2025版登革熱血清流行病學調查方案2025年登革熱血清流行病學調查以掌握目標地區(qū)人群登革熱病毒（DENV）抗體水平及分布特征、分析影響因素、為防控策略調整提供科學依據為核心目標。調查區(qū)域覆蓋本省3類流行強度地區(qū)，其中高流行區(qū)（近3年有本地暴發(fā)疫情）2個地級市，中流行區(qū)（近3年有散發(fā)病例）3個地級市，低流行區(qū)（近3年無本地病例）2個地級市，每類地區(qū)各選2個縣（區(qū)）作為調查點，每縣（區(qū)）抽取3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道），每鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）抽取2個村（社區(qū)），最終覆蓋28個調查點。樣本量計算基于預期IgG抗體陽性率15%（參考近3年本省監(jiān)測數據），設定α=0.05（雙側），允許誤差d=3%，設計效應（Deff）=1.5，計算公式為n=Deff×Z2×P×(1P)/d2，計算得單調查點樣本量約384人。結合各地區(qū)人口結構，按05歲、615歲、1660歲、60歲以上4個年齡組分層，各層樣本量按該地區(qū)人口年齡構成比例分配，最終總樣本量約10752人（28點×384人）。調查對象為調查點內常住居民（居住≥6個月），排除近期（3個月內）有登革熱疫苗接種史者（如當地開展過疫苗接種）。采用多階段分層隨機抽樣，第一階段按流行強度分層抽取縣（區(qū)），第二階段在縣（區(qū)）內隨機抽取鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道），第三階段在鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）內隨機抽取村（社區(qū)），第四階段以村（社區(qū)）為單位，按住戶名單系統(tǒng)抽樣確定調查戶，每戶抽取1名符合條件的常住居民，若戶內無符合條件者則順位選擇相鄰住戶?，F(xiàn)場調查包括問卷調查與樣本采集。問卷內容涵蓋人口學信息（年齡、性別、住址）、既往登革熱患病史（確診時間、癥狀）、近1年防蚊措施（蚊帳使用、殺蟲劑噴灑頻率）、發(fā)病季節(jié)（410月）戶外暴露時長（日均小時數）、居住環(huán)境（房屋類型、周邊積水容器數量）等。問卷經預調查（每類地區(qū)各選1個村，調查50人）修正后使用，調查員經統(tǒng)一培訓（內容包括問卷填寫規(guī)范、溝通技巧、隱私保護），現(xiàn)場由調查對象或其監(jiān)護人（18歲以下）獨立填寫，調查員核對信息完整性。血清樣本采集于清晨空腹進行，采集靜脈血35ml，室溫靜置30分鐘后3000轉/分離心10分鐘，分離血清至凍存管（每管0.5ml），20℃冰箱暫存，48小時內通過冷藏箱（溫度28℃）轉運至省級疾控中心實驗室，80℃長期保存。樣本轉運過程全程記錄溫度（使用溫度記錄儀），并核對樣本編號與問卷信息一致性。實驗室檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測DENVIgG抗體，試劑盒選用經國家藥品監(jiān)督管理局批準的商品化試劑（如Panbio登革熱IgG檢測試劑盒），嚴格按說明書操作。檢測步驟包括：包被板預處理（每孔加100μl稀釋后的捕獲抗體，37℃孵育2小時）、洗板（PBST洗板機洗5次）、加樣本（100μl1:100稀釋血清，37℃孵育1小時）、加酶標二抗（100μlHRP標記抗人IgG，37℃孵育1小時）、洗板（同前）、加底物（TMB溶液，37℃避光反應15分鐘）、終止反應（50μl2MH2SO4），酶標儀（450nm波長）讀取OD值。同時設置陰陽性對照（試劑盒提供），每批次檢測樣本量≤90份，陽性樣本重復檢測2次確認。質量控制貫穿全流程：現(xiàn)場調查階段，每調查點抽取10%問卷進行復核（由督導員通過電話回訪核實關鍵信息），問卷缺失率控制在5%以內；樣本采集階段，每50份樣本隨機抽取5份復查離心效果（血清無溶血、無脂血），轉運溫度異常樣本（＞8℃或＜2℃）重新采集；實驗室階段，室內質控要求陰性對照OD值≤0.15，陽性對照OD值≥1.0，批內變異系數（CV）≤10%，每季度參加國家疾控中心組織的室間質評（要求靶值符合率≥95%）；數據管理階段，采用EpiData3.1雙錄入，設置邏輯校驗規(guī)則（如年齡＞0且≤100，抗體OD值＞0），缺失值通過回訪補充（限3次），無法補充者標記為“缺失”（占比≤2%）。數據分析使用SPSS26.0軟件，統(tǒng)計描述包括各年齡組、性別、地區(qū)的IgG抗體陽性率（陽性定義為OD值≥臨界值，臨界值=陰性對照均值+0.15）、幾何平均滴度（GMT）；組間比較采用卡方檢驗（陽性率）或t檢驗（GMT），多因素分析采用Logistic回歸模型（自變量包括年齡、性別、地區(qū)、防蚊措施、戶外暴露時長等，因變量為IgG陽性狀態(tài)），篩選影響抗體陽性率的獨立危險因素。調查時間安排：2025年12月完成方案制定、調查員培訓、試劑與耗材采購；35月開展現(xiàn)場調查（避開本地登革熱高發(fā)期，如本省高發(fā)期為911月，則選擇35月）；68月完成血清檢測；910月進行數據清洗與分析；1112月撰寫調查報告（內容包括抗體水平分布、影響因素分析、防控建議）。組織分工：省級疾控中心負責方案制定、技術指導、實驗室檢測、數據分析；市級疾控中心協(xié)助樣本轉運、現(xiàn)場督導；縣級疾控中心協(xié)調鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）、村（社區(qū)）動員調查對象；村（社區(qū)）工作人員配合入戶通知與引導。經費預算總計約215萬元，其中樣本采集（問卷