ICS11.22054CCSB4154西 藏 自 治 區(qū) 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB54/T0565—2026牛羊住肉孢子蟲病防控技術(shù)規(guī)程2026-1-4發(fā)布 2026-2-5實施西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局??發(fā)布DB54/T0565DB54/T0565—2026PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語和定義 1流行特點 1樣品的采集、保存和運(yùn)輸 1診斷 2預(yù)防 2檢疫監(jiān)督 3附錄A（規(guī)范性）壓片鏡檢法4附錄B（資料性）住肉孢子蟲形態(tài)5附錄C（規(guī)范性）PCR6前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由西藏自治區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口。本文件起草單位：西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所。本文件主要起草人：單曲拉姆、米榮升、扎西央宗、索朗曲吉、趙霞玲、王冬經(jīng)、馬弘財、任越。DB54/T0565DB54/T0565—2026PAGEPAGE1牛羊住肉孢子蟲病防控技術(shù)規(guī)程本文件適用于牛羊住肉孢子蟲病的防控工作。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單適用于本文件。GB16567 種畜禽調(diào)運(yùn)檢疫技術(shù)規(guī)范GB7959 糞便無害化衛(wèi)生要求GB/T36195 畜禽糞便無害化處理技術(shù)規(guī)范NY/T3961 畜禽屠宰加工人員防護(hù)技術(shù)規(guī)范術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。住肉孢子蟲病住肉孢子蟲侵入中間宿主的肌肉和終末宿主腸道引起的一種危害嚴(yán)重的人獸共患食源性寄生蟲病。流行特點宿主特異性牛羊是住肉孢子蟲的中間宿主，犬、貓、狐貍等肉食動物以及人類是終末宿主。傳播途徑中間宿主食入被終末宿主糞便污染的飼料或水，終末宿主通過捕食感染的中間宿主而感染。流行季節(jié)發(fā)病多為秋、冬季。樣品的采集、保存和運(yùn)輸樣品的采集采集50g～80g新鮮牛羊肌肉，記錄樣品采集地點、日期、牲畜種類、年齡、采集部位及病史等內(nèi)容。樣品的保存和運(yùn)輸樣品低溫保存送回實驗室，短期在2℃～8℃保存，長期在-20℃及以下保存或浸泡于福爾馬林溶液中。診斷臨床診斷臨床癥狀通常表現(xiàn)為食欲減退、貧血、水腫、尾端脫毛并壞死，嚴(yán)重時出現(xiàn)流產(chǎn)、四肢伸直、肌肉僵硬等癥狀。病理變化臨床結(jié)果判定實驗室診斷壓片鏡檢法肌肉樣品壓片鏡檢法具體操作見附錄A，牛羊住肉孢子蟲形態(tài)見附錄B。PCRPCR診斷具體方法見附錄C。血清檢測法可采用ELISA試劑盒方法按說明書檢測血清中住肉孢子蟲特異性抗體，適用于群體篩查和流行病學(xué)調(diào)查。預(yù)防糞便無害化處理加強(qiáng)對住肉孢子蟲終末宿主糞便的管理，按GB7959規(guī)定進(jìn)行無害化處理。切斷傳播途徑圈舍內(nèi)嚴(yán)禁犬貓，加強(qiáng)對鼠的控制；嚴(yán)防犬、貓等動物糞便接觸牛羊飼料及飲水。環(huán)境消毒定期用25%來蘇爾、含氯消毒劑或過氧化物消毒劑交替使用對圈舍進(jìn)行消毒。發(fā)生過本病的區(qū)域，消毒后空舍時間不低于30d。飼養(yǎng)管理肉品安全處理屠宰發(fā)現(xiàn)有白色包囊的肉品應(yīng)無害化處理。人員防護(hù)3961進(jìn)行無害化處理。檢疫監(jiān)督產(chǎn)地檢疫牛羊出售或流動之前，養(yǎng)殖場/戶應(yīng)向當(dāng)?shù)貏游镄l(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)申報檢疫，按畜禽產(chǎn)地檢疫取得動物檢疫合格證明。屠宰檢疫動物衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)的檢疫人員對待宰牛羊進(jìn)行查證驗物，合格后方可入廠/場屠宰。引種檢疫GB1656715d～30d,合格后方可進(jìn)場/戶飼養(yǎng)。監(jiān)督管理GB/T36195規(guī)定進(jìn)行無害化處理。附 錄 A（規(guī)范性）壓片鏡檢法主要儀器設(shè)備外科手術(shù)剪、不銹鋼鑷子、不銹鋼、鋁合金或塑料肉樣盤,載玻片及生物顯微鏡。試劑甘油。操作方法剔除脂肪、結(jié)締組織及肌膜，暴露出肌肉，在光線下觀察肌纖維間是否含灰白/乳白色紡錘形、圓柱形等包囊。壓片鏡檢4條～6結(jié)果判定附 錄 B（資料性）圖B.1巨型住肉孢子蟲圖B.2 顯微鏡下住肉孢子蟲A：羊柔嫩住肉孢子蟲（VP呈指狀突起）；B：白羊犬住肉孢子蟲（VP呈毛狀突起）;C：牦牛犬住肉孢子蟲（VP呈現(xiàn)長毛狀突起）；D：海氏住肉孢子蟲（VP呈現(xiàn)短毛狀突起）；E：諾氏住肉孢子蟲（VP呈長指狀突起）；F：似人住肉孢子蟲（VP呈短指狀突起）圖B.3不同種類住肉孢子蟲（鏡檢４００Ｘ）附 錄 C（規(guī)范性）住肉孢子蟲PCR實驗方法主要儀器高速離心機(jī)、PCR基因擴(kuò)增儀、微量可調(diào)移液器、核酸電泳儀及凝膠成像分析系統(tǒng)。主要試劑2×PCRMix、DL2000DNAMarker、Ts-GelRed、核酸染料及瓊脂糖。操作方法PCR擴(kuò)增采用PCR采用50μL反應(yīng)體系:DNAMix25μL，上下游引物各2μL，加ddH2O50.0μL。PCR循環(huán)參數(shù)：95℃預(yù)變性5min;94℃變性15s,Tm退火15s,721kb/s,35;7210min。引物序列信息見表C.1。瓊脂糖凝膠電泳用1XTAE1.0100mL凝膠中加入10μLPCR5μL,1.0%瓊脂糖凝膠中以150V凝膠的電壓下進(jìn)行電泳,采用凝膠成像分析系統(tǒng)觀察電泳結(jié)果并拍照。結(jié)果判定結(jié)果判定陽性:被檢樣品擴(kuò)增產(chǎn)物泳道出現(xiàn)目的條帶時,判為陽性。陰性:被檢樣品擴(kuò)增產(chǎn)物泳道沒有出現(xiàn)任何條帶,經(jīng)重復(fù)３次PCR檢測仍未出現(xiàn)擴(kuò)增條帶時,判為陰性。表C.1住肉孢子蟲常用PCR引物序列特性引物名序列（5’-3’）長度（bp）Tm備注較為通用unF1CGGCTGGACTATGTATC58050unR1CGTGCCCGTAGGTATunF2TCGGATGTGGTTCGC86252unR2TCGTGCCCGTAGGT對單一種靈敏性較高ST-COX1FATGCCAGTCCTGTTCTCCG80055S.tenellaST-COX1RCTGCCCAATAATCCGCTGTSC-COX1FGAGGCTCTTTGCCGTAG80055S.capracanisSC-COX1RTGGCTGCCCAGTAATCCSH-C