PAGE1吡啶類藥物分析新方法的研究吡啶類化合物具有與吲哚、氮雜吲哚等類似的特殊結(jié)構(gòu)和良好的生物活性,在醫(yī)藥和農(nóng)藥工業(yè)有著廣泛的應(yīng)用，吡啶類藥物按從屬關(guān)系應(yīng)隸屬于雜環(huán)類藥物。碳環(huán)中夾雜有非碳原子的環(huán)狀有機化合物，稱為雜環(huán)化合物，其中的非碳原子稱為雜原子，雜原子一般包括氮、氧、硫等。雜環(huán)類藥物可以分為很多種，例如，呋喃類、吡啶類、哌啶類、嘌呤類、托烷類、苯并二氮雜類。對吡啶類藥物結(jié)構(gòu)分析可得：吡啶類藥物大多為氮雜原子六元單環(huán)，代表藥物為異煙肼和尼可剎米。廣泛使用的藥物異煙肼過量使用引起中毒的臨床表現(xiàn)有：昏迷、過敏性休克、引起病人精神障礙、高熱、皮疹、全身水腫、心率失常、肝損害、腎功能衰竭等等。所以必須采取措施來保護病人，減少毒副反應(yīng)的發(fā)生。而采取有效措施的前提條件是建立臨床藥物檢測分析的有效方法。所以大力開展藥物分析科學(xué)研究，借助分析手段對藥物使用后在血液、尿液等人體內(nèi)中的降解、代謝、歸趨進行跟蹤監(jiān)控，對藥物與人體相容性進行綜合評價，這對于新藥物開發(fā)、指導(dǎo)合理用藥和降低藥物對人體的污染具有重要的意義。本文以吡啶類藥物的代表藥物——異煙肼為例分析了異煙肼的藥物分析新方法。一、異煙肼概述異煙肼(isoniazid，INH，又稱雷米封，分子式為C6H7N30)，作為抗結(jié)核的一線藥物，臨床上應(yīng)用廣泛。異煙肼對結(jié)核桿菌有高度選擇性，抗菌力強，在試管中0.025～0.05mg/L的濃度即可抑菌，較高濃度對繁殖期細菌有殺菌作用。單用時結(jié)核桿菌易產(chǎn)生耐藥性，但與其他抗結(jié)核藥無交叉耐藥性，如與其他抗結(jié)核藥聯(lián)用，則能延緩耐藥性的發(fā)生并增強療效?？咕鷻C制可能是抑制分枝菌酸的合成，使細菌喪失耐酸性、疏水性和增殖力而死亡。此酸是結(jié)核桿菌細胞所特有的重要成分，因此異煙肼對其他細菌無作用。藥物有毒副作用，過量使用會引起中毒，即使在國家規(guī)定的治療量范圍內(nèi)使用也容易發(fā)生急性或蓄積性中毒。二、異煙肼的分析方法1、分光光度法分光光度法測定異煙肼前處理簡單、測定快速但缺點是靈敏度低、偏差大。不適用于微量檢測。陶錦清基于異煙肼將Cu2+還原為Cu+，后者可與新銅試劑形成黃色配合物，提出了間接分光光度法測定藥物中異煙肼的新方法。結(jié)果表明在pH4.0～8.0范圍內(nèi)，檢測范圍在0～4.5mg/L。郁翠華，李和娟，劉斌利用異煙肼還原Cu2+為Cu+，以新亞銅試劑為顯色劑，Cu+與新亞銅試劑生成黃色絡(luò)合物，借以分光光度法測定。在優(yōu)化實驗條件下，測定范圍為0.1～1.8mg/L。檢出限為0.02mg/L。喬蘭俠，高志國，邢秋蕊利用異煙肼在紫外區(qū)的特定吸收，研究了測定異煙肼含量的最佳條件，測定范圍為2.0～-30.0mg/L。檢出限為2mg/L。A.Safavi，M.A.Karimi等利用在新亞銅存在下，Cu2+被異煙肼還原為Cu+，形成Cu+.新亞銅絡(luò)合物，該絡(luò)合物的最大吸收波長為454nm，通過分光光度法在此波長處檢測絡(luò)合物而間接測定了異煙肼。檢測范圍0.3～3.5mg/L。用于藥物中的異煙肼測定結(jié)果滿意。S.A.Benetton等通過可見分光光度法與一階導(dǎo)數(shù)紫外可見分光光度法測定了藥物混合樣中的利福平和異煙肼的含量。在pH為7.4的緩沖溶液中，通過420nm和520nm之間應(yīng)用三點修正技術(shù)確定475nm波長處檢測利福平；在0.012mol/L的HCl中利用一階導(dǎo)數(shù)紫外可見分光光度法257nm處檢測異煙肼。測定了膠囊態(tài)的藥物并與標(biāo)準(zhǔn)測定方法比較后結(jié)果滿意。P.Nagaraja,K.C.SrinivasaMurthy提出了一種快速、靈敏、簡單測定異煙肼的分光光度法。該法利用堿性溶液中1，2-萘醌-4-磺酸鈉與異煙肼反應(yīng)產(chǎn)生紅色絡(luò)合物，500nm處分光光度法檢測，加入十六烷基溴化銨以增強檢測靈敏度。該法用于測定不同形式的藥物，加入同種類藥物賦形劑不干擾該法測定。H6ctorC.GoiCoechea等利用多元分光光度法校準(zhǔn)并同時測定了利福平、異煙肼、吡嗪酰胺三種抗結(jié)核藥物。對于分光光度法分析所產(chǎn)生的光譜重疊采用局部最小二乘方分析處理。與古典最小二乘方分析比較測定藥片時賦形劑不干擾測定，對光譜重疊的處理效果更佳，尤其對低靈敏度異煙肼的檢測更突出。且具有測定準(zhǔn)確、快速、不需要其他非水溶劑。2、高效液相色譜法(HPLC)高效液相色譜法(HPLC)以其獨特的分析手段在藥物分析領(lǐng)域里獲得了廣泛的發(fā)展。是現(xiàn)在乃至今后一段時間內(nèi)藥物分析的主流。HPLC法應(yīng)用范圍廣、測定速度快、靈敏度精密度高、操作相對簡單。但所用儀器昂貴可能限制其進一步發(fā)展。殷琦，車寧等建立了一種HPLC法同時測定人體血漿中利福平和異煙肼濃度的方法。以0.02mol/L磷酸二氫鉀.乙腈.三乙胺(40：60-0.15，磷酸調(diào)節(jié)pH4.30)，流速0.9mL/min，檢測波長264nm，內(nèi)標(biāo)為氟呱啶醇。結(jié)果測定異煙肼的線性范圍為0.125～16mg/L。方法簡便、準(zhǔn)確。趙偉杰，段連山等應(yīng)用反相HPLC法測定血漿中異煙肼的濃度。選用ODSC18柱，流動相0.01M磷酸緩沖液(pH7.7)：甲醇(59.5/40.5，Vm，流速0.85mL/min，檢測波長335nm。異煙肼與香草醛在酸性條件下測定生成的異煙腙，內(nèi)標(biāo)為丙硫異煙胺，乙腈作蛋白沉淀劑，與血漿比為1/2(V/V)。檢測范圍為0.25～10mg/L。檢出限為0.05mg/L。曹曉梅，陳冰，冷偉衛(wèi)等建立了同時測定血漿中異煙肼和乙酰異煙肼的HPLC法。血漿樣品經(jīng)10％高氯酸沉淀蛋白后，取上清液直接進樣分析。選用LichrospherC18柱，流動相為乙腈：20mmol磷酸緩沖液(含2mmol庚烷磺酸鈉)(2：98，Vm。檢測波長266nm。結(jié)果異煙肼與乙酰異煙肼的檢測濃度分別為0.12～15.89mg/L和0.13～17.08mg/L。此研究建立的方法簡便、準(zhǔn)確，滿足藥代動力學(xué)研究中生物樣品測定的要求。邱楓，肇麗梅，張桂鳳等選用EclipseXDBC18色譜柱，流動相為：0.05mol/L磷酸二氫銨.乙腈(65：35)。0.5mL的血漿用10％的三氯乙酸沉淀蛋白后，加桂皮醛衍生化，在用乙醚提取分離后進樣分析測定了血藥中異煙肼濃度，結(jié)果測定的線性范圍是0.1～12mg/L。此法具有快捷、靈敏度較高、干擾少等特點，可用于異煙肼的藥代動力學(xué)研究。許亦鳴，陳冰，王洲等提出了HPLC法測定人血漿中異煙肼及其代謝物乙酰異煙肼濃度的新方法。血漿加入三氯乙酸沉淀蛋白后，將上清液分為兩份，一份加入蒸餾水，另一份加入鹽酸，80℃孵育lh后，分別加入1％桂皮醛進行柱前衍生化。色譜柱為HypersilBDSC18，流動相為0.02mol/L磷酸二氫鉀(pH=4.0).乙腈(69：31)，檢測波長為340nm.流速為lmL/min。檢出限低于0.05mg/L。金鳴，黃河，陳新山建立了血漿及尿液中異煙肼的HPLC快速測定方法，以滿足臨床藥物分析和法醫(yī)學(xué)鑒定的需要，提高對血漿及尿液中異煙肼濃度檢測的準(zhǔn)確性。以香草醛為衍生化試劑，將異煙肼經(jīng)柱前衍生為異煙肼.香草醛腙，直接對處理后樣品中的腙進行定性、定量分析。結(jié)果表明，方法的線性范圍為0.2mg/L～12.0mg/L；檢測限為0.2mg/L；劉慶，楊林建立了一種適用于異煙肼穩(wěn)定性及其降解動力學(xué)研究的含量測定的反相高效液相色譜法。采用ShimadzuODS柱，以0.05mol/L醋酸銨溶液(用氨水調(diào)節(jié)pH6.0).乙腈(90：l0)為流動相，檢測波長為275nm。檢測范圍為0.01～0.1mg/L。與美國藥典收載的色譜條件相比較，異煙肼與相鄰雜質(zhì)分離更完全。NouredineSadeg等通過30％的三氯乙酸處理血清樣品后加入桂皮醛進行衍生處理，液相色譜340nm處檢測衍生物而間接測定了異煙肼的量。色譜條件：流動相為乙腈/水/三乙胺/乙酸(400：600：2：1，Vm，pH為5.0，流速1.0mL/min。A.Espinosa.Mansilla等用HPLC法同時測定了尿液中利福平、吡嗪酰胺、異煙肼、乙酰異煙肼代謝物的含量。選用色譜條件為：C18分析柱，采用梯度洗脫，在0.02M，pH7.0磷酸二氫鉀緩沖液中，0～1min為含5％nW)的甲醇，l～3.4min變?yōu)?％(VⅣ)甲醇，隨后4min甲醇含75％(V/V)。在4.5min時二極管陣列檢測波長從254變?yōu)?75nm。四種藥物全部在8min內(nèi)洗脫出來。胡詠梅，徐新華，許建明建立同時測定血清中異煙肼(INH)、利福平(RFP)、吡嗪酰胺(PZA)濃度的高效液相色譜法。INH、PZA檢測條件：SymmetryC18色譜柱，流動相為磷酸鹽緩沖液(pH5.5)：甲醇=30：70，流速0.45mL/min，檢測波長340rim；INH、PZA檢測條件：SymmetryC18色譜柱，流動相為磷酸緩沖液(pH6.0)：乙腈=91：9，流速0.8mL/min，測定波長254nm。以峰高外標(biāo)法定量，線性范圍其中INH為0.5～20mg/L。該法簡便、快速、靈敏度和準(zhǔn)確度較高，無干擾，用于上述3種藥物復(fù)合制劑衛(wèi)非特片的藥代動力學(xué)研究，證明滿足人體血藥濃度監(jiān)測及藥代動力研究的需要。EugeneB.Hansen等通過硫酸鋅、甲醇兩步驟沉淀處理血清樣品蛋白后，以5％的異丙醇、59/L甲酸銨的水溶液作為流動相，液相色譜電化學(xué)檢測器0.8V檢測。該法成功用于檢測血樣中含異煙肼濃度低于0.1mg/L的樣品。AllnaWang等通過LC.MS聯(lián)用法測定了狗血中的異煙肼含量。血漿樣品通過甲醇沉淀蛋白后分析測定。測定條件：選用C18柱，四級桿質(zhì)譜儀，流動相為1％的蟻酸.乙腈(91：9，Vm。最低檢測限可達2.5x10～mg/L。該法成功用于狗血中藥物動力學(xué)研究。M.Y.Khuhawar,F.M.A。Rind利用YMC-ODS柱分離測定了血樣中異煙肼、利福平、吡嗪酰胺三種抗結(jié)核藥物。異煙肼用2-fluorene.carboxaldehyde(FA)衍生處理，分離用乙醇.氯仿.乙腈.水做流動相，337nm處檢測。三種藥物的檢出限分別為0.02mg/L、2.6megL、0.04mg/L。M.C.Gennaroa，R.Calvino，C.Abrigo利用離子交感試劑反相HPLC法測定了多種抗結(jié)核藥物及其代謝物的含量。該法測定血樣中異煙肼的含量低于0.094mg/L。E.Called，E等建立了一種簡單、快速、準(zhǔn)確的HPLC法測定片劑中三種抗結(jié)核藥物的量。該法采用梯度洗脫二極管陣列檢測結(jié)果滿意。AdananE1-Yazigi，DaleA.Raines研究了血漿中多種抗結(jié)核藥物的液相色譜分析電化學(xué)與光譜雙重檢測方法。A.P.Argekar等利用薄層色譜法研究測定了異煙肼等三種抗結(jié)核藥物。3、化學(xué)發(fā)光分析法化學(xué)發(fā)光是化學(xué)反應(yīng)體系中的某分子吸收了化學(xué)反應(yīng)釋放出的化學(xué)能后由基態(tài)躍遷到激發(fā)態(tài)，再由激發(fā)態(tài)返回到基態(tài)時所產(chǎn)生的一種光輻射。根據(jù)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)生的輻射光的發(fā)光強度來確定反應(yīng)中相應(yīng)物質(zhì)含量的分析方法叫化學(xué)發(fā)光分析法，它是一種分子發(fā)射光譜分析的方法。化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象廣泛存在于自然界中，古代人們就己經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多生物體能夠產(chǎn)生發(fā)光現(xiàn)象，如螢火蟲、真菌類和海洋生物的發(fā)光；但并不知道為什么有的生物能發(fā)光而有的卻不能發(fā)光。1668年Boyle提出生物發(fā)光需要氧氣的參與，這為我們正確理解和認識化學(xué)發(fā)光和生物發(fā)光現(xiàn)象開辟了道路。1877年Rdazisezwski發(fā)現(xiàn)洛汾堿(2，4，5.三苯基咪唑)在堿性條件下被過氧化氫等試劑氧化發(fā)出綠的光。19世紀末，德國科學(xué)家Wideemnna首次提出化學(xué)發(fā)光這一專業(yè)術(shù)語，認為是一種相對簡單的有機反應(yīng)過程。1928年，Albreehi發(fā)現(xiàn)了魯米諾在堿性質(zhì)中的發(fā)光現(xiàn)象，這是化學(xué)發(fā)光史的一個重要里程碑，對化學(xué)發(fā)光發(fā)展成為分析化學(xué)的重要手段起到了重要作用。隨后，光澤精的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象于1935也被發(fā)現(xiàn)。但由于大多數(shù)化學(xué)發(fā)光非常微弱，且稍縱即逝，加之早期的分析檢測手段比較落后，化學(xué)發(fā)光方面的研究一直進展緩慢，未有實質(zhì)性的應(yīng)用。直到世紀60年代以后，過去難以實現(xiàn)的微弱發(fā)光的檢測成為可能，化學(xué)發(fā)光才獲得迅猛的發(fā)展。我國的化學(xué)發(fā)光研究起步于80年代，但在20年來也取得了長足發(fā)展。化學(xué)發(fā)光法具有靈敏度高、線性范圍寬、儀器簡單、分析速度快、易于實自動化、容易實現(xiàn)批量分析和在線分析、易與其它研究手段相結(jié)合等優(yōu)點，已廣泛地應(yīng)用于工業(yè)分析、地質(zhì)分析、藥物分析、環(huán)境檢測、臨床檢驗、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品分析、生物科學(xué)、材料科學(xué)等許多方面，成為微量分析和痕量分析領(lǐng)域中種十分重要的研究方法.化學(xué)發(fā)光法本身的不斷發(fā)展、完善，新體系、新方新的發(fā)光試劑不斷出現(xiàn)，化學(xué)發(fā)光法與流動注射、電化學(xué)、微流控制、高效液相譜、毛細管電泳等其它研究手段的結(jié)合，為生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、材料科學(xué)的研究提供了許多高靈敏度、高選擇性的檢測方法，推動了這些學(xué)科理論的技術(shù)的發(fā)展。同時，其它學(xué)科方面的研究成果也為化學(xué)發(fā)光分析和生物發(fā)光分析發(fā)展了許多新的研究技術(shù)和手段，如納米發(fā)光、發(fā)光成像、發(fā)光活體分析法等，進一步促進了化學(xué)發(fā)光法本身的發(fā)展。呂家根等采用了一種與流動注射體系組合的在線自發(fā)電池作為電致化學(xué)發(fā)光的激發(fā)源。通過實驗發(fā)現(xiàn)在堿性介質(zhì)中，A1/Ag雙金屬對可提供穩(wěn)定的電位輸出并可激發(fā)魯米諾在鉑電極表面的電致化學(xué)發(fā)光，利用此種組合體系，檢測了片劑藥物異煙肼的含量。該方法測定片劑中INH的最低檢測限為1.0×10-2～mg/L。宋正華，呂繼宏以異煙肼與K3Fe(CN)6的氧化還原反應(yīng)對Lumin01.K3Fe(CN)6的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的抑制為基礎(chǔ)，異煙肼與K3Fe(CN)6發(fā)生氧化還原反應(yīng)，導(dǎo)致K3Fe(CN)6濃度降低，從而使K3Fe(CN)6與Luminol的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)受到抑制，即化學(xué)反應(yīng)強度的減小值與異煙肼的濃度在一定范圍內(nèi)成線性關(guān)系。設(shè)計出一種簡便、快速、靈敏度高的流動注射抑制化學(xué)發(fā)光測定異煙肼的新方法。檢出限為4.8x10-4mg/L。此法成功地應(yīng)用于藥劑中異煙肼含量測定，回收率滿意。趙芳，吳遠遠等報道一種微量測定抗結(jié)核藥物異煙肼的新方法，方法是基于異煙肼對魯米諾.錳(I).高碘酸鉀化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的增敏作用，建立了微量異煙肼的流動注射化學(xué)發(fā)光分析法。本法檢測限是3×10-2mg/L；線性濃度范圍為0.1～10mg/L。顧雪凡，鄭行望利用異煙肼在汞膜修飾石墨電極表面被還原后即被溶液中的溶解氧所氧化，重新回到初始狀態(tài)；而溶解氧被還原生成活性氧自由基，其與魯米諾之間的弱化學(xué)發(fā)光信號強烈地受異煙胼的增敏，由此建立了一種新的高靈敏的測定異煙肼的電化學(xué)發(fā)光分析新方法。結(jié)果表明，在最佳的實驗條件下，相對電化學(xué)發(fā)光強度與異煙肼的濃度在2.0xl0-3～2.0mg/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，檢出限為6.7x10-4mg/L。此方法已成功用于片劑異煙肼的測定。劉麗君，鄭行望，章竹君基于在堿性介質(zhì)中電氧化熒光素(fluorescein)的弱電化學(xué)發(fā)光信號可被異煙肼增敏，據(jù)此，建立了測定異煙肼的高選擇性電化學(xué)發(fā)光新方法。該方法測定異煙肼的線性范圍為2.0x10-1～-80mg/L，檢出限為1.0×10-1～mg/L。張琰圖，陳小利，楊維平等基于在NaOH堿性介質(zhì)中，鐵氰化鉀可直接氧化異煙肼產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光這一現(xiàn)象，結(jié)合流動注射分析技術(shù)，研究并優(yōu)化了化學(xué)發(fā)光檢測的條件，提出了一種直接利用化學(xué)發(fā)光測定異煙肼的新方法。該方法測定的異煙肼線性范圍為0.05～6.0mg/L，檢出限為2×10-2～mg/L。該方法成功地用于藥片及針劑中異煙肼的測定，結(jié)果滿意。YumingHuangt等提出了在堿性介質(zhì)中，基于發(fā)光氨.異煙肼.hexacyanoferrate(III)的化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的增敏作用，建立了異煙肼測定的新方法。響應(yīng)信號與異煙肼的濃度在0～1mg/L的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。檢出限為0.03ug/L。JiachuHuang等利用恒定電流電解生成的次氯酸鹽.發(fā)光氨反應(yīng)產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光信號強烈的受異煙胼的增敏，由此建立了一種測定異煙肼的新方法。該法測定的檢出限為6×10-3mg/L。用于藥物制劑形式的測定結(jié)果滿意。BaoxinLi等利用恒定電流電解生成的不穩(wěn)定Mn(III)與異煙肼在硫磺酸介質(zhì)中產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光體系而測定了異煙肼?；瘜W(xué)發(fā)光強度與異煙肼的濃度在0.1～10mg/L范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，方法的檢出限為3.2×10-2～mg/L。AfsanehSafavil等利用堿性介質(zhì)中的N.bromosuccinimide(NBS)與N.chlorosuccinimide(NCS)使發(fā)光氨(1umin01)氧化而產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號，發(fā)現(xiàn)在此發(fā)光氨溶液中異煙肼能增強該信號的發(fā)光強度，基于此提出了一種新的流動注射化學(xué)發(fā)光法測定異煙肼的新方法。在NBS-與NCS-發(fā)光氨發(fā)光系統(tǒng)中，異煙肼的檢出限為4×10-3mg/L。SichunZhang，HuaLit等通過化學(xué)發(fā)光試劑發(fā)光氨與高碘酸鹽反應(yīng)產(chǎn)生的弱化學(xué)發(fā)光信號可被異煙肼增敏這一原理來測定藥物形式的異煙肼含量。該法測定的線性范圍為-1.1×10-3～0.1mg/L。檢出限可達0.58×10-3mg/L。鄭行望，楊梅，章竹君等基于一種新型流通電解池的設(shè)計，結(jié)合恒電流電解技術(shù)與流動注射技術(shù)，使電生于電極表面附近的溴具有初生態(tài)的化學(xué)發(fā)光活性，它可直接氧化異煙肼而產(chǎn)生強度高、反應(yīng)速度快的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，據(jù)此建立了測定異煙肼的電化學(xué)發(fā)光新方法。該方法的檢出限為1.2x10-2～mg/L。4、電化學(xué)分析方法生命現(xiàn)象最基本過程是電荷運動，電分析化學(xué)是研究生命過程的有利工具或手段。而極譜法是電分析化學(xué)的基本方法之一，因此用這種分析方法研究與人體健康密切相關(guān)的藥物具有重要的理論意義和應(yīng)用價值。應(yīng)用于藥物分析的近代極譜法有線性掃描示波極譜法、交流示波極譜和示波極譜滴定、方波極譜、脈沖極譜，它們在有機藥物分析中取得了成功的應(yīng)用。尤其以單掃描極譜法在有機藥物分析中的應(yīng)用最為廣泛。隨著極譜法的不斷發(fā)展，各種極譜新技術(shù)應(yīng)運而生。近年來，發(fā)展起來的有機藥物的極譜催化波引起了電化學(xué)工作者的極大興趣。有機化合物的極譜催化波是指在氧化劑存在下有機化合物自身的極譜催化波。它是由于有機化合物的可還原基團被還原成中間體自由基(或最終產(chǎn)物)，氧化劑氧化該自由基(或最終產(chǎn)物)再生成原可還原基團而產(chǎn)生的。伏安法以吸附伏安法在有機藥物分析中的應(yīng)用最為廣泛。吸附伏安法是在極譜絡(luò)合吸附波的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種融富集與電化學(xué)溶出于一體的電分析方法，這種經(jīng)過濃集而后測定的方法，靈敏度極譜吸附波相比可以提高一、二個數(shù)量級，尤其適用于有機藥物的痕量分析。伏安法使用懸汞電極、汞膜電極，固體電極如玻碳電極、貴金屬電極、熱解石墨電極、碳糊電極等工作電極，由于減少了充電電流的影響而具有更高的靈敏度和更低的檢出限。固體電極用于有機藥物的吸附伏安法測定已有許多報道。目前，電分析方法在研究有機藥物與DNA的相互作用、天然藥物抗氧化活性等電化學(xué)行為和成份分析中的地位變得越來越重要，這主要是由于電分析方法具有簡便、靈敏度高、響應(yīng)速度快，易于實現(xiàn)原位、在線、實時、微區(qū)、活體和現(xiàn)場測定，可直接展現(xiàn)自由基變化過程等優(yōu)點。異煙肼的電化學(xué)方法檢測也有相關(guān)報道。張君才，趙川，宋俊峰通過不可逆電對的雙安培檢測原理，使用經(jīng)過恒電流陽極化預(yù)處理的雙鉑電極，在外加電位為0V時，通過耦合異煙肼在一支鉑電極上的催化氧化和另一支電極上的氧化鉑的還原兩個不可逆電對，建立了流動注射雙安培檢測異煙肼的新方法。該電化學(xué)測定異煙肼的檢出限低于0.1mg/L。魯雙云，于春梅等采用三電極系統(tǒng)，以電化學(xué)預(yù)處理玻碳電極為工作電極，飽和甘汞電極為參比電極，鉑電極為對電極，用循環(huán)伏安法研究異煙肼的電化學(xué)行為。發(fā)現(xiàn)異煙肼在預(yù)處理的玻碳電極上產(chǎn)生兩個不可逆的還原峰，電位分別為-0.80V和-0.90V，其過程是一個表面吸附過程。實驗得出在-0.90V出現(xiàn)的還原峰電流所檢測異煙肼的濃度的檢出限為0.16×10-5～mg/L。翟萬云，王宏等通過利用多壁納米管修飾玻碳電極來顯著提高異煙肼的氧化峰電流而測定了異煙肼。優(yōu)化了底液、pH、修飾劑量、