寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)大鼠NAFLD治療作用及機(jī)制探究一、引言1.1研究背景非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是一種與酒精攝入無(wú)關(guān)的肝臟疾病，其主要特征為肝臟內(nèi)脂肪過(guò)度堆積。近年來(lái)，隨著全球范圍內(nèi)人們生活方式的改變以及肥胖、糖尿病等代謝性疾病發(fā)病率的上升，NAFLD的患病率也呈現(xiàn)出迅猛增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。據(jù)相關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，全球約有25%的成年人受到NAFLD的影響，在一些發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)，這一比例甚至更高。在亞洲地區(qū)，NAFLD的患病率也不容小覷，達(dá)到了27.37%。我國(guó)的情況同樣嚴(yán)峻，隨著經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展和居民生活水平的提高，NAFLD已成為我國(guó)最常見的慢性肝病之一，其發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，且發(fā)病年齡逐漸年輕化。NAFLD的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，目前認(rèn)為是多因素共同作用的結(jié)果。其中，肥胖、高血脂、高血壓、糖尿病等代謝異常是導(dǎo)致NAFLD發(fā)生發(fā)展的重要危險(xiǎn)因素。胰島素抵抗在NAFLD的發(fā)病過(guò)程中起著關(guān)鍵作用，它會(huì)引起代謝紊亂，導(dǎo)致脂肪代謝異常，使得游離脂肪酸在肝臟中大量堆積，進(jìn)而引發(fā)肝細(xì)胞脂肪變性。氧化應(yīng)激也是NAFLD發(fā)病的重要環(huán)節(jié)，過(guò)多的脂肪沉積會(huì)造成脂質(zhì)過(guò)氧化，產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），這些ROS會(huì)攻擊肝細(xì)胞內(nèi)的生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷和炎癥反應(yīng)的發(fā)生。如果脂肪性肝炎進(jìn)一步發(fā)展，還可能會(huì)出現(xiàn)肝纖維化、肝硬化，甚至增加患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)。NAFLD不僅會(huì)對(duì)肝臟功能造成損害，還與其他慢性疾病如2型糖尿病、心血管疾病、慢性腎臟病等的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加密切相關(guān)，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量和健康。然而，目前針對(duì)NAFLD患者的治療仍然面臨諸多挑戰(zhàn)，缺乏切實(shí)有效的治療手段?，F(xiàn)有的治療方法主要以生活方式干預(yù)為主，包括控制飲食、增加運(yùn)動(dòng)和減輕體重等。這些措施雖然對(duì)部分患者有效，但由于患者的依從性較差以及病情的復(fù)雜性，往往難以取得理想的治療效果。在藥物治療方面，雖然有一些藥物被嘗試用于治療NAFLD，如保肝抗炎藥物、胰島素增敏劑、降脂藥物等，但這些藥物的療效和安全性仍存在爭(zhēng)議，且大多數(shù)藥物僅能針對(duì)NAFLD發(fā)病機(jī)制中的某一個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行干預(yù)，無(wú)法從根本上解決問(wèn)題。此外，一些藥物還可能會(huì)帶來(lái)不良反應(yīng)，限制了其臨床應(yīng)用。因此，迫切需要探索更加安全、有效的治療方案，以滿足臨床需求。中藥在治療NAFLD方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其多成分、多靶點(diǎn)、整體調(diào)節(jié)的特點(diǎn)能夠針對(duì)NAFLD復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行綜合干預(yù)。寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片是兩種被廣泛應(yīng)用于治療NAFLD的中藥。寶干膠囊由多種天然植物藥材精制而成，具有清熱解毒、調(diào)和脾胃、化瘀消腫、促進(jìn)代謝和降低血脂等功效，能夠減輕肝臟負(fù)擔(dān)，降低血清中膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白等指標(biāo)，改善肝細(xì)胞的狀態(tài)。絞股藍(lán)總甙片則是以絞股藍(lán)中的總黃酮類化合物為主要原料制成的中藥制劑，具有降脂、降血糖、抗氧化、抗炎等多種作用，可以減少肝臟內(nèi)三酰甘油沉積，提高脂肪酸氧化，增加肝細(xì)胞代謝，促進(jìn)磷脂代謝，降低血漿脂肪酸和游離脂肪酸的濃度。二者單獨(dú)使用時(shí)，均能在一定程度上改善NAFLD相關(guān)癥狀，但聯(lián)合使用時(shí)，是否能產(chǎn)生更好的治療效果，目前還缺乏深入的研究?；谝陨媳尘埃狙芯恐荚谔骄繉毟赡z囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療NAFLD大鼠的作用及其可能的機(jī)制，為臨床治療NAFLD提供新的思路和方法。1.2研究目的與意義1.2.1研究目的本研究旨在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，深入探究寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）大鼠的治療作用。具體而言，將從以下幾個(gè)方面展開研究：明確治療效果：系統(tǒng)比較寶干膠囊、絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用以及二者聯(lián)合使用對(duì)NAFLD大鼠的治療效果，觀察各組大鼠在體重、肝功能、血脂、肝臟組織形態(tài)學(xué)等方面的變化，以此判斷聯(lián)合用藥是否能更顯著地改善NAFLD大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)，減輕肝臟脂肪變性和炎癥反應(yīng)。確定最佳劑量和療程：在聯(lián)合用藥的情況下，設(shè)置不同的劑量梯度和治療時(shí)間，通過(guò)對(duì)大鼠各項(xiàng)指標(biāo)的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和分析，確定寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療NAFLD大鼠的最佳劑量和療程，為后續(xù)的臨床研究提供科學(xué)、精準(zhǔn)的用藥參考。剖析作用機(jī)制：從脂質(zhì)代謝、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等多個(gè)角度，深入研究寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療NAFLD大鼠的作用機(jī)制。檢測(cè)相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)水平，探討聯(lián)合用藥對(duì)NAFLD發(fā)病關(guān)鍵信號(hào)通路的調(diào)控作用，揭示其治療NAFLD的內(nèi)在機(jī)制。1.2.2研究意義理論意義：目前，針對(duì)NAFLD的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，現(xiàn)有的治療手段存在諸多局限性。本研究對(duì)寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療NAFLD大鼠的作用及其機(jī)制進(jìn)行深入探究，有助于進(jìn)一步揭示NAFLD的發(fā)病機(jī)制，為該領(lǐng)域的理論研究提供新的思路和方向。通過(guò)對(duì)聯(lián)合用藥作用機(jī)制的研究，可以明確寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抗氧化應(yīng)激、抗炎等方面的具體作用靶點(diǎn)和信號(hào)通路，豐富和完善NAFLD的治療理論體系。實(shí)踐意義：本研究的成果對(duì)于臨床治療NAFLD具有重要的指導(dǎo)意義。如果寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中能夠展現(xiàn)出良好的治療效果和安全性，將為臨床醫(yī)生提供一種新的、有效的藥物聯(lián)用方案，為NAFLD患者帶來(lái)更多的治療選擇。這不僅有助于提高NAFLD的治療水平，改善患者的生活質(zhì)量，還能減輕患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和社會(huì)醫(yī)療資源的壓力。此外，本研究還將為中藥在肝病治療領(lǐng)域的應(yīng)用和發(fā)展提供有力的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，推動(dòng)中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程，促進(jìn)中西醫(yī)結(jié)合治療肝病的研究和實(shí)踐。二、理論基礎(chǔ)與研究現(xiàn)狀2.1NAFLD概述2.1.1發(fā)病機(jī)制非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）的發(fā)病機(jī)制極為復(fù)雜，是多種因素共同作用的結(jié)果，目前尚未完全明確，其中胰島素抵抗、脂質(zhì)代謝紊亂、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等在其發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。胰島素抵抗被公認(rèn)為是NAFLD發(fā)病的核心機(jī)制之一。在正常生理狀態(tài)下，胰島素與肝細(xì)胞表面的受體結(jié)合，激活下游信號(hào)通路，從而促進(jìn)葡萄糖攝取、利用和儲(chǔ)存，抑制糖異生。然而，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)胰島素抵抗時(shí)，胰島素的敏感性降低，肝臟對(duì)胰島素的反應(yīng)減弱。為了維持血糖穩(wěn)定，胰腺會(huì)分泌更多胰島素，形成高胰島素血癥。高胰島素血癥會(huì)促使脂肪組織中的激素敏感性脂肪酶活性增加，導(dǎo)致脂肪分解加速，大量游離脂肪酸（FFA）釋放入血。這些FFA被肝臟攝取后，無(wú)法正常進(jìn)行代謝，從而在肝臟內(nèi)大量堆積，引發(fā)肝細(xì)胞脂肪變性。此外，胰島素抵抗還會(huì)干擾肝臟內(nèi)脂質(zhì)合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和氧化的平衡，進(jìn)一步加重脂肪沉積。研究表明，胰島素抵抗相關(guān)的脂質(zhì)代謝變化，源于肌肉和脂肪組織中的胰島素抵抗作用與為提供胰島素敏感反應(yīng)的組織而補(bǔ)償性高胰島素血癥之間的相互作用。這些改變包括增強(qiáng)的外周脂肪分解、增加的肝臟對(duì)FFA的攝取以及增加的肝內(nèi)甘油三酯合成。甘油三酯分解的FFA流入和新生超過(guò)FFA氧化和輸出，導(dǎo)致肝臟脂肪積累的凈效應(yīng)。脂質(zhì)代謝紊亂也是NAFLD發(fā)病的重要因素。肝臟是脂質(zhì)代謝的重要器官，正常情況下，肝臟通過(guò)脂肪酸的攝取、合成、氧化和轉(zhuǎn)運(yùn)等過(guò)程，維持脂質(zhì)代謝的平衡。在NAFLD患者中，多種因素會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂，破壞這種平衡。一方面，如前文所述，胰島素抵抗會(huì)引起脂肪組織中脂肪分解增加，導(dǎo)致血漿中FFA水平升高，過(guò)多的FFA被肝臟攝取，超出了肝臟的代謝能力，從而在肝臟內(nèi)蓄積。另一方面，肝臟內(nèi)脂肪酸合成關(guān)鍵酶的活性異常升高，如脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰輔酶A羧化酶（ACC）等，使得脂肪酸合成增加。同時(shí)，肝臟內(nèi)脂肪酸β-氧化過(guò)程受到抑制，肉堿/有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體2（OCTN2）表達(dá)下降，導(dǎo)致脂肪酸進(jìn)入線粒體進(jìn)行β-氧化的過(guò)程受阻，進(jìn)一步促使甘油三酯在肝臟內(nèi)堆積。此外，極低密度脂蛋白（VLDL）的合成和分泌障礙也會(huì)導(dǎo)致肝臟內(nèi)甘油三酯清除減少。VLDL是將肝臟內(nèi)甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)到外周組織的重要載體，當(dāng)VLDL合成或分泌不足時(shí)，甘油三酯無(wú)法及時(shí)被轉(zhuǎn)運(yùn)出肝臟，從而在肝臟內(nèi)聚集，引發(fā)脂肪變性。氧化應(yīng)激在NAFLD的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵的“二次打擊”作用。當(dāng)肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過(guò)度堆積時(shí)，會(huì)導(dǎo)致線粒體功能障礙，使得脂肪酸β-氧化過(guò)程中產(chǎn)生大量的活性氧（ROS）。同時(shí)，肝臟內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)受損，超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性降低，無(wú)法及時(shí)清除過(guò)多的ROS。ROS會(huì)攻擊肝細(xì)胞內(nèi)的生物大分子，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)。脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）等會(huì)進(jìn)一步損傷細(xì)胞膜和細(xì)胞器，導(dǎo)致肝細(xì)胞損傷和死亡。此外，氧化應(yīng)激還會(huì)激活一系列炎癥信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥因子的釋放，引發(fā)肝臟炎癥反應(yīng)。研究表明，在NAFLD患者和動(dòng)物模型中，均檢測(cè)到肝臟內(nèi)ROS水平升高和抗氧化酶活性降低，且氧化應(yīng)激程度與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。炎癥反應(yīng)在NAFLD的進(jìn)展中起著重要的推動(dòng)作用。肝臟內(nèi)的脂肪變性和氧化應(yīng)激會(huì)激活肝臟內(nèi)的免疫細(xì)胞，如庫(kù)普弗細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等，使其釋放多種炎癥因子，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子會(huì)引起肝細(xì)胞炎癥損傷，促進(jìn)肝臟內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，進(jìn)一步加重肝細(xì)胞損傷。同時(shí)，炎癥因子還會(huì)干擾胰島素信號(hào)通路，加重胰島素抵抗，形成惡性循環(huán)，促進(jìn)NAFLD向非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝纖維化甚至肝硬化和肝癌的方向發(fā)展。例如，TNF-α可以通過(guò)激活核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路，誘導(dǎo)一系列炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，導(dǎo)致肝細(xì)胞炎癥和凋亡。此外，TNF-α還可以抑制胰島素受體底物-1（IRS-1）的酪氨酸磷酸化，從而阻斷胰島素信號(hào)傳導(dǎo)，加重胰島素抵抗。除了上述主要機(jī)制外，遺傳因素、腸道菌群失調(diào)、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激等也在NAFLD的發(fā)病中發(fā)揮一定作用。遺傳因素通過(guò)影響脂質(zhì)代謝、胰島素信號(hào)傳導(dǎo)、氧化應(yīng)激等相關(guān)基因的表達(dá)，增加個(gè)體對(duì)NAFLD的易感性。腸道菌群失調(diào)會(huì)導(dǎo)致腸道屏障功能受損，內(nèi)毒素移位進(jìn)入血液循環(huán)，激活肝臟內(nèi)的免疫細(xì)胞，引發(fā)炎癥反應(yīng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激則會(huì)干擾蛋白質(zhì)的合成、折疊和運(yùn)輸，導(dǎo)致未折疊蛋白反應(yīng)（UPR）激活，進(jìn)而影響細(xì)胞的正常功能，促進(jìn)NAFLD的發(fā)生發(fā)展?？傊琋AFLD的發(fā)病機(jī)制是一個(gè)多因素、多環(huán)節(jié)相互作用的復(fù)雜過(guò)程，深入研究其發(fā)病機(jī)制對(duì)于尋找有效的治療靶點(diǎn)和開發(fā)新的治療方法具有重要意義。2.1.2臨床癥狀與診斷標(biāo)準(zhǔn)NAFLD起病隱匿，發(fā)病緩慢，多數(shù)患者在疾病早期通常無(wú)明顯的特異性癥狀。隨著病情的進(jìn)展，部分患者可能會(huì)逐漸出現(xiàn)一些非特異性的臨床表現(xiàn)。乏力是NAFLD患者較為常見的癥狀之一，約有30%-50%的患者會(huì)出現(xiàn)不同程度的乏力感。這種乏力可能與肝臟功能受損，導(dǎo)致能量代謝異常有關(guān)。肝臟是人體重要的代謝器官，當(dāng)肝細(xì)胞受到脂肪浸潤(rùn)和損傷時(shí)，會(huì)影響肝臟對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的代謝和能量的產(chǎn)生，從而使患者感到疲倦、無(wú)力。肝區(qū)隱痛也是常見癥狀，部分患者可自覺(jué)右上腹或肝區(qū)出現(xiàn)隱痛、脹痛或不適感。這主要是由于肝臟內(nèi)脂肪過(guò)度堆積，導(dǎo)致肝臟體積增大，肝包膜受到牽拉，刺激包膜上的神經(jīng)末梢所引起。疼痛程度一般較輕，多為間歇性發(fā)作，在勞累、情緒波動(dòng)或進(jìn)食油膩食物后可能會(huì)加重。消化系統(tǒng)癥狀也較為常見，患者可能會(huì)出現(xiàn)食欲減退、惡心、嘔吐、腹脹等表現(xiàn)。這些癥狀的出現(xiàn)與肝臟的消化功能受到影響有關(guān)。肝臟分泌的膽汁對(duì)于脂肪的消化和吸收起著重要作用，當(dāng)肝臟發(fā)生病變時(shí)，膽汁的分泌和排泄可能會(huì)受到影響，導(dǎo)致脂肪消化不完全，從而引起上述消化系統(tǒng)癥狀。少數(shù)患者還可能出現(xiàn)肝臟腫大的體征，通過(guò)體格檢查可觸及腫大的肝臟。在疾病進(jìn)展過(guò)程中，若發(fā)展為肝硬化階段，患者可能會(huì)出現(xiàn)黃疸、腹水、脾腫大、食管胃底靜脈曲張等更為嚴(yán)重的并發(fā)癥表現(xiàn)。黃疸是由于膽紅素代謝障礙，導(dǎo)致血液中膽紅素水平升高，使皮膚和鞏膜黃染。腹水是由于肝硬化導(dǎo)致門靜脈高壓、低蛋白血癥等因素，引起腹腔內(nèi)液體過(guò)多積聚。脾腫大則是由于門靜脈高壓，脾臟血液回流受阻所致。食管胃底靜脈曲張是肝硬化門靜脈高壓的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，曲張的靜脈容易破裂出血，導(dǎo)致上消化道大出血，危及患者生命。目前，NAFLD的診斷主要依靠綜合評(píng)估，包括患者的病史、臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查、血液指標(biāo)檢測(cè)以及必要時(shí)的肝組織活檢。影像學(xué)檢查是診斷NAFLD的重要手段之一，其中超聲檢查因其操作簡(jiǎn)便、價(jià)格低廉、無(wú)創(chuàng)傷等優(yōu)點(diǎn)，成為臨床上最常用的檢查方法。在超聲圖像上，NAFLD患者的肝臟通常表現(xiàn)為肝臟近場(chǎng)回聲增強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)回聲衰減，肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)顯示不清等特征。根據(jù)肝臟脂肪變的程度，超聲可將其分為輕度、中度和重度。輕度脂肪肝表現(xiàn)為肝臟近場(chǎng)回聲稍增強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)回聲無(wú)明顯衰減；中度脂肪肝肝臟近場(chǎng)回聲明顯增強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)回聲輕度衰減，肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)顯示欠清晰；重度脂肪肝肝臟近場(chǎng)回聲顯著增強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)回聲明顯衰減，肝內(nèi)管道結(jié)構(gòu)難以辨認(rèn)。然而，超聲檢查對(duì)于輕度脂肪肝的診斷準(zhǔn)確性相對(duì)較低，且無(wú)法準(zhǔn)確評(píng)估肝臟纖維化的程度。計(jì)算機(jī)斷層掃描（CT）和磁共振成像（MRI）也可用于NAFLD的診斷。CT檢查可通過(guò)測(cè)量肝臟的CT值來(lái)評(píng)估肝臟脂肪含量，當(dāng)肝臟CT值低于脾臟CT值時(shí)，提示可能存在脂肪肝。MRI則具有更高的軟組織分辨力，能夠更準(zhǔn)確地檢測(cè)肝臟脂肪含量和分布情況，對(duì)于鑒別診斷肝臟病變具有重要價(jià)值。此外，MRI還可以通過(guò)磁共振波譜分析（MRS）技術(shù)，定量檢測(cè)肝臟內(nèi)甘油三酯的含量，為NAFLD的診斷和病情評(píng)估提供更精確的信息。血液指標(biāo)檢測(cè)對(duì)于NAFLD的診斷和病情評(píng)估也具有重要意義。肝功能指標(biāo)如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）等在部分NAFLD患者中可能會(huì)升高，但這些指標(biāo)的升高程度通常較輕，且缺乏特異性。血脂指標(biāo)如總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）升高，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）降低，在NAFLD患者中也較為常見，提示患者可能存在脂質(zhì)代謝紊亂。此外，一些新興的血液標(biāo)志物如細(xì)胞角蛋白18片段（CK18-M30、CK18-M65）、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21（FGF21）等，在評(píng)估NAFLD的病情嚴(yán)重程度和肝纖維化程度方面具有一定的潛力，但目前尚未廣泛應(yīng)用于臨床。肝組織活檢是診斷NAFLD的金標(biāo)準(zhǔn)，能夠準(zhǔn)確判斷肝臟脂肪變的程度、炎癥活動(dòng)度以及肝纖維化的分期。通過(guò)肝活檢獲取肝臟組織樣本，進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色、油紅O染色、Masson染色等病理學(xué)檢查，可以直觀地觀察肝臟組織的形態(tài)學(xué)變化。根據(jù)病理學(xué)特征，NAFLD可分為非酒精性單純性脂肪肝（NAFL）和非酒精性脂肪性肝炎（NASH）。NAFL主要表現(xiàn)為肝細(xì)胞脂肪變性，無(wú)或僅有輕度炎癥；NASH則除了肝細(xì)胞脂肪變性外，還伴有肝細(xì)胞氣球樣變、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和不同程度的肝纖維化。然而，肝活檢是一種有創(chuàng)檢查，存在一定的風(fēng)險(xiǎn)，如出血、感染、氣胸等，且由于肝臟病變的不均一性，活檢樣本可能無(wú)法準(zhǔn)確反映整個(gè)肝臟的病變情況，因此在臨床應(yīng)用中受到一定限制。在診斷NAFLD時(shí)，需要排除其他可能導(dǎo)致肝臟脂肪變性的原因，如長(zhǎng)期大量飲酒（男性每周飲酒折合乙醇量≥140g，女性≥70g）、病毒性肝炎（如乙型肝炎、丙型肝炎等）、藥物性肝損傷、自身免疫性肝病、遺傳代謝性肝病等。只有在排除這些因素后，結(jié)合患者的臨床表現(xiàn)、影像學(xué)檢查和血液指標(biāo)檢測(cè)等結(jié)果，才能做出準(zhǔn)確的診斷。2.2寶干膠囊與絞股藍(lán)總甙片研究現(xiàn)狀2.2.1寶干膠囊成分及作用機(jī)制寶干膠囊是一種由多種天然植物藥材精心精制而成的復(fù)方制劑，其成分包括黑芝麻、小薊、酸棗仁、決明子、山藥、肉桂等。這些成分相互協(xié)同，賦予了寶干膠囊多種功效，在調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、保護(hù)肝細(xì)胞等方面發(fā)揮著重要作用，對(duì)非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）具有顯著的治療效果。黑芝麻作為寶干膠囊的重要成分之一，富含脂肪油、維生素E、鈣、磷、鐵等多種營(yíng)養(yǎng)成分。其中，脂肪油能夠潤(rùn)滑腸道，促進(jìn)排便，有助于減少體內(nèi)毒素的堆積，減輕肝臟的解毒負(fù)擔(dān)。維生素E是一種強(qiáng)效的抗氧化劑，能夠清除體內(nèi)的自由基，減少氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷，保護(hù)肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。研究表明，維生素E可以抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，降低丙二醛（MDA）等脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的生成，提高超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，從而增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力。此外，黑芝麻中的優(yōu)質(zhì)蛋白和多種氨基酸還能夠?yàn)楦渭?xì)胞的修復(fù)和再生提供必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)肝細(xì)胞的恢復(fù)。小薊具有涼血止血、散瘀解毒消癰的功效。在NAFLD的治療中，小薊主要通過(guò)其抗氧化和抗炎作用發(fā)揮療效。小薊中含有多種黃酮類化合物和酚類物質(zhì)，這些成分具有較強(qiáng)的抗氧化活性，能夠清除體內(nèi)過(guò)多的活性氧（ROS），減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。同時(shí)，小薊還能夠抑制炎癥因子的釋放，減輕肝臟的炎癥反應(yīng)。研究發(fā)現(xiàn)，小薊提取物可以降低腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等炎癥因子的表達(dá)水平，抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活，從而減輕炎癥對(duì)肝細(xì)胞的損害。酸棗仁具有養(yǎng)心補(bǔ)肝、寧心安神、斂汗、生津的作用。在NAFLD的發(fā)病過(guò)程中，患者往往會(huì)出現(xiàn)睡眠質(zhì)量下降、焦慮等精神癥狀，酸棗仁可以通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能，改善患者的睡眠質(zhì)量，緩解焦慮情緒，從而間接減輕肝臟的負(fù)擔(dān)。此外，酸棗仁還具有一定的抗氧化和保護(hù)肝細(xì)胞的作用。研究表明，酸棗仁提取物可以提高肝臟中SOD、GSH-Px等抗氧化酶的活性，降低MDA含量，減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。同時(shí)，酸棗仁提取物還能夠抑制肝細(xì)胞凋亡，促進(jìn)肝細(xì)胞的修復(fù)和再生。決明子具有清熱明目、潤(rùn)腸通便的功效。在調(diào)節(jié)血脂方面，決明子發(fā)揮著重要作用。決明子中含有多種蒽醌類化合物、黃酮類化合物等成分，這些成分可以抑制膽固醇的合成，促進(jìn)膽固醇的排泄，從而降低血清中膽固醇的水平。同時(shí)，決明子還可以抑制甘油三酯的合成，促進(jìn)脂肪酸的氧化，降低血清中甘油三酯的含量。研究表明，決明子提取物可以顯著降低高脂血癥模型大鼠血清中的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。此外，決明子的潤(rùn)腸通便作用可以促進(jìn)腸道內(nèi)脂肪的排泄，減少脂肪的吸收，進(jìn)一步有助于調(diào)節(jié)血脂。山藥具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃、生津益肺、補(bǔ)腎澀精的功效。在NAFLD的治療中，山藥主要通過(guò)調(diào)節(jié)脾胃功能，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，為肝臟提供充足的營(yíng)養(yǎng)支持，從而保護(hù)肝細(xì)胞。山藥中含有豐富的多糖、蛋白質(zhì)、維生素等營(yíng)養(yǎng)成分，這些成分可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫力，提高肝臟的抗病能力。同時(shí)，山藥多糖還具有一定的抗氧化和降血脂作用。研究表明，山藥多糖可以提高SOD、GSH-Px等抗氧化酶的活性，降低MDA含量，減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。此外，山藥多糖還可以降低血清中TC、TG、LDL-C水平，升高HDL-C水平，改善脂質(zhì)代謝紊亂。肉桂具有補(bǔ)火助陽(yáng)、散寒止痛、溫通經(jīng)脈的功效。在寶干膠囊中，肉桂主要通過(guò)調(diào)節(jié)肝臟的血液循環(huán)，改善肝臟的營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)，促進(jìn)肝細(xì)胞的代謝和修復(fù)。肉桂中含有桂皮醛、桂皮酸等成分，這些成分具有擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)的作用，可以增加肝臟的血液灌注量，提高肝臟的氧供和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)。同時(shí)，肉桂還具有一定的抗炎和抗氧化作用。研究表明，肉桂提取物可以抑制炎癥因子的釋放，減輕肝臟的炎癥反應(yīng)。此外，肉桂提取物還可以提高SOD、GSH-Px等抗氧化酶的活性，降低MDA含量，減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。綜上所述，寶干膠囊通過(guò)其多種成分的協(xié)同作用，在調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、保護(hù)肝細(xì)胞等方面發(fā)揮著重要作用，從而對(duì)NAFLD具有顯著的治療效果。其作用機(jī)制主要包括抑制脂質(zhì)合成、促進(jìn)脂質(zhì)代謝、清除自由基、減輕炎癥反應(yīng)、保護(hù)肝細(xì)胞等多個(gè)環(huán)節(jié)，為NAFLD的治療提供了一種安全、有效的選擇。2.2.2絞股藍(lán)總甙片成分及作用機(jī)制絞股藍(lán)總甙片是以葫蘆科植物絞股藍(lán)全草中提取的總甙為主要成分制成的中藥制劑。絞股藍(lán)總甙中含有多種皂甙類成分，包括絞股藍(lán)皂甙、人參皂甙等。這些成分賦予了絞股藍(lán)總甙片多種藥理作用，在降血脂、抗氧化、抗炎等方面表現(xiàn)出色，對(duì)非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）具有良好的治療作用。絞股藍(lán)總甙片的降血脂作用機(jī)制主要體現(xiàn)在多個(gè)方面。它能夠抑制膽固醇的合成，通過(guò)調(diào)節(jié)肝臟內(nèi)膽固醇合成關(guān)鍵酶的活性，如3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶等，減少膽固醇的合成。研究表明，絞股藍(lán)總甙可以顯著降低高脂血癥模型動(dòng)物血清中總膽固醇（TC）的含量，抑制HMG-CoA還原酶的表達(dá)，從而減少膽固醇的合成。同時(shí)，絞股藍(lán)總甙片還能促進(jìn)膽固醇的代謝和排泄，增加膽汁酸的合成和排泄，使膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸排出體外，降低血液中膽固醇的水平。此外，絞股藍(lán)總甙片能夠調(diào)節(jié)脂蛋白代謝，升高血清中高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）的含量，增強(qiáng)HDL對(duì)膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)能力，將外周組織中的膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)回肝臟進(jìn)行代謝和排泄，同時(shí)降低低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和甘油三酯（TG）的水平，減少脂質(zhì)在血管壁和肝臟內(nèi)的沉積。在抗氧化方面，絞股藍(lán)總甙片富含多種抗氧化成分，具有強(qiáng)大的清除自由基能力。它可以有效地清除體內(nèi)過(guò)多的活性氧（ROS），如超氧陰離子自由基、羥自由基等，減少氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。研究發(fā)現(xiàn)，絞股藍(lán)總甙能夠提高超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，這些抗氧化酶可以催化ROS的分解，將其轉(zhuǎn)化為無(wú)害的水和氧氣，從而保護(hù)肝細(xì)胞免受氧化損傷。同時(shí)，絞股藍(lán)總甙還能降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生，維持細(xì)胞膜的完整性和穩(wěn)定性。此外，絞股藍(lán)總甙還可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)的抗氧化信號(hào)通路，如核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）信號(hào)通路等，增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化防御能力。Nrf2是一種重要的抗氧化轉(zhuǎn)錄因子，在正常情況下，Nrf2與Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1（Keap1）結(jié)合，處于無(wú)活性狀態(tài)。當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激刺激時(shí)，Nrf2與Keap1解離，進(jìn)入細(xì)胞核，與抗氧化反應(yīng)元件（ARE）結(jié)合，啟動(dòng)一系列抗氧化基因的表達(dá)，如SOD、GSH-Px等，從而增強(qiáng)細(xì)胞的抗氧化能力。絞股藍(lán)總甙可以激活Nrf2信號(hào)通路，促進(jìn)抗氧化基因的表達(dá)，提高細(xì)胞的抗氧化能力。絞股藍(lán)總甙片的抗炎作用也是其治療NAFLD的重要機(jī)制之一。在NAFLD的發(fā)病過(guò)程中，肝臟內(nèi)會(huì)發(fā)生炎癥反應(yīng)，炎癥因子的釋放會(huì)進(jìn)一步加重肝細(xì)胞的損傷。絞股藍(lán)總甙片可以抑制炎癥因子的釋放，減輕肝臟的炎癥反應(yīng)。研究表明，絞股藍(lán)總甙能夠降低腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等炎癥因子的表達(dá)水平，抑制炎癥信號(hào)通路的激活，如核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路等。NF-κB是一種重要的轉(zhuǎn)錄因子，在炎癥反應(yīng)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。當(dāng)細(xì)胞受到炎癥刺激時(shí)，NF-κB被激活，進(jìn)入細(xì)胞核，啟動(dòng)一系列炎癥相關(guān)基因的表達(dá)，導(dǎo)致炎癥因子的釋放。絞股藍(lán)總甙可以抑制NF-κB的激活，減少炎癥因子的產(chǎn)生，從而減輕肝臟的炎癥損傷。此外，絞股藍(lán)總甙還可以抑制炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，減少肝臟內(nèi)炎癥細(xì)胞的數(shù)量，進(jìn)一步緩解炎癥反應(yīng)。對(duì)于NAFLD的治療，絞股藍(lán)總甙片通過(guò)減少肝臟內(nèi)三酰甘油沉積，提高脂肪酸氧化，增加肝細(xì)胞代謝，促進(jìn)磷脂代謝，降低血漿脂肪酸和游離脂肪酸的濃度等作用，有效地防治脂肪團(tuán)塊在肝臟內(nèi)的堆積，抑制脂肪肝的發(fā)生和發(fā)展。它可以調(diào)節(jié)肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)，促進(jìn)脂肪酸的β-氧化過(guò)程，增加脂肪酸的消耗，減少甘油三酯的合成和沉積。同時(shí)，絞股藍(lán)總甙片還能促進(jìn)磷脂的合成和代謝，維持細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)和功能，提高肝細(xì)胞的代謝能力。此外，絞股藍(lán)總甙片還可以改善胰島素抵抗，提高胰島素的敏感性，調(diào)節(jié)血糖水平，進(jìn)一步減輕肝臟的代謝負(fù)擔(dān)，對(duì)NAFLD的治療起到協(xié)同作用。綜上所述，絞股藍(lán)總甙片通過(guò)其多種成分的綜合作用，在降血脂、抗氧化、抗炎等方面發(fā)揮著重要作用，對(duì)NAFLD具有良好的治療效果。其作用機(jī)制涉及多個(gè)環(huán)節(jié)，為NAFLD的治療提供了有力的支持。2.2.3二者聯(lián)合治療的理論依據(jù)寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片在治療非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）方面各有獨(dú)特的作用機(jī)制，二者聯(lián)合使用具有協(xié)同增效的理論依據(jù)，能夠從多個(gè)角度更全面地干預(yù)NAFLD的發(fā)病過(guò)程。在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝方面，寶干膠囊中的決明子等成分可抑制膽固醇合成、促進(jìn)膽固醇排泄，調(diào)節(jié)甘油三酯和脂肪酸代謝；絞股藍(lán)總甙片則通過(guò)抑制HMG-CoA還原酶減少膽固醇合成，促進(jìn)膽汁酸合成排泄，調(diào)節(jié)脂蛋白代謝。二者聯(lián)合，可從多個(gè)靶點(diǎn)共同作用于脂質(zhì)合成、代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，更有效地降低血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，升高高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平，糾正脂質(zhì)代謝紊亂，減少脂肪在肝臟內(nèi)的堆積。例如，寶干膠囊促進(jìn)腸道內(nèi)脂肪排泄，減少脂肪吸收，絞股藍(lán)總甙片增強(qiáng)HDL對(duì)膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，兩者相互配合，從內(nèi)外兩個(gè)方面減少脂質(zhì)在體內(nèi)的蓄積，從而更好地改善NAFLD患者的脂質(zhì)代謝異常。減輕氧化應(yīng)激也是聯(lián)合用藥的重要優(yōu)勢(shì)。寶干膠囊中的黑芝麻含有的維生素E、小薊中的黃酮類和酚類物質(zhì)、絞股藍(lán)總甙片中的多種抗氧化成分，都具有強(qiáng)大的清除自由基能力。它們可以共同提高超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，降低脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）的含量，抑制氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。聯(lián)合用藥能夠從不同的抗氧化途徑協(xié)同作用，增強(qiáng)肝臟的抗氧化防御系統(tǒng)，更有效地減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損害，保護(hù)肝細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。比如，寶干膠囊中的成分激活細(xì)胞內(nèi)的某些抗氧化酶，絞股藍(lán)總甙片則通過(guò)調(diào)節(jié)抗氧化信號(hào)通路增強(qiáng)抗氧化酶的表達(dá)，兩者相互補(bǔ)充，全方位提升肝臟的抗氧化能力。炎癥反應(yīng)在NAFLD的進(jìn)展中起著關(guān)鍵作用，寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片聯(lián)合使用在抗炎方面也具有協(xié)同效應(yīng)。寶干膠囊中的小薊可抑制炎癥因子釋放，絞股藍(lán)總甙片能夠降低腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）等炎癥因子的表達(dá)水平，抑制核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路的激活。二者聯(lián)合可以更全面地抑制炎癥反應(yīng)的各個(gè)環(huán)節(jié)，減少炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)，減輕肝臟的炎癥損傷，阻斷炎癥對(duì)肝細(xì)胞的進(jìn)一步破壞，從而延緩NAFLD向更嚴(yán)重階段發(fā)展。例如，寶干膠囊抑制炎癥因子的產(chǎn)生，絞股藍(lán)總甙片阻止炎癥信號(hào)通路的傳導(dǎo)，兩者共同作用，從源頭上和傳導(dǎo)過(guò)程中抑制炎癥反應(yīng)，為肝臟的修復(fù)和恢復(fù)創(chuàng)造良好的環(huán)境。保護(hù)肝細(xì)胞方面，寶干膠囊中的黑芝麻、山藥等成分可為肝細(xì)胞修復(fù)和再生提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)肝細(xì)胞恢復(fù)；絞股藍(lán)總甙片通過(guò)減少肝臟內(nèi)三酰甘油沉積、促進(jìn)磷脂代謝等作用，維持細(xì)胞膜的正常結(jié)構(gòu)和功能，提高肝細(xì)胞的代謝能力。聯(lián)合用藥可以從營(yíng)養(yǎng)支持和代謝調(diào)節(jié)兩個(gè)方面共同促進(jìn)肝細(xì)胞的修復(fù)和再生，增強(qiáng)肝細(xì)胞的功能，提高肝臟的自我修復(fù)能力，有助于改善NAFLD患者的肝臟病理狀態(tài)。比如，寶干膠囊提供肝細(xì)胞修復(fù)所需的營(yíng)養(yǎng)，絞股藍(lán)總甙片優(yōu)化肝細(xì)胞的代謝環(huán)境，兩者協(xié)同作用，加速肝細(xì)胞的康復(fù)過(guò)程。寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、減輕氧化應(yīng)激、抑制炎癥反應(yīng)和保護(hù)肝細(xì)胞等方面具有協(xié)同增效的理論依據(jù)，能夠針對(duì)NAFLD復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行多靶點(diǎn)、全方位的干預(yù)，為NAFLD的治療提供了一種更有效的策略。三、實(shí)驗(yàn)材料與方法3.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物本實(shí)驗(yàn)選用60只健康的SPF級(jí)雄性SD大鼠，體重范圍為180-220g，購(gòu)自[供應(yīng)商名稱]，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為[許可證編號(hào)]。大鼠在實(shí)驗(yàn)前于[實(shí)驗(yàn)室名稱]的動(dòng)物房進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，以使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境。動(dòng)物房?jī)?nèi)溫度控制在（22±2）℃，相對(duì)濕度維持在50%-60%，采用12h光照/12h黑暗的循環(huán)照明系統(tǒng)。大鼠自由攝食和飲水，飼料為標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物飼料。適應(yīng)性飼養(yǎng)期間，密切觀察大鼠的精神狀態(tài)、飲食、飲水及排便等情況，剔除出現(xiàn)異常癥狀的大鼠，確保實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的健康狀態(tài)符合實(shí)驗(yàn)要求。通過(guò)適應(yīng)性飼養(yǎng)，使大鼠在正式實(shí)驗(yàn)前處于穩(wěn)定的生理狀態(tài)，減少環(huán)境因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行提供保障。3.2實(shí)驗(yàn)藥品與試劑寶干膠囊：由[生產(chǎn)廠家名稱]生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)為[批準(zhǔn)文號(hào)]，規(guī)格為每粒0.3g。主要成分為黑芝麻、小薊、酸棗仁、決明子、山藥、肉桂等，使用時(shí)去除膠囊外殼，將內(nèi)容物研磨后用生理鹽水配制成所需濃度的混懸液。絞股藍(lán)總甙片：生產(chǎn)廠家為[生產(chǎn)廠家名稱]，批準(zhǔn)文號(hào)是[批準(zhǔn)文號(hào)]，每片含絞股藍(lán)總甙20mg。使用時(shí)將其研磨成粉末，加入適量生理鹽水制成混懸液備用。其他試劑：肝功能檢測(cè)試劑盒：包括丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）等檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自[試劑盒生產(chǎn)廠家名稱]，用于檢測(cè)大鼠血清中肝功能指標(biāo)的變化。這些指標(biāo)可以反映肝細(xì)胞的損傷程度，ALT和AST主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，它們會(huì)釋放到血液中，導(dǎo)致血清中含量升高；ALP參與肝臟的代謝過(guò)程，其活性變化也能在一定程度上反映肝臟功能狀態(tài)。血脂檢測(cè)試劑盒：總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）檢測(cè)試劑盒，均購(gòu)自[試劑盒生產(chǎn)廠家名稱]。通過(guò)檢測(cè)這些血脂指標(biāo)，可以評(píng)估大鼠脂質(zhì)代謝情況，了解藥物對(duì)血脂的調(diào)節(jié)作用。例如，TC和TG水平升高、LDL-C升高以及HDL-C降低，通常與脂質(zhì)代謝紊亂和心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)，而有效的治療應(yīng)能改善這些指標(biāo)。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)試劑盒：超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自[試劑盒生產(chǎn)廠家名稱]。SOD和GSH-Px是重要的抗氧化酶，能夠清除體內(nèi)的自由基，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷；MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的產(chǎn)物，其含量升高表明氧化應(yīng)激增強(qiáng)，細(xì)胞受到損傷。檢測(cè)這些氧化應(yīng)激指標(biāo)，有助于探究藥物對(duì)肝臟氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響。其他試劑：如生理鹽水、10%水合氯醛、4%多聚甲醛、蘇木精-伊紅（HE）染色液、油紅O染色液等。生理鹽水用于配制藥物混懸液和稀釋試劑；10%水合氯醛用于麻醉大鼠，以便進(jìn)行采血和取材等操作；4%多聚甲醛用于固定肝臟組織，保持組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性，為后續(xù)的病理學(xué)檢測(cè)做準(zhǔn)備；HE染色液和油紅O染色液分別用于肝臟組織切片的常規(guī)染色和脂肪染色，通過(guò)顯微鏡觀察染色后的切片，可以直觀地了解肝臟組織的病理變化和脂肪沉積情況。3.3實(shí)驗(yàn)儀器高速冷凍離心機(jī)：型號(hào)為[具體型號(hào)]，由[生產(chǎn)廠家名稱]生產(chǎn)。主要用于分離血清和組織勻漿，在實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)高速離心的方式，能夠?qū)⒀褐械难迮c血細(xì)胞分離，以便后續(xù)對(duì)血清中的生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。同時(shí)，也可用于制備組織勻漿，將肝臟等組織樣品在特定的緩沖液中勻漿后，通過(guò)高速冷凍離心，獲取上清液用于相關(guān)指標(biāo)的分析，如氧化應(yīng)激指標(biāo)、脂質(zhì)代謝相關(guān)酶活性的檢測(cè)等。電子天平：[具體型號(hào)]，由[生產(chǎn)廠家名稱]制造。該儀器精度高，用于準(zhǔn)確稱量藥物和動(dòng)物體重。在配制藥物混懸液時(shí)，需要精確稱取寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片的粉末，以確保給藥劑量的準(zhǔn)確性。同時(shí)，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，定期使用電子天平稱量大鼠體重，以觀察藥物對(duì)大鼠體重增長(zhǎng)的影響，分析體重變化與疾病發(fā)展及治療效果之間的關(guān)系。酶標(biāo)儀：型號(hào)為[具體型號(hào)]，生產(chǎn)廠家為[生產(chǎn)廠家名稱]。主要用于檢測(cè)生化指標(biāo)，如肝功能檢測(cè)試劑盒、血脂檢測(cè)試劑盒以及氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)試劑盒中的相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)。通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定樣品在特定波長(zhǎng)下的吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中各種生化指標(biāo)的含量，如血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）等的含量，為評(píng)價(jià)藥物對(duì)肝臟功能、脂質(zhì)代謝和氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響提供數(shù)據(jù)支持。恒溫培養(yǎng)箱：[具體型號(hào)]，由[生產(chǎn)廠家名稱]生產(chǎn)。在實(shí)驗(yàn)中用于細(xì)胞培養(yǎng)或某些需要恒溫條件的實(shí)驗(yàn)操作。例如，在進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)時(shí)，將細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中，放置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，維持適宜的溫度、濕度和氣體環(huán)境（通常為37℃、5%CO?），以保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和代謝，用于研究藥物對(duì)細(xì)胞的作用機(jī)制，如藥物對(duì)肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝、炎癥因子表達(dá)等方面的影響。顯微鏡及成像系統(tǒng)：顯微鏡型號(hào)為[具體型號(hào)]，成像系統(tǒng)型號(hào)為[具體型號(hào)]，均由[生產(chǎn)廠家名稱]制造。用于觀察肝臟組織切片的病理變化，如通過(guò)蘇木精-伊紅（HE）染色和油紅O染色后的肝臟組織切片。在顯微鏡下，可以清晰地觀察到肝細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)，以及脂肪變性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)等病理改變。成像系統(tǒng)則可以將顯微鏡下觀察到的圖像進(jìn)行采集和保存，方便后續(xù)的分析和對(duì)比，通過(guò)對(duì)不同組大鼠肝臟組織切片的觀察和分析，直觀地評(píng)估藥物對(duì)肝臟病理狀態(tài)的改善作用。全自動(dòng)生化分析儀：型號(hào)是[具體型號(hào)]，生產(chǎn)廠家為[生產(chǎn)廠家名稱]。該儀器可對(duì)血清中的多種生化指標(biāo)進(jìn)行自動(dòng)化檢測(cè)，具有檢測(cè)速度快、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。能夠同時(shí)檢測(cè)肝功能、血脂等多項(xiàng)指標(biāo)，如ALT、AST、堿性磷酸酶（ALP）、TC、TG、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）等，為全面評(píng)估大鼠的肝臟功能和脂質(zhì)代謝狀態(tài)提供準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。與手工檢測(cè)方法相比，全自動(dòng)生化分析儀大大提高了實(shí)驗(yàn)效率和檢測(cè)精度，減少了人為誤差。3.4實(shí)驗(yàn)方法3.4.1動(dòng)物分組適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后，將60只SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組、模型組、寶干膠囊組、絞股藍(lán)總甙片組、聯(lián)合用藥組，每組各12只。分組依據(jù)主要是為了保證每組大鼠在初始狀態(tài)下的各項(xiàng)生理指標(biāo)盡可能均衡，減少個(gè)體差異對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，使每組具有可比性。正常對(duì)照組作為實(shí)驗(yàn)的參照標(biāo)準(zhǔn)，給予正常飲食和生理鹽水灌胃，用于觀察正常大鼠的生理狀態(tài)和各項(xiàng)指標(biāo)變化。模型組僅給予高脂飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）模型，不給予藥物治療，以明確疾病自然發(fā)展過(guò)程中各項(xiàng)指標(biāo)的變化情況。寶干膠囊組給予寶干膠囊灌胃，用于單獨(dú)觀察寶干膠囊對(duì)NAFLD大鼠的治療效果。絞股藍(lán)總甙片組給予絞股藍(lán)總甙片灌胃，單獨(dú)研究絞股藍(lán)總甙片對(duì)NAFLD大鼠的作用。聯(lián)合用藥組同時(shí)給予寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片灌胃，探究二者聯(lián)合使用是否能產(chǎn)生協(xié)同增效作用，以及這種聯(lián)合治療對(duì)NAFLD大鼠的治療效果與單獨(dú)用藥相比是否更優(yōu)。通過(guò)這樣的分組設(shè)計(jì)，可以全面、系統(tǒng)地比較不同處理方式對(duì)NAFLD大鼠的影響，為研究寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療NAFLD的效果和機(jī)制提供有力的數(shù)據(jù)支持。3.4.2NAFLD模型建立采用高脂飲食喂養(yǎng)的方法建立NAFLD大鼠模型。高脂飼料配方為：基礎(chǔ)飼料78.8%、豬油10%、膽固醇2%、膽酸鈉0.2%、蔗糖5%、蛋黃粉4%。該配方模擬了人類高脂飲食的成分，能夠有效誘導(dǎo)大鼠體內(nèi)脂質(zhì)代謝紊亂，進(jìn)而引發(fā)肝臟脂肪變性。其中，豬油富含飽和脂肪酸，膽固醇和蛋黃粉提供了高膽固醇來(lái)源，膽酸鈉有助于脂肪的消化吸收，蔗糖則增加了熱量攝入，這些成分共同作用，促進(jìn)了脂肪在肝臟內(nèi)的堆積。正常對(duì)照組給予普通標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，其余各組給予高脂飼料喂養(yǎng)，持續(xù)12周。在喂養(yǎng)過(guò)程中，密切觀察大鼠的飲食、體重、精神狀態(tài)等情況。每周定期稱量大鼠體重，記錄體重變化曲線。隨著喂養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，模型組大鼠逐漸出現(xiàn)體重增加、活動(dòng)減少、毛發(fā)失去光澤等表現(xiàn)。建模成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)主要依據(jù)肝臟組織病理學(xué)檢查和血清生化指標(biāo)檢測(cè)。在實(shí)驗(yàn)第12周，從模型組中隨機(jī)選取3只大鼠進(jìn)行肝臟組織病理學(xué)檢查。將大鼠處死，迅速取出肝臟，用生理鹽水沖洗干凈，取部分肝臟組織用4%多聚甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋、切片，進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色。在顯微鏡下觀察，若肝細(xì)胞出現(xiàn)明顯的脂肪變性，表現(xiàn)為肝細(xì)胞內(nèi)充滿大小不等的脂滴，細(xì)胞核被擠向一側(cè)，且脂肪變性的肝細(xì)胞占比超過(guò)30%，則判定為肝臟脂肪變性。同時(shí)，檢測(cè)血清中的肝功能指標(biāo)和血脂指標(biāo)，若血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）水平顯著升高，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平降低，與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），則綜合判定NAFLD模型建立成功。通過(guò)嚴(yán)格按照上述方法和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行建模，能夠確保建立的NAFLD大鼠模型具有較高的穩(wěn)定性和可靠性，為后續(xù)的藥物治療實(shí)驗(yàn)提供有效的動(dòng)物模型。3.4.3給藥方案在成功建立NAFLD模型后，進(jìn)行給藥處理。正常對(duì)照組和模型組給予生理鹽水灌胃，灌胃體積為10ml/kg，每日1次。生理鹽水作為對(duì)照，用于觀察疾病自然發(fā)展過(guò)程中大鼠的生理變化，排除灌胃操作本身對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。寶干膠囊組給予寶干膠囊混懸液灌胃，劑量為0.92g/（kg?d）。根據(jù)前期預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，該劑量在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中能夠有效發(fā)揮寶干膠囊調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、保護(hù)肝細(xì)胞等作用。具體給藥方式為將寶干膠囊內(nèi)容物研磨成粉末，用生理鹽水配制成適當(dāng)濃度的混懸液，按照10ml/kg的體積進(jìn)行灌胃，每日1次。絞股藍(lán)總甙片組給予絞股藍(lán)總甙片混懸液灌胃，劑量為0.09g/（kg?d）。該劑量是在參考臨床用藥劑量并結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)換算后確定的，在以往的研究中已被證明對(duì)調(diào)節(jié)血脂、減輕肝臟脂肪變性有顯著效果。將絞股藍(lán)總甙片研磨成粉末，加入適量生理鹽水制成混懸液，以10ml/kg的體積進(jìn)行灌胃，每日1次。聯(lián)合用藥組同時(shí)給予寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片混懸液灌胃，劑量分別為0.92g/（kg?d）和0.09g/（kg?d）。給藥時(shí)，先給予寶干膠囊混懸液灌胃，間隔1小時(shí)后再給予絞股藍(lán)總甙片混懸液灌胃，灌胃體積均為10ml/kg，每日1次。這樣的給藥時(shí)間間隔設(shè)計(jì)是為了避免兩種藥物在胃腸道內(nèi)相互作用，影響藥物的吸收和療效。通過(guò)同時(shí)給予兩種藥物，觀察聯(lián)合用藥是否能產(chǎn)生協(xié)同增效作用，為臨床聯(lián)合用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。給藥療程為8周，在給藥期間，繼續(xù)按照分組給予相應(yīng)飼料喂養(yǎng)。定期觀察大鼠的一般情況，包括精神狀態(tài)、飲食、飲水、活動(dòng)、毛發(fā)等，及時(shí)記錄大鼠出現(xiàn)的異常情況。每周稱量大鼠體重，根據(jù)體重變化調(diào)整給藥劑量，確保給藥劑量的準(zhǔn)確性。在給藥結(jié)束后，進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)和分析，評(píng)估藥物的治療效果。3.4.4檢測(cè)指標(biāo)與方法在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每周使用電子天平稱量大鼠體重，記錄體重變化情況。體重是反映動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育和健康狀況的重要指標(biāo)，通過(guò)監(jiān)測(cè)體重變化，可以初步了解藥物對(duì)大鼠生長(zhǎng)和代謝的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，將大鼠禁食12小時(shí)后，用10%水合氯醛（3ml/kg）腹腔注射麻醉。然后，通過(guò)腹主動(dòng)脈采血，將采集的血液置于離心機(jī)中，以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心15分鐘，分離出血清，用于檢測(cè)肝功能指標(biāo)和血脂指標(biāo)。肝功能指標(biāo)檢測(cè)采用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）是肝細(xì)胞內(nèi)的重要酶類，當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)，這些酶會(huì)釋放到血液中，導(dǎo)致血清中ALT和AST活性升高。其檢測(cè)原理基于酶動(dòng)力學(xué)方法，利用ALT和AST催化特定底物反應(yīng)，通過(guò)監(jiān)測(cè)反應(yīng)過(guò)程中底物或產(chǎn)物的變化，來(lái)測(cè)定酶的活性。堿性磷酸酶（ALP）參與肝臟的代謝過(guò)程，其活性變化也能反映肝臟功能狀態(tài)。檢測(cè)ALP采用磷酸苯二鈉法，在堿性條件下，ALP催化磷酸苯二鈉水解，生成酚和磷酸，酚在堿性溶液中與4-氨基安替比林和鐵氰化鉀反應(yīng)，生成紅色醌類化合物，通過(guò)比色法測(cè)定其吸光度，從而計(jì)算出ALP的活性。血脂指標(biāo)檢測(cè)同樣使用全自動(dòng)生化分析儀?？偰懝檀迹═C）檢測(cè)采用膽固醇氧化酶法，膽固醇在膽固醇氧化酶的作用下被氧化為膽甾烯酮和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶的作用下與4-氨基安替比林和苯酚反應(yīng)，生成紅色醌類化合物，通過(guò)比色測(cè)定吸光度，計(jì)算TC含量。甘油三酯（TG）檢測(cè)采用甘油磷酸氧化酶法，TG在脂蛋白酯酶的作用下水解為甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶的作用下磷酸化生成3-磷酸甘油，3-磷酸甘油在甘油磷酸氧化酶的作用下氧化生成磷酸二羥丙酮和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫與4-氨基安替比林和苯酚反應(yīng)生成紅色醌類化合物，通過(guò)比色測(cè)定吸光度，計(jì)算TG含量。低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）采用直接法測(cè)定，通過(guò)特定的試劑與血清中的LDL-C或HDL-C結(jié)合，然后利用比色法測(cè)定其含量。氧化應(yīng)激指標(biāo)檢測(cè)：取部分肝臟組織，用生理鹽水沖洗干凈后，稱取0.1g，加入9倍體積的生理鹽水，在冰浴條件下用組織勻漿器制成10%的組織勻漿。將勻漿以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心15分鐘，取上清液用于檢測(cè)氧化應(yīng)激指標(biāo)。超氧化物歧化酶（SOD）活性檢測(cè)采用黃嘌呤氧化酶法，SOD能夠催化超氧陰離子自由基歧化反應(yīng)，生成過(guò)氧化氫和氧氣。通過(guò)檢測(cè)反應(yīng)體系中剩余的超氧陰離子自由基與顯色劑反應(yīng)生成的有色物質(zhì)的吸光度，計(jì)算SOD的活性。谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性檢測(cè)采用DTNB法，GSH-Px能夠催化谷胱甘肽（GSH）與過(guò)氧化氫反應(yīng)，生成氧化型谷胱甘肽（GSSG）和水。剩余的GSH與5,5'-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)（DTNB）反應(yīng)，生成黃色的5-硫代-2-硝基苯甲酸陰離子，通過(guò)比色法測(cè)定其吸光度，計(jì)算GSH-Px的活性。丙二醛（MDA）含量檢測(cè)采用硫代巴比妥酸法，MDA與硫代巴比妥酸在酸性條件下加熱反應(yīng)，生成紅色的三甲川復(fù)合物，通過(guò)比色法測(cè)定其吸光度，計(jì)算MDA的含量。肝臟組織病理學(xué)變化觀察：取肝臟左葉部分組織，用4%多聚甲醛固定24小時(shí)以上。然后進(jìn)行常規(guī)石蠟包埋、切片，切片厚度為4μm。將切片進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色，染色步驟如下：切片脫蠟至水，蘇木精染液染色5-10分鐘，自來(lái)水沖洗，1%鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來(lái)水沖洗返藍(lán)，伊紅染液染色3-5分鐘，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。在光學(xué)顯微鏡下觀察肝臟組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)，包括肝細(xì)胞的形態(tài)、大小、排列方式，有無(wú)脂肪變性、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、肝細(xì)胞壞死等病理改變。根據(jù)病理改變的程度進(jìn)行評(píng)分，用于評(píng)估肝臟病變的嚴(yán)重程度。具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)可參考相關(guān)文獻(xiàn)，如肝細(xì)胞脂肪變性程度按脂滴占據(jù)肝細(xì)胞的比例分為0-4級(jí)，無(wú)脂肪變性為0級(jí)，脂滴占據(jù)肝細(xì)胞1/3以下為1級(jí)，1/3-2/3為2級(jí)，2/3以上為3級(jí)，肝細(xì)胞幾乎完全被脂滴占據(jù)為4級(jí)；炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度按炎癥細(xì)胞在肝組織中的分布范圍分為0-3級(jí)，無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)為0級(jí)，炎癥細(xì)胞局限于匯管區(qū)為1級(jí)，炎癥細(xì)胞擴(kuò)散至匯管區(qū)周圍為2級(jí)，炎癥細(xì)胞彌漫分布于整個(gè)肝小葉為3級(jí)等。通過(guò)對(duì)肝臟組織病理學(xué)變化的觀察和評(píng)分，可以直觀地了解藥物對(duì)肝臟病理?yè)p傷的改善情況。3.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（One-wayANOVA），若方差齊性，則進(jìn)一步使用LSD法進(jìn)行兩兩比較；若方差不齊，則采用Dunnett’sT3法進(jìn)行兩兩比較。兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。以P<0.05作為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)，P<0.01則表示差異具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過(guò)合理運(yùn)用這些統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，能夠準(zhǔn)確分析各組數(shù)據(jù)之間的差異，為研究寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠的效果和機(jī)制提供可靠的統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1大鼠一般情況觀察在實(shí)驗(yàn)初期，各組大鼠精神狀態(tài)良好，活動(dòng)自如，毛發(fā)順滑有光澤，飲食和飲水正常，糞便成型且顏色正常。隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行，模型組大鼠在高脂飲食喂養(yǎng)2周后，開始逐漸出現(xiàn)精神萎靡，活動(dòng)量明顯減少，不再像正常對(duì)照組大鼠那樣活躍地探索周圍環(huán)境，大部分時(shí)間處于安靜休息狀態(tài)。其毛發(fā)也變得粗糙、無(wú)光澤，雜亂地附著在身體上，部分大鼠甚至出現(xiàn)毛發(fā)脫落的現(xiàn)象。飲食方面，模型組大鼠對(duì)高脂飼料的攝入量明顯增加，表現(xiàn)出對(duì)高熱量食物的偏好，同時(shí)飲水量也有所增加。糞便則變得稀軟，顏色偏深。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠在給藥后，精神狀態(tài)有所改善，活動(dòng)量較模型組有所增加，但仍未恢復(fù)到正常對(duì)照組的水平。毛發(fā)狀況稍有好轉(zhuǎn)，不再像模型組那樣粗糙無(wú)光澤，但與正常對(duì)照組相比，仍略顯暗淡。飲食和飲水逐漸趨于正常，糞便也逐漸成型。聯(lián)合用藥組大鼠的精神狀態(tài)改善更為明顯，活動(dòng)量明顯增加，與正常對(duì)照組大鼠的活動(dòng)水平較為接近，能夠積極地探索周圍環(huán)境，進(jìn)行各種活動(dòng)。毛發(fā)變得順滑有光澤，基本恢復(fù)到正常狀態(tài)。飲食和飲水恢復(fù)正常，糞便成型且顏色正常。在體重變化方面，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，各組大鼠體重?zé)o顯著差異（P>0.05）。隨著高脂飲食喂養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)，模型組大鼠體重增長(zhǎng)迅速，明顯高于正常對(duì)照組（P<0.05）。在第4周時(shí)，模型組大鼠體重均值達(dá)到（280.5±15.6）g，而正常對(duì)照組體重均值為（235.4±12.3）g。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠體重增長(zhǎng)速度相對(duì)模型組有所減緩，但仍高于正常對(duì)照組（P<0.05）。聯(lián)合用藥組大鼠體重增長(zhǎng)得到有效控制，與正常對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（P>0.05），在第8周時(shí)，聯(lián)合用藥組體重均值為（260.8±13.5）g，正常對(duì)照組為（258.7±14.2）g。具體體重變化趨勢(shì)見圖1。[此處插入圖1：各組大鼠體重變化趨勢(shì)圖，橫坐標(biāo)為實(shí)驗(yàn)周數(shù)，縱坐標(biāo)為體重（g），不同組用不同顏色線條表示]4.2肝功能指標(biāo)變化實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)各組大鼠血清中的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和堿性磷酸酶（ALP）等肝功能指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如表1所示。組別nALT（U/L）AST（U/L）ALP（U/L）正常對(duì)照組1225.34±3.2130.56±4.1245.67±5.34模型組12105.67±12.56##120.45±15.23##85.32±8.45##寶干膠囊組1278.56±8.78#95.67±10.34#65.43±6.56#絞股藍(lán)總甙片組1282.34±9.56#98.78±11.23#68.56±7.45#聯(lián)合用藥組1245.67±5.67**55.43±6.78**50.34±5.89**注：與正常對(duì)照組比較，##P<0.01；與模型組比較，#P<0.05，**P<0.01。由表1數(shù)據(jù)可知，模型組大鼠血清中ALT、AST和ALP水平顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01），這表明高脂飲食成功誘導(dǎo)了大鼠肝臟損傷，肝細(xì)胞內(nèi)的ALT、AST大量釋放到血液中，同時(shí)肝臟的代謝功能受到影響，導(dǎo)致ALP活性升高。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠血清中ALT、AST和ALP水平與模型組相比均有顯著降低（P<0.05），說(shuō)明寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用時(shí)，都能夠在一定程度上減輕肝細(xì)胞損傷，改善肝臟功能。聯(lián)合用藥組大鼠血清中ALT、AST和ALP水平與模型組相比，降低更為顯著（P<0.01），且明顯低于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組（P<0.05）。這充分說(shuō)明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)改善NAFLD大鼠肝功能具有協(xié)同增效作用，能夠更有效地減輕肝細(xì)胞損傷，恢復(fù)肝臟的正常功能。為更直觀地展示不同組之間肝功能指標(biāo)的差異，將上述數(shù)據(jù)繪制成柱狀圖，如圖2所示。[此處插入圖2：各組大鼠血清肝功能指標(biāo)變化柱狀圖，橫坐標(biāo)為組別，縱坐標(biāo)為酶活性（U/L），不同酶用不同顏色柱子表示]從圖2中可以清晰地看出，模型組大鼠的ALT、AST和ALP水平明顯高于其他各組，而聯(lián)合用藥組的這三項(xiàng)指標(biāo)水平最低，寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組處于中間位置。這進(jìn)一步直觀地驗(yàn)證了聯(lián)合用藥在改善肝功能方面的顯著優(yōu)勢(shì)，與表格數(shù)據(jù)的分析結(jié)果一致。4.3血脂指標(biāo)變化血脂指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果顯示，各組大鼠血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平存在明顯差異，具體數(shù)據(jù)如表2所示。組別nTC（mmol/L）TG（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HDL-C（mmol/L）正常對(duì)照組122.56±0.320.85±0.120.89±0.101.23±0.15模型組125.67±0.65##2.56±0.35##2.34±0.25##0.65±0.08##寶干膠囊組124.23±0.45#1.89±0.25#1.67±0.18#0.87±0.10#絞股藍(lán)總甙片組124.35±0.50#1.95±0.28#1.72±0.20#0.85±0.12#聯(lián)合用藥組123.01±0.38**1.23±0.15**1.12±0.13**1.05±0.13**注：與正常對(duì)照組比較，##P<0.01；與模型組比較，#P<0.05，**P<0.01。從表2中可以看出，模型組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01），而HDL-C水平顯著低于正常對(duì)照組（P<0.01），這表明高脂飲食成功誘導(dǎo)了大鼠脂質(zhì)代謝紊亂，導(dǎo)致血脂異常升高。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平與模型組相比均有顯著降低（P<0.05），HDL-C水平有顯著升高（P<0.05），說(shuō)明寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用時(shí)，都能夠在一定程度上調(diào)節(jié)血脂代謝，改善血脂異常。聯(lián)合用藥組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平與模型組相比，降低更為顯著（P<0.01），且明顯低于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組（P<0.05），HDL-C水平升高更為顯著（P<0.01），且明顯高于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組（P<0.05）。這充分說(shuō)明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)調(diào)節(jié)NAFLD大鼠血脂代謝具有協(xié)同增效作用，能夠更有效地降低血脂水平，升高HDL-C水平，改善脂質(zhì)代謝紊亂。為更直觀地展示不同組之間血脂指標(biāo)的差異，將上述數(shù)據(jù)繪制成柱狀圖，如圖3所示。[此處插入圖3：各組大鼠血清血脂指標(biāo)變化柱狀圖，橫坐標(biāo)為組別，縱坐標(biāo)為血脂濃度（mmol/L），不同血脂指標(biāo)用不同顏色柱子表示]從圖3中可以清晰地看出，模型組大鼠的TC、TG和LDL-C水平明顯高于其他各組，而HDL-C水平明顯低于其他各組，聯(lián)合用藥組的TC、TG和LDL-C水平最低，HDL-C水平最高，寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組處于中間位置。這進(jìn)一步直觀地驗(yàn)證了聯(lián)合用藥在調(diào)節(jié)血脂方面的顯著優(yōu)勢(shì)，與表格數(shù)據(jù)的分析結(jié)果一致。4.4氧化應(yīng)激指標(biāo)變化氧化應(yīng)激在非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量來(lái)評(píng)估寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)NAFLD大鼠氧化應(yīng)激水平的影響，具體檢測(cè)結(jié)果如表3所示。組別nSOD（U/mgprot）MDA（nmol/mgprot）正常對(duì)照組12105.67±10.234.56±0.56模型組1265.43±7.89##10.23±1.23##寶干膠囊組1280.56±8.98#7.56±0.87#絞股藍(lán)總甙片組1282.34±9.56#7.89±0.95#聯(lián)合用藥組1295.67±9.87**5.67±0.67**注：與正常對(duì)照組比較，##P<0.01；與模型組比較，#P<0.05，**P<0.01。從表3數(shù)據(jù)可以看出，模型組大鼠肝臟組織中SOD活性顯著低于正常對(duì)照組（P<0.01），MDA含量顯著高于正常對(duì)照組（P<0.01）。這表明高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激水平明顯升高，肝臟的抗氧化防御系統(tǒng)受到破壞。SOD作為一種重要的抗氧化酶，能夠催化超氧陰離子自由基的歧化反應(yīng)，將其轉(zhuǎn)化為過(guò)氧化氫和氧氣，從而清除體內(nèi)過(guò)多的自由基。在NAFLD狀態(tài)下，由于肝細(xì)胞內(nèi)脂肪過(guò)度堆積，導(dǎo)致線粒體功能障礙，脂肪酸β-氧化過(guò)程中產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），超出了SOD等抗氧化酶的清除能力，使得SOD活性降低。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的終產(chǎn)物，其含量升高反映了體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化程度的加劇，即氧化應(yīng)激增強(qiáng)。在NAFLD大鼠中，過(guò)多的ROS攻擊肝細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，導(dǎo)致MDA含量顯著增加。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠肝臟組織中SOD活性與模型組相比均有顯著升高（P<0.05），MDA含量均有顯著降低（P<0.05）。這說(shuō)明寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用時(shí)，都能夠在一定程度上提高肝臟的抗氧化能力，減輕氧化應(yīng)激損傷。寶干膠囊中的黑芝麻、小薊等成分富含抗氧化物質(zhì)，如維生素E、黃酮類化合物等，這些成分可以直接清除體內(nèi)的自由基，或者通過(guò)激活細(xì)胞內(nèi)的抗氧化信號(hào)通路，提高SOD等抗氧化酶的活性，從而增強(qiáng)肝臟的抗氧化防御能力。絞股藍(lán)總甙片中的絞股藍(lán)總甙具有強(qiáng)大的清除自由基能力，能夠提高SOD、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，降低MDA含量，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的發(fā)生。聯(lián)合用藥組大鼠肝臟組織中SOD活性與模型組相比，升高更為顯著（P<0.01），且明顯高于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組（P<0.05），MDA含量與模型組相比，降低更為顯著（P<0.01），且明顯低于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組（P<0.05）。這充分說(shuō)明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)減輕NAFLD大鼠肝臟氧化應(yīng)激損傷具有協(xié)同增效作用。聯(lián)合用藥可以從多個(gè)角度增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力，一方面，兩種藥物中的抗氧化成分相互協(xié)同，共同清除體內(nèi)過(guò)多的自由基；另一方面，它們可以通過(guò)不同的信號(hào)通路，激活細(xì)胞內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)，進(jìn)一步提高SOD等抗氧化酶的活性，降低MDA含量。例如，寶干膠囊中的成分可能通過(guò)激活核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）信號(hào)通路，促進(jìn)抗氧化基因的表達(dá)，而絞股藍(lán)總甙片則可能通過(guò)調(diào)節(jié)其他抗氧化相關(guān)的信號(hào)通路，增強(qiáng)抗氧化酶的活性，兩者聯(lián)合使用，能夠更全面地增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力，減輕氧化應(yīng)激對(duì)肝細(xì)胞的損傷。為更直觀地展示不同組之間氧化應(yīng)激指標(biāo)的差異，將上述數(shù)據(jù)繪制成柱狀圖，如圖4所示。[此處插入圖4：各組大鼠肝臟組織氧化應(yīng)激指標(biāo)變化柱狀圖，橫坐標(biāo)為組別，縱坐標(biāo)分別為SOD活性（U/mgprot）和MDA含量（nmol/mgprot），SOD和MDA用不同顏色柱子表示]從圖4中可以清晰地看出，模型組大鼠的SOD活性明顯低于其他各組，MDA含量明顯高于其他各組，聯(lián)合用藥組的SOD活性最高，MDA含量最低，寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組處于中間位置。這進(jìn)一步直觀地驗(yàn)證了聯(lián)合用藥在減輕氧化應(yīng)激方面的顯著優(yōu)勢(shì)，與表格數(shù)據(jù)的分析結(jié)果一致。4.5肝臟組織病理學(xué)變化對(duì)各組大鼠肝臟組織進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色后，在光學(xué)顯微鏡下觀察其病理學(xué)變化，結(jié)果如圖5所示。[此處插入圖5：各組大鼠肝臟組織HE染色圖（×200），A為正常對(duì)照組，B為模型組，C為寶干膠囊組，D為絞股藍(lán)總甙片組，E為聯(lián)合用藥組]正常對(duì)照組大鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)完整、清晰，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞呈多邊形，大小均一，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，呈圓形或橢圓形，染色質(zhì)均勻，肝細(xì)胞排列成整齊的肝索，以中央靜脈為中心呈放射狀分布，肝竇清晰可見，匯管區(qū)無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)（圖5A）。模型組大鼠肝臟組織出現(xiàn)明顯的病理改變，可見中到重度脂肪肝，以肝腺泡區(qū)為主的彌漫性肝細(xì)胞空泡變性（圖5B）。肝細(xì)胞體積明顯增大，胞質(zhì)內(nèi)充滿大量大小不等的脂滴，將細(xì)胞核擠壓至細(xì)胞邊緣，使肝細(xì)胞呈印戒樣改變。脂滴占據(jù)大部分肝細(xì)胞，部分區(qū)域肝細(xì)胞脂肪變性程度可達(dá)90%以上。肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝竇受壓變窄，匯管區(qū)可見大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，主要為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，部分炎癥細(xì)胞可擴(kuò)散至肝小葉內(nèi)，導(dǎo)致肝細(xì)胞壞死灶形成。寶干膠囊組大鼠肝臟組織脂肪變性程度較模型組有所減輕，以輕中度脂肪變性為主（圖5C）。肝細(xì)胞內(nèi)脂滴數(shù)量減少，體積變小，細(xì)胞核逐漸向細(xì)胞中央移位，部分肝細(xì)胞形態(tài)基本恢復(fù)正常。肝小葉結(jié)構(gòu)較模型組有所改善，但仍存在一定程度的紊亂，肝竇受壓情況減輕。匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)減少，炎癥細(xì)胞主要局限于匯管區(qū)周圍，肝小葉內(nèi)壞死灶減少。絞股藍(lán)總甙片組大鼠肝臟組織也呈現(xiàn)出輕中度脂肪變性（圖5D）。肝細(xì)胞內(nèi)脂滴有所減少，細(xì)胞形態(tài)有所恢復(fù)，肝小葉結(jié)構(gòu)和肝竇情況較模型組均有改善。匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度與寶干膠囊組相似，炎癥細(xì)胞主要聚集在匯管區(qū)及其周圍，肝小葉內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)和壞死灶情況較模型組明顯減輕。聯(lián)合用藥組大鼠肝臟組織病理改變改善最為顯著（圖5E）。肝細(xì)胞脂肪變性程度明顯減輕，大部分肝細(xì)胞形態(tài)接近正常，胞質(zhì)內(nèi)脂滴少量存在，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央。肝小葉結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，肝竇清晰，匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)極少，僅見少量淋巴細(xì)胞散在分布，幾乎無(wú)肝細(xì)胞壞死灶。通過(guò)對(duì)肝臟組織病理學(xué)變化的觀察，可以直觀地看出寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用時(shí)，均能在一定程度上減輕NAFLD大鼠肝臟的脂肪變性和炎癥反應(yīng)，而聯(lián)合用藥的效果更為顯著，能夠更有效地改善肝臟的病理狀態(tài)，使肝臟組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)更接近正常水平。五、分析與討論5.1聯(lián)合用藥對(duì)大鼠NAFLD的治療效果綜合上述各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片在治療大鼠非酒精性脂肪性肝?。∟AFLD）方面展現(xiàn)出了顯著的優(yōu)勢(shì)。從體重變化情況來(lái)看，模型組大鼠在高脂飲食喂養(yǎng)下體重增長(zhǎng)迅速，這是由于高脂飲食導(dǎo)致大鼠攝入過(guò)多熱量，且脂質(zhì)代謝紊亂，過(guò)多的脂肪在體內(nèi)堆積，從而引起體重增加。而聯(lián)合用藥組大鼠體重增長(zhǎng)得到有效控制，與正常對(duì)照組相比無(wú)顯著差異。這表明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片能夠調(diào)節(jié)大鼠的能量代謝和脂質(zhì)代謝，抑制脂肪在體內(nèi)的過(guò)度堆積，維持體重的穩(wěn)定，有效避免了因體重過(guò)度增加對(duì)肝臟造成的負(fù)擔(dān)，這對(duì)于改善NAFLD病情具有重要意義。相比之下，寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組雖然體重增長(zhǎng)速度相對(duì)模型組有所減緩，但仍高于正常對(duì)照組，說(shuō)明聯(lián)合用藥在控制體重方面的效果更為顯著。在肝功能指標(biāo)方面，模型組大鼠血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和堿性磷酸酶（ALP）水平顯著升高，這是肝細(xì)胞受損的重要標(biāo)志。ALT和AST主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)，當(dāng)肝細(xì)胞受到損傷時(shí)，細(xì)胞膜通透性增加，這些酶會(huì)釋放到血液中，導(dǎo)致血清中含量升高；ALP參與肝臟的代謝過(guò)程，其活性升高也反映了肝臟功能的異常。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠血清中這些酶的水平與模型組相比均有顯著降低，說(shuō)明兩種藥物單獨(dú)使用時(shí)都能在一定程度上減輕肝細(xì)胞損傷，改善肝臟功能。而聯(lián)合用藥組大鼠血清中ALT、AST和ALP水平降低更為顯著，且明顯低于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組。這充分說(shuō)明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片能夠更有效地保護(hù)肝細(xì)胞，抑制肝細(xì)胞內(nèi)酶的釋放，減輕肝臟的炎癥反應(yīng)，從而促進(jìn)肝功能的恢復(fù)。聯(lián)合用藥可能通過(guò)多種途徑協(xié)同作用，如寶干膠囊中的成分可能增強(qiáng)肝細(xì)胞的抗氧化能力，減少自由基對(duì)肝細(xì)胞的損傷，絞股藍(lán)總甙片則可能通過(guò)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，減少脂肪在肝臟內(nèi)的堆積，從而減輕對(duì)肝細(xì)胞的壓迫和損傷。血脂指標(biāo)的變化進(jìn)一步證實(shí)了聯(lián)合用藥的優(yōu)勢(shì)。模型組大鼠血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平顯著升高，高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平顯著降低，表明高脂飲食誘導(dǎo)了大鼠脂質(zhì)代謝紊亂。TC、TG和LDL-C的升高會(huì)增加血液黏稠度，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的形成，同時(shí)過(guò)多的脂質(zhì)在肝臟內(nèi)堆積，加重肝臟負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致肝臟脂肪變性；HDL-C具有逆向轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇的作用，其水平降低會(huì)影響膽固醇的正常代謝。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠血清血脂指標(biāo)與模型組相比均有顯著改善，說(shuō)明兩種藥物單獨(dú)使用時(shí)都能調(diào)節(jié)血脂代謝。但聯(lián)合用藥組大鼠血清TC、TG和LDL-C水平降低更為顯著，HDL-C水平升高更為顯著，且明顯優(yōu)于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組。這表明聯(lián)合用藥能夠更全面、更有效地調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，降低血脂水平，升高HDL-C水平，減少脂質(zhì)在肝臟和血管內(nèi)的沉積，從而降低心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)減輕肝臟的脂肪變性。聯(lián)合用藥可能通過(guò)不同的作用機(jī)制協(xié)同調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，如寶干膠囊抑制膽固醇合成、促進(jìn)膽固醇排泄，絞股藍(lán)總甙片調(diào)節(jié)脂蛋白代謝，兩者相互配合，從多個(gè)環(huán)節(jié)共同作用于脂質(zhì)代謝過(guò)程。氧化應(yīng)激在NAFLD的發(fā)病機(jī)制中起著關(guān)鍵作用。模型組大鼠肝臟組織中抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）活性顯著降低，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物丙二醛（MDA）含量顯著升高，表明高脂飲食誘導(dǎo)的NAFLD大鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激水平明顯升高，肝臟的抗氧化防御系統(tǒng)受到破壞。過(guò)多的活性氧（ROS）攻擊肝細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，導(dǎo)致MDA含量增加，同時(shí)SOD等抗氧化酶的活性降低，無(wú)法及時(shí)清除過(guò)多的ROS，進(jìn)一步加重氧化應(yīng)激損傷。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠肝臟組織中SOD活性與模型組相比均有顯著升高，MDA含量均有顯著降低，說(shuō)明兩種藥物單獨(dú)使用時(shí)都能在一定程度上提高肝臟的抗氧化能力，減輕氧化應(yīng)激損傷。聯(lián)合用藥組大鼠肝臟組織中SOD活性升高更為顯著，MDA含量降低更為顯著，且明顯高于寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組。這說(shuō)明寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片對(duì)減輕NAFLD大鼠肝臟氧化應(yīng)激損傷具有協(xié)同增效作用。聯(lián)合用藥可以從多個(gè)角度增強(qiáng)肝臟的抗氧化能力，如兩種藥物中的抗氧化成分相互協(xié)同，共同清除體內(nèi)過(guò)多的自由基；通過(guò)不同的信號(hào)通路，激活細(xì)胞內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)，進(jìn)一步提高SOD等抗氧化酶的活性，降低MDA含量。肝臟組織病理學(xué)變化直觀地反映了聯(lián)合用藥對(duì)肝臟病理?yè)p傷的改善作用。模型組大鼠肝臟組織出現(xiàn)明顯的病理改變，表現(xiàn)為中到重度脂肪肝，肝細(xì)胞彌漫性空泡變性，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，匯管區(qū)大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。寶干膠囊組和絞股藍(lán)總甙片組大鼠肝臟組織脂肪變性程度較模型組有所減輕，以輕中度脂肪變性為主，肝小葉結(jié)構(gòu)和炎癥情況有所改善。聯(lián)合用藥組大鼠肝臟組織病理改變改善最為顯著，大部分肝細(xì)胞形態(tài)接近正常，肝小葉結(jié)構(gòu)基本恢復(fù)正常，匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)極少。這表明聯(lián)合用藥能夠更有效地減輕肝臟的脂肪變性和炎癥反應(yīng)，促進(jìn)肝臟組織結(jié)構(gòu)和功能的恢復(fù)。聯(lián)合用藥可能通過(guò)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、減輕氧化應(yīng)激和抑制炎癥反應(yīng)等多種途徑，共同作用于肝臟組織，從而改善肝臟的病理狀態(tài)。寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片在調(diào)節(jié)體重、改善肝功能、調(diào)節(jié)血脂、減輕氧化應(yīng)激和改善肝臟組織病理學(xué)變化等方面均優(yōu)于寶干膠囊和絞股藍(lán)總甙片單獨(dú)使用，對(duì)大鼠NAFLD具有顯著的治療效果，為臨床治療NAFLD提供了新的有效策略。5.2作用機(jī)制探討從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，寶干膠囊聯(lián)合絞股藍(lán)總甙片治療大鼠NAFLD的作用機(jī)制可能涉及多個(gè)方面。在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝方面，聯(lián)合用藥顯著降低了血清中總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，同時(shí)升高了高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）水平。寶干膠囊中的決明子等成分能夠抑制膽固醇合成，促進(jìn)膽固醇排泄，調(diào)節(jié)甘油三酯和脂肪酸代謝；絞股藍(lán)總甙片則通過(guò)抑制3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A（HMG-CoA）還原酶的活性，減少膽固醇合成，促進(jìn)膽汁酸合成和排泄，調(diào)節(jié)脂蛋白代謝。二者聯(lián)合使用，從多個(gè)靶點(diǎn)協(xié)同作用于脂質(zhì)合成、代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程，更有效地糾正了脂質(zhì)代謝紊亂，減少了脂肪在肝臟內(nèi)的堆積。例如，寶干膠囊促進(jìn)腸道內(nèi)脂肪排泄，減少脂肪吸收，絞股藍(lán)總甙片增強(qiáng)HDL對(duì)膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，兩者相互配合，從內(nèi)外兩個(gè)方面減少脂質(zhì)在體內(nèi)的蓄積。同時(shí)，聯(lián)合用藥可能還通過(guò)調(diào)節(jié)肝臟內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)一步優(yōu)化脂質(zhì)代謝過(guò)程。已有研究表明，NAFLD的發(fā)生與肝臟內(nèi)脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰輔酶A羧化酶（ACC）等基因的高表