第七章異常毒性檢查第一節(jié)

概述第二節(jié)

藥品異常毒性檢查的方法目錄第七章

異常毒性檢查學(xué)習(xí)目標(biāo)第七章異常毒性檢查掌握

異常毒性檢查的概念。

熟悉

異常毒性檢查的原理。了解

異常毒性檢查的方法。概述第一節(jié)第七章異常毒性檢查第一節(jié)概述概念異常毒性有別于藥物本身所具有的毒性特征，是指由生產(chǎn)過程中引入或其他原因所致的毒性。異常毒性檢查內(nèi)容

①檢查藥品的非特異性毒性的通用安全試驗(yàn)；②檢查制品中是否污染外源性毒性物質(zhì)；⑤是否存在意外的不安全因素的試驗(yàn)。一、

異常毒性檢查的概念原理本法系使用靜脈注射給藥方式，給予動(dòng)物一定劑量的供試品溶液，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)觀察動(dòng)物出現(xiàn)的異常反應(yīng)或死亡情況，檢查供試品中是否污染外源性毒性物質(zhì)以及是否存在意外的不安全因素。二、異常毒性檢查原理異常毒性試驗(yàn)實(shí)際上是一個(gè)限度試驗(yàn),是指通過藥品對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的作用來測定出藥品中測試物的最低含量或濃度的方法。該測試物并不一定要定量測出其準(zhǔn)確值，只是確定其是否超過限度。第一節(jié)概述小鼠尾部靜脈注射藥品異常毒性檢查的方法第二節(jié)第七章異常毒性檢查第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法（一）異常毒性檢查法的檢查材料1.試劑：一、試驗(yàn)前準(zhǔn)備75%乙醇滅菌注射用水氯化鈉注射液75%乙醇氯化鈉注射液滅菌注射用水第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法（一）異常毒性檢查法的檢查材料實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求一、試驗(yàn)前準(zhǔn)備動(dòng)物應(yīng)同一來源同品系健康無傷，毛色光滑，眼睛紅亮，活潑，雌雄并用來源、飼養(yǎng)條件、品種均應(yīng)相同應(yīng)符合國家對(duì)動(dòng)物飼養(yǎng)條件做過本實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物不得重復(fù)使用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在稱重前自然飽腹試驗(yàn)用小鼠（二）異常毒性檢查法的檢查器材1.器材

注射器（1ml以下，精度0.01ml）、注射針頭、秒表、棉球、大稱量瓶、吸管、移液管、小燒杯、試管等。2.設(shè)備

高壓蒸汽滅菌器（與供試液接觸的所有器具均應(yīng)高壓滅菌，115℃30分鐘）、天平（精度0.01mg或0.5mg用于供試品、試劑稱量，精度0.1g用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物稱重）、小鼠固定器和支架、消毒設(shè)備等。一、試驗(yàn)前準(zhǔn)備試驗(yàn)用玻璃容器、注射器、針頭等與供試品及動(dòng)物接觸的用具，只要能承受干熱滅菌，都宜采用干熱滅菌的方式，因?yàn)楦蔁釡缇€能消除內(nèi)毒素。試驗(yàn)器材與設(shè)備第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法（三）異常毒性檢查法的檢查環(huán)境藥品異常毒性檢查須在潔凈室內(nèi)進(jìn)行，潔凈室應(yīng)保持清潔整齊，定期進(jìn)行消毒、潔凈度檢查，發(fā)現(xiàn)不符合要求時(shí)，應(yīng)立即徹底消毒滅菌。操作前應(yīng)開啟紫外殺菌裝置和空氣過濾裝置至少30分鐘。一、試驗(yàn)前準(zhǔn)備潔凈室與生物安全柜第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法（一）供試液的配制

二、操作過程第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法原料藥精密稱取適量，置適宜容器中，按規(guī)定濃度加精密量取的一定量的溶劑，攪拌使溶解。注射液用75%乙醇棉球消毒安瓿頸部或瓶塞，精密量取一定量藥液，按規(guī)定濃度，加精密量取的一定量溶劑，混勻。粉針劑用75%乙醇棉球消毒安瓿頸部或瓶塞，加入一定量規(guī)定的溶媒配成所需濃度，混勻。除另有規(guī)定外，一般用氯化鈉注射液作為溶劑按各品種項(xiàng)下規(guī)定的濃度制成供試品溶液，供試液制備后應(yīng)立即使用，最長不得超過24小時(shí)。（二）異常毒性檢查法

二、操作過程第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法除另有規(guī)定外，生物制品異常毒性試驗(yàn)可采用小鼠試驗(yàn)法或豚鼠試驗(yàn)法。

試驗(yàn)中應(yīng)設(shè)同批動(dòng)物空白對(duì)照，觀察期內(nèi)，動(dòng)物全部健存，且無異常反應(yīng)，到期時(shí)每只動(dòng)物體重應(yīng)增加，則判定試驗(yàn)成立。按照規(guī)定的給藥途徑緩慢注入動(dòng)物體內(nèi)?！吨袊幍洹罚?015年版）四部規(guī)定，非生物制品異常毒性試驗(yàn)采用小鼠試驗(yàn)法。除另有規(guī)定外，取小鼠5只，體重18~22g每只小鼠分別靜脈給予供試品溶液0.5ml4~5秒內(nèi)勻速注射完畢，規(guī)定緩慢注射的品種可延長至30秒除另有規(guī)定外，取小鼠5只/豚鼠2只，注射前每只稱體重，應(yīng)為18～22g/250～350g。每只小鼠/豚鼠腹腔注射供試品溶液0.5ml/5.0ml，觀察7天，并記錄觀察期內(nèi)動(dòng)物的反應(yīng)，具體見下表。程度反應(yīng)無未見任何毒性反應(yīng)輕輕度癥狀，但無運(yùn)動(dòng)減少、呼吸困難或腹部刺激中腹部刺激、呼吸困難、運(yùn)動(dòng)減少、眼瞼下垂、腹瀉重衰竭、發(fā)紺、震顫、嚴(yán)重腹部刺激、眼瞼下垂、呼吸困難死亡注射后死亡異常毒性試驗(yàn)動(dòng)物反應(yīng)觀察指標(biāo)第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法二、操作過程（一）《中國藥典》（2015年版）第四部通則1141規(guī)定：除另有規(guī)定外，全部小鼠在給藥后48小時(shí)內(nèi)不得有死亡；如有死亡時(shí)，應(yīng)另取體重19～21g的小鼠10只復(fù)試、全部小鼠在48小時(shí)內(nèi)不得死亡。三、結(jié)果判斷第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法給藥后，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)不引起可能死亡的任何反應(yīng)不屬于異常毒性檢查范圍，不作為判斷結(jié)果的依據(jù)。（二）對(duì)于《中國藥典》（2015年版）收載的生物制品，第四部通則1141規(guī)定：除另有規(guī)定外，觀察期內(nèi)，小鼠（豚鼠）應(yīng)全部健存，且無異常反應(yīng)，到期時(shí)每只小鼠體重應(yīng)增加，判定供試品符合規(guī)定。如不符合上述要求，應(yīng)另取體重19～21g的小鼠10只（豚鼠4只）復(fù)試1次，判定標(biāo)準(zhǔn)同前。

（一）異常毒性檢查的應(yīng)用及意義

異常毒性檢查對(duì)保障成分復(fù)雜的抗生素、中草藥注射液和生物制品等藥品的安全用藥有一定意義，尤其對(duì)有未知?jiǎng)《倦s質(zhì)混入可能的藥品而言更有意義。

如燈盞細(xì)辛注射液、清開靈注射液、右旋糖酐注射液、硫酸魚精蛋白注射液、抗銀環(huán)蛇毒血清、重組乙型肝炎疫苗(CHO細(xì)胞)等。四、異常毒性檢查的相關(guān)要求第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法

（二）異常毒性檢查法注意事項(xiàng)1.動(dòng)物的質(zhì)量是試驗(yàn)成功的重要因素之一，質(zhì)量包括級(jí)別、來源、體重、飼養(yǎng)條件等。在選取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物時(shí)，要使用同一批次，體重和飼養(yǎng)條件須保持相近。2.供試品的注射速度是試驗(yàn)成功的另一重要因素，注射速度過快、過慢和速度不均勻都可能影響檢查結(jié)果。因此，在試驗(yàn)時(shí)要保持勻速注射給藥，且一次實(shí)驗(yàn)中每只小白鼠的注射時(shí)間要盡量一致。3.有些藥物本身的藥理和毒理作用以及酸度和滲透壓均可能干擾檢查結(jié)果，檢查時(shí)須加以分析排除。4.試驗(yàn)時(shí)的室溫應(yīng)保持在20～30℃，過高或過低均可影響試驗(yàn)結(jié)果。5.檢查劑量限值確定，制訂異常毒性檢查項(xiàng)限值前，須參考文獻(xiàn)數(shù)據(jù)并經(jīng)單次靜脈注射給藥確定該注射劑的急性毒性數(shù)據(jù)（LD50或LD1及其可信限）。四、異常毒性檢查的相關(guān)要求第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法檢品名稱生產(chǎn)廠家檢品規(guī)格生產(chǎn)批號(hào)檢品數(shù)量包裝和外觀檢品生產(chǎn)單位有效期檢驗(yàn)項(xiàng)目異常毒性檢查檢驗(yàn)依據(jù)《中國藥典》（2015年版）（）部，通則（）檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)結(jié)果：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（數(shù)量、來源、性別、體重）供試品組：小鼠

（）只，死亡（）只檢驗(yàn)結(jié)論：檢驗(yàn)人：

復(fù)核人：室溫：

濕度：

檢驗(yàn)日期：第二節(jié)藥品異常毒性檢查的方法

檢驗(yàn)報(bào)告應(yīng)當(dāng)完整、簡潔、結(jié)論明確。除無操作步驟外，其他內(nèi)容應(yīng)同原始記錄。①原始記錄應(yīng)完整，無缺頁損壞。②原始記錄內(nèi)容真實(shí)，準(zhǔn)確。③原始記錄如