微生物無菌檢驗試題及答案一、單項選擇題（每題1分，共30分。每題只有一個正確答案，請將正確選項字母填入括號內）1.中國藥典2020版規(guī)定，無菌檢查用硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（FTM）的氧化層高度不得超過（）。A.10mm??B.15mm??C.20mm??D.25mm答案：C2.薄膜過濾法進行無菌檢查時，對直徑50mm、孔徑0.45μm的濾膜，每次沖洗量一般不少于（）。A.50mL??B.100mL??C.150mL??D.200mL答案：B3.下列哪種中和劑最常用于含汞防腐劑供試品的無菌檢查（）。A.硫代硫酸鈉??B.卵磷脂??C.聚山梨酯80??D.半胱氨酸答案：A4.無菌檢查陽性對照菌株金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003的接種量應≤（）CFU/皿。A.10??B.50??C.100??D.200答案：C5.供試品經溶解后直接接種FTM與TSB，若出現(xiàn)渾濁，首先應進行的操作是（）。A.立即報告陽性??B.轉種血平板??C.革蘭染色鏡檢??D.繼續(xù)培養(yǎng)至14天答案：C6.培養(yǎng)基適用性檢查中，促生長試驗接種量定為≤100CFU，其目的是驗證（）。A.培養(yǎng)基滅菌效果??B.培養(yǎng)基靈敏度??C.培養(yǎng)基選擇性??D.培養(yǎng)基穩(wěn)定性答案：B7.對β內酰胺類抗生素供試品進行無菌檢查時，首選的中和劑組合為（）。A.青霉素酶+聚山梨酯80??B.青霉素酶+卵磷脂??C.高碘酸鈉+硫代硫酸鈉??D.半胱氨酸+EDTA答案：A8.無菌檢查隔離器背景環(huán)境應達到ISO（）級潔凈度。A.5??B.7??C.8??D.9答案：A9.培養(yǎng)基靈敏度檢查用菌懸液濃度測定，采用比濁法時0.5麥氏單位約相當于（）CFU/mL。A.1.0×10???B.1.5×10???C.1.0×10???D.5.0×10?答案：B10.供試品取樣量按批產量計，若批產量為80支，應?。ǎ┲нM行無菌檢查。A.5??B.8??C.10??D.20答案：C11.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基氧化還原指示劑為（）。A.酚紅??B.刃天青??C.溴甲酚紫??D.美藍答案：B12.無菌檢查中，若陽性對照管未生長，應判定本次試驗（）。A.無效??B.有效??C.需復驗??D.可發(fā)報告答案：A13.薄膜過濾法沖洗液溫度應控制在（）℃。A.20±2??B.25±2??C.30±2??D.37±2答案：B14.供試品為油劑時，應選用（）溶解后過濾。A.0.1%蛋白胨水??B.聚山梨酯80生理鹽水??C.磷酸鹽緩沖液??D.硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基答案：B15.無菌檢查培養(yǎng)時間不得少于（）天。A.7??B.10??C.14??D.21答案：C16.培養(yǎng)基滅菌后pH允許偏差為（）。A.±0.1??B.±0.2??C.±0.3??D.±0.5答案：B17.隔離器過氧化氫滅菌驗證生物指示劑采用（）芽孢。A.枯草芽孢桿菌5230??B.嗜熱脂肪芽孢桿菌7953??C.短小芽孢桿菌5833??D.金黃色葡萄球菌26003答案：B18.無菌檢查陽性對照菌株接種后，培養(yǎng)時間不超過（）小時應明顯生長。A.12??B.24??C.48??D.72答案：B19.薄膜過濾法沖洗終點判斷，最后一次沖洗液取0.1mL接種TSB，培養(yǎng)（）天無菌生長即為合格。A.1??B.2??C.3??D.5答案：C20.供試品為凍干粉針時，復溶所用稀釋劑需經（）處理。A.115℃30min??B.121℃15min??C.0.22μm過濾??D.180℃干熱2h答案：C21.無菌檢查中，若需超聲助溶，超聲時間一般不超過（）分鐘。A.1??B.5??C.10??D.15答案：B22.培養(yǎng)基適用性檢查中，抑制性試驗所用菌株為（）。A.金黃色葡萄球菌??B.銅綠假單胞菌??C.白色念珠菌??D.枯草芽孢桿菌答案：C23.無菌檢查報告“符合規(guī)定”的依據(jù)是（）。A.供試品管無菌生長且陽性對照生長良好??B.供試品管無菌生長??C.陰性對照無菌生長??D.培養(yǎng)基合格答案：A24.供試品為抗生素軟膏，取樣量應不少于（）g。A.1??B.2??C.5??D.10答案：C25.無菌檢查陽性對照菌懸液保存于2～8℃，有效期為（）小時。A.6??B.12??C.24??D.48答案：C26.薄膜過濾法沖洗速度控制在（）mL/min可減少濾膜堵塞。A.20–30??B.40–50??C.60–70??D.80–100答案：B27.供試品為血液制品，需加入（）中和潛在抗生素。A.β內酰胺酶??B.青霉素酶??C.聚山梨酯80??D.硫代硫酸鈉答案：B28.無菌檢查陽性對照菌株銅綠假單胞菌CMCC(B)10104為（）菌。A.革蘭陽性球菌??B.革蘭陰性球菌??C.革蘭陰性桿菌??D.革蘭陽性桿菌答案：C29.培養(yǎng)基靈敏度檢查中，接種菌量回收率應≥（）%。A.50??B.60??C.70??D.80答案：C30.無菌檢查隔離器運行前，VHPS濃度達到（）ppm開始滅菌計時。A.100??B.250??C.400??D.600答案：C二、配伍選擇題（每題1分，共20分。每組試題共用五個備選答案，每個答案可重復選用，也可不選用，請將正確選項字母填入括號內）【31–35】培養(yǎng)基適用性檢查項目A.無菌性檢查??B.靈敏度檢查??C.選擇性檢查??D.抑制性檢查??E.促生長檢查31.白色念珠菌接種SDA（）32.金黃色葡萄球菌接種FTM（）33.銅綠假單胞菌接種TSA（）34.培養(yǎng)基滅菌后取樣置20–25℃5天（）35.枯草芽孢桿菌接種TSB（）答案：31E?32E?33E?34A?35E【36–40】中和劑選擇A.硫代硫酸鈉??B.卵磷脂+聚山梨酯80??C.青霉素酶??D.半胱氨酸??E.高碘酸鈉36.含氯己定供試品（）37.含汞供試品（）38.含β內酰胺抗生素供試品（）39.含醛類供試品（）40.含磺胺類供試品（）答案：36B?37A?38C?39D?40E【41–45】操作錯誤對應后果A.假陽性??B.假陰性??C.試驗無效??D.濾膜破損??E.菌落融合41.沖洗液未滅菌（）42.陽性對照菌量>100CFU（）43.超聲時間過長（）44.濾膜孔徑選0.8μm（）45.培養(yǎng)箱溫度波動±3℃（）答案：41A?42C?43B?44B?45B【46–50】培養(yǎng)現(xiàn)象判斷A.產酸產氣??B.氧化層消失??C.沉淀生長??D.表面菌膜??E.澄清無生長46.枯草芽孢桿菌在FTM30–35℃3天（）47.白色念珠菌在TSB20–25℃5天（）48.產氣莢膜梭菌在FTM（）49.銅綠假單胞菌在FTM（）50.陰性對照（）答案：46C?47D?48A?49D?50E三、多項選擇題（每題2分，共20分。每題有兩個或兩個以上正確答案，多選少選均不得分，請將正確選項字母填入括號內）51.以下屬于無菌檢查陽性對照菌株的有（）。A.金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003??B.枯草芽孢桿菌CMCC(B)63501??C.白色念珠菌CMCC(F)98001??D.黑曲霉CMCC(F)98003??E.銅綠假單胞菌CMCC(B)10104答案：ABCE52.薄膜過濾法沖洗液可選用（）。A.0.1%蛋白胨水??B.pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液??C.聚山梨酯80生理鹽水??D.硫代硫酸鈉溶液??E.含中和劑的磷酸鹽緩沖液答案：ABCE53.無菌檢查培養(yǎng)基靈敏度檢查用菌懸液制備方法包括（）。A.比濁法??B.活菌計數(shù)法??C.微量滴定法??D.表面計數(shù)法??E.麥氏管法答案：ABE54.供試品為吸入粉霧劑時，前處理措施有（）。A.無菌生理鹽水溶解??B.聚山梨酯80助溶??C.0.22μm過濾除菌??D.超聲助溶≤5min??E.直接接種答案：ABD55.無菌檢查隔離器VHPS滅菌驗證參數(shù)包括（）。A.濃度??B.濕度??C.溫度??D.時間??E.壓力答案：ABCD56.以下情況需進行無菌檢查復驗的有（）。A.陽性對照未生長??B.供試品管渾濁但鏡檢為供試品顆粒??C.濾膜破損??D.培養(yǎng)基失效??E.陰性對照生長答案：ACDE57.無菌檢查記錄應包括（）。A.培養(yǎng)基批號??B.菌株來源??C.沖洗量??D.培養(yǎng)箱編號??E.檢驗員簽名答案：ABCDE58.供試品為放射性藥品時，特殊措施有（）。A.鉛罐運輸??B.衰變后檢驗??C.遠程操作隔離器??D.縮短培養(yǎng)時間??E.增加取樣量答案：ABC59.無菌檢查培養(yǎng)基保存條件為（）。A.2–8℃避光??B.可冷凍??C.平放??D.密封??E.不超過21天答案：ACDE60.無菌檢查報告審核人需具備（）。A.微生物學本科??B.中級職稱??C.5年以上經驗??D.受訓合格??E.授權簽字人答案：BDE四、判斷題（每題1分，共10分。正確打“√”，錯誤打“×”）61.無菌檢查陽性對照菌懸液可反復凍融使用。（）答案：×62.薄膜過濾法沖洗終點可用最后一次沖洗液0.1mL接種TSB3天無菌生長判定。（）答案：√63.供試品為生物制品時，可省略陽性對照。（）答案：×64.無菌檢查培養(yǎng)基分裝后115℃30min滅菌即可使用。（）答案：×65.隔離器手套完整性檢查每月進行一次即可。（）答案：×66.無菌檢查陰性對照若生長，則試驗無效。（）答案：√67.供試品為固體，可直接投入培養(yǎng)基無需溶解。（）答案：×68.無菌檢查陽性對照菌株傳代次數(shù)不得超過5代。（）答案：√69.無菌檢查報告可電子簽名，但需符合電子記錄法規(guī)。（）答案：√70.無菌檢查培養(yǎng)基靈敏度檢查可每季度進行一次。（）答案：√五、填空題（每空1分，共20分）71.中國藥典規(guī)定，無菌檢查培養(yǎng)基靈敏度所用菌株接種量不得大于________CFU。答案：10072.薄膜過濾法沖洗液溫度應控制在________℃±2℃。答案：2573.無菌檢查陽性對照菌株銅綠假單胞菌編號為CMCC(B)________。答案：1010474.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基氧化層高度不得超過________mm。答案：2075.無菌檢查隔離器VHPS滅菌常用生物指示劑芽孢為________。答案：嗜熱脂肪芽孢桿菌795376.供試品為油劑時，常用________作為乳化劑助溶。答案：聚山梨酯8077.無菌檢查培養(yǎng)時間不得少于________天。答案：1478.培養(yǎng)基適用性檢查包括無菌性、________、抑制性和選擇性。答案：靈敏度79.無菌檢查陽性對照菌懸液保存于2–8℃，有效期________小時。答案：2480.無菌檢查報告“符合規(guī)定”必須滿足陽性對照生長良好且供試品管________。答案：無菌生長81.無菌檢查取樣量按批產量≤100支時，應取________支。答案：1082.無菌檢查陰性對照若生長，則本次試驗________。答案：無效83.薄膜過濾法濾膜孔徑為________μm。答案：0.4584.無菌檢查培養(yǎng)基滅菌后pH允許偏差為±________。答案：0.285.無菌檢查陽性對照菌株接種后，培養(yǎng)時間不超過________小時應明顯生長。答案：2486.無菌檢查隔離器背景環(huán)境應達到ISO________級。答案：587.無菌檢查培養(yǎng)基促生長試驗接種量回收率應≥________%。答案：7088.無菌檢查供試品為抗生素時，首選中和劑為________。答案：青霉素酶89.無菌檢查薄膜過濾法沖洗量一般不少于________mL。答案：10090.無菌檢查記錄保存期限不得少于________年。答案：5六、簡答題（每題10分，共30分）91.簡述無菌檢查薄膜過濾法對含防腐劑供試品的操作要點及注意事項。答案：（1）中和劑選擇：根據(jù)防腐劑類型選用硫代硫酸鈉、卵磷脂+聚山梨酯80、青霉素酶等，驗證中和劑有效性。（2）沖洗量：每膜≥100mL，分3–5次沖洗，最后一次取0.1mL沖洗液接種TSB3天無菌生長確認終點。（3）沖洗速度：40–50mL/min，避免濾膜堵塞及微生物損傷。（4）濾膜完整性：過濾前后進行起泡點試驗，≥0.35MPa為合格。（5）陽性對照：加入≤100CFU陽性菌，驗證中和劑無毒性。（6）操作環(huán)境：隔離器A級層流，手套完整性檢查，VHPS滅菌周期驗證。（7）記錄：詳細記錄沖洗量、速度、中和劑批號、濾膜批號及起泡點數(shù)據(jù)。92.無菌檢查陽性對照菌懸液制備、保存及使用過程中的質量控制措施。答案：（1）菌株來源：采用CMCC或ATCC標準菌株，傳代≤5代，80℃甘油保存。（2）復活：取凍存菌劃線TSA，30–35℃