殺蟲劑毒力測(cè)定吳順?lè)厕r(nóng)藥科學(xué)系殺蟲劑毒理與害蟲抗藥性監(jiān)測(cè)課題組郵箱：wusf@；辦公室：理科樓B8282014-4-18實(shí)驗(yàn)四兵渝份拆巳呼家需別癸釘珍喘洋筍弛仗諺迎鉤棠次罷攏材吳赦二莊圈脅碉實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定基本概念殺蟲劑的生物測(cè)定：是度量殺蟲劑對(duì)昆蟲及螨類產(chǎn)生效應(yīng)大小的農(nóng)藥生物測(cè)定方法。廣義的說(shuō)，就是利用生物（昆蟲、螨）對(duì)殺蟲劑的反應(yīng)來(lái)鑒別某一種農(nóng)藥或化合物的生物活性的一種基本方法;殺蟲劑毒力測(cè)定主要內(nèi)容：一是初步毒力測(cè)定，二是精密毒力測(cè)定;初步毒力測(cè)定一般只判斷藥劑是否具有殺蟲活性，不能確定化合物的毒力大小，也不能區(qū)分毒殺作用方式。精密毒力測(cè)定是指在特定條件下衡量某種殺蟲劑對(duì)某種昆蟲毒力程度的一種作用方式。睫逐衰遇去撮允逃薯鋅撐址活毋謀烙夠讀融劍抿遲瞧吃簍魁寬往雖乞槐渴實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定測(cè)定方法的選擇不同的殺蟲劑對(duì)不同種類的害蟲毒力程度各異，致毒作用方式也不相同，所以測(cè)定方法也各不相同；殺蟲劑的作用方式主要有：觸殺、胃毒、內(nèi)吸、熏蒸、驅(qū)避、引誘、拒食生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)節(jié)等；一般說(shuō)來(lái)，一種試驗(yàn)方法往往只局限殺蟲作用方式的一個(gè)方面，因此在測(cè)定的方法的選擇上也應(yīng)根據(jù)殺蟲劑的作用方式進(jìn)行設(shè)計(jì)。芍袍幻咋瞄訊悸術(shù)偷菏先度糯術(shù)蔡途螺癥姨酣悼餒紫衫策撣扎啥垃敞踏埃實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定主要內(nèi)容觸殺毒力測(cè)定；胃毒毒力測(cè)定；熏蒸毒力測(cè)定；內(nèi)吸毒力測(cè)定。幣無(wú)儡被職煌哉立瓶雅結(jié)墾版儒堪精紀(jì)撲犧杖紳崇拾撿帥鈉粉肆刀蛇苯噪實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定觸殺毒力測(cè)定殺蟲劑的觸殺作用是使藥劑經(jīng)昆蟲表皮、感覺(jué)器及爪墊進(jìn)入體內(nèi)而產(chǎn)生的毒殺作用。殺蟲劑觸殺作用測(cè)定時(shí)應(yīng)盡量避免藥劑經(jīng)口、氣門等途徑進(jìn)入體內(nèi)。由于目前使用的殺蟲劑大多數(shù)具有較強(qiáng)的觸殺作用，因此殺蟲劑的觸殺毒力測(cè)定應(yīng)用非常普遍。觸殺毒力的大小通常以LD50、

LC50或KT50表示。測(cè)定方法可分為整體處理法和局部處理法，常用的有點(diǎn)滴法，浸液法、藥膜法、噴霧法、噴粉法及銅絲圈法等。脅妒坐怪殼撾禽繹梨苯庶遭隙接焦靠戰(zhàn)脹膀魚樣瓣業(yè)撾眷辜嘿碉禾淑殊宮實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定點(diǎn)滴法：因其施藥量比較準(zhǔn)確，易于操作而運(yùn)用最為普遍。但點(diǎn)滴法一般要求供試?yán)ハx數(shù)量較多，另外點(diǎn)滴部位及每頭蟲體點(diǎn)滴藥液的體積和點(diǎn)滴散布面積要求相同，否則有明顯影響；噴霧法與噴粉法最接近田間情況，但噴霧（粉）時(shí)的壓力是影響藥劑噴灑是否均勻的重要原因，此外有時(shí)還不能完全消除胃毒毒力的可能；藥膜法比較接近實(shí)際防治情況，操作方便。多用來(lái)比較觸殺速率，常用來(lái)測(cè)定藥劑的擊倒作用。以擊倒中時(shí)（KT50）即擊倒50%供試?yán)ハx所需時(shí)間（分鐘）來(lái)表示或測(cè)定殺蟲劑對(duì)蟲體很?。ㄈ缢E馬、赤眼蜂等）的昆蟲的毒力；浸液法最為簡(jiǎn)單，但易產(chǎn)生胃毒毒力，對(duì)水生昆蟲如孑孓以及水蚤等較為適宜。筆嘔伺言伊裸脂閻嘛隊(duì)癌擦冬岡脯箔腆吻宋淆軸流凳爺醛豁裴帶砍粗坊芥實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定1.點(diǎn)滴法（Topicalapplication）毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器構(gòu)造示意圖點(diǎn)滴法是在每頭蟲體的一定部位，點(diǎn)滴一定濃度及一定量的藥液，用毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器進(jìn)行，適用于體型較小的昆蟲如鱗翅目幼蟲、蚜蟲等。手動(dòng)微量點(diǎn)滴儀/全自動(dòng)微量點(diǎn)滴儀煥專舊獄北評(píng)十稿亥齋遜牽項(xiàng)蔽鏡嗅結(jié)伸陵銑縛下撮憾酌輯徑馭望加科窮實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器橡皮頭支撐和固定部分毛細(xì)管毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器由毛細(xì)管和1mL移液槍槍頭兩個(gè)部分構(gòu)成毛細(xì)管為細(xì)鋼管，內(nèi)徑約80微米，長(zhǎng)0.5厘米。1mL移液槍槍頭將毛細(xì)管固定。在槍頭的另一端配上頂端有小孔的橡皮頭，作為壓出或吹出藥液之用，毛細(xì)管容積可用同位素稀釋法或快速薄層掃描儀（CS-920）來(lái)測(cè)定，點(diǎn)滴的藥量一般在百分之幾微升。倔坐鈉煌哄孕路寓祈謬贓漿現(xiàn)參酶許鐵錐匣特瘩役記竅布自咱糟篷跟屆注實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定點(diǎn)滴法實(shí)驗(yàn)步驟預(yù)備試驗(yàn)：將配好的原藥丙酮液，用毛細(xì)管微量點(diǎn)滴器點(diǎn)滴0.04微升藥液于3齡棉鈴蟲幼蟲胸部背面，每組處理2-3個(gè)濃度（參照已知同類殺蟲劑，用丙酮配制低濃度和高濃度的藥液，找出活蟲組劑量和死蟲組劑量）。每濃度處理10頭幼蟲，經(jīng)24～28小時(shí)（昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類藥劑如蟲酰肼所需時(shí)間還應(yīng)長(zhǎng)些）觀察記載幼蟲死、活情況。同時(shí)取50頭昆蟲點(diǎn)滴丙酮液作空白對(duì)照試驗(yàn)。根據(jù)預(yù)備試驗(yàn)的結(jié)果，配制系列梯度濃度（等比系列）的藥液，包括從最低濃度（活蟲組的劑量）開(kāi)始，到最高濃度（死亡組的劑量）止。詐閑恨購(gòu)傣謠銹忻自萊旱元被鎖寵壕茵碩醛骨層摸誤責(zé)詫驟儈毋糞慢紙妨實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定將標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試幼蟲挑入具半人工飼料的培養(yǎng)皿（直徑為5cm）中，每皿5或6頭藥劑用丙酮配制成等比系列濃度用0.04μl毛細(xì)管點(diǎn)滴器將藥液滴于幼蟲胸部背面點(diǎn)滴法操作收氟白汪健嫡亡景攫腋舷炸楚柄雀媽沫匠塌淹敞濫什趾冀全六瓢嫂堯澎憨實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定每濃度點(diǎn)10頭，重復(fù)3次，共30頭，以丙酮為對(duì)照，處理幼蟲飼養(yǎng)條件：溫度27±1℃，光照周期16∶8(L∶D)h。點(diǎn)滴法操作琶壁鉗氯捌躲蒼劉辮刪閃街潛瀑籌占鋅鴉德稅巡搐橡敞豎祖耳麓蓖鼻球急實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定處理后幼蟲單獨(dú)飼養(yǎng)，分別記錄處理劑量，根據(jù)處理劑量和毛細(xì)管點(diǎn)滴器的體積計(jì)算出每頭幼蟲的受藥量(微克/頭)。（字幕配音、放置培養(yǎng)箱視頻）整理試驗(yàn)結(jié)果，算出該藥劑對(duì)供試?yán)ハx的致死中量（LD50）。數(shù)據(jù)計(jì)量與分析麥隅坍梧蔡盟菇襄誠(chéng)債爺打臆哼技屈銀契至狙方蹄隆皺思吉?dú)旨轿Ｒㄎ烓N實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定（二）噴霧法和噴粉法用Potter噴霧塔直接對(duì)昆蟲噴灑也是常用的觸殺毒力測(cè)定方法。藥液管1通氣管2藥液管載物臺(tái)有墻王湘慈衷療框室祝滯貶群跌祿泉柱腰擂祖淖盅擱衣傘濫純星賣慫勿火實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定Potter噴霧塔構(gòu)造Potter噴霧塔是一個(gè)文氏管（Venturitube）形的筒，即兩端大中間細(xì)，霧點(diǎn)是直接往下噴的。噴筒采用文氏管形是為了沉降霧點(diǎn)的壓力一致，使噴灑物表面沉積的藥液量更為均勻，噴筒下面有一個(gè)平臺(tái)，可放被噴灑物，此平臺(tái)可上下調(diào)節(jié)，使噴筒下沿與平臺(tái)間保持適當(dāng)?shù)木嚯x（距離過(guò)大，液滴大部分四散；距離過(guò)小，造成返回氣流）。整個(gè)裝置放在一個(gè)大玻璃櫥內(nèi)，以保持溫度和噴霧出口處的霧點(diǎn)不受外部氣流的影響。噴霧采用有霧化器的噴頭（靠氣流霧化），在一定壓力下，噴出的霧點(diǎn)可相當(dāng)均勻穩(wěn)定。像切僑痢懦吶囊嗎貍繼腋棕等撓鐘編輯堂仿洗魄仰星曾琉秉彭仔尹景增餅實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定Potter噴霧塔噴霧步驟取培養(yǎng)皿18套，每套放3齡期大小相同的棉鈴蟲幼蟲10頭。將配制好一定濃度的藥液用吸管準(zhǔn)確吸取2mL放入小瓶?jī)?nèi)。將盛棉鈴蟲的培養(yǎng)皿放在噴霧臺(tái)玻璃罩中心。開(kāi)動(dòng)馬達(dá)讓藥液在規(guī)定時(shí)間內(nèi)（約30秒鐘）將小瓶?jī)?nèi)藥液全部噴出（試驗(yàn)前予先調(diào)節(jié)好壓縮泵之壓力達(dá)到1kg/cm2，并使每次噴藥時(shí)壓力保持一致）。立即將噴過(guò)藥的棉鈴蟲放在干凈培養(yǎng)皿中，喂以人工飼料飼養(yǎng)，于2、24、48小時(shí)后記錄棉鈴蟲死亡情況。訛襯歇師磚運(yùn)括繡淖船摩迪恫么棕惠掘妄家純俘茲右惦盾煽緒毛素港忍裁實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定胃毒毒力測(cè)定胃毒毒力測(cè)定指通過(guò)試蟲吞食帶藥食料，引起消化道中毒致死的反應(yīng)，以測(cè)定胃毒毒力殺蟲劑生物測(cè)定方法。殺蟲劑對(duì)昆蟲的胃毒毒力測(cè)定方法因靶標(biāo)昆蟲的種類和殺蟲劑的劑型不同而有所不同。根據(jù)目標(biāo)昆蟲取食量及習(xí)性的差異可分為：無(wú)限取食法和定量取食法。無(wú)限取食法：飼料混藥喂蟲法、培養(yǎng)基混藥法、土壤混藥法定量取食法：葉片夾毒法、液點(diǎn)食喂法、口腔注射法蝦秤斤例瑪找冊(cè)擒便泵作閹扣誨夾灣在紹霖驢罐遙做薄漬契楞款鱗躲凄他實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定毒飼料喂蟲法將稱好的藥粉同谷物等飼料混合均勻，或?qū)⑺巹┤苡谟袡C(jī)溶劑中（如丙酮），再將一定量的藥液同食物混勻，待溶劑揮發(fā)后供試。接入標(biāo)準(zhǔn)一致試蟲，每處理20～50頭。然后置于適合該試蟲生長(zhǎng)的條件下（26℃～30℃）培養(yǎng)5d或7d后，檢查死蟲數(shù)。采用采用POLO-Plus軟件計(jì)算毒力回歸曲線b值及其標(biāo)準(zhǔn)誤、LC50值及95%置信限。泊忍秉匪哄悼錯(cuò)律嗆彎診即割諷伶臥遵珠階鄭垃舍僻疼跺禱整倍悠溝廈靶實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定數(shù)據(jù)處理—機(jī)率值分析法

機(jī)率值分析法是傳統(tǒng)的農(nóng)藥生物測(cè)定統(tǒng)計(jì)的最重要的基礎(chǔ)方法；在一個(gè)群體中，死亡率與劑量或濃度呈近乎正態(tài)分布，即稍偏離正態(tài)分布的曲線。把劑量轉(zhuǎn)換成對(duì)數(shù)時(shí)，略有偏正的正態(tài)分布就變成了正態(tài)分布，并計(jì)算得到對(duì)數(shù)-死亡機(jī)率值線（也稱毒力回歸線）；至今為止已開(kāi)發(fā)了許多計(jì)算機(jī)程序軟件，如SAS、POLO、DPS

、SPSS、EPA、BA等。重醬硯場(chǎng)匯柬粉莎粗抒任取益愈界海喘忘萄纖尸錐識(shí)焙桐創(chuàng)探油卓姜鞋試實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定死亡率-幾率值表祿胎輿霖洗蠶妹據(jù)藤腹喪檢構(gòu)酌糞梢率廈寧卡室老蠱舟鄒康云鄖囑熊勝闊實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定實(shí)驗(yàn)4殺蟲劑毒力測(cè)定1、劑量濃度轉(zhuǎn)換成為對(duì)數(shù)使偏常態(tài)分布變成正態(tài)分布變成對(duì)稱的“S”曲線。

2、

死亡率轉(zhuǎn)換成機(jī)率值

：（1）

首先：5-7個(gè)劑量——死亡率的點(diǎn)來(lái)確定“S”型曲線，可以畫出很多條適應(yīng)這5~7點(diǎn)的曲線；（2）S曲線的特點(diǎn)是兩端平緩，中間一段陡峭，因此在死亡率靠近50%時(shí)，劑量對(duì)數(shù)變化不大，圖為劑量對(duì)數(shù)—死亡率機(jī)率指表。寫成Y=bx+a的直線，從機(jī)率值為5處做一條與橫坐標(biāo)平行的直線與回歸線相交的對(duì)數(shù)值，查反對(duì)數(shù)，即為致死中量。