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文檔簡介

ICS11.220

CCSB41

DB51

四川省地方標準

DB51/T3293—2025

山羊乳房炎診斷和防治技術規(guī)

2025-09-15發(fā)布2025-10-15實施

四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB51/T3293—2025

目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術語和定義.........................................................................1

4縮略語.............................................................................1

5臨床診斷...........................................................................2

6實驗室診斷.........................................................................2

7防治措施...........................................................................3

8無害化處理.........................................................................3

附錄A(規(guī)范性)羊乳房炎致病菌的PCR檢測及鑒定.........................................4

參考文獻..............................................................................5

I

DB51/T3293—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。

本文件由四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、歸口、解釋并組織實施。

本文件起草單位:西南民族大學。

本文件主要起草人:楊發(fā)龍、封海波、刀筱芳、張煥容、張凱。

II

DB51/T3293—2025

山羊乳房炎診斷和防治技術規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了山羊乳房炎診斷、預防和治療的技術要求。

本文件適用于由病原微生物引起的山羊乳房炎的診斷、預防與治療。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,

僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本

文件。

GB19489實驗室生物安全通用要求

NY/T541獸醫(yī)診斷樣本采集、保存與運輸技術規(guī)范

NY/T2962奶牛乳房炎乳汁中金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、無乳鏈球菌分離鑒定方法

NY/T5030無公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準則

DB51/T2084動物源性大腸桿菌分離鑒定操作規(guī)程

3術語和定義

下列術語和定義適用于本文件。

3.1

乳房炎mastitis

主要由病原微生物引起的山羊乳腺及周邊組織的炎癥,按臨床表現(xiàn)分為臨床型乳房炎和隱性乳房炎

兩種類型。

3.2

臨床型乳房炎clinicalmastitis

表現(xiàn)出明顯的乳房炎癥狀,如乳房腫脹、發(fā)紅、疼痛等,同時乳汁的外觀可能發(fā)生變化,泌乳量減

少。

3.3

隱性乳房炎subclinicalmastitis

乳房炎的一種類型,通常無明顯外部癥狀,但乳汁中體細胞數(shù)顯著增加。

4縮略語

下列縮略語適用于本文件。

CMT:加州乳房炎試驗(CaliforniaMastitisTest)

PCR:聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)

DNA:脫氧核糖核酸(DeoxyribonucleicAcid)

1

DB51/T3293—2025

5臨床診斷

5.1流行病學

山羊乳房炎致病菌主要有葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希氏菌等,不同地區(qū)的病原種類可能存在差異,

且病原體可通過擠奶器具、污染環(huán)境或皮膚黏膜損傷傳播。臨床型乳房炎發(fā)病率在1%~15%,隱性乳房

炎發(fā)病率在15%~70%,各品種山羊在不同季節(jié)均可發(fā)生。

5.2臨床癥狀

5.2.1臨床型乳房炎

患病山羊的乳房表現(xiàn)出腫脹、發(fā)硬、發(fā)熱,皮膚變紅,觸診有疼痛;患處乳腺組織彈性降低,可能

形成硬結(jié);乳房上淋巴結(jié)腫大并伴有壓痛。乳汁排出不暢,泌乳減少或停止,乳汁顏色異常、粘稠、有

絮狀物,嚴重時可能出現(xiàn)乳凝塊或血塊。

5.2.2隱性乳房炎

隱性乳房炎通常無明顯癥狀,可表現(xiàn)為泌乳量減少。

6實驗室診斷

6.1樣本采集與處理

按照NY/T541的規(guī)定進行。采集乳樣時,先用溫水清潔乳房,再用0.2%新潔爾滅擦洗,最后用70%

的酒精擦拭乳頭。采樣者手部消毒后,棄去最初擠出的3把~4把乳汁,再采集3mL左右乳汁于無菌容器

中送檢。樣本應在4℃條件下保存和運輸,保存時間不超過24h。

6.2乳汁體細胞計數(shù)及結(jié)果判定

乳汁體細胞計數(shù)按照《奶牛乳房炎防治技術指南(試行)》進行,或采用體細胞計數(shù)儀、具備體細

胞計數(shù)功能的乳成分分析儀進行。當體細胞數(shù)大于5×105個/mL時,判定為隱性乳房炎。

6.3加州乳房炎試驗(CMT)及結(jié)果判定

加州乳房炎試驗(CMT)及結(jié)果判定按照《奶牛乳房炎防治技術指南(試行)》進行,或采用市售

成品CMT診斷試劑,具體的操作方法和判定標準按說明書進行。

6.4乳汁致病菌的PCR檢測

采用酚/氯仿法或商品化細菌基因組DNA提取試劑盒提取乳汁中細菌總DNA,并作為模板進行PCR擴增。

引物、PCR反應體系和反應條件按照附錄A執(zhí)行。

6.5致病菌的分離鑒定

金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌及無乳鏈球菌的分離鑒定按照NY/T2962規(guī)定的方法進行;

對大腸桿菌的分離鑒定按照DB51/T2084規(guī)定的方法進行。對于經(jīng)分離純化的致病菌,也可使用全自動

微生物鑒定系統(tǒng)進行鑒定。

2

DB51/T3293—2025

6.6實驗室生物安全措施

實驗室生物安全要求按照GB19489執(zhí)行。

7防治措施

7.1臨床型乳房炎

7.1.1隔離

患病山羊應立即隔離,并對接觸過的用具、環(huán)境進行徹底消毒,防止病原擴散。

7.1.2治療

7.1.2.1抗感染治療

選用抗感染藥物治療。必要時進行病原菌的分離培養(yǎng)和藥敏試驗,并參考藥敏試驗結(jié)果選用抗菌藥

物。

7.1.2.2對癥治療

使用解熱、鎮(zhèn)痛和抗過敏藥物進行治療,用藥按照NY/T5030執(zhí)行。

7.1.2.3輔助性治療

采用乳房基部封閉、乳房按摩、增加擠奶次數(shù)、乳房冷敷、外敷藥物等緩解乳房的腫脹。

7.2隱性乳房炎

對確診為隱性乳房炎的病羊按照7.1.2.1要求進行治療,并隔離和監(jiān)測。

7.3預防

7.3.1科學營養(yǎng)供給及加強飼養(yǎng)管理

根據(jù)不同山羊品種以及各生長階段的營養(yǎng)需求,配制全面合理的日糧,供給母羊優(yōu)質(zhì)飼料,禁止飼

喂發(fā)霉變質(zhì)和冰凍飼料。在飼養(yǎng)過程中盡量避免引起應激的因素,適當增加運動,增強免疫力。定期對

乳房健康狀況進行監(jiān)測。

7.3.2保持良好的衛(wèi)生環(huán)境

羊舍、運動場設計合理,空間寬敞,保持陽光充足;定期對羊舍和運動場進行消毒,乳房炎高發(fā)季

節(jié)應加強消毒,保持乳房清潔。

8無害化處理

按照《病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范》的相關規(guī)定對病死羊進行無害化處理。

3

DB51/T3293—2025

附錄A

(規(guī)范性)

羊乳房炎致病菌的PCR檢測及鑒定

A.1引物

用于從羊乳中檢測乳房炎相關致病菌以及分離培養(yǎng)細菌鑒定的特異性PCR引物見表1。

表A.1引物序列信息

病原菌引物名稱引物序列(5’-3’)擴增片段大小/bp退火溫度/℃

Sau327GGACGACATTAGACGAATCA

金黃色葡萄球菌131864

Sau1645CGGGCACCTATTTTCTATCT

Sag40CGCTGAGGTTTGGTGTTTACA

無乳鏈球菌40560

Sag445CACTCCTACCAACGTTCTTC

Sdy105AAAGGTGCAACTGCATCACTA

停乳鏈球菌28157

Sdy386GTCACATGGTGGATTTTCCA

Sub1546TGATGGGGAGCGAAAATAAG

乳房鏈球菌71857

Sub2170CCCAACAACGCCTCAAACGA

Eco2083GCTTGACACTGAACATTGAG

大腸桿菌66253

Eco2745GCACTTATCTCTTCCGCATT

A.2反應體系及反應條件

PCR反應體系總體積20μL,包括2×Taq酶預混液10μL,上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL,DNA

模板1μL,去離子水8μL。PCR反應條件為:95℃預變性5min;94℃變性30s,退火30s,72℃

延伸40s,共35個循環(huán);隨后72℃延伸8min后結(jié)束反應。

A.3擴增產(chǎn)物電泳檢測

制備1.0%瓊脂糖凝膠,取5μLPCR擴增產(chǎn)物和1μL6×DNA上樣緩沖液混合后進行加樣和電泳,

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