ICS11.120.99CCSB38QASIT/QAS148—2026本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由中國科學院西北高原生物研究所提出。本文件由青海省標準化協(xié)會歸口。本文件起草單位：中國科學院西北高原生物研究所、中國科學院新疆理化技術研究所、西寧海關技術中心、青海省藥品檢驗檢測院、東營市工業(yè)產(chǎn)品檢驗與計量檢定中心、淮安市食品藥品檢驗所。本文件主要起草人：汪園、李玉林、譚亮、陳濤、王環(huán)、馬家麟、楊麗、薛賓、丁成麗、焦興蘋、賈靜、王萍。T/QAS148—20262獐牙菜屬植物藏茵陳及其制劑中雛菊葉龍膽酮的測定高效液相色譜法本文件描述了獐牙菜屬植物藏茵陳及其制劑中雛菊葉龍膽酮的測定高效液相色譜法。本文件適用于獐牙菜屬植物藏茵陳包括抱莖獐牙菜、川西獐牙菜和印度獐牙菜等及其制劑（藏茵陳膠囊、藏茵陳片）中雛菊葉龍膽酮的測定。本文件雛菊葉龍膽酮的檢出限為0.001g/100g；定量限為0.003g/100g。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4原理試樣中的雛菊葉龍膽酮經(jīng)50%乙醇溶液熱回流提取60min后，用配有紫外檢測器或二極管矩陣檢測器的高效液相色譜儀，在波長為253nm下進行測定，以雛菊葉龍膽酮的保留時間定性，外標法定量。5試劑和材料5.1試劑5.1.1水：GB/T6682，一級5.1.2無水乙醇（C2H6O）：色譜純。5.1.3甲醇（CH3OH）：色譜純。5.1.4甲酸（HCOOH）：色譜純。5.1.5二甲基亞砜（C2H6OS）：色譜純。5.1.6雛菊葉龍膽酮對照品（C14H10O6CAS號2798-25-6，純度不低于98%。5.2試劑配制5.2.150%乙醇溶液的配制：量取無水乙醇（5.1.2）500mL于1000mL容量瓶中，以水稀釋至刻度，搖勻。5.2.20.2%甲酸溶液配制：量取甲酸（5.1.4）2mL至1000mL容量瓶中，以水稀釋至刻度，搖勻。5.2.3雛菊葉龍膽酮對照品儲備液（1.00mg/mL精密稱取雛菊葉龍膽酮對照品50mg（精確至0.01mg）于50mL容量瓶中，加入25mL二甲基亞砜（5.1.5）使之溶解，再用甲醇（5.1.3）稀釋并定容、混勻。于4℃下，貯存于棕色樣品瓶中，保存有效期為1個月。5.2.4雛菊葉龍膽酮標準系列溶液：準確移取適量的雛菊葉龍膽酮對照品儲備液（5.2.3分別于10mL容量瓶中，用甲醇（5.1.3）稀釋并定容，混勻，配制成質(zhì)量濃度分別為1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、250μg/mL、500μg/mL標準系列溶液，根據(jù)儀器性能和檢測需要選擇不少于6個濃度點，供液相色譜儀測定，臨用現(xiàn)配。注：也可根據(jù)檢測需要配制成其他適宜的質(zhì)量濃度。T/QAS148—202636儀器和設備6.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測器或二極管矩陣檢測器。6.2分析天平：感量0.01mg和0.1mg。6.3回流裝置：具塞錐形瓶和冷凝管。6.4恒溫水浴鍋：控溫精度±2℃。6.5粉碎機：可將樣品粉碎并通過65目篩。6.6微孔濾膜：孔徑0.45μm，有機系。7分析步驟7.1試樣制備7.1.1藥材：除去可見雜質(zhì)后，取有代表性試樣50g～100g，用藥材粉碎機粉碎后，過65目篩，混勻，裝入密閉容器中，陰涼干燥處保存。7.1.2片劑：取不少于20?；虿簧儆?g樣品，經(jīng)高速粉碎機或研缽磨成粉狀，混勻，裝入密閉容器中，陰涼干燥處保存。7.1.3膠囊：取不少于20?；虿簧儆?g樣品，取其內(nèi)容物，混勻，必要時研細，裝入密閉容器中，陰涼干燥處保存。7.2試樣溶液的制備平行做兩份試驗。稱取試樣0.5g（精確至0.1mg置于150mL具塞錐形瓶中，精密加入50%乙醇溶液（5.2.1）20mL，密塞，稱定重量，置水浴中加熱回流60min，不時振蕩，防止試樣黏附在瓶壁上，放冷，再稱定重量，用50%乙醇溶液（5.2.1）補足減失的重量，搖勻，過0.45μm微孔濾膜，上機測定。7.3測定7.3.1液相色譜參考條件7.3.1.1色譜柱：C18柱，長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm，或性能相當者。7.3.1.2流動相：A相為0.2%甲酸溶液（5.2.2），B相為甲醇（5.1.3），梯度洗脫程序見表1。7.3.1.3流速：1.0mL/min。7.3.1.4柱溫：30℃。7.3.1.5檢測波長：253nm。表1梯度洗脫程序A相/%07.3.2標準系列溶液和試樣溶液測定在儀器的最佳條件下，分別取雛菊葉龍膽酮標準系列溶液（5.2.4）和試樣溶液（7.2）上機測定。雛菊葉龍膽酮的液相色譜圖見附錄A。7.3.3定性以保留時間定性，試樣溶液中雛菊葉龍膽酮色譜峰的保留時間應與質(zhì)量濃度相當?shù)臉藴氏盗腥芤褐须r菊葉龍膽酮色譜峰的保留時間一致，其相對偏差應在±2.5%之內(nèi)。7.3.4定量T/QAS148—20264以雛菊葉龍膽酮的質(zhì)量濃度為橫坐標，以色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其相關系數(shù)應不低于0.99。試樣溶液中雛菊葉龍膽酮的質(zhì)量濃度應在標準曲線的線性范圍內(nèi)，若超出線性范圍，應將試樣溶液用乙醇溶液（5.2.1）稀釋后，重新測定。8數(shù)據(jù)處理試樣中雛菊葉龍膽酮的含量以質(zhì)量分數(shù)ω計，數(shù)值以g/100g表示。按公式（1）計算：式中：ρ——從標準曲線得到的試樣溶液中雛菊葉龍膽酮質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV——試樣溶液（7.2）的定容體積，單位為毫升（mL）；10000——換算系數(shù)；n——超出標準曲線范圍后的稀釋倍數(shù)；m——試樣質(zhì)量，單位為克（g）。測定結果以平行測定的算術平均值表示，保留3位有效數(shù)字。9精密度在重復條件下，獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不應超過算術平均值的10%。T/QAS148—20265（資料性