一、前言演講人目錄01.前言07.健康教育03.護理評估05.護理目標與措施02.病例介紹04.護理診斷06.并發(fā)癥的觀察及護理08.總結(jié)病原生物與免疫學：免疫細胞凍存復蘇課件01前言前言作為從事腫瘤免疫細胞治療護理工作近十年的臨床護士，我始終記得第一次參與免疫細胞凍存復蘇操作時的緊張與震撼——零下196℃的液氮罐里，那些承載著患者希望的免疫細胞被“封存”，而復蘇時37℃水浴鍋中逐漸恢復活性的細胞懸液，又像重新點燃的生命火種。這些年，隨著CAR-T、CIK等細胞治療技術(shù)在血液腫瘤、實體瘤領(lǐng)域的突破，免疫細胞的凍存與復蘇已從實驗室技術(shù)延伸為臨床治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。對我們護理團隊而言，這不僅是一項操作技術(shù)，更是連接“生命存儲”與“精準治療”的橋梁。我曾見過患者因凍存細胞活性不足而延誤治療時的焦慮，也見證過復蘇后細胞存活率達95%以上時醫(yī)患雙方的熱淚。今天，我想以親身參與的一例淋巴瘤患者護理經(jīng)歷為線索，和大家分享免疫細胞凍存復蘇全流程中的護理要點，希望能讓更多護理同仁理解：每一個凍存管的標簽核對、每一度水浴溫度的精準控制、每一次細胞活性的鏡下觀察，都是在為患者的生命質(zhì)量“加碼”。02病例介紹病例介紹2023年3月，我們科室收治了42歲的淋巴瘤患者王女士。她確診為復發(fā)難治性彌漫大B細胞淋巴瘤（r/rDLBCL），經(jīng)二線化療無效后，轉(zhuǎn)入我科接受抗CD19CAR-T細胞治療。根據(jù)治療方案，需采集患者外周血單個核細胞（PBMC）進行CAR-T細胞制備，部分未立即使用的細胞需凍存?zhèn)溆?，待治療前復蘇回輸。王女士的細胞采集過程順利，共獲得2×10?個PBMC，其中1×10?個用于CAR-T制備，剩余1×10?個（分5支凍存管，每管2×10?個）需凍存于-196℃液氮罐中。制備的CAR-T細胞因擴增周期較長（約14天），且患者存在骨髓抑制（白細胞2.1×10?/L，中性粒細胞0.8×10?/L），醫(yī)生決定先回輸凍存的自體PBMC以短暫提升免疫功能，待CAR-T細胞制備完成后再進行最終治療。病例介紹這個病例的特殊性在于：凍存細胞不僅是“備用資源”，更承擔了橋接治療的作用，因此對凍存復蘇的時效性、細胞活性要求更高。從凍存前的細胞質(zhì)量評估，到復蘇時的復溫速率控制，每一步都直接影響患者的治療窗。03護理評估護理評估接到王女士的護理任務后，我們立即啟動了“細胞治療全周期護理評估表”，從患者和細胞兩個維度展開評估?；颊呔S度評估生理狀態(tài)：王女士KPS評分70分（能自主活動但需部分幫助），存在乏力、間斷低熱（37.5-38℃），實驗室檢查顯示C反應蛋白（CRP）28mg/L（正常＜10mg/L），提示輕度炎癥；凝血功能正常（PT12.3s，APTT34.5s），無出血傾向。這些指標影響著細胞回輸時的風險預判——炎癥狀態(tài)可能增加輸注反應概率，需重點監(jiān)測。心理狀態(tài)：入院時王女士反復詢問“凍存的細胞會不會‘凍死’”“復蘇后還能用嗎”，睡眠量表（PSQI）評分10分（＞7分提示睡眠障礙），焦慮自評量表（SAS）評分58分（輕度焦慮）。她的丈夫透露，王女士因多次治療失敗已產(chǎn)生“最后一搏”的心理，對細胞凍存復蘇技術(shù)的信任度直接影響治療依從性。細胞維度評估凍存前質(zhì)量：細胞采集后立即送檢，流式細胞術(shù)檢測顯示活細胞率98%，臺盼藍拒染法計數(shù)細胞濃度2.1×10?/mL（符合凍存要求：＞1×10?/mL），支原體檢測陰性（PCR法），內(nèi)毒素＜0.5EU/mL（符合《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導原則》）。這些數(shù)據(jù)是凍存的“起點”，若細胞本身活性不足，凍存后復蘇效果必然打折扣。凍存過程追溯：細胞凍存時采用程序降溫法（從4℃降至-80℃，速率-1℃/min），保護劑為10%DMSO（二甲基亞砜）+90%自體血漿。我們核對了凍存記錄：降溫儀參數(shù)設(shè)置正確，液氮罐編號（A-03）、凍存位置（第5層第8格）、凍存時間（2023年3月15日14:30）均記錄清晰。這一步是為復蘇時“精準定位”做準備——曾有同事因凍存位置記錄模糊，在緊急復蘇時耗時20分鐘尋找凍存管，險些延誤治療。細胞維度評估復蘇環(huán)境準備：復蘇前2小時，我們檢查了水浴鍋（設(shè)定37℃±0.5℃，提前校準）、超凈工作臺（紫外線消毒30分鐘，沉降菌檢測合格）、倒置顯微鏡（調(diào)試至100倍物鏡）、細胞計數(shù)板（清潔無劃痕）。這些細節(jié)常被忽視，卻是保證復蘇過程無菌、細胞活性的基礎(chǔ)——我曾見過因水浴鍋溫度偏差2℃，導致細胞存活率從90%降至75%的教訓。04護理診斷護理診斷基于評估結(jié)果，我們梳理出以下核心護理問題：焦慮與擔心細胞凍存復蘇效果及治療預后有關(guān)：王女士反復詢問技術(shù)原理，夜間入睡困難，SAS評分58分。知識缺乏（特定）與缺乏免疫細胞凍存復蘇相關(guān)知識有關(guān)：患者對“為什么用DMSO”“凍存后細胞會不會變異”等問題認知不足，影響配合度。潛在并發(fā)癥：細胞活性下降與凍存復蘇操作不規(guī)范或保護劑毒性有關(guān)：凍存細胞需經(jīng)歷“降溫-低溫保存-復溫”三重應激，任何環(huán)節(jié)偏差都可能導致細胞膜損傷、凋亡增加。潛在并發(fā)癥：輸注反應與細胞回輸后免疫激活或保護劑殘留有關(guān)：DMSO可能引起惡心、頭痛，活化的免疫細胞可能誘發(fā)細胞因子釋放綜合征（CRS）。05護理目標與措施護理目標與措施針對護理診斷，我們制定了“全程參與、精準干預”的護理計劃，涵蓋心理支持、操作規(guī)范、風險預防三大方向。緩解焦慮：建立“技術(shù)-情感”雙信任目標：1周內(nèi)SAS評分降至50分以下，患者能復述凍存復蘇基本流程。措施：可視化教育：用自制流程圖（采集→分離→凍存→復蘇→回輸）結(jié)合動畫演示，向王女士解釋“細胞凍存像‘冬眠’，復蘇是‘喚醒’，DMSO是‘防凍劑’”。她曾問：“DMSO有毒嗎？”我們拿出文獻（《細胞治療用凍存保護劑研究進展》）說明：“治療級DMSO純度＞99.9%，回輸前會離心去除，殘留量＜0.1%，安全可控?！背晒Π咐窒恚貉?位曾接受同類治療的患者分享經(jīng)歷，其中一位張先生特別提到：“我凍存的細胞復蘇后存活率92%，回輸后沒發(fā)燒，現(xiàn)在都正常上班了?！蓖跖柯牶竺黠@放松，說：“原來不是我一個人在擔心?！本徑饨箲]：建立“技術(shù)-情感”雙信任參與式溝通：允許王女士觀看凍存管放入液氮罐的過程（隔著操作間玻璃），并解釋：“這根管子里有2000萬個‘小戰(zhàn)士’，它們在液氮里‘睡覺’，等需要時我們會輕輕‘叫醒’它們?！边@種“眼見為實”的體驗，比單純說教更能緩解焦慮。保障細胞活性：把控“凍存-復蘇”黃金操作鏈目標：復蘇后細胞存活率≥90%，活細胞濃度≥1.5×10?/mL。措施：凍存階段：細胞分離后30分鐘內(nèi)開始凍存（避免體外放置過久導致活性下降）；程序降溫時專人值守，每5分鐘記錄溫度（實際測得：4℃→-20℃用20分鐘，-20℃→-80℃用60分鐘，速率符合-1℃/min）；凍存管標記“王XX/20230315/CD19”，采用“姓名+日期+細胞類型”三重標識，避免混淆（曾有外院因標記不清導致細胞誤輸事件）。復蘇階段（關(guān)鍵中的關(guān)鍵?。罕Ｕ霞毎钚裕喊芽亍皟龃?復蘇”黃金操作鏈從液氮罐取出凍存管時戴防凍手套（避免凍傷），用鑷子快速轉(zhuǎn)移（暴露時間＜1分鐘，減少復溫前的溫度波動）；立即浸入37℃水浴鍋（水面低于管口，防止污染），持續(xù)晃動管體（加速融化），1分鐘內(nèi)完全溶解（觀察到管內(nèi)冰屑消失即可，復溫過慢會導致冰晶形成，損傷細胞）；融化后迅速轉(zhuǎn)移至超凈臺，加入預溫至37℃的復蘇培養(yǎng)基（含10%FBS），采用“慢加慢混”原則（先加1mL培養(yǎng)基，靜置2分鐘讓DMSO緩慢稀釋，再逐滴補加至10mL，避免滲透壓驟變導致細胞破裂）；離心（200g，5分鐘）后棄上清，用生理鹽水重懸細胞，重復洗滌2次（減少DMSO殘留）；最后取20μL細胞懸液，用臺盼藍染色計數(shù)（活細胞不著色，死細胞藍色），鏡下觀察：10個視野平均活細胞率93%，濃度1.8×10?/mL，符合回輸標準！預防輸注反應：構(gòu)建“監(jiān)測-干預”防護網(wǎng)目標：回輸過程中無3級及以上CRS，DMSO相關(guān)不良反應（惡心、頭痛）發(fā)生率≤10%。措施：預處理：回輸前30分鐘給予地塞米松5mg（減輕炎癥反應）、苯海拉明25mg（預防過敏），并建立靜脈通路（選擇上肢粗直靜脈，避免鋼針，減少外滲風險）。輸注中監(jiān)測：前15分鐘慢速輸注（10滴/分），密切觀察：王女士訴“有點頭暈”，測血壓110/70mmHg（基礎(chǔ)值120/80mmHg），心率95次/分（基礎(chǔ)值85次/分），考慮為DMSO輕微反應，未處理，繼續(xù)觀察；預防輸注反應：構(gòu)建“監(jiān)測-干預”防護網(wǎng)15分鐘后無加重，調(diào)至20滴/分，每15分鐘記錄生命體征（體溫、血壓、心率、SpO?）；01同時監(jiān)測細胞因子（IL-6、TNF-α），回輸后2小時IL-6從基線25pg/mL升至58pg/mL（未達3級CRS閾值100pg/mL），無需托珠單抗干預。01輸注后管理：回輸結(jié)束后留觀4小時，王女士未出現(xiàn)高熱（最高37.8℃）、呼吸困難等嚴重反應，僅訴“胃部輕微不適”，給予奧美拉唑20mg靜推緩解。0106并發(fā)癥的觀察及護理并發(fā)癥的觀察及護理免疫細胞凍存復蘇的并發(fā)癥可分為“細胞相關(guān)”和“患者相關(guān)”兩類，需針對性預防。細胞相關(guān)并發(fā)癥：活性下降或污染表現(xiàn)：復蘇后臺盼藍染色顯示活細胞率＜80%，或細菌/真菌培養(yǎng)陽性（渾濁、有菌落）。護理：凍存前嚴格篩查細胞質(zhì)量（活率＞95%、無支原體污染）；復蘇時控制復溫速率（37℃水浴，1分鐘內(nèi)融化），避免反復凍融（每凍融一次，活率下降約10%）；若發(fā)生污染，立即上報醫(yī)生，評估是否啟用備用凍存管（本例中我們提前凍存了5支管，1支用于復蘇，剩余4支仍保存）。患者相關(guān)并發(fā)癥：輸注反應常見類型：輕度CRS（1-2級）：發(fā)熱（＜38.5℃）、乏力、肌痛；重度CRS（3-4級）：高熱（≥38.5℃）、低血壓、低氧血癥；DMSO毒性反應：惡心、嘔吐、頭痛、嗜睡（血中DMSO濃度＞0.5%時出現(xiàn)）。護理要點：提前備好搶救藥品（托珠單抗、腎上腺素、升壓藥）、設(shè)備（心電監(jiān)護儀、除顫儀）；對高?；颊撸ㄈ缤跖坑醒装Y狀態(tài)），回輸前檢測基線細胞因子水平，回輸后每2小時復查；出現(xiàn)3級CRS時，立即暫停輸注，給予托珠單抗8mg/kg靜滴，同時進行物理降溫（冰袋、降溫毯），維持收縮壓≥90mmHg（必要時用去甲腎上腺素）?；颊呦嚓P(guān)并發(fā)癥：輸注反應王女士回輸后24小時內(nèi)體溫最高37.8℃，未達CRS診斷標準，僅需多飲水、物理降溫（溫水擦?。?，36小時后體溫恢復正常。這得益于我們對細胞活性的嚴格把控（高活性細胞減少過度免疫激活）和預處理的規(guī)范執(zhí)行。07健康教育健康教育免疫細胞凍存復蘇的成功，離不開患者的主動配合。我們針對王女士的需求，制定了“分階段”健康教育計劃：凍存前：消除顧慮，明確配合事項知識講解：用通俗語言解釋“為什么凍存”（細胞制備需要時間，凍存是為了“備用”）、“凍存會不會傷害細胞”（程序降溫+保護劑能最大程度保存活性）；配合要點：告知“采集當天需空腹4小時”（避免血脂過高影響細胞分離）、“采集后24小時內(nèi)避免劇烈運動”（防止血流動力學波動影響細胞質(zhì)量）。復蘇后：關(guān)注身體信號，及時反饋輸注反應識別：教王女士及家屬觀察“發(fā)熱（體溫＞38.5℃）、呼吸急促（＞20次/分）、皮疹”等癥狀，強調(diào)“哪怕輕微不適也要告訴護士”；生活指導：回輸后3天內(nèi)避免生冷飲食（預防感染）、保持穿刺點干燥（24小時內(nèi)不洗澡）、保證睡眠（每日≥7小時）。長期：建立隨訪意識告知“凍存細胞的保存期限”（理論上可保存20年以上，但建議每5年檢測一次活性）；提醒“若后續(xù)需再次使用，需提前3天聯(lián)系科室（預留復蘇和質(zhì)量檢測時間）”。王女士出院時說：“原來凍存復蘇不是‘把細胞放冰箱’這么簡單，你們的每一步都在為我‘把關(guān)’?！边@讓我深刻體會到：健康教育不僅是知識傳遞，更是信任的建立。08總結(jié)總結(jié)從王女士的護理經(jīng)歷中，我更深刻地理解了免疫細胞凍存復蘇的“雙重屬性”——它既是一項精密的實驗室技術(shù)，更是一場充滿人文關(guān)懷的生命守護。回顧整個過程，我們總結(jié)了三點關(guān)鍵經(jīng)驗：細節(jié)決定成?。簭膬龃婀艿臉擞浀剿″伒臏囟?，從細胞計數(shù)的準確性到患者的心理狀態(tài)，每一個“小細節(jié)”都可能影響最終療效；團隊協(xié)作是核心：護理、檢驗、臨床醫(yī)生需無縫銜接（本例中我們與細胞制備實驗室每2小時溝通一次進度）；