實驗動物上崗證(動物實驗類)考試題庫附答案一、法律法規(guī)與倫理要求1.【單選】我國現(xiàn)行《實驗動物管理條例》規(guī)定，從事實驗動物工作的單位必須向所在地哪一級行政部門申請許可證？A.國務院科技主管部門B.省級科技主管部門C.地市級科技主管部門D.縣級科技主管部門答案：B解析：條例第七條明確“省、自治區(qū)、直轄市科技主管部門負責實驗動物許可證的審批、發(fā)放與監(jiān)督”。2.【單選】依據(jù)《關于善待實驗動物的指導性意見》，對實驗用犬進行終末采血時，單次最大采血量不得超過總血量的：A.5%B.10%C.15%D.20%答案：B解析：指導性意見附件2規(guī)定，終末采血“單次不超過10%，且須麻醉后實施”。3.【判斷】實驗動物倫理審查表經(jīng)單位倫理委員會蓋章后即可生效，無需動物監(jiān)督員簽字。答案：錯誤解析：生效需同時滿足“委員會蓋章+兩名以上委員簽字+動物監(jiān)督員簽字”三要素，缺一不可。4.【多選】下列哪些情形應重新進行倫理審查？A.實驗方案新增非預定安樂死終點B.將原本用于藥效評價的小鼠轉用于教學示教C.實驗提前結束，動物存活數(shù)量減少30%D.更換供應商，動物遺傳背景由近交系變?yōu)榉忾]群答案：A、B、D解析：C項若未改變實驗目的、操作強度及終點，則無需重審；A、B、D均涉及動物使用性質、遺傳背景或終點變更，須重審。5.【案例分析】某課題組擬開展靈長類動物PET/CT實驗，需注射18FFDG。倫理初審已通過，但實驗員準備在未禁食狀態(tài)下給動物注射，理由是“猴不耐饑餓”。該做法是否合規(guī)？應如何糾正？答案：不合規(guī)。18FFDG為葡萄糖類似物，未禁食會導致本底過高、圖像偽影，且增加動物代謝負擔。糾正措施：①修訂方案，設置6h以上禁食；②提供流質營養(yǎng)膠防止低血糖；③重新提交倫理變更；④記錄禁食起止時間并雙人核對。二、實驗動物遺傳與微生物質量控制6.【單選】下列哪項不是近交系小鼠遺傳監(jiān)測的常規(guī)生化標記？A.過氧化氫酶（Car2）B.血紅蛋白β鏈等電點（Hbb）C.酯酶1（Es1）D.線粒體DNADloop區(qū)SNP答案：D解析：Dloop為母系遺傳，近交系雌雄均監(jiān)測核基因生化標記，Dloop僅用于系統(tǒng)發(fā)育或品系溯源，非常規(guī)監(jiān)測。7.【單選】根據(jù)GB14922.22018，SPF級大鼠必須排除的病毒是：A.漢坦病毒（HV）B.大鼠細小病毒（RMV）C.大鼠冠狀病毒（RCV）D.仙臺病毒（Sendai）答案：A解析：HV為人畜共患，一級排除；RMV、RCV、Sendai為二級，視機構要求而定。8.【填空】已知某封閉群ICR小鼠的繁殖數(shù)據(jù)：第0代雄30雌30，隨機交配，每代留種30♂30♀，則近交系數(shù)每代增量ΔF≈____%。答案：1/120≈0.833解析：ΔF=1/(2Ne)，有效群體大小Ne=4×30×30/(30+30)=60，ΔF=1/(2×60)=1/120。9.【多選】下列哪些方法可用于快速鑒別BALB/c與BALB/cnu？A.耳廓打孔標記B.胸腺觸診C.實時熒光PCR檢測Foxn1基因突變D.流式細胞術檢測CD3+細胞比例答案：B、C、D解析：A為標記方式，與基因型無關；nu/nu胸腺缺如，B、C、D均可區(qū)分。10.【簡答】描述“哨兵動物”在IVC系統(tǒng)中的作用及布放原則。答案：哨兵動物用于監(jiān)測IVC架內潛在污染，其原理為：將已知微生物背景的敏感動物（通常1%籠位）與實驗動物共享同一通風系統(tǒng)，通過臟墊料暴露法收集病原體。布放原則：①每架至少2籠，對角線分布；②每籠3–5只，雌雄各半；③每周更換一次臟墊料，持續(xù)4–6周；④監(jiān)測項目覆蓋國標必檢清單；⑤發(fā)現(xiàn)陽性立即整架封鎖并溯源。三、動物房設計與運行管理11.【單選】屏障環(huán)境動物房壓差梯度正確的是：A.清潔走廊>飼養(yǎng)間>污染走廊>外界B.飼養(yǎng)間>清潔走廊>污染走廊>外界C.外界>污染走廊>飼養(yǎng)間>清潔走廊D.清潔走廊=飼養(yǎng)間>污染走廊>外界答案：A解析：清潔走廊最高正壓，確保氣流由潔到污，防止交叉污染。12.【單選】高效過濾器（HEPA）對0.3μm顆粒的最低過濾效率為：A.85%B.95%C.99%D.99.97%答案：D解析：GB13554規(guī)定H13級HEPA≥99.95%，動物房常用H14級≥99.995%，最接近選項為D。13.【計算】某小鼠房面積200m2，凈高2.6m，設計換氣次數(shù)20次/h，則理論新風量為____m3/h。答案：200×2.6×20=10400解析：新風量=面積×凈高×換氣次數(shù)。14.【多選】下列哪些屬于“重大運行偏差”須在24h內向當?shù)乜萍贾鞴懿块T報告？A.空調機組故障停機>30minB.備用發(fā)電機無法啟動C.高壓滅菌器生物指示劑陽性D.消防噴淋誤噴答案：A、B、C解析：D屬消防事件，由消防部門管轄；A、B、C均直接影響動物質量或生物安全，須報告。15.【案例分析】某SPF級大鼠房檢出鼠棒狀桿菌（C.kutscheri）陽性，污染籠位5%，菌株對恩諾沙星敏感。請給出根除方案。答案：①立即封鎖陽性架及周邊，暫停繁殖與實驗；②淘汰陽性籠全部動物，尸體無害化處理；③架體、籠具、墊料高壓+5%過氧乙酸消毒；④IVC主機更換HEPA，風道用VHP滅菌；⑤環(huán)境采樣驗證陰性后，引入哨兵動物監(jiān)測4周；⑥對未污染架預防性飲水投恩諾沙星10mg/kg×5d；⑦修訂SOP，增加每月肛拭子PCR監(jiān)測；⑧向科技部門提交事件報告與整改結論。四、常規(guī)操作與麻醉鎮(zhèn)痛16.【單選】成年SD大鼠行尾靜脈注射，最佳進針部位為：A.尾尖1/3處B.尾根1/3處C.尾中1/3背側D.尾中1/3腹側答案：D解析：腹側靜脈粗大且固定，易穿刺；背側為動脈；尾尖易裂。17.【單選】小鼠眼眶靜脈叢采血最大安全量（7周齡，22g）為：A.0.5mLB.1.0mLC.1.5mLD.2.0mL答案：B解析：總血量≈1.5mL/10g，即3.3mL；單次≤1%，即0.33mL；但眼眶叢可間隔1周重復，累計1.0mL為上限。18.【單選】下列哪種麻醉劑不推薦用于C57BL/6小鼠長期手術？A.1.25%2,2,2三溴乙醇（阿佛?。〣.戊巴比妥鈉C.異氟烷D.氯胺酮+甲苯噻嗪答案：B解析：C57BL/6對戊巴比妥代謝個體差異大，死亡率偏高，現(xiàn)已被國際指南列為慎用。19.【多選】關于小鼠預鎮(zhèn)痛，下列正確的是：A.術前30min皮下注射丁丙諾啡0.1mg/kgB.術前24h給予COX2抑制劑可顯著降低術后痛敏C.預鎮(zhèn)痛可減少術中麻醉藥用量20–30%D.阿片類預鎮(zhèn)痛會干擾術后行為學測試，應放棄使用答案：A、B、C解析：D錯誤，可通過選擇測試時間窗或改用非阿片類避免干擾，而非放棄鎮(zhèn)痛。20.【簡答】列舉三種判斷兔麻醉深度的臨床指征，并給出對應數(shù)值。答案：①翻正反射消失；②夾捏趾間無疼痛回縮；③呼吸頻率降至20–30次/min；④角膜反射遲鈍但存在；⑤肌肉松弛，下頜張力≤5N（用張力計）。達到上述3項以上可開始手術。五、實驗設計與“3R”應用21.【單選】某新藥急性毒性試驗擬采用上下法（UDP），其符合哪一條“3R”原則？A.ReplacementB.ReductionC.RefinementD.以上均不是答案：B解析：UDP用少量動物（每步6–8只）即可估算LD50，顯著減少用量。22.【單選】OECDTG439為體外皮膚刺激重建人表皮模型，可完全替代哪類動物試驗？A.兔皮膚刺激B.兔眼刺激C.豚鼠最大化致敏D.鼠局部淋巴結致敏答案：A解析：TG439專用于替代Draize兔皮膚刺激試驗。23.【填空】若采用PowerAnalysis估算樣本量，設定α=0.05，Power=0.8，預期效應量Cohen’sd=1.0，則兩組均數(shù)比較所需小鼠最少為____只/組。答案：17解析：用GPower計算，雙側t檢驗，得n=16.7，向上取整17。24.【多選】下列哪些措施屬于Refinement？A.使用溫度可控手術臺B.術后給予果凍營養(yǎng)補充C.以基因敲除小鼠替代野生型D.采用無創(chuàng)尾動脈血壓測量答案：A、B、D解析：C為Replacement；A、B、D均減輕動物痛苦或應激。25.【案例分析】某研究生欲研究慢性應激致抑郁，原計劃每日束縛2h×21d，使用40只小鼠。請用3R原則提出優(yōu)化方案。答案：①Reduction：采用重復測量設計，基線+第7、14、21天行為測試，同只動物縱向觀察，樣本減至20只；②Refinement：束縛改為透明可調節(jié)管，預留呼吸孔，每日時間隨機化避免預期焦慮；提供筑巢材料增強可控感；③Replacement：增設一組體外海馬神經(jīng)元原代培養(yǎng)，驗證應激激素對突觸蛋白的直接影響，減少活體使用10只；④統(tǒng)計：用混合效應模型處理缺失數(shù)據(jù)，避免為補足樣本而追加動物。六、疾病模型與評價指標26.【單選】建立C57BL/6小鼠高脂誘導動脈粥樣硬化模型，最常用背景缺陷基因為：A.ApoE/B.LDLR/C.ApoC3/D.LPL/答案：A解析：ApoE/對膽固醇清除障礙，喂普通飼料即可出現(xiàn)斑塊，造模周期短。27.【單選】STZ誘導大鼠1型糖尿病，最佳劑量組合（單次腹腔）為：A.30mg/kgB.45mg/kgC.65mg/kgD.80mg/kg答案：C解析：65mg/kg一次注射，72h后空腹血糖≥16.7mmol/L成模率>90%，死亡率<5%。28.【填空】在小鼠MCAO線栓模型中，Longa評分≥____分視為成功局灶性腦缺血。答案：2解析：Longa0–4分制，≥2分出現(xiàn)對側前肢屈曲，提示神經(jīng)功能缺損。29.【多選】評價NAFLD小鼠模型病變程度的金標準包括：A.血清ALTB.肝組織OilRedO染色C.肝組織NAS評分D.肝臟甘油三酯含量答案：C、D解析：NAS評分由病理學家半定量脂肪變、炎癥、氣球樣變；肝TG為生化定量，兩者為國際共識金標準；ALT、OilRedO為輔助。30.【簡答】寫出APP/PS1轉基因阿爾茨海默病小鼠模型出現(xiàn)Aβ沉積的最早周齡及檢測方法。答案：6月齡即可在皮層和海馬檢測到致密斑；檢測方法：①免疫組化，6E10抗體，4%多聚甲醛灌注后冰凍切片；②硫黃素T染色，熒光顯微鏡下綠色致密斑；③ELISA測定腦勻漿Aβ42/Aβ40比值，6月齡約為野生型2–3倍。七、職業(yè)健康與生物安全31.【單選】依據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB19489），動物生物安全二級實驗室（ABSL2）必須配備：A.Ⅲ級生物安全柜B.定向氣流飼養(yǎng)籠C.雙門高壓滅菌器D.化學淋浴答案：C解析：ABSL2要求廢棄物經(jīng)雙扉高壓滅菌后傳出，Ⅲ級柜為ABSL3/4，化學淋浴為ABSL3/4。32.【單選】被實驗動物抓傷后，首要處理步驟是：A.報告上級B.擠壓傷口至出血C.75%乙醇消毒D.包扎傷口答案：B解析：立即擠壓+流動水沖洗5min，可減少病原體負荷，隨后再消毒、報告。33.【填空】人感染猴B病毒（HerpesB）潛伏期最長可達____天。答案：50解析：文獻報道最長50d，平均7–21d。34.【多選】下列哪些屬于動物過敏原（LAA）控制措施？A.使用低蛋白墊料B.增加換氣次數(shù)至25次/hC.為操作員提供N95口罩D.采用負壓墊料更換臺答案：A、B、D解析：N95對氣溶膠有效，但對LAA顆粒（>5μm）普通外科口罩即可，N95非強制。35.【案例分析】某實驗員在ABSL3進行SARSCoV2感染倉鼠實驗，出艙時突發(fā)停電，生物安全柜風機停轉。請寫出應急流程。答案：①立即停止操作，封閉操作臺；②穿戴動力送風頭罩者保持冷靜，勿摘面罩；③觸發(fā)UPS應急照明，使用便攜消毒噴壺對臺面噴灑75%乙醇；④關閉籠蓋，密封籠具于雙層滅菌袋；⑤按停電預案從緩沖間緊急退出，關閉實驗室門；⑥啟動備用電源或移動式HEPA過濾單元，30min后由值班人員穿PAPR進入，重新消毒；⑦填寫異常事件報告，向單位生物安全委員會報備；⑧對實驗員醫(yī)學隔離觀察14d，每日測體溫與核酸。八、綜合應用題36.某新藥擬開展GLP長期毒性試驗，選用Beagle犬，設高、中、低三劑量，雌雄各半，給藥26周，恢復8周。請回答：（1）每組最少動物數(shù)；（2）主要觀察指標；（3）安樂死與尸檢要求；（4）數(shù)據(jù)歸檔保存年限。答案：（1）按照《藥物重復給藥毒性研究技術指導原則》，Beagle犬長期毒性每組≥8/性別，本試驗最少16只/組。（2）臨床觀察：一般癥狀、體重、食量、體溫、血壓、心電圖、眼科；血液學：血常規(guī)、凝血；血液生化：肝腎功能、電解質、脂代謝；尿液分析；免疫學：IgG、IgM、細胞因子；毒代：Cmax、AUC；病理：臟器重量、組織學。（3）給藥結束每組安樂死≥75%動物，恢復期末安樂死剩余；采用靜脈注射戊巴比妥鈉100mg/kg，放血處死；系統(tǒng)尸檢，取50余種組織，4%中性甲醛固定，石蠟包埋，HE染色；發(fā)現(xiàn)病變組織加做特殊染色或電鏡。（4）原始數(shù)據(jù)、病理切片、蠟塊、電子數(shù)據(jù)保存≥15年；GLP質量保證記錄永久保存。37.計算題：某IVC籠盒尺寸0.37m×0.21m×0.18m，飼養(yǎng)5只18g小鼠，國標GB14925規(guī)定最小地面積0.0042m2/只，最小籠內高度0.13m。判斷籠盒是否合規(guī)，并計算最大飼養(yǎng)密度。答案：底面積=0.37×0.21=0.0777m2；5只需0.0042×5=0.021m2；0.0777>0.021，合規(guī)；高度0.18>0.13，合規(guī)。最大飼養(yǎng)數(shù)=0.0777/0.0042≈18.5，取整18只；但IVC通常限制≤10只/籠以防熱應激，故實際飼養(yǎng)≤10只。38.設計題：請設計一個“小鼠急性胰腺炎模型”實驗方案，要求體現(xiàn)3R原則，并給出評價時點與終點。答案：①動物：C57BL/6雄鼠，8周齡，n=10/組，采用Power分析減至最?。虎赗eplacement：增設雨蛙素刺激AR42J細胞組，驗證機制；③Refinement：雨蛙素50μg/kg，7次腹腔注射，間隔1h，減少單次劑量降低死亡率；術前皮下給予丁丙諾啡0.1mg/kg，術后24h內保溫墊維持37℃；④評價：3、6、12、24h采血測血清淀粉酶、脂肪酶；24h行超聲檢測胰腺水腫；48h取胰腺組織，HE評分（水腫、炎癥、壞死各0–3分）；⑤終點：評分≥7