微生物、潔凈區(qū)基礎知識及無菌保證知識培訓試卷與答案一、單選題（每題1分，共30分。每題只有一個正確答案，請將正確選項字母填入括號內）1.潔凈區(qū)A級靜態(tài)環(huán)境下，≥0.5μm懸浮粒子最大允許數為（）A.3520個/m3B.352000個/m3C.35200個/m3D.3520000個/m3答案：A2.下列哪種微生物屬于革蘭氏陽性、可形成芽孢、對濕熱抵抗力最強的指示菌（）A.銅綠假單胞菌B.枯草芽孢桿菌C.金黃色葡萄球菌D.白色念珠菌答案：B3.歐盟GMP附錄1規(guī)定，B級區(qū)動態(tài)監(jiān)測時，≥0.5μm粒子警戒限為（）A.標準限值的50%B.標準限值的70%C.標準限值的80%D.標準限值的90%答案：B4.潔凈室壓差梯度設計時，相鄰不同潔凈級別之間最小壓差應為（）A.5PaB.10PaC.12.5PaD.15Pa答案：C5.過氧化氫蒸汽（VHP）滅菌工藝中，最關鍵的驗證參數是（）A.相對濕度B.溫度C.過氧化氫濃度D.氣流速度答案：C6.無菌藥品灌裝線開機前，對A級區(qū)表面進行微生物監(jiān)測，接觸碟培養(yǎng)時間應為（）A.30～35℃培養(yǎng)48hB.30～35℃培養(yǎng)72hC.20～25℃培養(yǎng)48hD.20～25℃培養(yǎng)5d答案：B7.下列哪項不是潔凈區(qū)人員進入B級區(qū)必須佩戴的防護裝備（）A.無菌口罩B.無菌眼罩C.無菌手套D.棉質鞋套答案：D8.采用濕熱滅菌程序F0≥12min時，其滅菌標準對應的微生物殘存概率為（）A.10?3B.10??C.10??D.10??答案：D9.潔凈室高效過濾器（H13級）對0.3μm粒子的最低過濾效率為（）A.95%B.99%C.99.97%D.99.999%答案：C10.下列哪種消毒劑對細菌芽孢殺滅效果最差（）A.0.2%過氧乙酸B.2%戊二醛C.70%異丙醇D.5%過氧化氫答案：C11.潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測發(fā)現B級區(qū)浮游菌結果>警戒限但<糾偏限，首先應（）A.立即停產B.啟動OOS調查C.增加監(jiān)測頻率并趨勢分析D.更換消毒劑答案：C12.無菌工藝模擬試驗（APS）中，培養(yǎng)基灌裝最少樣本量為（）A.5000瓶B.10000瓶C.5000瓶或全部批次中的最大批量，取較大者D.全部批次的0.1%答案：C13.潔凈室回風口設計風速一般控制在（）A.0.1～0.2m/sB.0.2～0.4m/sC.0.4～0.6m/sD.0.6～0.8m/s答案：B14.采用激光粒子計數器進行懸浮粒子監(jiān)測時，采樣管長度不應超過（）A.0.5mB.1.0mC.1.5mD.2.0m答案：B15.下列哪項不是無菌保證水平（SAL）的定義要素（）A.滅菌后微生物殘存概率B.以10為底的對數單位C.與產品初始污染菌無關D.通常表示為10??答案：C16.潔凈區(qū)C級區(qū)靜態(tài)≥5.0μm粒子最大允許數為（）A.20個/m3B.29個/m3C.290個/m3D.2900個/m3答案：B17.采用環(huán)氧乙烷滅菌時，最關鍵的工藝參數是（）A.溫度B.相對濕度C.氣體濃度D.真空度答案：C18.潔凈室人員更衣確認中，表面微生物監(jiān)測合格標準為（）A.≤1CFU/皿B.≤3CFU/皿C.≤5CFU/皿D.≤10CFU/皿答案：C19.下列哪種情況必須重新進行培養(yǎng)基模擬試驗（）A.更換高效過濾器B.新增同型號灌裝機C.每班人員變動超過30%D.連續(xù)一年未發(fā)生微生物污染答案：C20.潔凈區(qū)溫濕度監(jiān)測點應距離墻面（）A.0.1mB.0.5mC.1.0mD.1.5m答案：B21.采用干熱滅菌250℃、30min程序，其FH值為（）A.30B.60C.120D.300答案：A22.潔凈室自凈時間測試合格標準為粒子濃度下降至目標值（）A.1/10B.1/100C.1/1000D.1/10000答案：B23.下列哪項不是無菌操作“雙人原則”的核心目的（）A.降低人為差錯B.實時相互監(jiān)督C.減少監(jiān)測頻次D.提高無菌保證答案：C24.潔凈區(qū)地漏液封高度應不低于（）A.25mmB.50mmC.75mmD.100mm答案：B25.采用汽化過氧化氫對隔離器滅菌，生物指示劑常用（）A.嗜熱脂肪芽孢桿菌10?B.枯草芽孢桿菌10?C.金黃色葡萄球菌10?D.銅綠假單胞菌10?答案：B26.潔凈室高效過濾器完整性測試（DOP/PAO）上游濃度應達到（）A.10～20μg/LB.20～40μg/LC.50～80μg/LD.80～120μg/L答案：D27.無菌藥品最終滅菌產品F0≥8min時，其SAL應達到（）A.10?3B.10??C.10??D.10??答案：D28.潔凈區(qū)表面微生物監(jiān)測，接觸碟培養(yǎng)基常用（）A.TSAB.SDAC.MACD.XLD答案：A29.采用過氧化氫滅菌時，最難殺滅的微生物為（）A.細菌繁殖體B.真菌孢子C.病毒D.芽孢答案：D30.潔凈室風速測試時，測點距高效過濾器出口平面（）A.50mmB.100mmC.150mmD.300mm答案：C二、配伍題（每題1分，共10分。每題先給出五個選項，后跟五個題干，請將正確選項字母填入題干后括號內，每個選項可重復使用）選項：A.30～35℃培養(yǎng)72hB.20～25℃培養(yǎng)5dC.55～60℃培養(yǎng)24hD.30～35℃培養(yǎng)48hE.20～25℃培養(yǎng)72h31.TSA接觸碟監(jiān)測B級區(qū)表面微生物（）答案：A32.SDA沉降碟監(jiān)測霉菌和酵母菌（）答案：B33.嗜熱脂肪芽孢桿菌生物指示劑培養(yǎng)（）答案：C34.培養(yǎng)基模擬試驗樣品培養(yǎng)（）答案：A35.純化水微生物限度檢查（）答案：D36.浮游菌采樣TSA培養(yǎng)（）答案：A37.隔離器表面過氧化氫滅菌后監(jiān)測（）答案：A38.培養(yǎng)基靈敏度試驗（）答案：D39.成品無菌檢查硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（）答案：A40.成品無菌檢查改良馬丁培養(yǎng)基（）答案：B三、判斷題（每題1分，共20分。正確打“√”，錯誤打“×”）41.潔凈區(qū)A級區(qū)可設置水池和地漏。（）答案：×42.高效過濾器完整性測試僅在新裝后進行一次即可。（）答案：×43.無菌操作期間，人員可快速穿越A級區(qū)以減少暴露時間。（）答案：×44.滅菌柜熱穿透試驗探頭應放置于最大包裝單位冷點。（）答案：√45.潔凈室壓差低于設定值時，可臨時關閉回風閥提高壓差。（）答案：×46.培養(yǎng)基模擬試驗允許使用0.1%聚山梨酯80中和過氧化氫殘留。（）答案：√47.同一高效過濾器，若邊框泄漏率>0.01%視為不合格。（）答案：√48.無菌藥品內包材可在C級區(qū)完成最終清洗后進入A級區(qū)。（）答案：×49.潔凈區(qū)監(jiān)測出現連續(xù)3點超警戒限即構成趨勢偏差。（）答案：√50.采用干熱滅菌去熱原，FH≥30min即可保證內毒素下降3個對數單位。（）答案：√51.人員更衣確認可接受標準中，手套表面微生物≤5CFU/皿。（）答案：√52.汽化過氧化氫滅菌時，相對濕度越高殺滅效果越好。（）答案：×53.潔凈室自凈時間測試僅需在空態(tài)下進行。（）答案：×54.無菌工藝模擬試驗中，任何陽性樣品必須調查并擴大采樣。（）答案：√55.潔凈區(qū)溫濕度探頭應每年至少校準一次。（）答案：√56.采用環(huán)氧乙烷滅菌，產品解析階段可省略溫度監(jiān)控。（）答案：×57.潔凈區(qū)墻面與地面夾角應呈圓弧R≥50mm設計。（）答案：√58.無菌操作期間，設備維修人員可臨時進入A級區(qū)進行緊急維修。（）答案：×59.純化水系統消毒采用巴氏消毒法，常用80℃、60min。（）答案：√60.潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)測數據應保存至產品有效期后至少1年。（）答案：√四、填空題（每空1分，共20分）61.潔凈區(qū)A級區(qū)動態(tài)≥0.5μm粒子最大允許數為________個/m3。答案：352062.濕熱滅菌標準菌株嗜熱脂肪芽孢桿菌的D121值為________min。答案：1.5～3.063.歐盟GMP規(guī)定，B級區(qū)浮游菌動態(tài)警戒限為________CFU/m3。答案：5064.高效過濾器邊框掃描泄漏測試，采樣頭移動速度為________cm/s。答案：2～365.無菌操作隔離器內部應維持相對于背景環(huán)境________Pa的負壓或正壓。答案：+20～+6066.培養(yǎng)基模擬試驗最差條件應包括最大________人數和最長________時間。答案：操作；暴露67.潔凈室自凈時間測試粒子衰減曲線應達到________%的下降。答案：9968.汽化過氧化氫滅菌常用濃度范圍為________mg/L。答案：6～1269.無菌藥品最終滅菌工藝F0≥________min視為過度殺滅法。答案：1270.潔凈區(qū)表面微生物監(jiān)測，接觸碟直徑為________mm。答案：5571.干熱滅菌去熱原常用溫度/時間為________℃/________min。答案：250；3072.純化水系統反滲透裝置回收率一般控制在________%。答案：7573.潔凈區(qū)地漏液封應使用________%消毒劑溶液。答案：0.2～0.574.無菌操作手套每________分鐘應消毒一次。答案：3075.潔凈室高效過濾器效率等級H14對0.3μm粒子效率≥________%。答案：99.99576.培養(yǎng)基靈敏度試驗中，金黃色葡萄球菌接種量應≤________CFU。答案：10077.無菌工藝模擬試驗樣品應在________℃倒置培養(yǎng)。答案：20～2578.潔凈區(qū)監(jiān)測出現糾偏限超標時，應在________小時內完成初步調查。答案：2479.環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢量通常為________CFU/片。答案：10?80.潔凈區(qū)風速測試測點間距一般為________m。答案：0.3五、簡答題（每題6分，共30分）81.簡述潔凈區(qū)A級區(qū)與B級區(qū)在動態(tài)監(jiān)測頻次上的差異及科學依據。答案：A級區(qū)需對懸浮粒子與浮游菌進行連續(xù)監(jiān)測，每點每秒采樣并實時報警；B級區(qū)粒子每班一次、浮游菌每班一次，因A級區(qū)為最核心無菌暴露區(qū)域，任何瞬時污染均可能影響產品，故需連續(xù)監(jiān)測以即時發(fā)現偏差；B級區(qū)為背景環(huán)境，風險相對較低，頻次降低可兼顧可行性與代表性，符合歐盟GMP附錄1風險分級原則。82.闡述培養(yǎng)基模擬試驗（APS）設計中最差條件的三大要素及其相互關系。答案：最差條件包括最大操作人數、最長暴露時間、最復雜干預操作。三者相互疊加可放大污染風險：人數增加提高發(fā)菌量；暴露時間延長增加污染概率；復雜干預（如拆機、調整針頭）破壞無菌狀態(tài)。設計時需同時滿足，確保驗證結果覆蓋日常最差情況，且不得相互抵消，如延長暴露時間不得減少人數，以保證驗證的科學性與保守性。83.說明汽化過氧化氫（VHP）滅菌過程中“冷凝點”概念及其控制策略。答案：冷凝點指過氧化氫氣體濃度達到飽和開始液化的溫度/濃度臨界點。一旦冷凝，微滴覆蓋芽孢形成屏障，反而降低殺滅效率。控制策略：1）維持艙室溫度高于露點2～4℃；2）分階段注入，先除濕至相對濕度<40%，再緩慢提升H?O?濃度；3）實時監(jiān)測腔體溫度與H?O?ppm，采用PID算法調節(jié)注入速率；4）使用短循環(huán)風機保證均勻分布，避免局部過飽和。84.無菌操作期間，人員突發(fā)低血糖需緊急離開A級區(qū)，應如何執(zhí)行應急退出與再進入程序？答案：1）立即通知值班主管與QA，啟動應急退出；2）按SOP在A級區(qū)內脫下外層無菌手套，噴0.2%過氧乙酸消毒內層手套；3）通過緩沖間一步退出，不得接觸任何產品；4）B級區(qū)脫下全部無菌衣，按一般人員退出；5）醫(yī)療處理后，重新完成更衣確認（含表面微生物≤5CFU/皿）；6