再生醫(yī)學(xué)干細(xì)胞培養(yǎng)工程師崗位考試試卷及答案一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.干細(xì)胞培養(yǎng)常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基是（）A.DMEMB.PBSC.FBSD.DMSO2.以下哪種細(xì)胞屬于多能干細(xì)胞（）A.造血干細(xì)胞B.胚胎干細(xì)胞C.神經(jīng)干細(xì)胞D.成纖維細(xì)胞3.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，二氧化碳培養(yǎng)箱的氣體比例一般是（）A.5%O?、95%CO?B.20%O?、80%CO?C.5%CO?、95%空氣D.10%CO?、90%空氣4.干細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，水浴溫度一般為（）A.30℃B.37℃C.42℃D.45℃5.用于去除細(xì)胞培養(yǎng)體系中支原體的抗生素是（）A.青霉素B.鏈霉素C.兩性霉素BD.環(huán)丙沙星6.干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，傳代的最佳細(xì)胞匯合度是（）A.30%-40%B.50%-60%C.70%-80%D.90%-100%7.以下哪種技術(shù)可用于鑒定干細(xì)胞的多能性（）A.RT-PCRB.WesternblotC.免疫熒光D.以上都是8.干細(xì)胞培養(yǎng)的血清一般需要經(jīng)過(guò)（）處理A.過(guò)濾除菌B.高壓滅菌C.干熱滅菌D.煮沸滅菌9.凍存干細(xì)胞時(shí)，常用的凍存保護(hù)劑是（）A.甘油B.乙醇C.DMSOD.丙酮10.培養(yǎng)干細(xì)胞的超凈工作臺(tái)一般采用（）消毒A.75%乙醇B.95%乙醇C.碘伏D.新潔爾滅答案：1.A2.B3.C4.B5.C6.C7.D8.A9.C10.A二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.干細(xì)胞的特性包括（）A.自我更新能力B.分化潛能C.無(wú)限增殖D.免疫原性低2.常用的干細(xì)胞培養(yǎng)添加物有（）A.生長(zhǎng)因子B.細(xì)胞因子C.抗生素D.血清3.以下哪些屬于干細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件（）A.合適的培養(yǎng)基B.適宜的溫度C.氣體環(huán)境D.無(wú)菌操作4.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，可能出現(xiàn)的污染類型有（）A.細(xì)菌污染B.真菌污染C.支原體污染D.病毒污染5.鑒定干細(xì)胞的方法有（）A.形態(tài)學(xué)觀察B.細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)C.分化能力檢測(cè)D.基因表達(dá)分析6.干細(xì)胞培養(yǎng)的器皿有（）A.培養(yǎng)瓶B.培養(yǎng)皿C.多孔板D.離心管7.影響干細(xì)胞培養(yǎng)的因素有（）A.培養(yǎng)基成分B.培養(yǎng)器皿材質(zhì)C.傳代次數(shù)D.細(xì)胞接種密度8.干細(xì)胞凍存的步驟包括（）A.配制凍存液B.收集細(xì)胞C.梯度降溫D.液氮保存9.復(fù)蘇干細(xì)胞時(shí)的注意事項(xiàng)有（）A.快速解凍B.無(wú)菌操作C.及時(shí)更換培養(yǎng)基D.觀察細(xì)胞狀態(tài)10.干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用領(lǐng)域有（）A.組織修復(fù)B.器官再生C.疾病治療D.藥物研發(fā)答案：1.ABD2.ABD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABCD三、判斷題（每題2分，共20分）1.所有干細(xì)胞都具有全能性。（）2.干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，血清可以直接加入培養(yǎng)基中。（）3.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有影響。（）4.支原體污染不會(huì)影響干細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。（）5.傳代次數(shù)過(guò)多可能導(dǎo)致干細(xì)胞的特性改變。（）6.復(fù)蘇干細(xì)胞時(shí)，可將凍存管直接放入37℃水浴中快速解凍。（）7.免疫熒光可以用于檢測(cè)干細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá)。（）8.干細(xì)胞培養(yǎng)不需要考慮細(xì)胞接種密度。（）9.凍存干細(xì)胞時(shí)，凍存液中血清的比例越高越好。（）10.干細(xì)胞在再生醫(yī)學(xué)中可以完全替代傳統(tǒng)治療方法。（）答案：1.×2.×3.×4.×5.√6.√7.√8.×9.×10.×四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述干細(xì)胞培養(yǎng)的基本流程。答案：準(zhǔn)備合適培養(yǎng)基、添加物等，對(duì)培養(yǎng)器皿滅菌。獲取干細(xì)胞，用合適方法接種于培養(yǎng)器皿，放入適宜條件（如37℃、5%CO?）的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。定期觀察細(xì)胞狀態(tài)，當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到一定程度時(shí)進(jìn)行傳代，傳代按消化、離心、重懸、接種步驟進(jìn)行。培養(yǎng)過(guò)程需嚴(yán)格無(wú)菌操作，避免污染。2.干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中防止污染的措施有哪些？答案：實(shí)驗(yàn)室環(huán)境保持清潔，定期消毒。培養(yǎng)器皿、培養(yǎng)基等耗材嚴(yán)格滅菌。操作人員遵守?zé)o菌操作規(guī)程，如穿工作服、戴口罩帽子，操作前用75%乙醇消毒雙手。使用的試劑、儀器保持無(wú)菌，避免交叉污染。定期對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行污染檢測(cè)，一旦發(fā)現(xiàn)污染及時(shí)處理。3.簡(jiǎn)述干細(xì)胞鑒定的主要方法及意義。答案：方法有形態(tài)學(xué)觀察，看細(xì)胞形態(tài)特征；檢測(cè)細(xì)胞表面標(biāo)志物，用流式細(xì)胞術(shù)等；分化能力檢測(cè)，誘導(dǎo)其分化看結(jié)果；基因表達(dá)分析，了解特定基因表達(dá)情況。意義在于準(zhǔn)確判斷干細(xì)胞的類型、特性和多能性，確保培養(yǎng)的細(xì)胞符合研究和應(yīng)用要求，為后續(xù)再生醫(yī)學(xué)研究和治療奠定基礎(chǔ)。4.簡(jiǎn)述干細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的要點(diǎn)。答案：凍存要點(diǎn)：配制含凍存保護(hù)劑（如DMSO）的凍存液，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度，梯度降溫（如先放4℃、-20℃、-80℃，再轉(zhuǎn)液氮）。復(fù)蘇要點(diǎn)：快速將凍存管從液氮取出，放入37℃水浴快速解凍，無(wú)菌操作轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿，及時(shí)更換培養(yǎng)基，密切觀察細(xì)胞狀態(tài)。五、討論題（每題5分，共20分）1.討論干細(xì)胞培養(yǎng)在再生醫(yī)學(xué)中的重要性及面臨的挑戰(zhàn)。答案：重要性在于為組織器官修復(fù)再生提供細(xì)胞來(lái)源，推動(dòng)疾病治療新方法發(fā)展，助力藥物研發(fā)等。但面臨挑戰(zhàn)，如培養(yǎng)條件復(fù)雜，需精確控制營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子等；易受污染，支原體等污染影響細(xì)胞特性；干細(xì)胞的多能性維持和定向分化機(jī)制還不完全清楚，限制其臨床廣泛應(yīng)用。2.闡述如何優(yōu)化干細(xì)胞培養(yǎng)條件以提高培養(yǎng)效果。答案：優(yōu)化培養(yǎng)基成分，篩選適合干細(xì)胞生長(zhǎng)分化的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子組合；改善氣體環(huán)境，精確調(diào)控O?、CO?濃度；控制溫度、pH等物理?xiàng)l件穩(wěn)定；選擇合適培養(yǎng)器皿材質(zhì)，減少對(duì)細(xì)胞影響；優(yōu)化細(xì)胞接種密度，避免過(guò)密或過(guò)??；合理安排傳代時(shí)間和方法，防止傳代對(duì)細(xì)胞造成損傷，維持干細(xì)胞特性。3.結(jié)合實(shí)際，談?wù)劯杉?xì)胞培養(yǎng)工程師在再生醫(yī)學(xué)產(chǎn)業(yè)中的職責(zé)與作用。答案：職責(zé)包括熟練掌握干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，確保細(xì)胞培養(yǎng)質(zhì)量；嚴(yán)格遵守操作規(guī)程和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范，保證無(wú)菌環(huán)境；記錄培養(yǎng)過(guò)程數(shù)據(jù)，及時(shí)處理異常情況。作用是為再生醫(yī)學(xué)研究提供高質(zhì)量干細(xì)胞，保障研究順利進(jìn)行；推動(dòng)培養(yǎng)技術(shù)改進(jìn)創(chuàng)新，提高干細(xì)胞應(yīng)用效果，助力產(chǎn)業(yè)從實(shí)驗(yàn)室研究向臨床應(yīng)用轉(zhuǎn)化。4.討論干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中質(zhì)量控制的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。答案：關(guān)鍵環(huán)節(jié)有起始細(xì)胞的質(zhì)量