吉林省地方計量技術規(guī)范CalibrationSpecificationforRap2022-11-21發(fā)布2023-01-吉林省市場監(jiān)督管理廳發(fā)布JJF（吉）105-2022RapidNucleicAcidD參加起草單位：山東中測華溯儀器儀表有JJF（吉）105-2022JJF（吉）105-2022I （4） （4） IIJJF（吉）105－20221JJF(冀)200—2022快速核酸檢測儀校準規(guī)范3.2超過熒光閾值的循環(huán)數(shù)Numberofcycles3.3恒溫核酸擴增thermostaticnucleicacid特定基因在某一生物體基因組中所含的個數(shù)以及每個生JJF（吉）105－202223.9平均過沖溫度meantempe表1快速核酸檢測儀計量特性類型等溫擴增技術溫度偏差≤±0.5℃平均升溫速率平均降溫速率最大過沖溫度溫度波動度≤±0.5℃≤±0.5℃持續(xù)時間偏差檢出限≤500copies/mL樣本檢測重復性JJF（吉）105－20223溫度：10℃~40℃;表2測量標準及其他設備技術指標序號名稱規(guī)格技術要求1快速核酸檢測儀專用無線溫度校準裝置溫度0～120℃分辨力：不低于0.01℃最大允許誤差：≤±0.1℃記錄時間間隔：≤0.1s2----分辨力：不低于0.1s最大允許誤差：≤±1s/h3新型冠狀病毒核酸標準物質(zhì)FAM定值有證標準準物質(zhì)JOE定值有證標準準物質(zhì)ROX定值有證標準準物質(zhì)4移液器(2.5、10、100、200、1000、檢定合格注：也可以選擇滿足校準要求的其他測量標準；若快速核酸檢測儀用于檢測其他病原體可采用相應的有證標準物質(zhì)。JJF（吉）105－20224表3快速核酸檢測儀校準項目項目實時熒光PCR技術恒溫擴增技術溫度偏差++平均升溫速率+-平均降溫速率+-最大溫度過沖量+-溫度波動度++溫度持續(xù)時間偏差+-最小檢出限的Ct值++Ct值重復性++注：+表示應校準；-表示不校準。圖1獨立模塊快速核酸檢測儀布點示意圖JJF（吉）105－20225圖2（a）8通道快速核酸檢測儀布點示意圖圖2（b）16通道快速核酸檢測儀布點示意圖表4基于實時熒光PCR擴增技術的快速核酸檢測儀控溫程序步驟設定溫度點/℃設定溫度持續(xù)時間/s循環(huán)數(shù)1×12×1340×645×16×1740×1JJF（吉）105－20226表5基于等溫擴增技術的快速核酸檢測儀控溫程序步驟設定溫度點/℃設定溫度持續(xù)時間/min循環(huán)數(shù)1×12×1T——該模塊溫度實測值的平均值，℃;T計算按照公式（345）計算：JJF（吉）105－20227TT計算按照公式（678）計算：TTJJF（吉）105－20228TTT圖495℃過沖溫度示意圖TTJJF（吉）105－20229Δt=tc-ts=t2-t1(13)式中：tc——實測的設定溫度持續(xù)時間，s；t2——校準裝置采集到的最后一個維持設定溫度的時刻。t2取點示意圖式中：CV——變異系數(shù)M——測量結果的平均值JJF（吉）105－2022）；），JJF（吉）105－2022校準地點：環(huán)境溫度：℃環(huán)境相對濕度：%準確度等級/最大允許誤差/不確定度123456123456JJF（吉）105－2022123456溫度值rmax123456）：rmaxrminrmaxrmaxrminrminrmaxrmaxrminrminrmaxrmaxrminrminJJF（吉）105－2022123456JJF（吉）105－2022//JJF（吉）105－2022用專用無線溫度校準裝置對一臺基于實時熒光PCR技術的快速核酸檢測儀單模塊分 ΔTd=Tc-Ts（1）T設定溫度實測溫度平均溫度4040.5940.1640.1040.4140.4940.7740.6340.1240.1440.1540.3549.5849.5349.8949.3749.2849.8549.3749.4249.3949.3549.7159.3159.3359.2159.5659.6259.3459.6759.8159.3159.3359.4670.8370.9970.8270.8670.8370.8670.9970.9370.9670.9870.8791.0591.0791.0891.0991.0091.0591.0791.0591.0791.0891.0596.3396.3196.2696.2896.2796.2896.2896.2296.2796.2496.26JJF（吉）105－2022表C.2重復性引入的標準不確定度分溫度401u0.190.180.190.280.280.33依據(jù)公式uc計算可得合成標準不確定度，見表C.3。表C.3合成標準不確定度單位：℃溫度40uc0.1950.1950.1950.2840.2840.343溫度40U0.40.40.40.60.60.7JJF（吉）105－2022JF1527-2015《聚合酶鏈反應分析ΔC=CC-CS 12345678RSD4.54.54.74.64.44.34.24.23.7%4.54.74.54.74.64.74.64.44.54.74.54.74.64.44.74.62.32.42.22.22.12.42.32.43.8%2.12.42.42.12.42.12.22.12.42.12.42.12.22.22.12.2JJF（吉）105－2022CS) u(CS)=uC/k=2.8%/2=1.40%，k=2表C.6各標準不確定度分量匯總名稱來源uuCS)標準物