(12)發(fā)明專利(65)同一申請的已公布的文獻(xiàn)號(73)專利權(quán)人煙臺漢麻生物技術(shù)有限公司地址264670山東省煙臺市高新區(qū)科技大道39號(72)發(fā)明人曲桂武崔明審查員王博一種高純度大麻二酚的制備方法本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域，具體涉及一種高純度大麻二酚的制備方法，其特征在于，以大麻的葉及植株頂部約占整株植株五分之一的部分為提取部位，采用大孔吸附樹脂柱層析與聚酰胺柱層析聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行純化，采用混合溶劑體系進(jìn)行結(jié)晶精制，從而保證在獲得高純度產(chǎn)品的前提下最大程度提高收率。按本發(fā)明提供的方法所得21.一種高純度大麻二酚的制備方法，包括以下步驟：①溶劑提取：將大麻的提取部位曬干后粉碎成最粗粉，以95%乙醇為溶劑提取三次，每次溶劑用量為10～20倍量；合并提取液并過濾，50℃~70℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至室溫；②大孔吸附樹脂層析與聚酰胺層析聯(lián)用：第一步柱層析采用大孔吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為3～10g藥材/mL樹脂；先用45~55%的乙醇洗脫5～10個柱體積洗去大部分極性大的雜質(zhì)，再用80～95%的乙醇洗脫3~5個柱體積洗脫目標(biāo)成分；收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃~70℃減壓脫醇至溶液稍顯渾第二步柱層析采用聚酰胺吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為30～50mg大麻二酚/mL樹脂；先用30～50%的乙醇洗脫3～5個柱體積去除雜質(zhì)，再用50～80%的乙醇洗脫3～5個柱體積洗脫目標(biāo)成分；收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃~70℃減壓濃縮至稠膏；③混合溶劑結(jié)晶精制：將稠膏溶于混合溶劑體系，制成大麻二酚飽和溶液，靜置，得無比為1～5:1的比例組成；所述A為環(huán)己烷或正己烷，所述B為乙醇或甲醇；采用大孔吸附樹脂柱層析與聚酰胺柱層析聯(lián)用，其中所采用的大孔吸附樹脂為HPD-2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度大麻二酚的制備方法，其特征為：提取部位為大麻的葉及植株頂部占整株植株五分之一的部分。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域，具體涉及一種高純度大麻二酚的制備方法。背景技術(shù)[0002]大麻CannabissativaLinn.是大麻科(Cannabinaceae)大麻屬CannabisLinn.一年生草本植物，其成熟的雌株花、葉及莖制品稱Marijuana。目前從植物大麻中分離出的大麻素(cannabinoids,CBs)已有80多種，主要包括四氫大麻酚(tetrahydrocannabinol,THC)、大麻二酚(cannabidiol,CBD)、大麻酚(cannabinol,CBN)及大麻萜酚[0003]THC是大麻中重要的活性成分之一，具有良好的神經(jīng)保護(hù)作用，并可用于治療癌癥引起的嘔吐，但由于具有致幻作用，因此，只有那些生長期內(nèi)花、葉中THC含量低于0.3%的大麻品種(即工業(yè)大麻)才被允許種植。[0004]20世紀(jì)40年代從大麻中分離得到的CBD是大麻中的另一種重要活性成分，也是大麻中重要的非成癮性活性成分。體內(nèi)實驗發(fā)現(xiàn)CBD不但能拮抗THC激動大麻素I型受體作用，是一種在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域極具應(yīng)用前景的天然活性成分。[0005]盡量去除THC等具有致幻及成癮作用成分，獲取高純度產(chǎn)品，是CBD開發(fā)應(yīng)用的前CN105535111A分別公開了采用超臨界或亞臨界萃取技術(shù)制備富含CBD的火麻油或火麻浸膏的方法；CN107011125A公開了一種大麻二酚的方法，具體工藝包括二氧化碳超臨界萃取得大孔吸附樹脂、MCI樹脂或十八烷基鍵合硅膠等，結(jié)晶溶劑為乙醇。[0006]植物大麻中酚類成分復(fù)雜，極性相似的成分較多，因此上述方法，即使是CN106831353A中采用乙醇結(jié)晶的工藝制備CBD,產(chǎn)品中也仍可檢出THC等致幻或成癮性成發(fā)明內(nèi)容[0007]為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種高純度CBD的制備方法，按該方法制備的產(chǎn)品，CBD純度達(dá)98%以上，且THC僅痕量檢出或未檢出。[0008]本發(fā)明所提供的一種高純度CBD的制備方法，其技術(shù)方案包括以下步驟：[0009]①溶劑提?。簩⒋舐榈奶崛〔课粫窀珊蠓鬯槌勺畲址?，以95%乙醇為溶劑提取三次，每次溶劑用量為10～20倍量。合并提取液并過濾，50℃~70℃減壓脫醇至溶液稍顯渾4[0010]本發(fā)明中，溶劑提取所采用的提取部位是指大麻的葉及植株頂部約占整株植株五分之一的部分。[0012]第一步柱層析采用大孔吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為3～10g藥材/mL樹脂。先用45～55%的乙醇洗脫5～10個柱體積洗去大部分極性大的雜質(zhì)，再用80～95%的乙醇洗脫3～5個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃~70℃減壓脫醇至溶液[0013]上述第一步柱層析富集CBD,所采用的大孔吸附樹脂包括但不僅限于HPD-417、[0014]第二步柱層析采用聚酰胺吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為30～50mgCBD/mL樹脂。先用30～50%的乙醇洗脫3～5個柱體積去除雜質(zhì)，再用50～80%的乙醇洗脫3～5個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃~70℃減壓濃縮至稠膏。[0016]上述結(jié)晶所采用的混合溶劑體系由A(環(huán)己烷或正己烷)與B(乙醇或甲醇)按(1~5):1(V/V)的比例組成。[0017]大孔吸附樹脂層析與聚酰胺層析均是工業(yè)化生產(chǎn)中經(jīng)常采用的分離純化技術(shù)，但二者分離天然化合物的原理不同，在分離效果上可以互為補(bǔ)充。本發(fā)明將二者聯(lián)用，去雜效[0018]本發(fā)明采用混合溶劑作為結(jié)晶溶劑，其目的是調(diào)節(jié)溶劑極性，在最大程度地形成CBD的過飽和溶液的同時盡量增大THC等雜質(zhì)的溶解度，在保證產(chǎn)品純度的同時提高結(jié)晶的附圖說明[0019]圖1是按本發(fā)明所提供的方法制備的CBD的液相色譜圖。具體實施方式[0021]下面的實施例用以解釋本發(fā)明，但是并非對本發(fā)明實質(zhì)內(nèi)容的限制。[0022]實施例1.高純度CBD的制備[0023]①溶劑提?。喝〈舐轫敳考s占整株植株五分之一的部分，曬干后粉碎成最粗粉，以95%乙醇為溶劑提取三次，每次溶劑用量為10倍量。合并提取液并過濾，50℃減壓脫醇至溶[0024]②兩步柱層析：[0025]第一步柱層析：采用HPD-417型大孔吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為5g藥材/mL樹脂。先用45%的乙醇洗脫7個柱體積洗去大部分極性大的雜質(zhì)，再用85%的乙醇洗脫5個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至[0026]第二步柱層析：采用聚酰胺吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為30mgCBD/mL樹脂。5先用30%的乙醇洗脫3個柱體積去除雜質(zhì)，再用80%的乙醇洗脫3個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，50℃減壓濃縮至稠膏。[0027]③混合溶劑結(jié)晶：將稠膏溶于混合溶劑體系(環(huán)己烷：乙醇=3:1,V/V),制成CBD飽[0028]實施例2.高純度CBD的制備[0029]①溶劑提?。喝〈舐轫敳考s占整株植株五分之一的部分，曬干后粉碎成最粗粉，以95%乙醇為溶劑提取三次，每次溶劑用量為15倍量。合并提取液并過濾，60℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至室溫。[0030]②兩步柱層析：[0031]第一步柱層析：采用HPD-450型大孔吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為3g藥材/mL樹脂。先用55%的乙醇洗脫5個柱體積洗去大部分極性大的雜質(zhì)，再用95%的乙醇洗脫3個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，60℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至室溫；[0032]第二步柱層析：采用聚酰胺吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為50mgCBD/mL樹脂。先用50%的乙醇洗脫3個柱體積去除雜質(zhì)，再用75%的乙醇洗脫5個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，60℃減壓濃縮至稠膏。[0033]③混合溶劑結(jié)晶：將稠膏溶于混合溶劑體系(正己烷：甲醇=3:1,V/V),制成CBD飽[0034]實施例3.高純度CBD的制備[0035]①溶劑提?。喝〈舐轫敳考s占整株植株五分之一的部分，曬干后粉碎成最粗粉，以95%乙醇為溶劑提取三次，每次溶劑用量為20倍量。合并提取液并過濾，70℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至室溫。[0036]②兩步柱層析：[0037]第一步柱層析：采用AB-8型大孔吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為8g藥材/mL樹脂。先用55%的乙醇洗脫3個柱體積洗去大部分極性大的雜質(zhì)，再用95%的乙醇洗脫3個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，70℃減壓脫醇至溶液稍顯渾濁，冷卻至室[0038]第二步柱層析：采用聚酰胺吸附樹脂為層析介質(zhì)，柱負(fù)載量為45mgCBD/mL樹脂。先用45%的乙醇洗脫5個柱體積去除雜質(zhì)，再用80%的乙醇洗脫3個柱體積洗脫目標(biāo)成分。收集富含目標(biāo)成分的洗脫液，70℃減壓濃縮至稠膏。[0039]③混合溶劑結(jié)晶：將稠膏溶于混合溶劑體系(正己烷：乙醇=2:1,V/V),制成CBD飽[0041]照高效液相色譜法(《中國藥典》二部附錄VD)測定。[0042]色譜條件與系統(tǒng)適用性用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水-醋酸(25:50:25:0.4)為流動相；檢測波長220nm;理論板數(shù)按大麻二酚計算不低于4000。[0043]測定法取本品適量，精密稱定，加流動溶解并定量稀釋制成每1ml約含0.2mg的溶液，精密量取20μ1,注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取大麻二酚對照品，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計算，即