高考生物一輪總復(fù)習(xí)-生物技術(shù)實(shí)踐-專題4、5-DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、植物有效成分的提取講義-選修_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

專題4、5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)、植物有效成分的提取考綱內(nèi)容能力要求命題分析實(shí)驗(yàn):(1)蛋白質(zhì)的提取和分離(2)DNA的粗提取與鑒定(3)從生物材料中提取某些特定的成分實(shí)驗(yàn)與探究能力實(shí)驗(yàn)與探究能力實(shí)驗(yàn)與探究能力

新課標(biāo)卷以非選擇題的形式考查本部分內(nèi)容,特別是生物材料中某些成分的提取考查相對(duì)較多。2017年考查了植物有效成分提取的相關(guān)內(nèi)容。[考綱導(dǎo)讀]一、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1.DNA的粗提取與鑒定(1)實(shí)驗(yàn)原理0.14mol/L

①DNA在不同濃度的NaCl

溶液中的溶解度不同,濃度為____________時(shí)其溶解度最小。②DNA不溶于酒精溶液。藍(lán)色雜質(zhì)

③DNA與二苯胺在沸水浴中呈________。

(2)實(shí)驗(yàn)步驟:選材、制備雞血細(xì)胞液→破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液→去除濾液中的__________→DNA的析出與鑒定。

2.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段

(1)PCR原理:在一定的緩沖溶液中提供____________、分別與兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物、________________、耐熱的DNA聚合酶,同時(shí)控制溫度使DNA復(fù)制在________反復(fù)進(jìn)行。

(2)PCR的反應(yīng)過程:變性→________→延伸。DNA模板四種脫氧核苷酸體外復(fù)性3.血紅蛋白的提取和分離相對(duì)分子質(zhì)

(1)凝膠色譜法:也稱分配色譜法,是根據(jù)_______________________分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對(duì)分子質(zhì)量較小的移動(dòng)速度較慢,而相對(duì)分子質(zhì)量較大的無法___________________,移動(dòng)速度較快。進(jìn)入凝膠內(nèi)部(2)緩沖溶液:能夠抵制外界的______________對(duì)溶液pH的影響,維持pH基本不變。酸和堿電場(chǎng)(3)電泳:帶電粒子在_________的作用下發(fā)生遷移的過程。量的大小(4)實(shí)驗(yàn)操作:凝膠色譜柱的裝填

①樣品處理及粗分離:紅細(xì)胞的洗滌→血紅蛋白的釋放→分離血紅蛋白溶液→透析。 ②凝膠色譜柱操作:凝膠色譜柱的制作→_______________→樣品的加入和洗脫。 ③純度鑒定:用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳。提取成分提取方法實(shí)驗(yàn)流程玫瑰精油

的提取水蒸氣蒸餾法鮮玫瑰花+清水―→水蒸氣蒸餾―→油水混合物分離油層 除水玫瑰油橘皮精油

的提取壓榨法石灰水浸泡―→漂洗―→壓榨―→過濾―→靜置―→再次過濾―→橘皮油胡蘿卜素

的提取萃取法胡蘿卜―→粉碎―→干燥―→萃取―→過濾―→濃縮―→胡蘿卜素二、植物有效成分的提取[判斷正誤]1.蒸餾法的實(shí)驗(yàn)原理是利用水蒸氣將芳香油溶解下來,再把水蒸發(fā)掉,剩余的就是芳香油。()2.提煉玫瑰精油的玫瑰花應(yīng)在花開的初期采取,因?yàn)榇穗A段的花含油量最高。()3.油水混合物中加入無水Na2SO4,有利于分離油層。()4.乙醇和丙酮能夠用于胡蘿卜素的萃取。()5.萃取的效率主要取決于萃取時(shí)的溫度和時(shí)間。()答案:1.×2.×3.×4.×5.×方法步驟添加物質(zhì)及目的操作要求及目的取用與要求目的要求目的1.制備雞血細(xì)胞液取0.1g/mL的檸檬酸鈉100mL于500mL燒杯中,加雞血180mL檸檬酸鈉可防止凝血緩慢攪拌混勻血液與檸檬酸鈉,防凝血離心或置于冰箱使血細(xì)胞與血漿分離考點(diǎn)一DNA的粗提取與鑒定

[考點(diǎn)梳理]1.實(shí)驗(yàn)流程方法步驟添加物質(zhì)及目的操作要求及目的取用與要求目的要求目的2.提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)20mL蒸餾水使血細(xì)胞吸水漲破,釋放核物質(zhì)攪拌:?jiǎn)蜗?、快速?min加速血細(xì)胞破裂過濾:1~2層紗布濾取含DNA的濾液3.溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA2mol/L的

NaCl溶液40mL溶解DNA攪拌:?jiǎn)蜗?、緩慢?min促進(jìn)DNA溶解4.析出含DNA的黏稠物加蒸餾水至黏稠物不再增加為止降低NaCl溶液濃度,析出DNA攪拌:?jiǎn)蜗?、輕緩混勻溶液,促進(jìn)析出完整DNA分子5.濾取含DNA的黏稠物——3~4層紗布過濾獲取含DNA的黏稠物(續(xù)表)方法步驟添加物質(zhì)及目的操作要求及目的取用與要求目的要求目的6.將DNA的黏稠物再溶解2mol/L的

NaCl溶液20mL再溶解DNA單向攪拌使黏稠物盡可能多地溶解于溶液中7.過濾含有DNA的NaCl溶液——3~4層紗布過濾濾取含DNA的濾液8.提取含雜質(zhì)較少的DNA加入冷卻的、體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精50mL讓部分雜質(zhì)溶于酒精,析出含雜質(zhì)較少的DNA攪拌:?jiǎn)蜗虼龠M(jìn)雜質(zhì)溶解、DNA析出用玻璃棒卷起絲狀物,用濾紙吸水獲得DNA(白色乳狀絲狀物)(續(xù)表)方法步驟添加物質(zhì)及目的操作要求及目的取用與要求目的要求目的9.DNA的鑒定向2支20mL試管各加0.015mol/L的NaCl溶液一支對(duì)照,一支溶解DNA(作溶媒)攪拌促進(jìn)DNA溶解各加4mL二苯胺試劑作為DNA鑒定劑沸水浴5min,冷卻觀察顏色DNA所在試管溶液變藍(lán)色(續(xù)表)2.實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵(1)取材不能用哺乳動(dòng)物的血細(xì)胞,原因是其成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核。(2)獲取DNA時(shí)要向雞血細(xì)胞液中加入足量的蒸餾水,以使細(xì)胞膜和核膜破裂,把核內(nèi)物質(zhì)釋放出來。

(3)實(shí)驗(yàn)中有6次攪拌,除最后一次攪拌外,前5次攪拌均要朝一個(gè)方向。并且在析出DNA、DNA再溶解和提取DNA中,各步驟攪拌都要輕緩,玻璃棒不要直插燒杯底部,防止DNA分子斷裂。(4)兩次加蒸餾水的目的:①第一次加蒸餾水是為了使血細(xì)胞吸水膨脹破裂(注:植物細(xì)胞是用洗滌劑溶解細(xì)胞膜)。②第二次加蒸餾水是為了稀釋NaCl溶液,析出DNA。(5)用紗布過濾3次的目的:①過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液,提取細(xì)胞核物質(zhì)(濾液)。②濾取0.14mol·L-1NaCl溶液中析出的DNA(黏稠物)。③過濾溶有DNA的2mol·L-1NaCl溶液(濾液)。(6)4次用NaCl溶液的目的:(7)DNA易吸附在玻璃容器上,所以實(shí)驗(yàn)中最好使用塑料燒杯、試管、容器,以減少DNA的損失。①加2mol·L-1NaCl溶液,溶解提取的細(xì)胞核物質(zhì)。②(加蒸餾水)0.14mol·L-1NaCl溶液使DNA析出。

③加2mol·L-1NaCl溶液,溶解濾取的DNA黏稠物。④用2mol·L-1NaCl溶液,溶解絲狀物用于鑒定DNA。3.去除濾液中雜質(zhì)的其他方案(1)方案一:用嫩肉粉(蛋白酶),它能水解蛋白質(zhì),但對(duì)DNA沒有影響。(2)方案二:加熱至60℃~75℃,大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60℃~75℃的高溫而變性,但DNA不變性。[高考探究]考向DNA的粗提取與鑒定

[典例1]某實(shí)驗(yàn)小組以洋蔥組織為實(shí)驗(yàn)材料,進(jìn)行“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)主要過程如下圖所示,請(qǐng)回答下列問題:

(1)步驟一中需加入一定量的洗滌劑和____________對(duì)洋蔥組織進(jìn)行處理,加入前者是為了瓦解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),加入后者的目的是_______________。將攪拌和研磨后的物質(zhì)進(jìn)行過濾,即可得到含有DNA的濾液。(2)步驟二是DNA純化過程中的關(guān)鍵步驟,可以采用以下幾種不同的方法:

①濾液中NaCl濃度在0.14mol/L時(shí)可分離出DNA,若要再次提純,需要將其溶解在________mol/L的NaCl溶液中; ②通常會(huì)向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是__________________________;

③將得到的DNA粗提取物放在60~75℃水浴中保溫10~15min,蛋白質(zhì)被破壞,但仍能得到純度較高的DNA,說明了DNA____________________。

(3)步驟三中向?yàn)V液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精的目的是____________________,依據(jù)的原理是_________________________________________________。得到純凈的DNA后,可利用DNA與____________________在沸水浴條件下發(fā)生顯色反應(yīng)來對(duì)其進(jìn)行鑒定。[答案](1)食鹽(氯化鈉)溶解DNA②分解其中的蛋白質(zhì)③具有較高的穩(wěn)定性(或耐

(2)①2較高溫度)

(3)析出DNA性并與DNA分離DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白質(zhì)變二苯胺[考向預(yù)測(cè)]

1.自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核細(xì)胞中表達(dá)開始,基因工程正式問世了,人們對(duì)DNA的關(guān)注也越來越多。分析并回答下列問題:

(1)從生物組織中提取DNA時(shí),若要獲取含有DNA的濾液,需破碎細(xì)胞;若為雞的成熟紅細(xì)胞,可以加入一定量的蒸餾水,原因是細(xì)胞______________而漲破;若為植物細(xì)胞可以加入一定量的洗滌劑。

(2)利用DNA和RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,可以將它們分離。如DNA的溶解度在NaCl

溶液濃度為________時(shí)最小,可以使DNA與其他雜質(zhì)初步分離。

(3)為了純化提取的DNA,可以用體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精去除濾液中的雜質(zhì)。其原理是DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液,可以推測(cè)溶于酒精中的物質(zhì)可能有____________________。(4)一般DNA的鑒定試劑為________,沸水浴后溶液中有DNA則顏色為________。

解析:(1)常采用吸水的方法使動(dòng)物細(xì)胞漲破。(2)當(dāng)NaCl溶液濃度為0.14mol/L時(shí),DNA溶解度最低。(3)DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)溶于酒精。(4)DNA在沸水浴條件下與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色。答案:(1)吸水(2)0.14mol/L(3)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)(4)二苯胺藍(lán)色2.某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng),具體步驟如下:

材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10g。剪碎后分成兩組,一組置于20℃,另一組置于-20℃條件下保存24h。

DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中,各加入15mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。

第二步:先向6只小燒杯中分別注入10mL濾液,再加入20mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。保存溫度/℃材料花菜辣椒蒜黃20++++++-20+++++++++第三步:取6支試管,分別加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮狀物。

DNA檢測(cè):在上述試管中各加入4mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5min,待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。注:“+”越多表示藍(lán)色越深。分析上述實(shí)驗(yàn)過程,回答下列問題:(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是________________________________________________________________。(2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少__________。(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。①結(jié)論1:與20℃相比,相同實(shí)驗(yàn)材料在-20℃條件下保存,DNA的提取量較多。

結(jié)論2:______________________________________。 ②針對(duì)結(jié)論1,請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲_________________________________________________________________________。

(4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對(duì)DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是:__________________________________________,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。

解析:(1)從表格可以看出,該實(shí)驗(yàn)有兩個(gè)自變量:材料和保存溫度。所以該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱為探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響。低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢,提取的DNA較多。(2)第二步中用玻璃棒攪拌的目的是獲取DNA絮狀物,所以若速度快,易造成DNA斷裂。(3)本實(shí)驗(yàn)的結(jié)論可從兩個(gè)方面來考慮:①相同材料在不同溫度下的結(jié)論;②不同材料在相同溫度下的結(jié)論。(4)氯仿能使蛋白質(zhì)變性,而對(duì)DNA影響極小,所以可將第三步獲得的溶液與氯仿混合,又因?yàn)槁确旅芏却笥谒?,所以蛋白質(zhì)沉淀位于溶液下部,DNA位于上清液中。答案:(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNA提取量的影響(2)DNA斷裂(3)①等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多②低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時(shí)間,吸取上清液考點(diǎn)二蛋白質(zhì)的提取和分離(以血紅蛋白的提取和分離為

例)、PCR反應(yīng)的過程及結(jié)果

[考點(diǎn)梳理]

1.蛋白質(zhì)的提取和分離

(1)樣品處理 ①紅細(xì)胞的洗滌:目的是去除雜蛋白,分離時(shí)采用低速短時(shí)間離心,直至上清液不再呈現(xiàn)黃色,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。 ②血紅蛋白的釋放:在蒸餾水和甲苯(溶解細(xì)胞膜)的作用下,紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)粗分離

①分離血紅蛋白溶液:將攪拌好的混合溶液離心后,將試管中的液體用濾紙過濾,除去脂溶性沉淀層,于分液漏斗中靜置片刻后,分出下層的紅色透明液體。

②透析:取1mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中,將透析袋放入盛有300mL的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液中,透析12h,去除樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。分離的

種類相對(duì)分子質(zhì)量直徑大小運(yùn)動(dòng)方式運(yùn)動(dòng)速度運(yùn)動(dòng)路程洗脫次序大分子

物質(zhì)大大于凝膠顆??障洞怪毕蛳碌倪\(yùn)動(dòng)較快較短先小分子

物質(zhì)小小于凝膠顆??障洞怪毕蛳?、無規(guī)則擴(kuò)散的運(yùn)動(dòng)較慢較長(zhǎng)后(3)純化:利用凝膠色譜柱可對(duì)血紅蛋白進(jìn)行純化。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理,見下表:(4)純度鑒定:使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(可測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量)。項(xiàng)目DNA粗提取與鑒定血紅蛋白的提取與分離材料選擇雞血細(xì)胞等含DNA豐富的生物組織哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞破碎細(xì)胞方式①動(dòng)物細(xì)胞:吸水漲破②植物細(xì)胞:洗滌劑、食鹽攪拌研磨等加蒸餾水和甲苯攪拌去除雜質(zhì)方式①用不同濃度的NaCl溶液處理②用酒精處理③用蛋白酶處理等①透析處理②純化處理鑒定方式二苯胺,沸水浴SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法DNA與血紅蛋白的提取和分離過程的比較2.PCR反應(yīng)的過程及結(jié)果(1)過程①變性:當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí),雙鏈DNA解聚為單鏈。②復(fù)性:溫度下降到50℃左右,兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。

③延伸:溫度上升到72℃左右,溶液中的四種脫氧核苷酸(A,T,G,C)在DNA聚合酶的作用下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。(2)結(jié)果①PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán),每次循環(huán)都包括變性、復(fù)性、延伸三步。②兩引物之間的固定長(zhǎng)度的DNA序列呈指數(shù)擴(kuò)增。項(xiàng)目細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制PCR技術(shù)不同點(diǎn)解旋在解旋酶作用下邊解旋邊復(fù)制80℃~100℃高溫解旋,雙鏈完全分開酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA溫度體內(nèi)溫和條件高溫相同點(diǎn)①需提供DNA復(fù)制的模板②四種脫氧核苷酸作原料③子鏈延伸的方向都是從5′端到3′端(3)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較[高考探究]考向蛋白質(zhì)的提取和分離、PCR反應(yīng)的過程及結(jié)果

[典例2]隨著人類基因組計(jì)劃的推進(jìn)和多種生物基因組測(cè)序工作的完成,人類跨入了后基因組和蛋白質(zhì)組時(shí)代。對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行研究時(shí),首先要獲得純度較高的蛋白質(zhì)。下圖是某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實(shí)驗(yàn)中,準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計(jì)的“血紅蛋白提取、分離流程圖”:請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:

(1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用______反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?,可以破碎紅細(xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是________________。

(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是_________________________,若要盡快達(dá)到理想的透析效果,可以____________________(寫出一種方法)。(3)血紅蛋白的純化是通過____________法將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去。

(4)電泳利用了待分離樣品中各種分子的__________________________________等的差異產(chǎn)生不同遷移速度,實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。

(5)一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如下圖所示,由圖可知攜帶者有____________種血紅蛋白,從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是________________________________________________________________。

[解析](1)洗滌紅細(xì)胞所用的溶液是生理鹽水,根據(jù)滲透作用原理,將紅細(xì)胞置于低滲溶液中,紅細(xì)胞會(huì)吸水漲破,釋放出血紅蛋白。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì);可通過增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液等方法縮短透析時(shí)間,能盡快達(dá)到理想的透析效果。(3)樣品純化是通過凝膠色譜法去掉分子量較大的雜質(zhì)。凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程長(zhǎng),移動(dòng)的速度慢;相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,路程短,移動(dòng)的速度快。(4)由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異,在電泳過程中會(huì)產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。(5)根據(jù)圖示可知,鐮刀型細(xì)胞貧血癥的攜帶者含有兩種血紅蛋白,原因是攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對(duì)等位基因,分別控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。[答案](1)生理鹽水(2)除去小分子雜質(zhì)滲透(作用)原理 增加緩沖液的量或及時(shí)更換緩沖液(3)凝膠色譜法(4)帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀攜帶者具有一對(duì)等位基因,可以控制合成兩種不同

(5)2的蛋白質(zhì)[考向預(yù)測(cè)]

3.紅細(xì)胞中含有大量的血紅蛋白,紅細(xì)胞的功能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2和CO2,可選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來提取和分離血紅蛋白。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:

(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:________________________、________________、__________________和______________________。

(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液,要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉,取血回來,馬上進(jìn)行離心,收集血紅蛋白溶液。

①加入檸檬酸鈉的目的是________________________________________________________________________。 ②以上所述的過程即是樣品處理,它包括____________、__________________、收集血紅蛋白溶液。

(3)然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是________________________________________________________________________。

(4)電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及__________________、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。

解析:血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步,分別是:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。在實(shí)驗(yàn)中加入檸檬酸鈉的目的是防止血液凝固;樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、收集血紅蛋白溶液。樣品純化的目的是通過凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去。電泳法利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。答案:(1)樣品處理粗分離純化純度鑒定(2)①防止血液凝固②紅細(xì)胞的洗滌血紅蛋白的釋放(3)通過凝膠色譜法將相對(duì)分子量大的雜蛋白除去(4)分子的大小提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法實(shí)驗(yàn)原理利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑獲得芳香油方法步驟①水蒸氣蒸餾②分離油層③除水過濾①石灰水浸泡、漂洗②壓榨、過濾、靜置③再次過濾①粉碎、干燥②萃取、過濾③濃縮考點(diǎn)三植物有效成分的提取

[考點(diǎn)梳理]1.植物有效成分提取的三種方法的比較提取方法水蒸氣蒸餾法壓榨法有機(jī)溶劑萃取法適用范圍適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單易行,便于分離生產(chǎn)成本低,易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功能出油率高,易分離局限性水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解等問題分離較為困難,出油率相對(duì)較低使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量(續(xù)表)

(1)水蒸氣蒸餾法要適當(dāng)延長(zhǎng)蒸餾時(shí)間,溫度不能太高。

(2)壓榨法必須在常溫條件下進(jìn)行,否則會(huì)影響產(chǎn)物的產(chǎn)量和質(zhì)量;壓榨時(shí)原料必須要浸透,這樣壓榨時(shí)不會(huì)滑脫,出油率高,不堵塞篩眼;使用石灰水充分浸泡原料的目的是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時(shí)滑脫,提高出油率。[高考探究]考向植物有效成分的提取方法和過程

[典例3](2015年新課標(biāo)Ⅱ卷)回答與胡蘿卜素有關(guān)的問題:

(1)胡蘿卜含有的胡蘿卜素中,最主要的是________(填“α-胡蘿卜素”“β-胡蘿卜素”或“γ-胡蘿卜素”),該胡蘿卜素在人體內(nèi)可以轉(zhuǎn)變成兩分子______________,后者缺乏會(huì)引起人在弱光下視物不清的病癥,該疾病稱為__________,胡蘿卜素是____________(填“揮發(fā)性”或“非揮發(fā)性”)物質(zhì)。

(2)工業(yè)生產(chǎn)上,用養(yǎng)殖的鹽藻作為原料提取胡蘿卜素時(shí),__________(填“需要”或“不需要”)將鮮活的鹽藻干燥。

(3)現(xiàn)有乙醇和乙酸乙酯兩種溶劑,應(yīng)選用其中的___________________作為胡蘿卜素的萃取劑,不選用另外一種的理由是_______________________________________________。[答案](1)β-胡蘿卜素維生素A夜盲癥非揮發(fā)性(2)需要(3)乙酸乙酯萃取胡蘿卜素的有機(jī)溶劑應(yīng)不與水混溶,而乙醇為水溶性有機(jī)溶劑[考向預(yù)測(cè)]

4.(2017年新課標(biāo)Ⅲ卷)綠色植物甲含有物質(zhì)W,該物質(zhì)為無色針狀晶體,易溶于極性有機(jī)溶劑,難溶于水,且受熱、受潮易分解。其提取流程為:植物甲→粉碎→加溶劑→振蕩→收集提取液→活性炭處理→過濾去除活性炭→蒸餾(含回收溶劑)→重結(jié)晶→成品。回答下列問題:

(1)在提取物質(zhì)W時(shí),最好應(yīng)選用的一種原料是__________________(填“高溫烘干”“晾干”或“新鮮”)的植物甲,不宜選用其他兩種的原因是_____________________________________________________________。

(2)提取物質(zhì)W時(shí),振蕩的作用是______________________________________________________________________。

(3)活性炭具有很強(qiáng)的吸附能力,在提取過程中,用活性炭處理提取液的目的是______________________。

(4)現(xiàn)有丙酮(沸點(diǎn)56℃)、乙醇(沸點(diǎn)約78℃)兩種溶劑,在提取物質(zhì)W時(shí),應(yīng)選用丙酮作用提取劑,理由是_______________________________。(5)該實(shí)驗(yàn)操作過程中應(yīng)注意的事項(xiàng)是_______________________________(答出兩點(diǎn)即可)。

解析:(1)依據(jù)題干信息(受熱、受潮易分解)進(jìn)行推斷即可得知。(2)振蕩易于溶解,是基本實(shí)驗(yàn)知識(shí)。(3)根據(jù)題干信息可知,活性炭具有吸附能力,雜質(zhì)色素易被吸附。(4)根據(jù)題干信息,受熱易分解,所以選擇沸點(diǎn)低的丙酮。(5)根據(jù)題干信息,受熱易分解,所以注意溫度控制;丙酮易揮發(fā),對(duì)人體有害,所以操作時(shí)注意通風(fēng);因?yàn)橐獪p少物質(zhì)W的分解,所以操作要快。答案:(1)晾干高溫烘干過程中,植物甲中的物質(zhì)W易被破壞;新鮮的植物甲含水量高,用于提取的極性有機(jī)溶劑會(huì)被稀釋,進(jìn)而降低對(duì)物質(zhì)W的提取效果

(2)使原料和溶劑充分混勻

(3)去除提取液中的色素

(4)丙酮沸點(diǎn)低于乙醇,蒸餾時(shí)物質(zhì)W分解較少

(5)在溫度較低的情況下操作,注意通風(fēng)

5.(2016年吉林長(zhǎng)春質(zhì)檢)玫瑰在人們生活中具有多種用途。某同學(xué)進(jìn)行玫瑰的組織培養(yǎng)和玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答下列問題:(1)在進(jìn)行玫瑰組織培養(yǎng)時(shí),可以選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝作________,并要進(jìn)行________處理。

(2)玫瑰組織培養(yǎng)接種操作前,用體積分?jǐn)?shù)為70%的_______將工作臺(tái)擦拭一遍。接種后,還要經(jīng)過____________________、______________和栽培才能得到開花的玫瑰。

(3)某同學(xué)用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油,簡(jiǎn)便易行的是________(填“水中”“水上”或“水氣”)蒸餾的方法。蒸餾過程中需要監(jiān)控蒸餾溫度和時(shí)間,原因是__________________________________________________。

(4)使收集的乳濁液水油分層,需向其中加入________。要除去分液得到的油層中的水分,需向其中加入無水________。

解析:(1)植物組織培養(yǎng)時(shí),應(yīng)選取生長(zhǎng)旺盛的嫩枝作外植體,并對(duì)外植體進(jìn)行消毒處理。(2)在接種操作前要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭工作臺(tái),接種完成后還要經(jīng)過培養(yǎng)、移栽和栽培等過程。(3)用水蒸氣蒸餾法提取玫瑰精油時(shí),最簡(jiǎn)便易行的是水中蒸餾的方法,在蒸餾過程中,如果蒸餾溫度太高、時(shí)間太短,產(chǎn)品品質(zhì)就較差,因此要控制好蒸餾溫度和時(shí)間。(4)向收集的乳濁液中加入NaCl,可以增加水層的密度,利于油水分層,向分離出的油層中加入無水Na2SO4

可以除去油層中的水分。答案:(1)外植體消毒(2)酒精培養(yǎng)移栽(3)水中如果溫度太高,時(shí)間太短,產(chǎn)品質(zhì)量就比較差(4)NaClNa2SO46.(2017年廣西桂林考前模擬)根據(jù)相關(guān)知識(shí),回答胡蘿卜素提取和酶應(yīng)用方面的問題:

(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí),通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和__________________,以提高萃取效率;水蒸氣蒸餾法____________(填“適合”或“不適合”)胡蘿卜素的提取,原因是____________________________________;鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí),通??刹捎胈______________法,并以____________樣品作為對(duì)照。

(2)用萃取法提取薄荷油時(shí),采用的溶劑是__________,原理是______

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