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文檔簡介
ICS11.220
CCSB41
DB51
四川省地方標準
DB51/T3293—2025
山羊乳房炎診斷和防治技術規(guī)
2025-09-15發(fā)布2025-10-15實施
四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布
DB51/T3293—2025
目次
前言.................................................................................II
1范圍...............................................................................1
2規(guī)范性引用文件.....................................................................1
3術語和定義.........................................................................1
4縮略語.............................................................................1
5臨床診斷...........................................................................2
6實驗室診斷.........................................................................2
7防治措施...........................................................................3
8無害化處理.........................................................................3
附錄A(規(guī)范性)羊乳房炎致病菌的PCR檢測及鑒定.........................................4
參考文獻..............................................................................5
I
DB51/T3293—2025
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定
起草。
請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。
本文件由四川省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、歸口、解釋并組織實施。
本文件起草單位:西南民族大學。
本文件主要起草人:楊發(fā)龍、封海波、刀筱芳、張煥容、張凱。
II
DB51/T3293—2025
山羊乳房炎診斷和防治技術規(guī)范
1范圍
本文件規(guī)定了山羊乳房炎診斷、預防和治療的技術要求。
本文件適用于由病原微生物引起的山羊乳房炎的診斷、預防與治療。
2規(guī)范性引用文件
下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,
僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本
文件。
GB19489實驗室生物安全通用要求
NY/T541獸醫(yī)診斷樣本采集、保存與運輸技術規(guī)范
NY/T2962奶牛乳房炎乳汁中金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、無乳鏈球菌分離鑒定方法
NY/T5030無公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準則
DB51/T2084動物源性大腸桿菌分離鑒定操作規(guī)程
3術語和定義
下列術語和定義適用于本文件。
3.1
乳房炎mastitis
主要由病原微生物引起的山羊乳腺及周邊組織的炎癥,按臨床表現(xiàn)分為臨床型乳房炎和隱性乳房炎
兩種類型。
3.2
臨床型乳房炎clinicalmastitis
表現(xiàn)出明顯的乳房炎癥狀,如乳房腫脹、發(fā)紅、疼痛等,同時乳汁的外觀可能發(fā)生變化,泌乳量減
少。
3.3
隱性乳房炎subclinicalmastitis
乳房炎的一種類型,通常無明顯外部癥狀,但乳汁中體細胞數(shù)顯著增加。
4縮略語
下列縮略語適用于本文件。
CMT:加州乳房炎試驗(CaliforniaMastitisTest)
PCR:聚合酶鏈式反應(PolymeraseChainReaction)
DNA:脫氧核糖核酸(DeoxyribonucleicAcid)
1
DB51/T3293—2025
5臨床診斷
5.1流行病學
山羊乳房炎致病菌主要有葡萄球菌、鏈球菌、大腸埃希氏菌等,不同地區(qū)的病原種類可能存在差異,
且病原體可通過擠奶器具、污染環(huán)境或皮膚黏膜損傷傳播。臨床型乳房炎發(fā)病率在1%~15%,隱性乳房
炎發(fā)病率在15%~70%,各品種山羊在不同季節(jié)均可發(fā)生。
5.2臨床癥狀
5.2.1臨床型乳房炎
患病山羊的乳房表現(xiàn)出腫脹、發(fā)硬、發(fā)熱,皮膚變紅,觸診有疼痛;患處乳腺組織彈性降低,可能
形成硬結(jié);乳房上淋巴結(jié)腫大并伴有壓痛。乳汁排出不暢,泌乳減少或停止,乳汁顏色異常、粘稠、有
絮狀物,嚴重時可能出現(xiàn)乳凝塊或血塊。
5.2.2隱性乳房炎
隱性乳房炎通常無明顯癥狀,可表現(xiàn)為泌乳量減少。
6實驗室診斷
6.1樣本采集與處理
按照NY/T541的規(guī)定進行。采集乳樣時,先用溫水清潔乳房,再用0.2%新潔爾滅擦洗,最后用70%
的酒精擦拭乳頭。采樣者手部消毒后,棄去最初擠出的3把~4把乳汁,再采集3mL左右乳汁于無菌容器
中送檢。樣本應在4℃條件下保存和運輸,保存時間不超過24h。
6.2乳汁體細胞計數(shù)及結(jié)果判定
乳汁體細胞計數(shù)按照《奶牛乳房炎防治技術指南(試行)》進行,或采用體細胞計數(shù)儀、具備體細
胞計數(shù)功能的乳成分分析儀進行。當體細胞數(shù)大于5×105個/mL時,判定為隱性乳房炎。
6.3加州乳房炎試驗(CMT)及結(jié)果判定
加州乳房炎試驗(CMT)及結(jié)果判定按照《奶牛乳房炎防治技術指南(試行)》進行,或采用市售
成品CMT診斷試劑,具體的操作方法和判定標準按說明書進行。
6.4乳汁致病菌的PCR檢測
采用酚/氯仿法或商品化細菌基因組DNA提取試劑盒提取乳汁中細菌總DNA,并作為模板進行PCR擴增。
引物、PCR反應體系和反應條件按照附錄A執(zhí)行。
6.5致病菌的分離鑒定
金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌及無乳鏈球菌的分離鑒定按照NY/T2962規(guī)定的方法進行;
對大腸桿菌的分離鑒定按照DB51/T2084規(guī)定的方法進行。對于經(jīng)分離純化的致病菌,也可使用全自動
微生物鑒定系統(tǒng)進行鑒定。
2
DB51/T3293—2025
6.6實驗室生物安全措施
實驗室生物安全要求按照GB19489執(zhí)行。
7防治措施
7.1臨床型乳房炎
7.1.1隔離
患病山羊應立即隔離,并對接觸過的用具、環(huán)境進行徹底消毒,防止病原擴散。
7.1.2治療
7.1.2.1抗感染治療
選用抗感染藥物治療。必要時進行病原菌的分離培養(yǎng)和藥敏試驗,并參考藥敏試驗結(jié)果選用抗菌藥
物。
7.1.2.2對癥治療
使用解熱、鎮(zhèn)痛和抗過敏藥物進行治療,用藥按照NY/T5030執(zhí)行。
7.1.2.3輔助性治療
采用乳房基部封閉、乳房按摩、增加擠奶次數(shù)、乳房冷敷、外敷藥物等緩解乳房的腫脹。
7.2隱性乳房炎
對確診為隱性乳房炎的病羊按照7.1.2.1要求進行治療,并隔離和監(jiān)測。
7.3預防
7.3.1科學營養(yǎng)供給及加強飼養(yǎng)管理
根據(jù)不同山羊品種以及各生長階段的營養(yǎng)需求,配制全面合理的日糧,供給母羊優(yōu)質(zhì)飼料,禁止飼
喂發(fā)霉變質(zhì)和冰凍飼料。在飼養(yǎng)過程中盡量避免引起應激的因素,適當增加運動,增強免疫力。定期對
乳房健康狀況進行監(jiān)測。
7.3.2保持良好的衛(wèi)生環(huán)境
羊舍、運動場設計合理,空間寬敞,保持陽光充足;定期對羊舍和運動場進行消毒,乳房炎高發(fā)季
節(jié)應加強消毒,保持乳房清潔。
8無害化處理
按照《病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范》的相關規(guī)定對病死羊進行無害化處理。
3
DB51/T3293—2025
附錄A
(規(guī)范性)
羊乳房炎致病菌的PCR檢測及鑒定
A.1引物
用于從羊乳中檢測乳房炎相關致病菌以及分離培養(yǎng)細菌鑒定的特異性PCR引物見表1。
表A.1引物序列信息
病原菌引物名稱引物序列(5’-3’)擴增片段大小/bp退火溫度/℃
Sau327GGACGACATTAGACGAATCA
金黃色葡萄球菌131864
Sau1645CGGGCACCTATTTTCTATCT
Sag40CGCTGAGGTTTGGTGTTTACA
無乳鏈球菌40560
Sag445CACTCCTACCAACGTTCTTC
Sdy105AAAGGTGCAACTGCATCACTA
停乳鏈球菌28157
Sdy386GTCACATGGTGGATTTTCCA
Sub1546TGATGGGGAGCGAAAATAAG
乳房鏈球菌71857
Sub2170CCCAACAACGCCTCAAACGA
Eco2083GCTTGACACTGAACATTGAG
大腸桿菌66253
Eco2745GCACTTATCTCTTCCGCATT
A.2反應體系及反應條件
PCR反應體系總體積20μL,包括2×Taq酶預混液10μL,上、下游引物(10μmol/L)各0.5μL,DNA
模板1μL,去離子水8μL。PCR反應條件為:95℃預變性5min;94℃變性30s,退火30s,72℃
延伸40s,共35個循環(huán);隨后72℃延伸8min后結(jié)束反應。
A.3擴增產(chǎn)物電泳檢測
制備1.0%瓊脂糖凝膠,取5μLPCR擴增產(chǎn)物和1μL6×DNA上樣緩沖液混合后進行加樣和電泳,
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