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2026年高考生物復(fù)習(xí)熱搜題速遞之基因工程
一.選擇題(共10小題)
1.研究人員將魚的抗凍基因?qū)敕洋w內(nèi),獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種。下列操作合理的是()
A.設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因
B.利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合的構(gòu)建基因表達(dá)載體
C.將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞之前需用c£+處理細(xì)胞
D.運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)
2.如圖表示用胸昔(TdR)雙阻斷法使細(xì)胞周期同步化,其中A表示正常的細(xì)胞周期,Gi、S、G2、M期
依次分別為10h、7h、3.5h、1.5h;B表示經(jīng)第一次阻斷,細(xì)胞都停留在S期;C表示洗去TdR恢復(fù)正
常的細(xì)胞周期;D表示經(jīng)第二次阻斷,細(xì)胞均停留在G1/S交界處。下列說(shuō)法正確的是()
A.實(shí)驗(yàn)中需要對(duì)細(xì)胞解離,漂洗,染色,制片,以便于顯微鏡下觀察
B.胸苜(TdR)很可能是通過(guò)阻礙核糖體與mRNA結(jié)合發(fā)揮作用的
C.第二次阻斷應(yīng)該在第一次洗去TdR之后的7h到15h之間
D.若改用秋水仙素處理,則細(xì)胞會(huì)停留在G2/M交界處
3.某種線性DNA含有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI的1個(gè)酶切位點(diǎn).該DNA樣品(甲)經(jīng)EcoRI酶切后,
在DNA連接酶催化下形成產(chǎn)物乙(如圖).則反應(yīng)液中產(chǎn)物乙共有()
$…GAATTC_3*EcoR15-G.AATTC-JgA連接中、4,…GAAHC…3,
y-CTTAAG-g3*M<7TTAAG-5,y-CTTAAG-S
樣品甲產(chǎn)物乙
A.1種B.2種C.3種D.4種
4.下列各項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因在受體細(xì)胞中完成表達(dá)的是()
A.番茄葉肉細(xì)胞檢測(cè)到角的抗凍蛋白基因
B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNA
C.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人抗凝血酶基因
D.酵母菌細(xì)胞中提取到人白細(xì)胞介素
5.關(guān)于DNA片段PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的描述中不正確的是(
A.加入的Taq聚合酶耐高溫
B.不同大小DNA在電場(chǎng)中i£移速率不同
C.此過(guò)程需要DNA連接百每
D.擴(kuò)增區(qū)域由2個(gè)引物來(lái)決定
6.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)移目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,目的基因插入的位置是()
A.Ti質(zhì)粒上
B.受體細(xì)胞染色體DNA上
C.T-DNA
D.農(nóng)桿菌的擬核
7.用DNA連接能把被限制酶I(識(shí)別序列和切點(diǎn)是-JGATC-)切割過(guò)的運(yùn)載體和被限制睡II(識(shí)別序
列和切點(diǎn)是-GJGATCC-)切割過(guò)的目的基因連接起來(lái)后,該重組DNA分子能夠再被限制防II切割
開(kāi)的概率是()
A.工B.—C.工D.工
216164
8.關(guān)于采用瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn),下列敘述正確的是()
A.瓊脂糖凝膠濃度的選擇需考慮待分離DNA片段的大小
B.凝膠載樣緩沖液中指示劑的作用是指示DNA分子的具體位置
C.在同一電場(chǎng)作用下,DNA片段越長(zhǎng),向負(fù)極遷移速率越快
D.瓊脂糖凝膠中的DNA分子可在紫光燈下被檢測(cè)出來(lái)
9.制備熒光標(biāo)記的DNA探針時(shí).需要模板、引物、DNA聚合麻等。在只含大腸桿菌DNA聚合崎、擴(kuò)增
緩沖液、H20和4種脫氧核甘酸(dCTP、dTTP、dGTP和堿基被熒光標(biāo)記的dATP)的反應(yīng)管①?④中,
分別加入如表所示的適量單鏈DNA。已知形成的雙鏈DNA區(qū)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,且在本實(shí)驗(yàn)的溫
度條件下不能產(chǎn)生小于9個(gè)連續(xù)堿基對(duì)的雙鏈DNA區(qū)。能得到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針的反應(yīng)管有
()
反應(yīng)管加入的單鏈DNA
①5丁GCCGATCTTTATA-3,
3'?GACCGGCTAGAAA-5'
②5'-AGAGCCAATTGGC-3'
③5'-ATTTCCCGATCCG-3'
3'-AGGGCTAGGCATA-5'
④5'-TTCACTGGCCAGT-3'
A.①②B.②③C.①④D.③④
10.用不同的化學(xué)試劑可以鑒定某些物質(zhì),醫(yī)學(xué)上常用一些化學(xué)試劑進(jìn)行疾病的輔助診斷.下列關(guān)于一些
試劑診斷疾病的分析中不正確的是()
選項(xiàng)化學(xué)試劑診斷疾病檢測(cè)原理檢測(cè)對(duì)象
A基因探針白血病DNA分了雜交癌基因
B斐林試劑糖尿病與斐林試劑顯色反應(yīng)尿液葡萄糖
C雙縮服試劑腎炎與雙縮麻試劑顯色反應(yīng)尿液蛋白質(zhì)
D單克隆抗體乙型肝炎抗體與抗原基因特異性結(jié)合血液乙肝病毒
A.AB.BC.CD.D
二,多選題(共5小題)
(多選)11.利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯酶(CarE)制劑的流程如圖所示,卜.列敘述正確的是()
抗農(nóng)藥馬拉野H、菜蛾CarE基因I表達(dá)載體
降解當(dāng)拉氏/咳留一??…仁靛別科一^工1
A.過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶
B.過(guò)程②需使用解旋酶和PCR獲取目的基因
C.過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaCl溶液制備
D.過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞
(多選)12.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法正確的是()
A.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類的需要
B.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)
C.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子
D.蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,又被稱為第二代基因工程
(多選)13.下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的有()
A.提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸儲(chǔ)水漲破細(xì)胞
B.用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)
C.蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA
D.蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化
(多選)14.圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列敘述正確的是()
A.圖1、2中加入蒸儲(chǔ)水稀釋的目的相同
B.圖1中完成過(guò)濾之后保留濾液
C.圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液
D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉或木瓜蛋白酶有助于去除雜質(zhì)
(多選)15.科學(xué)家將含人的a-抗胰蛋白酶基因的DNA片段,注射到羊的受精卵中,該受精卵發(fā)育的
羊能分泌含a-抗胰蛋白酶的奶.這一過(guò)程涉及()
A.DNA按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則自我復(fù)制
B.DNA以其一條鏈為模板合成RNA
C.RNA以自身為模板自我復(fù)制
D.按照RNA密碼了-的排列<1序合成蛋白質(zhì)
三.解答題(共5小題)
16.如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示
氨節(jié)青霉素抗性基因,RamHl、HindULSmaI直線所示為三種限制陶的酌切位點(diǎn).據(jù)圖回答:
代
供體牛孕雌性轉(zhuǎn)含人乳鐵
受精卵牛基因牛蛋白乳汁
人乳鐵蛋白基因
(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用限制酶同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基
因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含的培養(yǎng)基上進(jìn)行。能驅(qū)動(dòng)人乳鐵蛋白基
因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控因子是圖中的O過(guò)程①采用的操作方法通常
是O
(2)過(guò)程②代表的生物技術(shù)是。對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割,經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體。目
前最常見(jiàn)的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵胎。
(3)為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá),可采用技術(shù)。
(4)對(duì)代孕牛的要求是o
17.如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,簡(jiǎn)捷地分析出已知序列兩側(cè)的序列,具體流程如
圖(以EcoRI隨切為例):
II連接]D\A連接酶
已知序列*
…片段F的
5''完整序列
請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:
(I)步驟I用的EcoRI是一種的,它通過(guò)識(shí)別特定的切割特定
位點(diǎn)。
(2)步驟H用的DNA連接酶催化相鄰核甘酸之間的3-羥基與5:磷酸間形成;PCR
循環(huán)中,升溫到95c是為了獲得;TaqDNA聚合酶的作用是催
化o
(3)若下表所列為已知的DNA序列和設(shè)計(jì)的一些PCR引物,步驟III選用的PCR引物必須是
(從引物①②③④中選擇,填編號(hào))。
DNA序列(虛線處省略了部分核昔酸序列)
己知序列5#-AACTATGCGCTCATGA--------GCAATGCGTAGCCTCT-3'
IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII
3'-TTGATACGCGAGTACT--------CGTTACGCATCGGAGA-5'
PCR引物①5,-AACTATGCGCTCATGA-3,
②5'-GCAATGCGTAGCCTCT-3'
③5「AGAGGCTACGCATTGC-3,
④5'-TCATGAGCGCATAGTT-3'
(4)對(duì)PCR產(chǎn)物測(cè)序,經(jīng)分析得到了片段F的完整序列。下列DNA單鏈序列中(虛線處省略了部分
核甘酸序列),結(jié)果正確的是。
A.5'-AACTATGCG------------------------------AGCCCTT-3'
B.5'-AATTCCATG-----------------------------CTGAATT-3'
C.5'-GCAATGCGT------------------------------TCGGGAA-3'
D.5'-TTGATACGC------------------------------CGAGTAC-3'
18.科研人員構(gòu)建了可表達(dá)J-V5融合蛋白的重組質(zhì)粒并進(jìn)行了檢測(cè),該質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如圖甲所示,其
中V5編碼序列表達(dá)標(biāo)簽短肽V5o
4——<——
RIR2
注:Fl>F2、RI、R2表示引物抗J蛋白抗體抗V5抗體
圖甲圖乙
(1)與圖甲中啟動(dòng)子結(jié)合的酶是。除圖甲中標(biāo)出的結(jié)構(gòu)外,作為載體,質(zhì)粒還需具備
的結(jié)構(gòu)有(答出2個(gè)結(jié)構(gòu)即可)。
(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒后,為了確定J基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確,需進(jìn)行PCR檢測(cè),若僅用一對(duì)
引物,應(yīng)選擇圖甲中的引物。已知J基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈位于b鏈,由此可知引物
FI與圖甲中J基因的(填“a鏈”或“鏈“)相應(yīng)部分的序列相同。
(3)重組質(zhì)粒在受體細(xì)胞內(nèi)F確表達(dá)后,用抗J蛋白抗體和抗V5抗體分別檢測(cè)相應(yīng)蛋白是否表達(dá)以
及表達(dá)水平,結(jié)果如圖乙所示。其中,出現(xiàn)條帶1證明細(xì)胞內(nèi)表達(dá)了,條帶2所檢
出的蛋白(填“是”或“不是”)由重組質(zhì)粒上的J基因表達(dá)的。
19.基因工程又稱為DNA重組技術(shù),回答相關(guān)問(wèn)題:
(I)在基因工程中,獲取目的基因主要有兩大途徑,即和從中分離.
(2)利用某植物的成熟葉片為材料,同時(shí)構(gòu)建cDNA文庫(kù)和基因組文庫(kù),兩個(gè)文庫(kù)相比,cDNA文庫(kù)
中含有的基因數(shù)目比基因組文庫(kù)中的少,其原因是.
(3)在基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子是聚合酶識(shí)別并結(jié)合的部位.若采用原核生物作為基因表
達(dá)載體的受體細(xì)胞,最常用的原核生物是.
(4)將目的基因通過(guò)基因槍法導(dǎo)入植物細(xì)胞時(shí),常用的攜帶目的基因的金屬顆粒有和
顆粒.
20.【生物--選修3:現(xiàn)代生物科技專題】
已知甲種農(nóng)作物因受到乙種昆蟲危害而減產(chǎn),乙種昆蟲食用某種原核生物分泌的丙種蛋白質(zhì)后死亡.因
此,可將丙種蛋白質(zhì)基因轉(zhuǎn)入到甲種農(nóng)作物體內(nèi),使甲種農(nóng)作物獲得抗乙種昆蟲危害的能力.
回答下列問(wèn)題:
(I)為了獲得丙中蛋白質(zhì)的基因,在已知丙種蛋白質(zhì)氨基酸序列的基礎(chǔ)上,推測(cè)出丙中蛋白質(zhì)的
序列,據(jù)此可利用方法合成目的基因.獲得丙中蛋白質(zhì)的基因還可用、
方法.
(2)在利用上述丙中蛋白質(zhì)基因和質(zhì)粒載體構(gòu)建重組質(zhì)粒的過(guò)程中,常需使用酶
和.
(3)將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與甲種農(nóng)作物的愈傷組織共培養(yǎng),篩選出含有丙種蛋白質(zhì)的愈傷組織,
由該愈傷組織培養(yǎng)成的再生植株可抵抗的危害.
(4)若用含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌直接感染甲種農(nóng)作物植株葉片傷口,則該植株的種子(填“含
有”或“不含“)丙種蛋白質(zhì)基因.
2026年高考生物復(fù)習(xí)熱搜題速遞之基因工程(2025年10月)
參考答案與試題解析
一.選擇題(共10小題)
題號(hào)12345678910
答案ACCDCBBADD
二.多選題(共5小題)
題號(hào)1112131415
答案ADACDBDBCDABD
一.選擇題(共10小題)
I.研究人員將魚的抗凍基因?qū)敕洋w內(nèi),獲得抗凍能力明顯提高的番茄新品種。下列操作合理的是()
A.設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物利用PCR技術(shù)擴(kuò)增H的基因
B.利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶構(gòu)建基因表達(dá)載體
C.將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄體細(xì)胞之前需用Ca?+處理細(xì)胞
D.運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞中表達(dá)
【答案】A
【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟:
1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是甚因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止了?和標(biāo)
記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將巨的基因?qū)?/p>
植物細(xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是
顯微注射法:將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)抱法C
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定:(I)分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的
基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基
因是否翻譯成蛋白質(zhì)■■抗原■抗體雜交技術(shù)。(2)個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒
定等。
【解答】解:A、獲取抗凍基因時(shí),可設(shè)計(jì)相應(yīng)DNA單鏈片段作為引物,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,
A正確;
B、利用限制酶和DNA連接前構(gòu)建基因表達(dá)載體,B錯(cuò)誤;
C、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入番茄細(xì)胞的方法有基因槍法、花粉管通道法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,這三種方法都不
需用Ca2+處理細(xì)胞,受體細(xì)胞是微生物時(shí),需要用Ca2+處理細(xì)胞,使其處于感受態(tài),C錯(cuò)誤;
D、運(yùn)用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)抗凍基因是否導(dǎo)入番茄細(xì)胞中,但不能檢測(cè)抗凍基因是否在番茄細(xì)胞
中表達(dá),D錯(cuò)誤。
故選:A。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的原理及技術(shù),做題關(guān)鍵是要求考生熟悉掌握基因工程的原理、工具、操作
步驟,掌握目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法以及目的基因檢測(cè)與鑒定的方法,能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷
各選項(xiàng)。
2.如圖表示用胸背(TdR)雙阻斷法使細(xì)胞周期同步化,其中A表示正常的細(xì)胞周期,Gi>S、G2、M期
依次分別為M)h、7h、3.5h、1.5h;B表示經(jīng)第一次阻斷,細(xì)胞都停留在S期;C表示洗去TdR恢復(fù)正
常的細(xì)胞周期:D表示經(jīng)第二次阻斷,細(xì)胞均停留在Gi/S交界處。卜.列說(shuō)法正確的是()
A.實(shí)驗(yàn)中需要對(duì)細(xì)胞解離,漂洗,染色,制片,以便于顯微鏡下觀察
B.胸背(TdR)很可能是通過(guò)阻礙核糖體與mRNA結(jié)合發(fā)揮作用的
C.第二次阻斷應(yīng)該在第一次洗去TdR之后的7h至U15h之間
D.若改用秋水仙素處理,則細(xì)胞會(huì)停留在G2/M交界處
【答案】C
【分析】Gi期主要進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的生物合成,并且為下階段S期的DNA合成做準(zhǔn)各;S期最主
要的特征是DNA的合成;G2期主要為M期做準(zhǔn)備,但是還有RNA和蛋白質(zhì)的合成,不過(guò)合成量逐
漸減少。細(xì)胞周期:連續(xù)分裂的細(xì)胞,從一次分裂完成時(shí)開(kāi)始到下次分裂完成時(shí)為止;包分裂間期和分
裂期;分裂間期歷時(shí)長(zhǎng),占細(xì)抱周期的90%--95%,則選觀察細(xì)胞有絲分裂的材料,選分裂期長(zhǎng),占
細(xì)胞周期比例大的。
【解答】解:A、實(shí)驗(yàn)中需要對(duì)細(xì)胞用胸苛(TdR)處理后再進(jìn)行制片,A錯(cuò)誤;
B、胸背(TdR)很可能是通過(guò)阻礙DNA的復(fù)制發(fā)揮作用的,B錯(cuò)誤;
C、由于S期時(shí)間為7h,Gi+G2+M=15h,故第二次阻斷后應(yīng)該在第一次洗去TdR之后的7h到15h之
間,c正確;
D、若改用秋水仙素處理,則細(xì)胞會(huì)停留在M期,D錯(cuò)誤。
故選:Co
【點(diǎn)評(píng)】本題考查細(xì)胞分裂中細(xì)胞周期的相關(guān)知識(shí),意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的
內(nèi)在聯(lián)系的能力。
3.某種線性DNA含有限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI的I個(gè)酶切位點(diǎn).該DNA樣品(甲)經(jīng)EcoRI酶切后,
在DNA連接酶催化下形成產(chǎn)物乙(如圖).則反應(yīng)液中產(chǎn)物乙共有()
S…GAATTC-¥氏oR1-G.AATTC…3'加連接"、S,—(;AATTC-3,
3'…CTTAAG-5*3'“<TTAAG-5,3*-CTTAAG-S
樣品甲產(chǎn).乙
A.1種B.2種C.3種D.4種
【答案】C
【分析】限制的能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核甘酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核
苻酸之間的磷酸二能鍵斷裂.
DNA連接酶:
(1)根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類:£co〃DNA連接酶、T4DNA連接酶.
這二者都能連接黏性末端,此外T4DNA連接酶還可以連接平末端,但連接平末端時(shí)的效率比較低.
(2)DNA連接酶連接的是兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵.
【解答】解:根據(jù)題意可知,線性DNA含有限制性核酸內(nèi)切前EcoRI的1個(gè)酹切位點(diǎn),因此經(jīng)過(guò)該腑
切割后會(huì)形成兩個(gè)相同的黏性末端,但是黏性末端兩側(cè)的序列不同,可以分別用a和b表示。
由于a和b具有相同的黏性末端,因此利用DNA連接酶催化后,能夠產(chǎn)生aa連接、bb連接、ab連接
三種產(chǎn)物。
故選:Co
【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的原理及技術(shù),要求考生掌握基因工程的工具酶,重點(diǎn)掌握限制酶和DNA
連接酹的特點(diǎn)及作用,明確DNA連接酶能夠連接相同的黏性末端,最后選出正確的答案,考生易錯(cuò)選
A項(xiàng).
4.下列各項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因在受體細(xì)胞中完成表達(dá)的是()
A.番茄葉肉細(xì)胞檢測(cè)到魚的抗凍蛋白基因
B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及其mRNA
C.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人抗凝血酶基因
D.醉母菌細(xì)胞中提取到人白細(xì)胞介索
【答案】D
【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和
標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞
的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因嗆法和花粉管通道法;將用的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射
法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基
因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因
是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
【解答】解:A、番茄葉肉細(xì)胞檢測(cè)到魚的抗凍蛋白基因,說(shuō)明目的基因、經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞,但不能說(shuō)
明目的基因已經(jīng)完成表達(dá),A錯(cuò)誤;
B、大腸桿菌中檢測(cè)到人的胰島素基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA,說(shuō)明H的基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)錄,但不能說(shuō)明目的
基因已經(jīng)完成表達(dá),B錯(cuò)誤:
C、山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人抗凝血酶基因,說(shuō)明目的基因已經(jīng)導(dǎo)入受體細(xì)胞,但不能說(shuō)明目的基因已
經(jīng)完成表達(dá),C錯(cuò)誤;
D、酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素,說(shuō)明目的基因已經(jīng)完成表達(dá),D正確.
故選:D。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟,掌握各操作步驟中
需要注意的細(xì)節(jié),能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。
5.關(guān)于DNA片段PCR擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)的描述中不正確的是()
A.加入的Taq聚合能耐高溫
B.不同大小DNA在電場(chǎng)中遷移速率不同
C.此過(guò)程需要DNA連接能
D.擴(kuò)增區(qū)域由2個(gè)引物來(lái)決定
【答案】C
【分析】PCR是體外DNA擴(kuò)增技術(shù),該技術(shù)是在高溫條件下進(jìn)行的,因此需要耐高溫Taq聚合酶,不
需要DNA連接醵.DNA大小不同,在電場(chǎng)中的遷移速率不同.PCR技術(shù)的條件:模板DMA、四種脫
氧核甘酸、一例引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶).
【解答】解:A、PCR是體外DNA擴(kuò)增技術(shù),該技術(shù)是在高溫條件下進(jìn)行的,因此需要耐高溫Taq聚
合酶,故A正確;
B、DNA大小不同,在電場(chǎng)中的遷移速率不同,故B正確;
C、PCR不需要DNA連接睡,但需要熱穩(wěn)定DNA聚合悔,故C錯(cuò)誤;
D、PCR技術(shù)需要一定的條件,其中一對(duì)引物就是條件之一,故D正確。
故選:C.
【點(diǎn)評(píng)】本題考查采用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn),
把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系,形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力;能運(yùn)用所學(xué)知識(shí),解決生物學(xué)問(wèn)題的能力.
6.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法轉(zhuǎn)移目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,目的基因插入的位置是()
A.Ti質(zhì)粒上
B.受體細(xì)胞染色體DNA上
C.T-DNA
D.農(nóng)桿菌的擬核
【答案】B
【分析】農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的具體過(guò)程:
(1)利用土壤的Ti質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體,即將目的基因整合到土壤農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上。
(2)將整合了目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)。
(3)利用土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,該過(guò)程實(shí)際上是將含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)
胞內(nèi)。
(4)含有目的基因的土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒進(jìn)入植物細(xì)胞后,可以把自己的一段基因整合到細(xì)胞核中的染
色體上,這段基因中包含了FI的基因。
【解答】解:植物基因工程中,可以用土壤農(nóng)桿菌作為轉(zhuǎn)移目的基因表達(dá)載體的工具,土埃農(nóng)桿菌細(xì)胞
內(nèi)含有質(zhì)粒,該質(zhì)粒稱為Ti質(zhì)粒。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,并且整合到受
體細(xì)胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn),如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA±,通
過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上。
故選:B.
【點(diǎn)評(píng)】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟,識(shí)記農(nóng)桿菌的特點(diǎn),
掌握農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理,明確農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞,再根據(jù)題干要求選出
正確的答案。
7.用DNA連接酶把被限制嗨I(識(shí)別序列和切點(diǎn)是?JGATC-)切割過(guò)的運(yùn)載體和被限制酶II(識(shí)別序
列和切點(diǎn)是-GJGATCC?)切割過(guò)的H的基因連接起來(lái)后,該重組DNA分子能夠再被限制酶H切割
開(kāi)的概率是()
C.—D.1
164
【答案】B
【分析】根據(jù)題意,運(yùn)載體被限制酣I切割,其識(shí)別序列和切點(diǎn)是-1GATC-,因此可寫出切割后的
序列;目的基因被限制前11切割,其識(shí)別序列和切點(diǎn)是-GJGATCC-,因此得到的重組質(zhì)粒為:
重組DNA
要能夠再被限制酶II切割開(kāi),必須具有-G1GATCC-,此時(shí)分情況討論即可.
【解答】解:重組DNA分子能夠再被限制酶II切割開(kāi),就應(yīng)該具有識(shí)別序列和切點(diǎn):-G|GATCC-,
而題中所述切割后重組有兩種情況:
情況一:
_J.GATC--G1GATCC--GATCC-
一CTAGT--CCTAG1G--CTAGG-
運(yùn)載體片段目的基因片段重組DNA分子片段
情況二:
一[GATC--GjGATCC--GGATC-
-CTAGT--CCTAG1G--CCTAG-
運(yùn)載體片型目的基慶1片段重組DNA分子片及
若要每種情況都含序列-G1GATCC-,情況一重組DNA分子片段左側(cè)堿基須是G,概率為1/4(A、
G、C、T之一),情況二重組DNA分子片段右側(cè)堿基須是C,概率同為1/4(A、G、C、T之一),考
慮到兩種情況同時(shí)符合要求的重復(fù)情形,要減去一個(gè)!義工,從而有1+1_1乂工二工.
44444416
故選:B.
【點(diǎn)評(píng)】本題具有一定的難度,著重考查基因工程中限制酶的特點(diǎn),在解題時(shí)要能夠?qū)懗鲑|(zhì)粒和目的基
因重組后的情況,然后再分情況進(jìn)行討論,要求考生具有較強(qiáng)的推理能力,并做出合理的判斷的能力.
8.關(guān)于采用瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn),下列敘述正確的是()
A.瓊脂糖凝膠濃度的選擇需考慮待分離DNA片段的大小
B.凝膠載樣緩沖液中指示劑的作用是指示DNA分子的具體位置
C.在同一電場(chǎng)作用下,DNA片段越長(zhǎng),向負(fù)極遷移速率越快
D.瓊脂糖凝膠中的DNA分子可在紫光燈下被檢測(cè)出來(lái)
【答案】A
【分析】PCR技術(shù):(1)概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸
合成技術(shù)。(2)原理:DNA雙鏈復(fù)制。(3)前提條件:要有一段已知目的基因的核甘酸序以便合成一
對(duì)引物。(4)條件:模板DNA、四種脫氧核甘酸、ATP、一對(duì)引物、耐高溫的DNA聚合酶。(5)過(guò)程:
高溫變性:DNA解旋過(guò)程(PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi));
低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;中溫延伸:合成子鏈。
【解答】解:A、在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象等有關(guān),瓊脂
糖凝膠濃度的選擇需考慮待分離DNA片段的大小,A正確;
B、凝膠載樣緩沖液中指示劑可起標(biāo)記的作用,是指示DNA分子對(duì)應(yīng)長(zhǎng)度所出現(xiàn)位置,B錯(cuò)誤:
C、DNA分子具有可解離的基團(tuán),在一定的pH下,這些基團(tuán)可以帶上正電荷或負(fù)電荷,在電場(chǎng)的作用
下,這些帶電分子會(huì)向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng),通常DNA片段越長(zhǎng),遷移速率越慢,C錯(cuò)誤;
D、凝膠中的DNA分子通過(guò)染色,可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái),D錯(cuò)誤。
故選:Ao
【點(diǎn)評(píng)】本題考查了PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí),要求考生能結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。
9.制備熒光標(biāo)記的DNA探針時(shí).需要模板、引物、DNA聚合齷等。在只含大腸桿菌DNA聚合酶、擴(kuò)增
緩沖液、H20和4種脫氧核甘酸(dCTP、dTTP、dGTP和堿基被熒光標(biāo)記的dATP)的反應(yīng)管①?④中,
分別加入如表所示的適曷單鏈DNA.已知形成的雙鏈DNA區(qū)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,且在本實(shí)驗(yàn)的溫
度條件下不能產(chǎn)生小于9個(gè)連續(xù)堿基對(duì)的雙鏈DNA區(qū)。能得到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針的反應(yīng)管有
()
反應(yīng)管加入的單鏈DNA
①5"-GCCGATCTTTATA-3,
3:GACCGGCTAGAAA-5,
②5'-AGAGCCAATTGGC-3'
③5'-ATTTCCCGATCCG-3,
y-AGGGCTAGGCATA-5,
?5'-TTCACTGGCCAGT-3'
A.①②B.②③C.①④D.③④
【答案】D
【分析】多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段:
1、PCR原理:目的基因DNA受熱變性后解為單鏈,引物與單鏈相應(yīng)互補(bǔ)序列結(jié)合:然后以單鏈DNA
為模板,在DNA聚合的作用卜進(jìn)行延伸,即將4種脫氧核苜酸加到引物的3,端,如此重要循環(huán)多次。
由于延伸后得到的產(chǎn)物又可以作為下一個(gè)循環(huán)的模板,因而每一次循環(huán)后目的基因的最可以增加一倍,
即呈指數(shù)形式擴(kuò)增(約為2,其中n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù))。
2、PCR反應(yīng)過(guò)程是:變性t復(fù)性->延伸。
3、結(jié)果:上述三步反應(yīng)完成后,一個(gè)DNA分子就變成了兩個(gè)DNA分子,隨著重復(fù)次數(shù)的增多,DNA
分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過(guò)程都是在PCR擴(kuò)增儀中完成的。
【解答】解:ABCD、分析反應(yīng)管①?④中分別加入的適量單鏈DNA可知,①中兩條單鏈DNA分子
之間具有互補(bǔ)的序列,但雙鏈DNA區(qū)之外的3,端無(wú)模板,因此無(wú)法進(jìn)行DNA合成,不能得到帶有熒
光標(biāo)記的DNA探針;②中單鏈DNA分子內(nèi)具有自身互補(bǔ)的序列,由于在本實(shí)驗(yàn)的溫度條件下不能產(chǎn)
生小于9個(gè)連續(xù)堿基對(duì)的雙鏈DNA區(qū),故一條單鏈DNA分子不發(fā)生自身環(huán)化,但兩條鏈可以形成雙
鏈DNA區(qū),由于DNA合成的鏈中不含堿基A,不能得到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針;③中兩條單鏈
DNA分子之間具有互補(bǔ)的序列,且雙鏈DNA區(qū)之外的3,端有模板和堿基T,因此進(jìn)行DNA合成能得
到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針;④中單鏈DNA分了?內(nèi)具有自身互補(bǔ)的序列,一條單鏈DNA分子不發(fā)生
自身環(huán)化,兩條鏈可以形成雙鏈DNA區(qū),且雙鏈DNA區(qū)之外的3,端有模板和堿基T,因此進(jìn)行DNA
合成能得到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針。綜上,能得到帶有熒光標(biāo)記的DNA探針的反應(yīng)管有:③④。
故選:D.
【點(diǎn)評(píng)】本題考查PCR的相關(guān)知識(shí),意在考查考生的理解能力、獲取信息的能力和綜合運(yùn)用能力,進(jìn)
一步考查生命觀念和科學(xué)思維。
10.用不同的化學(xué)試劑可以鑒定某些物質(zhì),醫(yī)學(xué)上常用一些化學(xué)試劑進(jìn)行疾病的輔助診斷.下列關(guān)于一些
試劑診斷疾病的分析中不正確的是()
選項(xiàng)化學(xué)試劑診斷疾病檢測(cè)原理檢測(cè)對(duì)象
A基因探針白血病DNA分子雜交癌基因
B斐林試劑糖尿病與斐林試劑顯色反應(yīng)尿液葡萄糖
C雙縮胭試劑腎炎與雙縮版試劑顯色反應(yīng)尿液蛋白質(zhì)
D單克隆抗體乙型肝炎抗體與抗原基因特異性結(jié)合血液乙肝病毒
A.AB.BC.CD.D
【答案】D
【分析】1、斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化為:磚紅色(沉淀).斐林試劑只能槍驗(yàn)生物組織
中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖.葡萄糖、麥芽糖、果糖是還原糖.
2、雙縮胭試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.01g/mL的硫酸銅溶液.蛋
白質(zhì)可與雙縮腺試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng).
3、單克隆抗體可以利用抗體和抗原特異性結(jié)合的原理發(fā)揮作用:
①作為診斷試劑:(最廣泛的月途)具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn).
②用于治療疾病和運(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥,可制成“生物導(dǎo)彈
【解答】解:A、DNA分子探針可以與癌基因雜交從而診斷白血病,A正確;
B、斐林試劑與尿液葡萄糖反應(yīng)生成豉紅色的沉淀,B正確;
C、雙縮版試劑與尿液蛋白質(zhì)呈紫色反應(yīng),C正確;
D、乙型肝炎可以采用單克隆抗體檢測(cè),原理是:抗體和抗原特異性結(jié)合,D錯(cuò)誤。
故選:D。
【點(diǎn)評(píng)】本題難度中等,屬于考綱理解層次.本題考查了生物學(xué)試驗(yàn)中試劑的使用相關(guān)知識(shí),意在考查
考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力,獨(dú)立完成“生物知識(shí)內(nèi)容表”所列的生物實(shí)驗(yàn),
包括理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃?、方法和操作步驟,掌握相關(guān)的操作技能,并能將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能
進(jìn)行綜合運(yùn)用.
二,多選題(共5小題)
(多選)II.利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯陶(CarE)制劑的流程如圖所示,下列敘述正確的是()
抗農(nóng)藥馬拉慶厘小菜蛾一運(yùn)]也國(guó)內(nèi)CarE基因表達(dá)載體
降解馬拉硫磷殘留l-ICarE制前]一石大腸桿菌1巨£彎成<融I
A.過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酹
B.過(guò)程②需使用解旋睡和PCR獲取目的基因
C.過(guò)程③使用的感受態(tài)細(xì)胞可用NaQ溶液制備
D.過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞
【答案】AD
【分析】分析圖解:圖中過(guò)程①表示利用mRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成相應(yīng)的DNA;過(guò)程②表示利用PCR
技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增;過(guò)程③表示將目的基因?qū)胧荏w犯胞;過(guò)程④表示通過(guò)篩選獲得工程菌.
【解答】解:A、過(guò)程①表示利用mRNA通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因,逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程中需要逆轉(zhuǎn)錄能的
催化,A正確;
B、過(guò)程②表示利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增,該過(guò)程中不需要利用解旋酶,解旋是通過(guò)高溫解鏈
實(shí)現(xiàn)的,B錯(cuò)誤;
C、感受態(tài)細(xì)胞法是利用的CaC12溶液,C錯(cuò)誤;
D、過(guò)程④可利用DNA分子雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞,D正確。
故選:AD。
【點(diǎn)評(píng)】本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟,通過(guò)操作步驟確定
圖中各標(biāo)號(hào)表示的生理過(guò)程;識(shí)記PCR技術(shù)中不需要解旋酷;識(shí)記目的基因?qū)胛⑸锏姆椒ǖ龋y
度不大,屬于考綱中識(shí)記、理解層次的考查.
(多選)12.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法正確的是()
A.蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類的需要
B.蛋白質(zhì)工程是在分子水平上對(duì)?蛋白質(zhì)分子直接進(jìn)行操作,定向改變分子的結(jié)構(gòu)
C.蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子
D.蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,乂被稱為第二代基因工程
【答案】ACD
【分析】蛋白質(zhì)工程和基因工程的不同:
項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程基因工程
區(qū)別原理中心法則的逆推基因重組
過(guò)程預(yù)期蛋白質(zhì)供能T設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)獲取目的基因-構(gòu)建基因表達(dá)載體一將目
構(gòu)一推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列一找到相對(duì)的基因?qū)胧荏w細(xì)胞一目的基因的檢測(cè)與
應(yīng)的脫氧核甘酸序列一合成DNAT表鑒定
達(dá)出蛋白質(zhì)
實(shí)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性,一伙的人類所
需的生物類型或生物產(chǎn)品(基因的異體表
達(dá))
結(jié)果生產(chǎn)自然界沒(méi)有的蛋白質(zhì)生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)
聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代基因工程,因?yàn)槭菍?duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)的
改造或制造新的蛋白質(zhì),所以必須通過(guò)基因修飾或基因合成實(shí)現(xiàn)
【解答】解:A、蛋白質(zhì)工程能定向改造蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu),使之更加符合人類的需要,A正確;
B、蛋白質(zhì)工程是通過(guò)改造基因來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)分子的改造的,B錯(cuò)誤;
C、蛋白質(zhì)工程能產(chǎn)生出自然界中不曾存在過(guò)的新型蛋白質(zhì)分子,c正確;
D、蛋白質(zhì)工程與基因工程密不可分,又被稱為第二代基因工程,D正確。
故選:ACDo
【點(diǎn)評(píng)】本題考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記蛋白質(zhì)工程的概念、操作過(guò)程、操作水平,掌
握蛋白質(zhì)工程和基因工程之間的關(guān)系,能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。
(多選)13.下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述,正確的有()
A.提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸儲(chǔ)水漲破細(xì)胞
B.用不同濃度NaCI溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì)
C.蛋白質(zhì)提取和分離過(guò)程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA
D.蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化
【答案】BD
【分析】DNA在O.I4mol/L的NaCI溶液中溶解度最小.提取較純凈的DNA時(shí)可加入95%的冷卻的酒
精,由于DNA不溶于酒精,DNA會(huì)從溶液中析出.DNA溶液中加入二苯胺試劑加熱后才會(huì)變成藍(lán)色;
電泳法,根據(jù)各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身大小、形狀的不同來(lái)分離蛋白質(zhì)或其它物質(zhì).
【解答】解:A、在提取DNA時(shí),如果是用動(dòng)物的細(xì)胞需要用蒸儲(chǔ)水漲破,如果用植物細(xì)胞則不需要,
而是用洗滌劑溶解細(xì)胞膜,A錯(cuò)誤;
B、用2mol/L的NaCI溶液溶解DNA,然后過(guò)濾出蛋白質(zhì),再降低NaCI溶液的濃度,析出DNA,B
正確:
C、DNA和蛋白質(zhì)樣品都是帶負(fù)電荷的,從負(fù)極向正極移動(dòng),移動(dòng)的距離都和樣品的分子量有關(guān)。C中
透析用以出去小分子物質(zhì),DNA是大分子物質(zhì),C錯(cuò)誤;
D、電泳法是常規(guī)分離純化的方法,比如用十二烷基磺酸鈉,可以根據(jù)其分子大小及所帶電荷性質(zhì)進(jìn)行
分離純化,D正確。
故選:BDo
【點(diǎn)評(píng)】本題考查了DNA粗提取技術(shù)的原理、蛋白質(zhì)提取與分離,重點(diǎn)考查學(xué)生對(duì)操作過(guò)程的分析、
判斷能力,從題目實(shí)驗(yàn)看出,該實(shí)驗(yàn)題目是探究不同材料對(duì)DNA和蛋白質(zhì)提取的影響.
(多選)14.圖1、2分別為“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中部分操作步驟示意圖,下列敘述正確的是()
6面加解液
圖I圖2
A.圖I、2中加入蒸儲(chǔ)水稀釋的目的相同
B.圖1中完成過(guò)濾之后保留濾液
C.圖2中完成過(guò)濾之后棄去濾液
D.在圖1雞血細(xì)胞液中加入少許嫩肉粉或木瓜蛋白酶有助于去除雜質(zhì)
【答案】BCD
【分析】1、DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是:
①DNA的溶解性,DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氮化鈉溶液中的溶解度不同,利用這一特點(diǎn)
可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出,從而達(dá)到分離的目的;
②DNA不容易酒精溶液,細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精,利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA
進(jìn)一步分離;
③DNA對(duì)于酶、高溫和洗滌劑的耐受性,蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但是不能水解DNA,蛋白質(zhì)不能耐受
較高
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