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文檔簡(jiǎn)介

細(xì)胞分裂課件匯報(bào)人:XXXX2025年11月23日CONTENTS目錄01

細(xì)胞分裂概述02

有絲分裂的過(guò)程與機(jī)制03

動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂的差異04

減數(shù)分裂的特殊過(guò)程CONTENTS目錄05

無(wú)絲分裂與原核細(xì)胞分裂06

細(xì)胞分裂的實(shí)驗(yàn)觀察技術(shù)07

細(xì)胞分裂的調(diào)控機(jī)制08

細(xì)胞分裂的生命意義細(xì)胞分裂概述01細(xì)胞分裂的定義與生理作用

細(xì)胞分裂的核心定義細(xì)胞分裂(celldivision)是活細(xì)胞增殖的基本過(guò)程,指一個(gè)母細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞核分裂和細(xì)胞質(zhì)分裂,形成兩個(gè)遺傳物質(zhì)穩(wěn)定的子細(xì)胞的生命活動(dòng)。1855年德國(guó)學(xué)者魏爾肖提出"一切細(xì)胞來(lái)自細(xì)胞"的論斷,確立其在生命延續(xù)中的核心地位。

細(xì)胞分裂的物質(zhì)基礎(chǔ)分裂過(guò)程中,母細(xì)胞需完成遺傳物質(zhì)(DNA)的復(fù)制與分配,以及細(xì)胞質(zhì)成分(如細(xì)胞器、蛋白質(zhì))的均等分配。在單細(xì)胞生物中是繁殖方式,在多細(xì)胞生物中則是生長(zhǎng)、發(fā)育與組織修復(fù)的基礎(chǔ)。

細(xì)胞分裂的生理功能主要功能包括:生物體生長(zhǎng)(如胚胎發(fā)育中細(xì)胞數(shù)量激增)、組織更新(如人體皮膚細(xì)胞每28天更替一次)、損傷修復(fù)(如傷口愈合時(shí)成纖維細(xì)胞快速分裂),以及維持核質(zhì)比例平衡與細(xì)胞大小調(diào)控。

細(xì)胞分裂素的調(diào)控作用細(xì)胞分裂素可誘導(dǎo)靜止細(xì)胞重新進(jìn)入分裂周期,調(diào)節(jié)根尖與莖尖的生長(zhǎng)分化(高濃度促芽形成,低濃度促根生長(zhǎng)),并通過(guò)延緩葉綠素降解實(shí)現(xiàn)葉片保綠,其作用機(jī)制與tRNA代謝及蛋白質(zhì)合成調(diào)控相關(guān)。細(xì)胞分裂的研究歷史與魏爾肖的貢獻(xiàn)早期觀察:細(xì)胞分裂現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)1841年,德國(guó)學(xué)者雷馬克(R.Remak)首次在雞胚血球細(xì)胞中觀察到細(xì)胞核分裂產(chǎn)生兩個(gè)子細(xì)胞核的完整過(guò)程,為細(xì)胞分裂研究奠定基礎(chǔ)。魏爾肖的“細(xì)胞學(xué)說(shuō)”里程碑1855年,德國(guó)學(xué)者魏爾肖(R.Virchow)提出“一切細(xì)胞來(lái)自細(xì)胞”的著名論斷,認(rèn)為個(gè)體所有細(xì)胞均由原有細(xì)胞分裂產(chǎn)生,否定了自然發(fā)生學(xué)說(shuō)。分裂機(jī)制研究的早期探索19世紀(jì)中后期,霍夫邁斯特(W.Hofmeister)通過(guò)碘液染色證實(shí)染色體存在;施特拉斯布格(E.Strasburger)首次論證動(dòng)植物有絲分裂過(guò)程的統(tǒng)一性,并命名前期、中期、后期。細(xì)胞分裂研究的意義魏爾肖的理論與后續(xù)研究共同確立了細(xì)胞分裂是生物體生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的基礎(chǔ),為現(xiàn)代細(xì)胞生物學(xué)和遺傳學(xué)發(fā)展提供了核心框架。細(xì)胞分裂的基本類型與分類依據(jù)

按生物類型與分裂機(jī)制分類原核生物主要通過(guò)二分裂方式增殖,如細(xì)菌通過(guò)DNA復(fù)制后細(xì)胞膜內(nèi)陷完成分裂;真核生物則包括有絲分裂、減數(shù)分裂和無(wú)絲分裂三種方式,其核心區(qū)別在于遺傳物質(zhì)是否精確分配及是否形成紡錘體結(jié)構(gòu)。

有絲分裂:體細(xì)胞增殖的主導(dǎo)方式有絲分裂是真核細(xì)胞分裂的基本形式,通過(guò)間期DNA復(fù)制及分裂期(前、中、后、末)的染色體精確分離,保證子細(xì)胞與母細(xì)胞遺傳物質(zhì)一致,是生長(zhǎng)、發(fā)育和修復(fù)的基礎(chǔ),如人體皮膚細(xì)胞更新。

減數(shù)分裂:生殖細(xì)胞形成的特殊分裂減數(shù)分裂是生殖細(xì)胞特有的分裂方式,DNA復(fù)制一次后連續(xù)分裂兩次,最終形成染色體數(shù)目減半的配子(如精子、卵細(xì)胞),通過(guò)同源染色體交叉互換和自由組合增加遺傳多樣性,是有性生殖的核心機(jī)制。

無(wú)絲分裂:簡(jiǎn)單快速的分裂方式無(wú)絲分裂過(guò)程中無(wú)紡錘體和染色體明顯變化,細(xì)胞核直接縊裂為二,如蛙的紅細(xì)胞、植物胚乳細(xì)胞分裂。該方式雖快速但可能導(dǎo)致遺傳物質(zhì)分配不均,主要見(jiàn)于低等生物或高等生物的特定分化細(xì)胞。有絲分裂的過(guò)程與機(jī)制02細(xì)胞周期:間期的物質(zhì)準(zhǔn)備

間期的時(shí)間占比與核心任務(wù)間期是細(xì)胞周期中持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)的階段,約占整個(gè)細(xì)胞周期的90%-95%。此階段細(xì)胞主要進(jìn)行DNA復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成,為后續(xù)分裂期(M期)做物質(zhì)準(zhǔn)備,同時(shí)細(xì)胞體積會(huì)適度增大。

G1期:生長(zhǎng)與分裂決定又稱DNA合成前期,主要進(jìn)行RNA和蛋白質(zhì)的合成,為S期DNA復(fù)制做準(zhǔn)備。細(xì)胞在此期會(huì)評(píng)估自身生長(zhǎng)狀態(tài)和外界環(huán)境,通過(guò)G1/S檢查點(diǎn)后才進(jìn)入S期。若條件不適,細(xì)胞可能停滯于G1期或進(jìn)入G0期(靜息狀態(tài))。

S期:DNA復(fù)制與染色單體形成即DNA合成期,細(xì)胞進(jìn)行DNA半保留復(fù)制,每條染色體形成兩條姐妹染色單體,通過(guò)著絲粒連接。此期DNA含量加倍,但染色體數(shù)目不變。中心體也在此期完成復(fù)制,為紡錘體形成奠定基礎(chǔ)。

G2期:分裂前的最后準(zhǔn)備也稱DNA合成后期,細(xì)胞繼續(xù)合成與分裂相關(guān)的蛋白質(zhì)(如微管蛋白),檢查DNA復(fù)制是否完整、損傷是否修復(fù)。通過(guò)G2/M檢查點(diǎn)后,細(xì)胞正式進(jìn)入分裂期。此期還會(huì)進(jìn)行細(xì)胞器的增殖,確保子細(xì)胞能獲得完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。前期:染色質(zhì)凝縮與紡錘體形成染色質(zhì)螺旋化形成染色體染色質(zhì)逐漸螺旋化、縮短變粗,形成光學(xué)顯微鏡下可見(jiàn)的染色體結(jié)構(gòu),每條染色體包含兩條姐妹染色單體,通過(guò)著絲粒相連。核膜與核仁解體消失細(xì)胞核的核膜逐漸解體,核仁結(jié)構(gòu)消失,為染色體的移動(dòng)和分配提供空間,此過(guò)程標(biāo)志著分裂期的正式開(kāi)始。紡錘體結(jié)構(gòu)的組裝啟動(dòng)植物細(xì)胞由兩極發(fā)出紡錘絲,動(dòng)物細(xì)胞由中心體發(fā)出星射線,兩種方式均形成紡錘體,為后續(xù)染色體排列和分離提供機(jī)械支撐。染色體散亂分布于細(xì)胞中央完成凝縮的染色體在紡錘絲牽引下開(kāi)始向細(xì)胞中央移動(dòng),初期呈不規(guī)則散亂分布狀態(tài),尚未形成穩(wěn)定排列。中期:染色體排列與赤道板結(jié)構(gòu)染色體的精準(zhǔn)定位

在紡錘絲的牽引下,染色體的著絲粒整齊排列于細(xì)胞中央的赤道板平面,此時(shí)染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰,是觀察和計(jì)數(shù)染色體的最佳時(shí)期。赤道板的結(jié)構(gòu)特征

赤道板并非真實(shí)存在的實(shí)體結(jié)構(gòu),而是細(xì)胞有絲分裂中期染色體著絲粒排列所處的一個(gè)假想平面,該平面與紡錘體中軸垂直,將細(xì)胞分為大致相等的兩部分。紡錘體的調(diào)控作用

紡錘體微管與染色體著絲粒處的動(dòng)粒緊密結(jié)合,通過(guò)微管的動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)(組裝與解聚),確保染色體在赤道板上的有序排列,為后續(xù)染色單體分離奠定基礎(chǔ)。動(dòng)植物細(xì)胞的共性表現(xiàn)

無(wú)論是植物細(xì)胞(如洋蔥根尖細(xì)胞)還是動(dòng)物細(xì)胞(如人體口腔上皮細(xì)胞),在有絲分裂中期均會(huì)出現(xiàn)染色體在赤道板位置整齊排列的現(xiàn)象,體現(xiàn)了真核細(xì)胞分裂機(jī)制的高度統(tǒng)一性。后期:著絲粒分裂與染色體分離著絲粒分裂的觸發(fā)機(jī)制后期起始的關(guān)鍵標(biāo)志是著絲粒分裂,該過(guò)程由特定信號(hào)調(diào)控,導(dǎo)致姐妹染色單體分離成為獨(dú)立的子染色體。染色體向兩極移動(dòng)的動(dòng)力來(lái)源在紡錘絲的牽引下,分離后的子染色體以一定速度向細(xì)胞兩極移動(dòng),確保遺傳物質(zhì)向兩個(gè)子細(xì)胞平均分配。染色體數(shù)目的瞬時(shí)變化著絲粒分裂使細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目暫時(shí)加倍,例如二倍體生物(2n)此時(shí)染色體數(shù)變?yōu)?n,為末期分裂形成兩個(gè)子細(xì)胞(各含2n染色體)奠定基礎(chǔ)。末期:核膜重建與胞質(zhì)分裂

染色體解聚與核膜重建到達(dá)兩極的染色體逐漸解螺旋,重新轉(zhuǎn)變?yōu)槿旧|(zhì)狀態(tài),核膜和核仁重新出現(xiàn),形成兩個(gè)新的細(xì)胞核。

植物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂:細(xì)胞板形成在赤道板位置,高爾基體分泌的囊泡聚集并融合形成細(xì)胞板,細(xì)胞板逐漸擴(kuò)展成為新的細(xì)胞壁,將母細(xì)胞分割為兩個(gè)子細(xì)胞。

動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂:細(xì)胞膜縊裂細(xì)胞膜從細(xì)胞中部向內(nèi)凹陷,形成環(huán)溝,環(huán)溝逐漸加深,最終將細(xì)胞縊裂為兩個(gè)子細(xì)胞,此過(guò)程不涉及細(xì)胞壁的形成。

紡錘體的消失隨著核膜的重建和胞質(zhì)分裂的進(jìn)行,紡錘體逐漸解體消失,細(xì)胞分裂過(guò)程基本完成。動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂的差異03紡錘體形成方式的區(qū)別

高等植物細(xì)胞紡錘體的形成高等植物細(xì)胞在有絲分裂前期,由細(xì)胞兩極發(fā)出紡錘絲,這些紡錘絲相互交織形成紡錘體,不依賴中心體。

動(dòng)物細(xì)胞紡錘體的形成動(dòng)物細(xì)胞在有絲分裂間期完成中心體的復(fù)制,前期時(shí),兩組中心體分別移向細(xì)胞兩極,由中心體發(fā)出星射線,星射線構(gòu)成紡錘體。

低等植物細(xì)胞紡錘體的形成特點(diǎn)低等植物細(xì)胞兼具高等植物和動(dòng)物細(xì)胞的特點(diǎn),其紡錘體由中心體發(fā)出的星射線形成,與動(dòng)物細(xì)胞紡錘體形成方式類似。細(xì)胞質(zhì)分裂機(jī)制的比較植物細(xì)胞:細(xì)胞板形成機(jī)制植物細(xì)胞末期在赤道板位置形成細(xì)胞板,逐漸擴(kuò)展為新細(xì)胞壁,將母細(xì)胞分隔為兩個(gè)子細(xì)胞,該過(guò)程與高爾基體活動(dòng)密切相關(guān)。動(dòng)物細(xì)胞:細(xì)胞膜縊裂機(jī)制動(dòng)物細(xì)胞末期細(xì)胞膜從中部向內(nèi)凹陷,通過(guò)縊裂方式將細(xì)胞質(zhì)分割,最終形成兩個(gè)子細(xì)胞,不涉及新細(xì)胞壁的合成。結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)差異植物細(xì)胞依賴細(xì)胞板和細(xì)胞壁完成分裂,動(dòng)物細(xì)胞則依靠細(xì)胞膜的流動(dòng)性實(shí)現(xiàn)縊裂,反映了兩者在細(xì)胞結(jié)構(gòu)上的根本區(qū)別。相關(guān)細(xì)胞器的作用差異

01核糖體:蛋白質(zhì)合成的核心場(chǎng)所動(dòng)植物細(xì)胞有絲分裂整個(gè)細(xì)胞周期,主要是間期,核糖體負(fù)責(zé)合成與分裂相關(guān)的蛋白質(zhì),如紡錘體蛋白等,為細(xì)胞分裂提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

02中心體:動(dòng)物細(xì)胞紡錘體形成的關(guān)鍵動(dòng)物細(xì)胞和某些低等植物細(xì)胞在間期、前期,中心體參與紡錘體的形成,其發(fā)出的星射線構(gòu)成紡錘體,牽引染色體移動(dòng)。

03高爾基體:植物細(xì)胞末期細(xì)胞壁形成的主力植物細(xì)胞在末期,高爾基體參與細(xì)胞壁的形成,赤道板位置出現(xiàn)的細(xì)胞板逐漸擴(kuò)展成細(xì)胞壁,將母細(xì)胞分成兩個(gè)子細(xì)胞。

04線粒體:細(xì)胞分裂的能量供應(yīng)站動(dòng)植物細(xì)胞在整個(gè)細(xì)胞周期,線粒體通過(guò)呼吸作用提供能量,滿足DNA復(fù)制、染色體移動(dòng)等分裂過(guò)程的能量需求。減數(shù)分裂的特殊過(guò)程04減數(shù)分裂的間期特點(diǎn)DNA復(fù)制的特殊性減數(shù)分裂間期同樣進(jìn)行DNA復(fù)制,但S期明顯延長(zhǎng),且僅完成99.7%的DNA復(fù)制,其余0.3%在減數(shù)第一次分裂前期的偶線期完成,為后續(xù)遺傳重組奠定基礎(chǔ)。細(xì)胞代謝活動(dòng)此階段細(xì)胞進(jìn)行旺盛的物質(zhì)積累,合成與減數(shù)分裂相關(guān)的蛋白質(zhì),如聯(lián)會(huì)復(fù)合體組分、紡錘體相關(guān)蛋白等,同時(shí)細(xì)胞體積增大,為分裂做準(zhǔn)備。與有絲分裂間期的差異與有絲分裂間期相比,減數(shù)分裂間期的G1期和G2期也存在相應(yīng)的物質(zhì)準(zhǔn)備,但最顯著區(qū)別在于DNA復(fù)制的不完全性及為同源染色體配對(duì)等特殊過(guò)程所需的物質(zhì)合成。減數(shù)第一次分裂:同源染色體分離01前期Ⅰ:聯(lián)會(huì)與交叉互換同源染色體兩兩配對(duì)(聯(lián)會(huì))形成四分體,非姐妹染色單體間發(fā)生交叉互換,為遺傳多樣性提供基礎(chǔ)。此階段核膜、核仁逐漸消失,紡錘體開(kāi)始形成。02中期Ⅰ:同源染色體排列赤道板成對(duì)的同源染色體整齊排列在細(xì)胞中央的赤道板兩側(cè),紡錘絲與著絲粒相連,此時(shí)染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰,是觀察的有利時(shí)機(jī)。03后期Ⅰ:同源染色體分離與自由組合同源染色體在紡錘絲牽引下彼此分離,分別移向細(xì)胞兩極,非同源染色體自由組合,進(jìn)一步增加配子遺傳多樣性,細(xì)胞染色體數(shù)目減半。04末期Ⅰ:形成兩個(gè)子細(xì)胞染色體到達(dá)兩極后,核膜、核仁重新出現(xiàn),細(xì)胞質(zhì)分裂,形成兩個(gè)子細(xì)胞,每個(gè)子細(xì)胞含有n條染色體,每條染色體仍含兩條姐妹染色單體。減數(shù)第二次分裂:姐妹染色單體分離

前期Ⅱ:染色體重新凝聚核膜核仁消失,紡錘體重新形成,染色體散亂分布,每條染色體含兩條姐妹染色單體。

中期Ⅱ:染色體排列赤道板染色體著絲粒整齊排列于赤道板,紡錘絲連接兩極與著絲粒,染色體形態(tài)清晰便于觀察。

后期Ⅱ:姐妹染色單體分離著絲粒分裂,姐妹染色單體成為獨(dú)立染色體,在紡錘絲牽引下分別移向細(xì)胞兩極,染色體數(shù)目暫時(shí)加倍。

末期Ⅱ:形成單倍體子細(xì)胞核膜核仁重建,紡錘體消失,細(xì)胞質(zhì)分裂,一個(gè)母細(xì)胞形成兩個(gè)子細(xì)胞,最終共產(chǎn)生四個(gè)遺傳物質(zhì)不同的單倍體配子。減數(shù)分裂中的遺傳重組機(jī)制

交叉互換:遺傳物質(zhì)的物理交換在減數(shù)第一次分裂前期的粗線期,同源染色體的非姐妹染色單體之間發(fā)生片段交換,即交叉互換。這一過(guò)程使染色體上的基因重新組合,是遺傳多樣性的重要來(lái)源之一。例如,人類的每對(duì)同源染色體在減數(shù)分裂時(shí)平均發(fā)生2-3次交叉互換。

同源染色體聯(lián)會(huì)與聯(lián)會(huì)復(fù)合體的作用減數(shù)第一次分裂前期的偶線期,同源染色體兩兩配對(duì)的過(guò)程稱為聯(lián)會(huì),形成四分體結(jié)構(gòu)。聯(lián)會(huì)復(fù)合體是同源染色體配對(duì)過(guò)程中形成的蛋白質(zhì)復(fù)合結(jié)構(gòu),介導(dǎo)同源染色體的準(zhǔn)確配對(duì)、聯(lián)會(huì)和遺傳重組,確保交叉互換的順利進(jìn)行。

非同源染色體的自由組合減數(shù)第一次分裂后期,同源染色體分離的同時(shí),非同源染色體自由組合。這使得不同對(duì)的染色體隨機(jī)分配到子細(xì)胞中,增加了生殖細(xì)胞中染色體組合的多樣性。以人類為例,有23對(duì)染色體,理論上可產(chǎn)生2^23種不同的配子組合。

遺傳重組的生物學(xué)意義遺傳重組通過(guò)交叉互換和非同源染色體自由組合,顯著增加了配子的遺傳多樣性,為生物進(jìn)化提供了豐富的原材料。這種多樣性使得后代在自然選擇中具有更大的適應(yīng)性和生存優(yōu)勢(shì),是物種進(jìn)化和適應(yīng)環(huán)境變化的重要機(jī)制。無(wú)絲分裂與原核細(xì)胞分裂05無(wú)絲分裂的過(guò)程與特點(diǎn)無(wú)絲分裂的基本過(guò)程無(wú)絲分裂過(guò)程相對(duì)簡(jiǎn)單,早期球形的細(xì)胞核和核仁伸長(zhǎng),隨后細(xì)胞核進(jìn)一步伸長(zhǎng)成啞鈴形,中央部分變得狹細(xì),最終細(xì)胞核分裂,細(xì)胞質(zhì)也隨之分裂,并在滑面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的參與下形成新的細(xì)胞膜。無(wú)絲分裂的顯著特點(diǎn)無(wú)絲分裂過(guò)程中核膜和核仁并不消失,也沒(méi)有染色體的明顯變化,但染色質(zhì)會(huì)進(jìn)行復(fù)制,細(xì)胞會(huì)逐漸增大,當(dāng)細(xì)胞核體積增大一倍時(shí)發(fā)生核分裂。無(wú)絲分裂的遺傳物質(zhì)分配由于無(wú)絲分裂不經(jīng)過(guò)染色體有規(guī)律的平均分配,存在遺傳物質(zhì)不能保證均等分配的問(wèn)題,有些人認(rèn)為這是一種不正常的分裂方式,其遺傳物質(zhì)DNA如何分配到子細(xì)胞中的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。無(wú)絲分裂的存在范圍無(wú)絲分裂是最早發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞分裂方式,過(guò)去認(rèn)為主要見(jiàn)于低等生物和高等生物體內(nèi)的衰老或病態(tài)細(xì)胞中,但后來(lái)發(fā)現(xiàn)在動(dòng)物和植物的正常組織中也比較普遍地存在,如動(dòng)物的上皮組織、疏松結(jié)締組織、肌肉組織和肝組織中,植物各器官的薄壁組織、表皮、生長(zhǎng)點(diǎn)和胚乳等細(xì)胞中。原核細(xì)胞的二分裂機(jī)制

二分裂的定義與核心特征二分裂是原核生物(如細(xì)菌)主要的無(wú)性生殖方式,通過(guò)細(xì)胞DNA復(fù)制后,細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)陷、細(xì)胞壁形成,將母細(xì)胞一分為二,形成兩個(gè)遺傳物質(zhì)基本相同的子細(xì)胞。

DNA復(fù)制與分配過(guò)程原核細(xì)胞的環(huán)狀DNA附著于質(zhì)膜(或間體)上,復(fù)制時(shí)從起始點(diǎn)雙向進(jìn)行,形成兩個(gè)子代DNA環(huán);隨著細(xì)胞生長(zhǎng),兩個(gè)DNA環(huán)隨質(zhì)膜延伸而分離,分別移向細(xì)胞兩極。

細(xì)胞分裂的結(jié)構(gòu)變化復(fù)制完成后,細(xì)胞中部的質(zhì)膜向內(nèi)凹陷,形成隔膜;同時(shí)細(xì)胞壁物質(zhì)在隔膜處沉積,最終將細(xì)胞分裂為兩個(gè)獨(dú)立子細(xì)胞,整個(gè)過(guò)程不涉及紡錘體或染色體的形成。

二分裂的速率與調(diào)控原核細(xì)胞二分裂速率極快,在適宜環(huán)境下(如大腸桿菌)每20-30分鐘即可完成一次分裂,其過(guò)程主要受DNA復(fù)制起始、細(xì)胞體積增長(zhǎng)等因素調(diào)控,確保遺傳物質(zhì)均等分配。細(xì)胞分裂的實(shí)驗(yàn)觀察技術(shù)06根尖分生區(qū)細(xì)胞的有絲分裂觀察

實(shí)驗(yàn)原理在高等植物體內(nèi),有絲分裂常見(jiàn)于根尖、芽尖等分生區(qū)細(xì)胞。由于各個(gè)細(xì)胞的分裂是獨(dú)立進(jìn)行的,因此在同一分生組織中可以看到處于不同分裂時(shí)期的細(xì)胞。通過(guò)在高倍顯微鏡下觀察各個(gè)時(shí)期細(xì)胞內(nèi)染色體的存在狀態(tài),就可以判斷這些細(xì)胞分別處于有絲分裂的哪個(gè)時(shí)期。染色體容易被堿性染料(如甲紫溶液)著色。

實(shí)驗(yàn)材料與試劑實(shí)驗(yàn)材料:洋蔥根尖(課前3-4d培養(yǎng),根長(zhǎng)約5cm時(shí)取用)。試劑:解離液(質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精按1:1的體積比混合)、漂洗液(清水)、染色液(質(zhì)量濃度為0.01g/mL或0.02g/mL的甲紫溶液或醋酸洋紅液)。

實(shí)驗(yàn)步驟洋蔥根尖培養(yǎng):課前3-4d,將洋蔥放在裝滿清水的廣口瓶上,讓洋蔥底部接觸瓶?jī)?nèi)的水面,放在溫暖處培養(yǎng)。取材:剪取根尖2-3mm,注意取材時(shí)間。解離:將根尖放入解離液中,3-5min,目的是使組織中的細(xì)胞相互分離開(kāi)來(lái)。漂洗:用清水漂洗約10min,洗去解離液,防止影響染色。染色:用染色液染色3-5min,使染色體著色。制片:將根尖放在載玻片上,加一滴清水,弄碎,蓋上蓋玻片,輕壓使細(xì)胞分散。觀察:先低倍鏡找到分生區(qū)細(xì)胞(排列緊密、呈正方形),再高倍鏡觀察各分裂時(shí)期細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)取材時(shí)只能剪取根尖2-3mm,過(guò)長(zhǎng)會(huì)包含伸長(zhǎng)區(qū)和成熟區(qū)細(xì)胞,這些細(xì)胞不分裂。解離時(shí)間要適當(dāng),過(guò)短細(xì)胞不易分散,過(guò)長(zhǎng)細(xì)胞會(huì)被破壞。漂洗要充分,否則殘留的解離液會(huì)影響染色效果。壓片時(shí)力度要適中,既要使細(xì)胞分散開(kāi),又不能壓碎蓋玻片。觀察時(shí)先低倍鏡找到分生區(qū),再換高倍鏡觀察。減數(shù)分裂實(shí)驗(yàn)材料的選擇與處理

實(shí)驗(yàn)材料的選擇標(biāo)準(zhǔn)選擇染色體數(shù)目少、形態(tài)大、分裂同步性高的材料,如雄性蝗蟲(chóng)精巢(乳白色條狀組織)、百合花粉母細(xì)胞、蠶豆花蕾(2~4mm長(zhǎng)度對(duì)應(yīng)減數(shù)分裂期)。

材料采集與固定方法動(dòng)物材料(蝗蟲(chóng)精巢):剪斷腹部末端取出精巢,立即投入卡諾氏固定液(無(wú)水乙醇:冰醋酸=3:1)固定24小時(shí);植物材料(花蕾)直接摘取后固定。固定后可轉(zhuǎn)移至70%乙醇4℃保存。

解離與染色處理步驟解離:材料經(jīng)蒸餾水沖洗后,用1mol/L鹽酸37℃水浴解離5~10分鐘(或室溫15~20分鐘),至組織松軟易分散;染色:用改良苯酚品紅染液(或醋酸洋紅、龍膽紫)染色10~15分鐘,使染色體著色。

壓片操作關(guān)鍵要點(diǎn)將染色后的材料置于載玻片中央,用解剖針輕輕撥散細(xì)胞,蓋上蓋玻片,覆蓋吸水紙后垂直按壓(力度適中避免滑動(dòng)),使細(xì)胞分散成單層,便于顯微鏡觀察。顯微鏡下分裂時(shí)期的識(shí)別要點(diǎn)

01間期細(xì)胞特征細(xì)胞核較大,呈球形,核仁明顯,染色質(zhì)呈細(xì)絲狀均勻分布,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,是顯微鏡視野中數(shù)量最多的時(shí)期。

02前期細(xì)胞特征核膜、核仁逐漸消失,染色質(zhì)螺旋化形成染色體,形態(tài)散亂分布,植物細(xì)胞兩極出現(xiàn)紡錘絲,動(dòng)物細(xì)胞中心體發(fā)出星射線。

03中期細(xì)胞特征染色體形態(tài)穩(wěn)定、數(shù)目清晰,著絲粒整齊排列在赤道板上,紡錘體完全形成,是觀察染色體形態(tài)和數(shù)目的最佳時(shí)期。

04后期細(xì)胞特征著絲粒分裂,姐妹染色單體分離成為子染色體,在紡錘絲牽引下向細(xì)胞兩極移動(dòng),細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目暫時(shí)加倍。

05末期細(xì)胞特征染色體解螺旋變回染色質(zhì),核膜、核仁重新出現(xiàn),紡錘體消失;植物細(xì)胞赤道板位置形成細(xì)胞板,動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞膜中部向內(nèi)凹陷。細(xì)胞分裂的調(diào)控機(jī)制07細(xì)胞周期檢查點(diǎn)的作用G1/S檢查點(diǎn):?jiǎn)?dòng)分裂的決策關(guān)卡位于G1期末,評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)及DNA完整性。若條件適宜,細(xì)胞進(jìn)入S期;若DNA受損,激活修復(fù)機(jī)制或停滯于G1期,防止異常細(xì)胞增殖。G2/M檢查點(diǎn):分裂前的質(zhì)量監(jiān)控處于G2期末,驗(yàn)證DNA復(fù)制是否完成及損傷是否修復(fù)。只有當(dāng)DNA復(fù)制準(zhǔn)確且無(wú)未修復(fù)錯(cuò)誤時(shí),細(xì)胞才通過(guò)此檢查點(diǎn)進(jìn)入M期,確保遺傳物質(zhì)完整傳遞。紡錘體組裝檢查點(diǎn):染色體分離的保障存在于M期中期,監(jiān)控染色體是否正確附著于紡錘體并排列在赤道板上。若所有染色體均正常連接,觸發(fā)后期啟動(dòng)信號(hào),確保姐妹染色單體均等分配到子細(xì)胞。檢查點(diǎn)功能異常與疾病關(guān)聯(lián)檢查點(diǎn)調(diào)控蛋白(如p53、CDK)突變可導(dǎo)致檢查點(diǎn)失效,引發(fā)染色體數(shù)目異?;駾NA損傷累積,是癌癥等疾病發(fā)生的重要機(jī)制,如唐氏綜合征與紡錘體檢查點(diǎn)異常相關(guān)。周期蛋白與CDK的調(diào)控作用周期蛋白的周期性表達(dá)周期蛋白(Cyclins)隨細(xì)胞周期階段變化而周期性表達(dá),如G1期的CyclinD、G2期的CyclinA等

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