第六章分光光度法----基礎(chǔ)知識(shí)一、填空題1.分光光度法測(cè)定樣品的基本原理是利用朗伯－比爾定律，根據(jù)不同濃度樣品溶液對(duì)光信號(hào)具有不同的，對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行定量測(cè)定。答案：吸光度（或吸光性，或吸收）2.采用分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，校正波長(zhǎng)是為了檢驗(yàn)波長(zhǎng)刻度與實(shí)際波長(zhǎng)的，并通過(guò)適當(dāng)方法進(jìn)行修正，以消除因波長(zhǎng)刻度的誤差引起的光度測(cè)定誤差。答案：符合程度3.采用分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，比色皿表面不清潔是造成測(cè)量誤差的常見(jiàn)原因之一，每當(dāng)測(cè)定有色溶液后，一定要充分洗滌。可用涮洗，或用浸泡。注意浸泡時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，以防比色皿脫膠損壞。答案：相應(yīng)的溶劑（1＋3)HNO3二、判斷題1.分光光度計(jì)可根據(jù)使用的波長(zhǎng)范圍、光路的構(gòu)造、單色器的結(jié)構(gòu)、掃描的機(jī)構(gòu)分為不同類(lèi)型的光度計(jì)。（)答案：正確2.采用分光光度法進(jìn)行試樣測(cè)定時(shí)，由于不同濃度下的測(cè)定誤差不同，因此選擇最適宜的測(cè)定濃度可減少測(cè)定誤差。一般來(lái)說(shuō)，透光度在20%~65%或吸光值在0.2~0.7時(shí)，測(cè)定誤差相對(duì)較小。（）答案：正確3.分光光度法主要應(yīng)用于測(cè)定樣品中的常量組分含量。（）答案：錯(cuò)誤正確答案為：分光光度法主要應(yīng)用于測(cè)定樣品中的微量組分。4.采用分光光度法進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，同一組比色皿之間的差值應(yīng)小于測(cè)定誤差。（）答案：錯(cuò)誤正確答案為：測(cè)定同一溶液時(shí)，同組比色皿之間吸光度相差應(yīng)小于0.005,否則需進(jìn)行校正。,第六章分光光度法1555.采用分光光度法進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，摩爾吸光系數(shù)隨比色皿厚度的變化而變化。（）答案：錯(cuò)誤正確答案為：摩爾吸光系數(shù)與比色皿厚度無(wú)關(guān)。三、選擇題1.采用分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，下列因素中不是產(chǎn)生偏離朗伯－比爾定律的主要原因。（）A.所用試劑的純度不夠的影響B(tài).非吸收光的影響C.非單色光的影響D.被測(cè)組分發(fā)生解離、締合等化學(xué)因素答案：A2.分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是指單色光最大強(qiáng)度的波長(zhǎng)值與波長(zhǎng)指示值。（)A.之和B.之差C.乘積答案：B3.分光光度計(jì)吸光度的準(zhǔn)確性是反映儀器性能的重要指標(biāo)，一般常用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行吸光度校正。（）A.堿性重鉻酸鉀B.酸性重鉻酸鉀C.高錳酸鉀答案：A4.分光光度計(jì)通常使用的比色皿具有性，使用前應(yīng)做好標(biāo)記。（）A.選擇B.滲透C.方向答案：C5.使用分光光度法測(cè)試樣品，校正比色皿時(shí)，應(yīng)將注入比色皿中，以其中吸收最小的比色皿為參比，測(cè)定其他比色皿的吸光度。（）A.純凈蒸餾水B.乙醇C.三氯甲烷答案：A6.朗伯－比爾定律A=kcL中，摩爾吸光系數(shù)k值表示該物質(zhì)對(duì)某波長(zhǎng)光的吸收能力越強(qiáng)，比色測(cè)定的靈敏度就越高。（）A.越大B.越小C.大小一樣答案：A7.在比色分析中為了提高分析的靈敏度，必須選擇摩爾吸光系數(shù)有色化合物，選擇具有最大k值的波長(zhǎng)作入射光。（）A.大的B.小的C.大小一樣答案：A8.用紫外分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，比色皿應(yīng)選擇材質(zhì)的。（）A.石英B.玻璃答案：A9.一般常把nm波長(zhǎng)的光稱(chēng)為紫外光。（）A.200~800B.200~400C.100~600答案：B10.一般常把nm波長(zhǎng)的光稱(chēng)為可見(jiàn)光。（）A.200~800B.400(或380)~800(或780)C.400~860答案：B11.朗伯－比爾定律A=kcL中，摩爾吸光系數(shù)k值與無(wú)關(guān)。（)A.入射光的波長(zhǎng)B.顯色溶液溫度C.測(cè)定時(shí)的取樣體積D.有色溶液的性質(zhì)答案：C12.一般分光光度計(jì)吸光度的讀數(shù)最多有位有效數(shù)字。（）A.3B.4C.2答案：A四、問(wèn)答題1.分光光度法是環(huán)境監(jiān)測(cè)中常用的方法，簡(jiǎn)述分光光度法的主要特點(diǎn)。答案：（1)靈敏度高；（2)準(zhǔn)確度高；（3)適用范圍廣；（4)操作簡(jiǎn)便、快速；（5)價(jià)格低廉。2.簡(jiǎn)述校正分光光度計(jì)波長(zhǎng)的方法。答案：校正波長(zhǎng)一般使用分光光度計(jì)光源中的穩(wěn)定線光譜或有穩(wěn)定亮線的外部光源，把光束導(dǎo)入光路進(jìn)行校正，或者測(cè)定已知光譜樣品的光譜，與標(biāo)準(zhǔn)光譜對(duì)照進(jìn)行校正。3.簡(jiǎn)述分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，選用比色皿應(yīng)該考慮的主要因素。答案：（1)測(cè)定波長(zhǎng)。比色液吸收波長(zhǎng)在370nm以上時(shí)可選用玻璃或石英比色皿，在370nm以下時(shí)必須使用石英比色皿；（2)光程。比色皿有不同光程長(zhǎng)度，通常多用10.0mm的比色皿，選擇比色皿的光程長(zhǎng)度應(yīng)視所測(cè)溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1~0.7為宜。4.如何檢查分光光度計(jì)的靈敏度？答案：靈敏度是反映儀器測(cè)量性能的重要指標(biāo)，檢查方法為：配制0.001%重鉻酸鉀溶液，用1cm比色皿裝入蒸餾水作參比，于440nm處測(cè)得的吸光度應(yīng)大于0.010.若示值＜0.010,可適當(dāng)增加靈敏度的擋數(shù)，如仍不能達(dá)到該值，應(yīng)檢查或更換光電管。5.在光度分析中，如何消除共存離子的干擾？答案：（1)盡可能采用選擇性高、靈敏度也高的特效試劑；（2)控制酸度，使干擾離子不產(chǎn)生顯色反應(yīng)；（3)加入掩蔽劑，使干擾離子被絡(luò)合而不發(fā)生干擾，而待測(cè)離子不與掩蔽劑反應(yīng)；（4)加入氧化劑或還原劑，改變干擾離子的價(jià)態(tài)以消除干擾；（5)選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)以消除干擾；（6)萃取法消除干擾；（7)其他能將被測(cè)組分與雜質(zhì)分離的步驟，如離子交換、蒸餾等；（8)利用參比溶液消除顯色劑和某些有色共存離子干擾；（9)利用校正系數(shù)從測(cè)定結(jié)果中扣除干擾離子影響。6.采用分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，什么情況下可用溶劑作空白溶液？答案：當(dāng)溶液中的有色物質(zhì)僅為待測(cè)成分與顯色劑反應(yīng)生成，可以用溶劑作空白溶液，簡(jiǎn)稱(chēng)溶劑空白。7.一臺(tái)分光光度計(jì)的校正應(yīng)包括哪4個(gè)部分？答案：波長(zhǎng)校正；吸光度校正；雜散光校正；比色皿校正。8.在光度分析中酸度對(duì)顯色反應(yīng)主要有哪些影響？答案：（1)對(duì)顯色劑本身的影響；（2)對(duì)溶液中各元素存在狀態(tài)的影響；（3)對(duì)顯色反應(yīng)的影響。9.簡(jiǎn)述朗伯－比爾定律A=kcL的基本內(nèi)容，并說(shuō)明式中各符號(hào)的含義。答案：朗伯－比爾定律是比色分析的理論基礎(chǔ)，它可綜合為光的吸收定律，即當(dāng)一束單色光通過(guò)均勻溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。式中：A-吸光度；k-吸光系數(shù)；c-待測(cè)物濃度；L-液層厚度。10.簡(jiǎn)述在朗伯－比爾定律中，吸光系數(shù)與摩爾吸光系數(shù)的區(qū)別。答案：在朗伯－比爾定律A=kcL中，k是比例常數(shù)，它與入射光的波長(zhǎng)、溶液的性質(zhì)有關(guān)。如果有色物質(zhì)溶液的濃度c用g/L表示，液層厚度以cm表示，比例常數(shù)k稱(chēng)為吸光系數(shù)。如果濃度c用mol/L表示，液層厚度以cm表示，則比例常數(shù)k稱(chēng)為摩爾吸光系數(shù)。摩爾吸光系數(shù)的單位為L(zhǎng)/(mol?cm),它表示物質(zhì)的濃度為1mol/L、液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度。11.簡(jiǎn)述在光度分析中如何用鐠釹濾光片對(duì)光度計(jì)的波長(zhǎng)進(jìn)行校正。答案：用特制的鐠釹濾光片（預(yù)先在精密度較高的儀器上進(jìn)行校正過(guò)）校正儀器波長(zhǎng)時(shí)，通常用573nm和586nm的雙峰譜線校正。12.簡(jiǎn)述在光度分析中如何選擇顯色劑。答案：（1)顯色劑的靈敏度要高；（2)顯色劑的選擇性要好；（3)所形成的有色化合物應(yīng)足夠穩(wěn)定，而且組成恒定，有確定的組成比；（4)所形成的有色化合物與顯色劑之間的差別要大；（5)其他因素如顯色劑的溶解度、穩(wěn)定性、價(jià)格等。13.簡(jiǎn)述在光度分析中共存離子的干擾主要有哪幾種情況。答案：（1)共存離子本身有顏色影響測(cè)定；（2)共存離子與顯色劑生成有色化合物，同待測(cè)組分的有色