2026屆江蘇省常州市禮嘉中學(xué)生物高三第一學(xué)期期末學(xué)業(yè)水平測試試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．將相同的紫色洋蔥外表皮細(xì)胞分別放置在清水、1．3g/mL蔗糖溶液中進(jìn)行滲透實(shí)驗(yàn)，一段時(shí)間后得到圖所示的結(jié)果。下列敘述正確的是（）A．乙細(xì)胞液泡中的色素含量不斷增大B．甲細(xì)胞在膨脹過程中細(xì)胞內(nèi)外濃度差逐漸減小C．外界溶液與細(xì)胞液只要存在濃度差，細(xì)胞就會發(fā)生滲透作用D．甲細(xì)胞在膨脹過程中水分子從其分子數(shù)相對較多向相對較少處運(yùn)動(dòng)2．下列關(guān)于細(xì)胞中糖類、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．細(xì)胞中的脂質(zhì)能夠與糖類結(jié)合B．細(xì)胞中的脂質(zhì)不會含有氮元素C．細(xì)胞膜上糖類與蛋白質(zhì)的結(jié)合物具有識別作用D．細(xì)胞中的糖類不能作為人體的直接能源物質(zhì)3．如圖表示果酒和果醋制作過程中的物質(zhì)變化過程，下列敘述正確的是A．過程①和②都只能發(fā)生在缺氧條件下B．過程①和③都只發(fā)生在酵母細(xì)胞的線粒體中C．過程③和④都需要氧氣的參與D．過程①~④所需的最適溫度基本相同4．科研人員采用錯(cuò)時(shí)添加或除去DNA合成抑制劑的方法，制備了均處于G1/S臨界處的洋蔥根尖分生組織細(xì)胞群，現(xiàn)將上述細(xì)胞群轉(zhuǎn)移至正常培養(yǎng)液中繼續(xù)分裂，下列敘述正確的是（）A．轉(zhuǎn)移至正常培養(yǎng)液后，細(xì)胞首先進(jìn)行的是合成DNA所需蛋白質(zhì)的合成B．由于間期長于分裂期，適當(dāng)時(shí)間后制片觀察，可發(fā)現(xiàn)間期細(xì)胞占絕大多數(shù)C．在中期，顯微鏡下能觀察到該細(xì)胞的染色體組型圖D．在末期，分離的兩套染色體的距離相比后期進(jìn)一步加大5．下列有關(guān)細(xì)胞結(jié)構(gòu)及其功能的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．細(xì)胞膜、線粒體膜上均有運(yùn)輸葡萄糖的載體B．主動(dòng)運(yùn)輸可使細(xì)胞內(nèi)外離子濃度差異加大C．葉肉細(xì)胞吸收Mg2+所需的ATP不會來自光反應(yīng)D．控制細(xì)菌性狀的基因主要位于擬核DNA上6．下列關(guān)于下丘腦與垂體的敘述，正確的是A．垂體可通過神經(jīng)細(xì)胞支配其他內(nèi)分泌腺B．垂體分泌的激素通過管道運(yùn)輸?shù)襟w液中C．甲狀腺激素能作用于下丘腦但不能作用于垂體D．神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能可通過下丘腦相聯(lián)系二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）腎上腺糖皮質(zhì)激素是由腎上腺皮質(zhì)分泌的一種激素，在生物體的生命活動(dòng)調(diào)節(jié)中起重要作用。如圖是腎上腺糖皮質(zhì)激素的分泌調(diào)節(jié)示意圖，請回答下列問題。（1）圖中“CRH”的中文名稱是__________，其分泌受到圖中__________物質(zhì)的調(diào)節(jié)。（2）從應(yīng)激刺激到糖皮質(zhì)激素的分泌過程屬于__________調(diào)節(jié)，腺垂體能接受CRH的調(diào)節(jié)是因?yàn)開_________。（3）氫化可地松是糖皮質(zhì)類激素，具有快速、強(qiáng)大而非特異性的抗炎作用。異體蛋白注射到大鼠足跖內(nèi)，可在短時(shí)間內(nèi)引起組織的急性炎癥，炎癥部位明顯腫脹，體積增大?，F(xiàn)有可供小鼠注射的生理鹽水、一定濃度的氫化可地松溶液、蛋清等試劑，為驗(yàn)證氫化可地松的抗炎作用，請寫出實(shí)驗(yàn)思路并預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果____________________。8．（10分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種。回答下列問題：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴(kuò)增出cDNA。在PCR過程中，兩個(gè)引物是_____酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動(dòng)物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測方法是_____。9．（10分）小麥?zhǔn)俏覈匾募Z食作物，種植面積極為廣泛?，F(xiàn)有不抗銹病的小麥（基因型ee基因位于7號染色體上）與抗銹病的純合四體小麥（7號染色體有4條，其上共有4個(gè)相關(guān)抗銹病基因）進(jìn)行有性雜交，完成下列問題：（1）四體小麥的形成是____________變異的結(jié)果。欲確定抗銹病的小麥?zhǔn)撬捏w，最簡捷的方法是：選取小麥的____________（填“分生區(qū)”或“伸長區(qū)”）材料制成裝片，進(jìn)行____________找到____________期細(xì)胞，觀察__________________。（2）雜交產(chǎn)生的三體小麥（7號染色體有3條），在減數(shù)分裂同源染色體聯(lián)會時(shí)，任意兩條染色體正常配對，在減數(shù)第一次分裂后期正常分離，而另一條隨機(jī)移向細(xì)胞任意一極。若上述雜交子代與不抗銹病小麥雜交，后代基因型及比例是____________，表現(xiàn)型及比例是____________，并畫出相應(yīng)遺傳圖解。___________10．（10分）人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。然而，為心?；颊咦⑸浯髣┝康幕蚬こ蘴-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高。研究證實(shí)，將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。（注：下圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒，新霉素為抗生素。）回答下列問題：（1）己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的密碼子為UCU，因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為____。（2）若t-PA改良基因的粘性末端如圖所示，那么需選用限制酶____和____切開質(zhì)粒pCLY11，才能與t-PA改良基因高效連接，在連接時(shí)需要用到___酶。（3）應(yīng)選擇____（能／不能）在加入新霉素的培養(yǎng)基中生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，目的是____。在加入新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞并非都是目的菌株，需選擇呈____色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。（4）以上制造性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程稱為____工程。11．（15分）實(shí)驗(yàn)嵌合體是了解哺乳動(dòng)物發(fā)育機(jī)制的關(guān)鍵點(diǎn)，也能為不同多潛能干細(xì)胞狀態(tài)的潛能提供咨詢的來源。將猴子的皮膚干細(xì)胞注射到小鼠的囊胚里，再將囊胚移入代孕鼠體內(nèi)發(fā)育形成猴鼠嵌合體——猴鼠，可用于器官的移植研究。請回答下列問題：（1）判斷哺乳動(dòng)物的受精過程是否完成的重要標(biāo)志是______________________。（2）胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)和誘導(dǎo)等操作均需在嚴(yán)格的無菌、無毒環(huán)境條件下操作，可以采取的措施有_______________________。胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)誘導(dǎo)分化可形成大量皮膚干細(xì)胞，其原因是__________。根據(jù)胚胎干細(xì)胞的這種功能特性，當(dāng)我們身體的某一類細(xì)胞功能出現(xiàn)異常或退化時(shí)，利用胚胎干細(xì)胞的治療思路是________________________。（3）將猴子的皮膚干細(xì)胞注射到小鼠囊胚的___________部位能獲取所需組織，再將囊胚移入代孕鼠體內(nèi)，此技術(shù)對代孕受體的要求是___________________。在畜牧生產(chǎn)中采用這種技術(shù)的優(yōu)勢主要是________，若想進(jìn)一步提高胚胎的利用率，可采用___技術(shù)。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】

根據(jù)題干信息分析，將紫色洋蔥外表皮細(xì)胞放置在清水中會吸水，由于細(xì)胞壁的保護(hù)作用，細(xì)胞的體積略有增大，如細(xì)胞甲所示；將紫色洋蔥外表皮細(xì)胞放置在1.3g/mL蔗糖溶液中，由于細(xì)胞液濃度小于蔗糖溶液濃度，細(xì)胞失水而發(fā)生質(zhì)壁分離，如乙細(xì)胞所示?！驹斀狻緼、乙細(xì)胞液泡中的色素含量不變，濃度增加，A錯(cuò)誤；B、甲細(xì)胞在膨脹過程中不斷吸水，因此細(xì)胞內(nèi)外濃度差逐漸減小，B正確；C、甲細(xì)胞的細(xì)胞液與外界溶液存在濃度差，但是其并不能繼續(xù)通過滲透作用吸水，C錯(cuò)誤；D、甲細(xì)胞在膨脹過程中，水分子從其分子數(shù)相對較多處向相對較少處擴(kuò)散，該過程中水分子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量多于出細(xì)胞的數(shù)量，D錯(cuò)誤。故選B。2、B【解析】

脂質(zhì)的種類及其功能：功能分類化學(xué)本質(zhì)分類功能儲藏脂類脂肪儲藏能量，緩沖壓力，減少摩擦，保溫作用結(jié)構(gòu)脂類磷脂是細(xì)胞膜、細(xì)胞器膜和細(xì)胞核膜的重要成份調(diào)節(jié)脂類固醇膽固醇細(xì)胞膜的重要成份，與細(xì)胞膜的流動(dòng)性有關(guān)性激素促進(jìn)生殖器官的生長發(fā)育，激發(fā)和維持第二性征及雌性動(dòng)物的性周期維生素D促進(jìn)動(dòng)物腸道對鈣磷的吸收，調(diào)節(jié)鈣磷的平衡生物膜的流動(dòng)鑲嵌模型：（1）磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本支架，這個(gè)支架是可以流動(dòng)的；（2）蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在磷脂雙分子層表面，有的部分或全部嵌入磷脂雙分子層中，有的橫跨整個(gè)磷脂雙分子層．大多數(shù)蛋白質(zhì)也是可以流動(dòng)的；（3）在細(xì)胞膜的外表，少數(shù)糖類與蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白，除糖蛋白外，細(xì)胞膜表面還有糖類與脂質(zhì)結(jié)合形成糖脂。【詳解】A、細(xì)胞膜中的脂質(zhì)可以與糖類結(jié)合形成糖脂，A正確；B、磷脂含有氮元素，B錯(cuò)誤；C、糖類與蛋白質(zhì)的結(jié)合形成糖蛋白，糖蛋白具有識別作用，C正確；D、人體的直接能源物質(zhì)是ATP，D正確。故選B。3、C【解析】

果酒發(fā)酵的微生物是酵母菌，條件是18-25℃，初期通入無菌空氣，進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；后期密封，無氧呼吸產(chǎn)生酒精；代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型。果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，條件是30-35℃，持續(xù)通入無菌空氣，代謝類型是異養(yǎng)需氧型。根據(jù)題意和圖示分析可知：過程①是細(xì)胞呼吸（有氧呼吸和無氧呼吸）的第一階段，過程②是無氧呼吸的第二階段，過程③是有氧呼吸的第二、三階段，過程④是果醋制作?！驹斀狻扛鶕?jù)以上分析已知，圖中過程①可以表示有氧呼吸和無氧呼吸的第一階段，在有氧和無氧條件下都可以發(fā)生，A錯(cuò)誤；

過程①發(fā)生的場所是細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，過程③發(fā)生的場所是線粒體，B錯(cuò)誤；

過程③是酵母菌的有氧呼吸第二、第三階段，過程④是醋酸菌的有氧呼吸，兩個(gè)過程都需要氧氣的參與，C正確；

過程①③表示酵母菌的有氧呼吸，最適宜溫度為20℃左右；①②表示酵母菌的無氧呼吸，所需的最適溫度在18-25℃；過程④表示醋酸菌的釀醋過程，所需的最適溫度在30～35℃，D錯(cuò)誤?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握果酒和果醋的發(fā)酵原理、過程，能夠準(zhǔn)確判斷圖中各個(gè)數(shù)字代表的過程的名稱，進(jìn)而結(jié)合各個(gè)選項(xiàng)分析答題。4、D【解析】

DNA復(fù)制發(fā)生在S期，若用DNA合成抑制劑多次處理后，獲得洋蔥根尖分生組織細(xì)胞群將都處于G1/S臨界處，若將該細(xì)胞群轉(zhuǎn)移至正常培養(yǎng)液中繼續(xù)分裂，則其將直接進(jìn)入S其進(jìn)行DNA的復(fù)制?！驹斀狻緼、轉(zhuǎn)移至正常培養(yǎng)液后，細(xì)胞首先進(jìn)入S期進(jìn)行DNA的復(fù)制，而合成DNA所需蛋白質(zhì)的合成發(fā)生在S期前面的G1期，A錯(cuò)誤；B、由于這一細(xì)胞群是同步的，因此接下來任意時(shí)間去觀察它們，都處于同一階段，不會出現(xiàn)大多數(shù)細(xì)胞處于間期、少數(shù)細(xì)胞處于裂期的情況，B錯(cuò)誤；C、在中期，顯微鏡下能觀察到該細(xì)胞的染色體，但是不是染色體組型圖，C錯(cuò)誤；D、在末期，分離的兩套染色體的距離相比后期進(jìn)一步加大，D正確。故選D。5、A【解析】

葡萄糖的氧化分解發(fā)生在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，故細(xì)胞膜上有它的載體而線粒體上沒有其載體等。主動(dòng)運(yùn)輸能逆濃度梯度運(yùn)輸離子，使得細(xì)胞內(nèi)外存在濃度差?！驹斀狻緼、葡萄糖不能進(jìn)入線粒體，因此線粒體膜上沒有運(yùn)輸葡萄糖的載體，A錯(cuò)誤；B、主動(dòng)運(yùn)輸保證細(xì)胞按照生命活動(dòng)的需要主動(dòng)地選擇吸收營養(yǎng)物質(zhì)，可逆濃度梯度進(jìn)行運(yùn)輸，使細(xì)胞內(nèi)外離子濃度差異加大，B正確；C.真核細(xì)胞葉綠體光反應(yīng)中產(chǎn)生的ATP只能用于暗反應(yīng)，植物葉肉細(xì)胞吸收Mg2+所需的能量可由線粒體合成的ATP提供，葉肉細(xì)胞吸收Mg2+所需的ATP不會來自光反應(yīng)，C正確；D、細(xì)菌是原核生物，無染色體，控制細(xì)菌性狀的基因主要位于擬核DNA上，D正確。故選A。6、D【解析】

下丘腦的部分細(xì)胞稱為神經(jīng)分泌細(xì)胞，既能傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)，又有分泌激素的功能。下丘腦在機(jī)體穩(wěn)態(tài)中有感受、傳導(dǎo)、分泌、調(diào)節(jié)四個(gè)方面的主要作用。下丘腦分泌多種促激素釋放激素作用于垂體，通過垂體調(diào)控其他內(nèi)分泌腺的活動(dòng)。【詳解】垂體通過釋放促激素調(diào)節(jié)其他內(nèi)分泌腺，A選項(xiàng)錯(cuò)誤；內(nèi)分泌腺?zèng)]有導(dǎo)管，是通過胞吐的方式將激素分泌到體液中，B選項(xiàng)錯(cuò)誤；甲狀腺激素的對全身幾乎所有細(xì)胞起作用，甲狀腺激素能作用于下丘腦也能作用于垂體，C選項(xiàng)錯(cuò)誤；下丘腦的部分細(xì)胞既能傳導(dǎo)神經(jīng)沖動(dòng)，又有分泌激素的功能，故神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能可通過下丘腦相聯(lián)系，D選項(xiàng)正確。二、綜合題：本大題共4小題7、促糖皮質(zhì)激素釋放激素ACTH、糖皮質(zhì)激素(神經(jīng)遞質(zhì))神經(jīng)—體液腺垂體細(xì)胞表面存在與CRH結(jié)合的特異性受體實(shí)驗(yàn)思路：選取兩組大小與生理狀況一致的小鼠，分別注射等量的生理鹽水和一定濃度的氫化可地松溶液，一段時(shí)間后，向兩組小鼠的足跖內(nèi)注射等量的蛋清溶液，隨后觀察兩組小鼠足跖的腫脹情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：注射一定濃度的氫化可地松溶液的小鼠足跖腫脹情況小于注射生理鹽水的小鼠【解析】

據(jù)圖分析：下丘腦是內(nèi)分泌調(diào)節(jié)的樞紐。下丘腦可以分泌相關(guān)的促激素釋放激素作用于垂體，促進(jìn)垂體相關(guān)的促激素作用于相應(yīng)的內(nèi)分泌腺，促進(jìn)內(nèi)分泌腺分泌相應(yīng)的激素。同時(shí)內(nèi)分泌腺分泌的激素可以負(fù)反饋?zhàn)饔糜谙虑鹉X和垂體，影響二者分泌促激素釋放激素和促激素?！驹斀狻浚?）由腎上腺糖皮質(zhì)激素的分泌調(diào)節(jié)示意圖可知，腎上腺糖皮質(zhì)激素的分泌屬于分級調(diào)節(jié)，其分泌受下丘腦、垂體的調(diào)控，故可判斷下丘腦分泌的CRH是促糖皮質(zhì)激素釋放激素，作用于垂體，促進(jìn)垂體分泌促糖皮質(zhì)激素，促糖皮質(zhì)激素最終促進(jìn)腎上腺皮質(zhì)分泌糖皮質(zhì)激素。圖中信息提示糖皮質(zhì)激素可通過長反饋來調(diào)節(jié)下丘腦的分泌，ACTH可通過短反饋來調(diào)節(jié)下丘腦的分泌。所以CRH的分泌受到圖中ACTH、糖皮質(zhì)激素(神經(jīng)遞質(zhì))等物質(zhì)的調(diào)節(jié)。（2）應(yīng)激刺激產(chǎn)生的興奮通過反射弧傳到下丘腦，下丘腦分泌相關(guān)激素(CRH)調(diào)控垂體的分泌，垂體分泌的激素調(diào)控腎上腺皮質(zhì)的分泌，這一過程為神經(jīng)—體液調(diào)節(jié)。下丘腦分泌的CRH可作用于腺垂體，是因?yàn)橄俅贵w細(xì)胞的表面有與CRH結(jié)合的特異性受體。（3）該實(shí)驗(yàn)屬于驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，需明確實(shí)驗(yàn)的原理：氫化可地松是糖皮質(zhì)類激素，具有快速、強(qiáng)大而非特異性的抗炎作用；異體蛋白屬于抗原，可引起機(jī)體短時(shí)間內(nèi)發(fā)生急性炎癥，炎癥部位明顯腫脹。非特異性免疫在抗原入侵時(shí)發(fā)揮作用，故應(yīng)在注射抗原前注射氫化可地松溶液，使實(shí)驗(yàn)鼠獲得非特異性的抗炎能力，在此基礎(chǔ)上再注射異體蛋白，觀察比較不同組別炎癥部位的腫脹情況，所以實(shí)驗(yàn)思路為：取兩組大小與生理狀況一致的小鼠，分別注射等量的生理鹽水和一定濃度的氫化可地松溶液，一段時(shí)間后，向兩組小鼠的足跖內(nèi)注射等量的蛋清溶液，隨后觀察兩組小鼠足跖的腫脹情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：注射一定濃度的氫化可地松溶液的小鼠足跖腫脹情況小于注射生理鹽水的小鼠?！军c(diǎn)睛】本題考查了激素的分級調(diào)節(jié)、免疫等相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。8、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）在PCR過程中，兩個(gè)引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列，因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列，所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少酶切產(chǎn)物自身環(huán)化。（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法，這也是將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法。（4）若要檢測抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，分子水平上可采用抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，識記PCR技術(shù)的原理和過程，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。9、染色體分生區(qū)鏡檢（顯微觀察）細(xì)胞有絲分裂中染色體形態(tài)、數(shù)目EEe：Eee：Ee：ce=1：2：2：1抗：不抗=5：1【解析】

觀察細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成，目的是使細(xì)胞分散開來）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過程中壓片是為了將根尖細(xì)胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）?！驹斀狻浚?）四體屬于染色體數(shù)目變異，要想觀察染色體形態(tài)和數(shù)目，只有用顯微鏡觀察進(jìn)行細(xì)胞分裂的細(xì)胞才能看到染色體；分生區(qū)細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，可以觀察到染色體，且分裂中期是觀察染色體形態(tài)和數(shù)月的最佳時(shí)期；四體是7號染色體有四條，確定抗銹病小麥為四體，需要用分生區(qū)細(xì)胞制成裝片，在顯微鏡下找到處于有絲分裂中期的細(xì)胞，觀察其染色體形態(tài)和數(shù)目。（2）根據(jù)題意，相關(guān)遺傳圖解如下故可知：子一代測交后代的基因型比例為：EEe：Eee：Ee：ce=1：2：2：1；表現(xiàn)型比例為，抗：不抗=5：1?！军c(diǎn)睛】能夠正確理解題干信息是解答本題的關(guān)鍵！植物細(xì)胞有絲分裂觀察的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)也是解答本題的必備知識。10、AGAXmɑⅠBglⅡDNA連接酶不能以便篩選出導(dǎo)入質(zhì)粒pCLY1I的大腸桿菌白蛋白質(zhì)【解析】

基因工程的基本操作步驟：獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斀狻浚?）根據(jù)堿基互補(bǔ)配對的原則，絲氨酸的密碼子為UCU，則其編碼序列為TCT，所以模板鏈的堿基序列為AGA。（2）若要質(zhì)粒pCLY11與t-PA突變基因高效連接，需質(zhì)粒和突變基因切割后產(chǎn)生黏性末端能堿基互補(bǔ)配對，t-PA突變基因切割后的黏性末端分別為：-GGCC和-CTAG，故質(zhì)粒pCLY11需要用XmaI和Bg/II切割，連接時(shí)需要應(yīng)DNA連接酶