再生醫(yī)學(xué)干細胞復(fù)蘇技術(shù)員崗位考試試卷及答案一、單項選擇題（每題2分，共20分）1.干細胞復(fù)蘇時，常用的水浴溫度是（）A.25℃B.37℃C.42℃D.50℃2.以下哪種是常用的干細胞凍存保護劑（）A.乙醇B.甘油C.DMSOD.丙酮3.復(fù)蘇干細胞時，離心轉(zhuǎn)速一般為（）A.500rpmB.1000rpmC.1500rpmD.2000rpm4.干細胞復(fù)蘇后，判斷活性的常用方法是（）A.革蘭氏染色B.臺盼藍染色C.伊紅染色D.蘇木精染色5.凍存干細胞的液氮罐，多久檢查一次液位合適（）A.每天B.每周C.每月D.每季度6.干細胞復(fù)蘇操作應(yīng)在什么環(huán)境下進行（）A.普通實驗室B.生物安全柜C.通風櫥D.無菌室7.復(fù)蘇干細胞時，從液氮取出凍存管后應(yīng)（）A.直接放入水浴B.先在空氣中停留1分鐘C.先離心D.先振蕩8.細胞計數(shù)板計數(shù)干細胞時，計數(shù)區(qū)域是（）A.四角大方格B.中央大方格C.全部方格D.隨機方格9.干細胞復(fù)蘇后培養(yǎng)，常用的培養(yǎng)基是（）A.PBSB.DMEMC.NaClD.Tris-HCl10.凍存干細胞的標簽應(yīng)注明（）A.細胞名稱、凍存日期B.操作人C.細胞數(shù)量D.以上都是二、多項選擇題（每題2分，共20分）1.干細胞復(fù)蘇過程中需要用到的儀器有（）A.水浴鍋B.離心機C.顯微鏡D.天平2.影響干細胞復(fù)蘇活性的因素有（）A.凍存保護劑濃度B.復(fù)蘇速度C.凍存時間D.培養(yǎng)條件3.干細胞復(fù)蘇后培養(yǎng)，需要添加的物質(zhì)有（）A.血清B.抗生素C.生長因子D.緩沖液4.干細胞復(fù)蘇操作的注意事項包括（）A.嚴格無菌操作B.快速復(fù)蘇C.準確記錄D.防止交叉污染5.用于干細胞凍存的凍存管要求（）A.耐低溫B.密封性好C.透明D.有刻度6.干細胞復(fù)蘇后，評估活性的指標有（）A.細胞形態(tài)B.細胞增殖能力C.細胞分化能力D.細胞代謝能力7.干細胞復(fù)蘇過程中，可能出現(xiàn)的問題有（）A.細胞污染B.復(fù)蘇失敗C.細胞損傷D.計數(shù)不準確8.常用的干細胞復(fù)蘇方法有（）A.快速復(fù)蘇B.慢速復(fù)蘇C.梯度復(fù)蘇D.分段復(fù)蘇9.干細胞復(fù)蘇后培養(yǎng)，培養(yǎng)箱的條件一般為（）A.37℃B.5%CO?C.95%空氣D.高濕度10.對干細胞凍存液的要求有（）A.能保護細胞免受凍害B.對細胞無毒性C.成分穩(wěn)定D.易于配制三、判斷題（每題2分，共20分）1.干細胞復(fù)蘇時，水浴時間越長越好。（）2.可以用手直接拿取液氮罐中的凍存管。（）3.復(fù)蘇后的干細胞可以直接用于臨床治療。（）4.不同來源的干細胞復(fù)蘇方法完全相同。（）5.干細胞凍存液可以重復(fù)使用。（）6.細胞計數(shù)時，壓線細胞應(yīng)遵循“計上不計下，計左不計右”原則。（）7.復(fù)蘇干細胞的操作可以在普通潔凈臺進行。（）8.凍存干細胞的液氮罐不需要定期維護。（）9.干細胞復(fù)蘇后培養(yǎng)，更換培養(yǎng)基的頻率是固定的。（）10.臺盼藍染色后，活細胞會被染成藍色。（）四、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述干細胞復(fù)蘇的基本步驟。答：從液氮罐取出凍存管，迅速放入37℃水浴中快速搖晃至完全融化，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管，加適量培養(yǎng)基離心，棄上清，加新鮮培養(yǎng)基重懸細胞，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)容器培養(yǎng)。2.干細胞復(fù)蘇時為什么要快速融化？答：快速融化可避免緩慢融化過程中形成冰晶對細胞造成機械損傷，減少細胞內(nèi)水分形成大冰晶破壞細胞結(jié)構(gòu)，從而提高干細胞復(fù)蘇后的活性和存活率。3.如何保證干細胞復(fù)蘇操作的無菌環(huán)境？答：在生物安全柜或無菌室內(nèi)操作，提前用紫外燈消毒，操作前用75%酒精擦拭臺面和雙手，所用器械、試劑等均需無菌，嚴格遵守無菌操作規(guī)程，避免交叉污染。4.干細胞復(fù)蘇后活性不佳，可能有哪些原因？答：可能原因有凍存保護劑濃度不當，對細胞產(chǎn)生毒性；凍存時間過長，細胞老化；復(fù)蘇速度不夠快，形成冰晶損傷細胞；培養(yǎng)條件不合適，如培養(yǎng)基成分、溫度、pH等不適宜。五、討論題（每題5分，共20分）1.討論干細胞復(fù)蘇技術(shù)在再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要性及發(fā)展前景。答：重要性在于為后續(xù)研究和治療提供活性細胞，是實現(xiàn)干細胞應(yīng)用的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。發(fā)展前景廣闊，隨著技術(shù)不斷改進，復(fù)蘇效率和細胞活性將提高，能更好滿足臨床治療、藥物研發(fā)等需求，推動再生醫(yī)學(xué)快速發(fā)展。2.若干細胞復(fù)蘇過程中出現(xiàn)細胞污染，應(yīng)如何處理及預(yù)防？答：處理：立即停止培養(yǎng)，對污染細胞進行滅活處理。預(yù)防：嚴格無菌操作，定期維護儀器設(shè)備和培養(yǎng)環(huán)境，對所用試劑嚴格除菌，加強操作人員培訓(xùn)，規(guī)范操作流程。3.分析不同凍存保護劑對干細胞復(fù)蘇效果的影響。答：不同凍存保護劑性質(zhì)不同，如DMSO穿透性強能快速進入細胞，甘油相對溫和。合適濃度可降低冰點、減少冰晶形成保護細胞，但濃度不當會有毒性。不同保護劑對細胞復(fù)蘇后的活性、增殖分化能力等有不同影響。4.結(jié)合實際工作，談?wù)劯杉毎麖?fù)蘇技術(shù)員應(yīng)具備哪些專業(yè)素養(yǎng)和職業(yè)態(tài)度？答：專業(yè)素養(yǎng)包括掌握干細胞復(fù)蘇理論知識、熟練操作儀器設(shè)備、準確進行細胞計數(shù)等技能。職業(yè)態(tài)度要求嚴謹認真，嚴格遵守操作規(guī)程，有責任心，對工作高度負責，具備團隊協(xié)作精神，不斷學(xué)習提升專業(yè)水平。答案一、單項選擇題1.B2.C3.B4.B5.B6.B7.