己烯雌酚與雙酚A：胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成影響及健康風(fēng)險(xiǎn)探究一、引言1.1研究背景與意義在現(xiàn)代工業(yè)和生活中，己烯雌酚（Diethylstilbestrol，DES）和雙酚A（BisphenolA，BPA）應(yīng)用極為廣泛。己烯雌酚作為一種人工合成的非甾體雌激素，曾在醫(yī)藥領(lǐng)域用于治療先兆流產(chǎn)、功能性子宮出血等婦科疾病，還被用作促生長劑廣泛應(yīng)用于畜牧養(yǎng)殖業(yè)，旨在增加蛋白質(zhì)沉積和減少脂肪沉積。然而，隨著研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)其具有嚴(yán)重的副作用。20世紀(jì)70年代，有研究表明，孕期服用己烯雌酚的女性，其女兒在青春期后發(fā)生陰道腺病及陰道透明細(xì)胞癌的風(fēng)險(xiǎn)顯著增加，這一發(fā)現(xiàn)引起了科學(xué)界和公眾對(duì)己烯雌酚安全性的高度關(guān)注。盡管目前己烯雌酚在許多國家已被禁止用于食品和醫(yī)藥領(lǐng)域，但由于其曾大量使用，在環(huán)境中仍有殘留，通過食物鏈等途徑進(jìn)入人體，對(duì)人類健康構(gòu)成潛在威脅。雙酚A是生產(chǎn)聚碳酸酯和環(huán)氧樹脂的重要原料，廣泛應(yīng)用于嬰兒奶瓶、飯盒、食品飲料包裝材料、電子產(chǎn)品外殼等日常用品中。由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)與雌激素相似，具有一定的雌激素活性，能夠通過消化道、呼吸道以及皮膚進(jìn)入機(jī)體，對(duì)人體多個(gè)系統(tǒng)產(chǎn)生有害影響。多項(xiàng)研究表明，雙酚A暴露與生殖系統(tǒng)疾病、心血管疾病、代謝紊亂以及神經(jīng)行為異常等健康問題相關(guān)。在生殖系統(tǒng)方面，雙酚A可能干擾性激素的正常分泌和作用，影響生殖器官的發(fā)育和功能；在代謝方面，它可能與肥胖、糖尿病等代謝性疾病的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。胎盤在維持妊娠和胎兒發(fā)育過程中起著至關(guān)重要的作用，它不僅是母體與胎兒之間物質(zhì)交換的重要器官，還能合成和分泌多種類固醇激素，如雌激素、孕激素等，這些激素對(duì)于維持妊娠的正常進(jìn)行、促進(jìn)胎兒的生長發(fā)育以及調(diào)節(jié)母體的生理狀態(tài)都具有關(guān)鍵作用。而己烯雌酚和雙酚A作為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，可能會(huì)干擾胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成，進(jìn)而影響胎兒的正常發(fā)育，甚至對(duì)成年后的健康產(chǎn)生長期的不良影響。研究己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響，具有重要的科學(xué)意義和現(xiàn)實(shí)價(jià)值。從科學(xué)研究角度來看，有助于深入揭示環(huán)境內(nèi)分泌干擾物對(duì)胎盤功能的作用機(jī)制，豐富和完善環(huán)境毒理學(xué)和生殖生物學(xué)的理論體系；從現(xiàn)實(shí)應(yīng)用角度而言，能夠?yàn)樵u(píng)估這兩種化合物對(duì)人類健康的潛在危害提供科學(xué)依據(jù)，為制定相關(guān)的環(huán)境和健康政策提供有力支持，對(duì)于保障人類的生殖健康和后代的正常發(fā)育具有重要意義。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀國內(nèi)外針對(duì)己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成影響的研究取得了一系列成果，但仍存在一定的局限性。在國外，早期研究主要集中在己烯雌酚和雙酚A對(duì)動(dòng)物生殖系統(tǒng)的影響。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，孕期暴露于己烯雌酚的小鼠，其后代雌性小鼠出現(xiàn)了生殖器官發(fā)育異常的情況，包括子宮形態(tài)改變、卵巢功能受損等，進(jìn)一步研究表明，己烯雌酚能夠干擾小鼠胎盤類固醇激素的合成，導(dǎo)致雌激素和孕激素水平下降，影響胎兒的正常發(fā)育。關(guān)于雙酚A，有大量研究表明其可干擾動(dòng)物內(nèi)分泌系統(tǒng)。有研究團(tuán)隊(duì)通過對(duì)大鼠的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，雙酚A暴露會(huì)導(dǎo)致大鼠胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞功能異常，類固醇激素合成相關(guān)酶的活性降低，進(jìn)而影響雌激素和孕激素的合成。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方面，有學(xué)者利用人類胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞系研究發(fā)現(xiàn)，雙酚A能夠抑制細(xì)胞中細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）的表達(dá)，該酶是雌激素合成的關(guān)鍵酶，其表達(dá)下降導(dǎo)致雌激素合成減少。國內(nèi)研究也在逐步深入。有研究探討了己烯雌酚對(duì)人胎盤絨毛滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖和凋亡的影響，發(fā)現(xiàn)己烯雌酚在一定濃度范圍內(nèi)可抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)影響類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)。對(duì)于雙酚A，國內(nèi)有學(xué)者研究了其對(duì)人胎盤BeWo細(xì)胞系中雌激素和孕激素合成的影響，結(jié)果顯示雙酚A處理后，細(xì)胞中雌激素和孕激素的分泌量均顯著降低，且這種影響呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。還有研究通過檢測雙酚A暴露人群的胎盤組織中類固醇激素水平，發(fā)現(xiàn)雙酚A暴露與胎盤雌激素和孕激素水平下降存在相關(guān)性。盡管國內(nèi)外在該領(lǐng)域取得了一定進(jìn)展，但仍存在不足。一方面，現(xiàn)有的研究多集中在單一化合物對(duì)胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響，對(duì)于己烯雌酚和雙酚A聯(lián)合作用的研究較少，而在實(shí)際環(huán)境中，人類往往同時(shí)暴露于多種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，因此研究它們的聯(lián)合效應(yīng)具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。另一方面，目前對(duì)于己烯雌酚和雙酚A影響胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的具體分子機(jī)制尚未完全明確，雖然已知它們可能通過影響相關(guān)酶的活性和基因表達(dá)來發(fā)揮作用，但在信號(hào)傳導(dǎo)通路、轉(zhuǎn)錄調(diào)控等層面的研究還不夠深入。此外，現(xiàn)有的研究多以體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為主，缺乏大規(guī)模的人群流行病學(xué)研究來進(jìn)一步驗(yàn)證和完善相關(guān)結(jié)論。1.3研究目的與方法本研究旨在深入分析己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響，全面探討其作用機(jī)制，為評(píng)估二者對(duì)人類健康的潛在危害提供堅(jiān)實(shí)的科學(xué)依據(jù)。具體而言，通過實(shí)驗(yàn)研究，精確測定己烯雌酚和雙酚A處理后人類胎盤細(xì)胞系中雌激素、孕激素等類固醇激素的合成量變化，細(xì)致觀察細(xì)胞形態(tài)和功能的改變；深入探究二者影響胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的分子機(jī)制，包括對(duì)相關(guān)合成酶活性、基因表達(dá)以及信號(hào)傳導(dǎo)通路的作用。此外，結(jié)合已有研究成果，全面評(píng)估己烯雌酚和雙酚A暴露對(duì)人類生殖健康和胎兒發(fā)育的潛在風(fēng)險(xiǎn)。為實(shí)現(xiàn)上述研究目的，本研究采用多種研究方法。在實(shí)驗(yàn)研究方面，精心選取合適的人類胎盤細(xì)胞系，如BeWo細(xì)胞系、JEG-3細(xì)胞系等，將其分為不同實(shí)驗(yàn)組，分別添加不同濃度的己烯雌酚和雙酚A進(jìn)行處理，同時(shí)設(shè)立嚴(yán)格的對(duì)照組。運(yùn)用比色法、ELISA法等技術(shù)，準(zhǔn)確檢測細(xì)胞培養(yǎng)液和細(xì)胞裂解物中雌激素、孕激素、睪酮等類固醇激素的含量，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)精確測定類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平，采用Westernblot技術(shù)細(xì)致分析相關(guān)蛋白的表達(dá)變化。通過MTT法、CCK-8法等方法，全面評(píng)估己烯雌酚和雙酚A對(duì)胎盤細(xì)胞系的細(xì)胞毒性，利用流式細(xì)胞術(shù)深入分析細(xì)胞周期和凋亡情況。在文獻(xiàn)綜述方面，廣泛搜集國內(nèi)外關(guān)于己烯雌酚和雙酚A對(duì)胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成影響的相關(guān)研究文獻(xiàn)，對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)梳理和深入分析，總結(jié)已有研究的成果與不足，為實(shí)驗(yàn)研究提供科學(xué)的理論支持和研究思路。二、相關(guān)理論基礎(chǔ)2.1己烯雌酚和雙酚A概述己烯雌酚，化學(xué)名稱為(E)-4,4'-(1,2-二乙基-1,2-亞乙烯基)雙苯酚，其化學(xué)式為C_{18}H_{20}O_{2}，分子量為268.35。從化學(xué)結(jié)構(gòu)上看，它由兩個(gè)對(duì)羥基苯基通過乙烯基連接而成，這種結(jié)構(gòu)使其具有與天然雌激素相似的空間構(gòu)象，從而能夠與雌激素受體結(jié)合，發(fā)揮雌激素樣作用。己烯雌酚為白色結(jié)晶性粉末，幾乎不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、氯仿等有機(jī)溶劑。在歷史上，己烯雌酚曾被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥和畜牧業(yè)領(lǐng)域。在醫(yī)藥方面，它被用于治療多種婦科疾病，如功能性子宮出血、閉經(jīng)、更年期綜合征等，通過補(bǔ)充雌激素來調(diào)節(jié)女性內(nèi)分泌系統(tǒng)。在畜牧業(yè)中，己烯雌酚作為促生長劑使用，能夠提高動(dòng)物的生長速度和飼料轉(zhuǎn)化率，增加肉類產(chǎn)量。然而，隨著對(duì)其危害認(rèn)識(shí)的加深，許多國家和地區(qū)已禁止將己烯雌酚用于食品和醫(yī)藥領(lǐng)域。盡管如此，由于過去的大量使用，己烯雌酚在環(huán)境中仍有殘留，土壤、水體等環(huán)境介質(zhì)中均可檢測到己烯雌酚的存在。其主要來源包括曾經(jīng)使用過己烯雌酚的養(yǎng)殖場廢棄物排放、含有己烯雌酚的醫(yī)藥廢水排放等。人類暴露于己烯雌酚的途徑主要通過食物鏈，如食用受污染的肉類、魚類等食物，以及飲用受污染的水源。此外，職業(yè)暴露也是一種途徑，從事相關(guān)化工生產(chǎn)或研究的人員可能會(huì)通過吸入或皮膚接觸而暴露于己烯雌酚。雙酚A，化學(xué)名稱為2,2-雙(4-羥基苯基)丙烷，化學(xué)式為C_{15}H_{16}O_{2}，分子量為228.29。其化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有兩個(gè)酚羥基和一個(gè)異丙基，這種結(jié)構(gòu)賦予了雙酚A一定的穩(wěn)定性和化學(xué)活性。雙酚A常溫下為白色結(jié)晶粉末，可溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑。雙酚A是一種重要的工業(yè)原料，主要用于生產(chǎn)聚碳酸酯塑料和環(huán)氧樹脂。在聚碳酸酯塑料生產(chǎn)中，雙酚A與光氣等原料反應(yīng)，形成具有高強(qiáng)度、高透明度和良好耐熱性的聚碳酸酯，廣泛應(yīng)用于制造嬰兒奶瓶、水瓶、食品包裝、電子產(chǎn)品外殼等日常用品。環(huán)氧樹脂則常用于涂料、膠粘劑、電子封裝材料等領(lǐng)域，雙酚A作為環(huán)氧樹脂的重要單體，能夠提高樹脂的性能。由于雙酚A的廣泛應(yīng)用，其在環(huán)境中的分布也較為廣泛。在室內(nèi)灰塵、水體、土壤以及食品包裝材料中都能檢測到雙酚A。人類暴露于雙酚A的途徑主要有飲食攝入、皮膚接觸和空氣吸入。飲食攝入是最主要的途徑，雙酚A可以從食品包裝材料遷移到食品中，如用聚碳酸酯塑料容器盛裝的熱飲、罐頭食品的內(nèi)壁涂層等都可能含有雙酚A并遷移到食品中。皮膚接觸主要是通過接觸含有雙酚A的塑料制品，如觸摸購物小票（熱敏紙中常含有雙酚A作為顯色劑）、使用塑料制品等，雙酚A可以附著在皮膚上并被吸收?？諝馕雱t是由于在生產(chǎn)雙酚A或使用含雙酚A產(chǎn)品的過程中，雙酚A可能揮發(fā)到空氣中，被人體吸入。2.2人類胎盤細(xì)胞系與類固醇激素人類胎盤細(xì)胞系是研究胎盤功能和妊娠相關(guān)機(jī)制的重要工具。常見的人類胎盤細(xì)胞系如BeWo細(xì)胞系、JEG-3細(xì)胞系等，它們具有與胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞相似的生物學(xué)特性。BeWo細(xì)胞系來源于人絨毛膜癌細(xì)胞，保留了合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的部分功能，能夠合成和分泌多種胎盤激素，如人絨毛膜促性腺激素（hCG）、雌激素、孕激素等，并且具有良好的細(xì)胞融合能力，可模擬胎盤合體滋養(yǎng)層的形成過程。JEG-3細(xì)胞系同樣來源于人絨毛膜癌，它表達(dá)多種胎盤特異性的轉(zhuǎn)錄因子和蛋白，在研究胎盤細(xì)胞的增殖、分化以及激素合成調(diào)節(jié)等方面具有重要價(jià)值。這些胎盤細(xì)胞系在體外培養(yǎng)條件下，能夠穩(wěn)定地生長和傳代，便于進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)操作和研究。人類胎盤在妊娠過程中發(fā)揮著不可替代的作用。它是母體與胎兒之間進(jìn)行物質(zhì)交換的關(guān)鍵器官，通過胎盤，胎兒能夠從母體獲取氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)，如葡萄糖、氨基酸、脂肪酸等，同時(shí)將代謝廢物排出到母體血液中。胎盤還具有重要的內(nèi)分泌功能，能夠合成和分泌多種激素，如人絨毛膜促性腺激素、人胎盤生乳素、雌激素、孕激素等，這些激素對(duì)于維持妊娠的正常進(jìn)行、促進(jìn)胎兒的生長發(fā)育以及調(diào)節(jié)母體的生理狀態(tài)起著至關(guān)重要的作用。例如，人絨毛膜促性腺激素在妊娠早期能夠刺激卵巢黃體持續(xù)分泌孕激素，維持子宮內(nèi)膜的穩(wěn)定，為胚胎著床和發(fā)育提供良好的環(huán)境；人胎盤生乳素則參與調(diào)節(jié)母體的代謝過程，促進(jìn)母體對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的攝取和利用，有利于胎兒的生長。類固醇激素是一類含有環(huán)戊烷多氫菲母核的激素，在人體內(nèi)具有廣泛而重要的生理功能。常見的類固醇激素包括雌激素、孕激素、雄激素、皮質(zhì)醇、醛固酮等。在胎盤組織中，主要合成的類固醇激素為雌激素和孕激素。雌激素主要包括雌二醇（E2）、雌酮（E1）和雌三醇（E3），其合成過程較為復(fù)雜。胎盤缺乏合成雌激素所需的某些關(guān)鍵酶，如17α-羥化酶和17,20-裂解酶，因此需要從母體或胎兒獲取前體物質(zhì)。在妊娠早期，胎盤合成雌激素的前體主要來自母體血液中的脫氫表雄酮（DHEA）及其硫酸鹽（DHEAS），在胎盤細(xì)胞內(nèi)，DHEA和DHEAS經(jīng)過一系列酶的作用，如3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）、17β-羥基類固醇脫氫酶（17β-HSD）和細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）等，逐步轉(zhuǎn)化為雌激素。隨著妊娠的進(jìn)展，胎兒腎上腺逐漸發(fā)育成熟，胎兒來源的DHEAS成為胎盤合成雌激素的主要前體。孕激素主要為孕酮，胎盤利用母體來源的膽固醇和孕烯醇酮合成孕酮。合成孕酮所需的母體源性膽固醇通過LDL細(xì)胞膜受體介導(dǎo)的胞飲或內(nèi)在化作用方式，從母體血漿進(jìn)入滋養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)，在多種酶的催化下，如膽固醇側(cè)鏈裂解酶（P450scc）、3β-HSD等，逐步轉(zhuǎn)化為孕酮。類固醇激素在妊娠過程中發(fā)揮著重要的生理功能。雌激素能夠促進(jìn)子宮平滑肌的增生和肥大，增加子宮的血液供應(yīng)，為胎兒的生長發(fā)育提供良好的環(huán)境；還能促進(jìn)乳腺腺管的發(fā)育，為產(chǎn)后泌乳做準(zhǔn)備。此外，雌激素還參與調(diào)節(jié)母體的代謝過程，如促進(jìn)脂肪代謝、增加蛋白質(zhì)合成等。孕激素則具有維持妊娠、抑制子宮收縮、促進(jìn)子宮內(nèi)膜腺體分泌等作用。在妊娠早期，孕激素主要由卵巢黃體分泌，隨著妊娠的進(jìn)展，胎盤逐漸成為孕激素的主要來源。孕激素能夠使子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)化為分泌期，有利于胚胎著床和發(fā)育；還能抑制子宮平滑肌的收縮，防止流產(chǎn)和早產(chǎn)的發(fā)生。三、己烯雌酚對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響研究3.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法實(shí)驗(yàn)材料的準(zhǔn)備至關(guān)重要。選用純度高、穩(wěn)定性好的己烯雌酚標(biāo)準(zhǔn)品，其來源可靠，經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。在細(xì)胞系選取方面，采用BeWo細(xì)胞系作為研究對(duì)象。BeWo細(xì)胞系是從人絨毛膜癌中分離得到的，具有合體滋養(yǎng)層細(xì)胞的部分特性，能夠合成和分泌多種胎盤激素，且在體外培養(yǎng)條件下生長穩(wěn)定，便于實(shí)驗(yàn)操作和觀察。細(xì)胞培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基為DMEM/F12培養(yǎng)基，這種培養(yǎng)基富含多種營養(yǎng)成分，能夠滿足BeWo細(xì)胞生長和增殖的需求。同時(shí)添加10%的胎牛血清，胎牛血清中含有豐富的生長因子和營養(yǎng)物質(zhì)，有助于維持細(xì)胞的正常生理功能。此外，還需準(zhǔn)備青霉素、鏈霉素等抗生素，以防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)菌污染。實(shí)驗(yàn)分組合理科學(xué)。將處于對(duì)數(shù)生長期的BeWo細(xì)胞以每孔1\times10^{5}個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔板和6孔板中。待細(xì)胞貼壁生長良好后，進(jìn)行分組處理。共設(shè)置5個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，對(duì)照組加入等量的不含己烯雌酚的培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度的己烯雌酚溶液，使其終濃度分別為10^{-9}mol/L、10^{-8}mol/L、10^{-7}mol/L、10^{-6}mol/L、10^{-5}mol/L。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，以減少實(shí)驗(yàn)誤差。己烯雌酚處理方式嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范。將含有不同濃度己烯雌酚的培養(yǎng)基加入相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組孔中，對(duì)照組加入等體積的正常培養(yǎng)基。將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37^{\circ}C、5%CO_{2}的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)。在培養(yǎng)過程中，定期觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，包括細(xì)胞的形態(tài)、密度等，確保細(xì)胞處于正常的生長環(huán)境中。檢測類固醇激素含量采用ELISA法。培養(yǎng)結(jié)束后，小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液。按照ELISA試劑盒的操作說明書進(jìn)行檢測，首先將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加入到已包被有特異性抗體的微孔板中，孵育一段時(shí)間后，使類固醇激素與抗體充分結(jié)合。然后洗滌微孔板，去除未結(jié)合的物質(zhì)。接著加入酶標(biāo)記的二抗，孵育后再次洗滌。最后加入底物溶液，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，通過酶標(biāo)儀在特定波長下測定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出細(xì)胞培養(yǎng)液中雌激素、孕激素等類固醇激素的含量。檢測類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平運(yùn)用RT-PCR技術(shù)。收集經(jīng)過己烯雌酚處理的BeWo細(xì)胞，使用Trizol試劑提取細(xì)胞總RNA。通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，具體操作按照試劑盒說明書進(jìn)行。以cDNA為模板，設(shè)計(jì)特異性引物，引物的設(shè)計(jì)根據(jù)相關(guān)基因的序列信息，利用專業(yè)的引物設(shè)計(jì)軟件進(jìn)行，確保引物的特異性和擴(kuò)增效率。引物序列經(jīng)過BLAST比對(duì)驗(yàn)證，避免非特異性擴(kuò)增。進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)，反應(yīng)體系包括cDNA模板、上下游引物、dNTPs、TaqDNA聚合酶和PCR緩沖液等。反應(yīng)條件經(jīng)過優(yōu)化，包括預(yù)變性、變性、退火、延伸等步驟，每個(gè)步驟的溫度和時(shí)間都經(jīng)過精確設(shè)定。擴(kuò)增結(jié)束后，通過瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產(chǎn)物，利用凝膠成像系統(tǒng)觀察并拍照記錄結(jié)果，采用凝膠分析軟件對(duì)條帶進(jìn)行灰度分析，以GAPDH作為內(nèi)參基因，計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量。3.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析在檢測類固醇激素含量時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，不同濃度己烯雌酚處理組的雌激素含量發(fā)生了顯著變化。隨著己烯雌酚濃度的增加，雌激素含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢（如圖1所示）。當(dāng)己烯雌酚濃度為10^{-9}mol/L時(shí)，雌激素含量較對(duì)照組略有升高，但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；當(dāng)濃度達(dá)到10^{-8}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高，與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），達(dá)到峰值；隨后，隨著己烯雌酚濃度繼續(xù)增加，雌激素含量逐漸下降，當(dāng)濃度為10^{-5}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。對(duì)于孕激素含量，隨著己烯雌酚濃度的升高，呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢（如圖2所示）。各實(shí)驗(yàn)組孕激素含量均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），且在10^{-5}mol/L濃度下，孕激素含量下降最為明顯。在睪酮含量方面，與對(duì)照組相比，各實(shí)驗(yàn)組睪酮含量無明顯變化（P>0.05），說明己烯雌酚對(duì)胎盤細(xì)胞系中睪酮的合成影響不顯著。<插入圖1：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中雌激素含量變化折線圖><插入圖2：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖><插入圖1：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中雌激素含量變化折線圖><插入圖2：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖><插入圖2：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖>在類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平檢測中，細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）是雌激素合成的關(guān)鍵酶基因。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著己烯雌酚濃度的增加，CYP19A1基因的mRNA表達(dá)水平呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢（如圖3所示）。在10^{-8}mol/L己烯雌酚濃度下，CYP19A1基因的mRNA表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組（P<0.05），而當(dāng)濃度達(dá)到10^{-5}mol/L時(shí)，其表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）基因參與孕激素和雄激素的合成，隨著己烯雌酚濃度的升高，3β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平逐漸降低（如圖4所示）。各實(shí)驗(yàn)組3β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），且在高濃度己烯雌酚處理下，表達(dá)水平下降更為明顯。17β-羥基類固醇脫氫酶（17β-HSD）基因在雌激素和雄激素的合成過程中發(fā)揮重要作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，17β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平在己烯雌酚處理后無明顯變化（P>0.05），表明己烯雌酚對(duì)該基因的表達(dá)影響較小。<插入圖3：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中CYP19A1基因mRNA表達(dá)水平變化折線圖><插入圖4：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖><插入圖3：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中CYP19A1基因mRNA表達(dá)水平變化折線圖><插入圖4：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖><插入圖4：不同濃度己烯雌酚處理下BeWo細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖>綜上所述，己烯雌酚對(duì)人類胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成具有顯著影響，且這種影響呈現(xiàn)出濃度依賴性。低濃度的己烯雌酚可能通過上調(diào)CYP19A1基因的表達(dá)，促進(jìn)雌激素的合成，而高濃度的己烯雌酚則可能抑制CYP19A1基因的表達(dá)，減少雌激素的合成。同時(shí)，己烯雌酚對(duì)孕激素合成的抑制作用可能是通過下調(diào)3β-HSD基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。己烯雌酚對(duì)睪酮合成及17β-HSD基因表達(dá)影響不明顯，說明其對(duì)這方面的作用相對(duì)較弱。這些結(jié)果表明，己烯雌酚作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，能夠干擾胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成，進(jìn)而可能對(duì)胎兒的正常發(fā)育產(chǎn)生不良影響。3.3影響機(jī)制探討己烯雌酚能夠與雌激素受體（ER）發(fā)生特異性結(jié)合。雌激素受體主要包括ERα和ERβ兩種亞型，它們廣泛分布于人體的各種組織和細(xì)胞中，在胎盤細(xì)胞中也有表達(dá)。己烯雌酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)與天然雌激素雌二醇相似，其分子中的酚羥基和乙烯基等結(jié)構(gòu)使其能夠與雌激素受體的配體結(jié)合域緊密結(jié)合，形成己烯雌酚-雌激素受體復(fù)合物。這種復(fù)合物具有較高的穩(wěn)定性，能夠在細(xì)胞內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用。研究表明，己烯雌酚與雌激素受體的親和力較強(qiáng)，其結(jié)合常數(shù)與雌二醇相近，這使得己烯雌酚能夠有效地競爭雌激素受體的結(jié)合位點(diǎn)，干擾天然雌激素與受體的正常結(jié)合，從而影響雌激素信號(hào)傳導(dǎo)通路的正常功能。在正常情況下，天然雌激素與雌激素受體結(jié)合后，會(huì)引發(fā)一系列的信號(hào)傳導(dǎo)事件。雌激素-雌激素受體復(fù)合物首先會(huì)發(fā)生構(gòu)象變化，然后與熱休克蛋白等輔助因子解離，進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)。在細(xì)胞核中，復(fù)合物與特定的DNA序列，即雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合，招募轉(zhuǎn)錄因子和其他相關(guān)蛋白，形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物，啟動(dòng)靶基因的轉(zhuǎn)錄過程。這些靶基因包括與細(xì)胞增殖、分化、代謝以及類固醇激素合成相關(guān)的基因，通過調(diào)節(jié)這些基因的表達(dá)，雌激素發(fā)揮其在生殖、發(fā)育和維持生理平衡等方面的重要作用。當(dāng)己烯雌酚與雌激素受體結(jié)合后，會(huì)對(duì)這一正常的信號(hào)傳導(dǎo)通路產(chǎn)生干擾。一方面，己烯雌酚-雌激素受體復(fù)合物雖然能夠與雌激素反應(yīng)元件結(jié)合，但它可能無法有效地招募轉(zhuǎn)錄所需的各種因子，或者招募的因子與天然雌激素-雌激素受體復(fù)合物招募的因子存在差異，從而導(dǎo)致靶基因的轉(zhuǎn)錄效率發(fā)生改變。例如，對(duì)于細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因，低濃度的己烯雌酚可能通過與雌激素受體結(jié)合，招募某些轉(zhuǎn)錄激活因子，促進(jìn)CYP19A1基因的轉(zhuǎn)錄，使其mRNA表達(dá)水平升高，進(jìn)而增加雌激素的合成；而高濃度的己烯雌酚可能導(dǎo)致復(fù)合物招募轉(zhuǎn)錄抑制因子，抑制CYP19A1基因的轉(zhuǎn)錄，使其mRNA表達(dá)水平降低，最終減少雌激素的合成。另一方面，己烯雌酚-雌激素受體復(fù)合物還可能通過與其他信號(hào)傳導(dǎo)通路相互作用，間接影響類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)，己烯雌酚可以激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，該通路的激活可能會(huì)影響轉(zhuǎn)錄因子的活性，如磷酸化的ERK1/2可以進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)某些轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化狀態(tài)，從而影響類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)。此外，己烯雌酚還可能干擾磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信號(hào)通路，該通路在細(xì)胞的增殖、存活和代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，其異常激活或抑制可能會(huì)對(duì)胎盤細(xì)胞的功能產(chǎn)生影響，進(jìn)而影響類固醇激素的合成。除了與雌激素受體結(jié)合并影響信號(hào)傳導(dǎo)通路外，己烯雌酚還可能對(duì)參與類固醇激素合成的關(guān)鍵酶的活性產(chǎn)生直接影響。細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）是雌激素合成過程中的關(guān)鍵酶，它能夠催化雄激素向雌激素的轉(zhuǎn)化。己烯雌酚可能通過與CYP19A1酶分子直接相互作用，改變其空間構(gòu)象，從而影響其催化活性。有研究表明，高濃度的己烯雌酚可能抑制CYP19A1酶的活性中心與底物的結(jié)合，降低酶的催化效率，導(dǎo)致雌激素合成減少。3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）在孕激素和雄激素的合成過程中起著重要作用，己烯雌酚可能通過影響3β-HSD的活性，干擾孕激素和雄激素的合成。具體來說，己烯雌酚可能抑制3β-HSD的活性，使孕烯醇酮向孕酮的轉(zhuǎn)化受阻，從而導(dǎo)致孕激素合成減少。己烯雌酚對(duì)這些關(guān)鍵酶活性的影響，進(jìn)一步證實(shí)了其對(duì)胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的干擾作用。四、雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響研究4.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法實(shí)驗(yàn)材料的選取至關(guān)重要，雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，因此采用高純度的雙酚A標(biāo)準(zhǔn)品，確保其化學(xué)結(jié)構(gòu)的完整性和穩(wěn)定性。細(xì)胞系方面，選用JEG-3細(xì)胞系作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象。JEG-3細(xì)胞系來源于人絨毛膜癌，具有胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的特性，能夠表達(dá)多種與胎盤功能相關(guān)的基因和蛋白，在研究胎盤激素合成和分泌方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢。細(xì)胞培養(yǎng)所需的培養(yǎng)基為RPMI1640培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基富含多種氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等營養(yǎng)成分，能夠?yàn)镴EG-3細(xì)胞的生長和代謝提供良好的環(huán)境。同時(shí)添加10%的胎牛血清，胎牛血清中含有豐富的生長因子、激素和營養(yǎng)物質(zhì)，能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖和維持細(xì)胞的正常生理功能。此外，還需準(zhǔn)備適量的青霉素和鏈霉素，其終濃度分別為100U/mL和100μg/mL，用于防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中的細(xì)菌污染。實(shí)驗(yàn)分組科學(xué)合理，將處于對(duì)數(shù)生長期的JEG-3細(xì)胞以每孔1\times10^{5}個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔板和6孔板中。待細(xì)胞貼壁生長良好后，進(jìn)行分組處理。共設(shè)置5個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，對(duì)照組加入等量的不含雙酚A的培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)組分別加入不同濃度的雙酚A溶液，使其終濃度分別為10^{-10}mol/L、10^{-9}mol/L、10^{-8}mol/L、10^{-7}mol/L、10^{-6}mol/L。每個(gè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，以減少實(shí)驗(yàn)誤差，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。雙酚A處理方式嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范，將含有不同濃度雙酚A的培養(yǎng)基加入相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)組孔中，對(duì)照組加入等體積的正常培養(yǎng)基。將細(xì)胞培養(yǎng)板置于37^{\circ}C、5%CO_{2}的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)。在培養(yǎng)過程中，定期觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)，包括細(xì)胞的形態(tài)、密度、貼壁情況等，確保細(xì)胞處于正常的生長環(huán)境中，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理可能出現(xiàn)的污染、細(xì)胞生長異常等問題。檢測類固醇激素含量采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS/MS）技術(shù)。培養(yǎng)結(jié)束后，小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液。首先對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理，包括蛋白質(zhì)沉淀、固相萃取等步驟，以去除雜質(zhì)和干擾物質(zhì)，提高檢測的準(zhǔn)確性。然后將處理后的樣品注入高效液相色譜儀中，通過色譜柱的分離作用，將不同的類固醇激素分離開來。接著，與質(zhì)譜儀聯(lián)用，利用質(zhì)譜的高靈敏度和高特異性，對(duì)分離后的類固醇激素進(jìn)行定性和定量分析。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖和質(zhì)譜圖，確定樣品中雌激素、孕激素、睪酮等類固醇激素的保留時(shí)間和特征離子，通過外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法計(jì)算出其含量。檢測類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)。收集經(jīng)過雙酚A處理的JEG-3細(xì)胞，使用TRIzol試劑提取細(xì)胞總RNA。提取過程嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，確保RNA的完整性和純度。通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，反轉(zhuǎn)錄條件經(jīng)過優(yōu)化，以保證反轉(zhuǎn)錄效率和cDNA的質(zhì)量。以cDNA為模板，設(shè)計(jì)特異性引物，引物的設(shè)計(jì)根據(jù)相關(guān)基因的序列信息，利用專業(yè)的引物設(shè)計(jì)軟件進(jìn)行，確保引物的特異性、擴(kuò)增效率和退火溫度的合理性。引物序列經(jīng)過BLAST比對(duì)驗(yàn)證，避免非特異性擴(kuò)增。進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)，反應(yīng)體系包括cDNA模板、上下游引物、SYBRGreen熒光染料、dNTPs、TaqDNA聚合酶和PCR緩沖液等。反應(yīng)條件經(jīng)過優(yōu)化，包括預(yù)變性、變性、退火、延伸等步驟，每個(gè)步驟的溫度和時(shí)間都經(jīng)過精確設(shè)定。在PCR反應(yīng)過程中，通過熒光信號(hào)的實(shí)時(shí)監(jiān)測，記錄每個(gè)循環(huán)的熒光強(qiáng)度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量，以β-actin作為內(nèi)參基因，對(duì)目的基因的表達(dá)水平進(jìn)行歸一化處理。4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析在類固醇激素含量檢測方面，與對(duì)照組相比，不同濃度雙酚A處理組的雌激素含量變化顯著（圖5）。隨著雙酚A濃度的升高，雌激素含量呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。當(dāng)雙酚A濃度為10^{-10}mol/L時(shí)，雌激素含量與對(duì)照組相比無明顯差異（P>0.05）；當(dāng)濃度達(dá)到10^{-9}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高，與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），達(dá)到峰值；隨后，隨著雙酚A濃度繼續(xù)增加，雌激素含量逐漸下降，當(dāng)濃度為10^{-6}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。孕激素含量方面，隨著雙酚A濃度的升高，呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢（圖6）。各實(shí)驗(yàn)組孕激素含量均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），且在10^{-6}mol/L濃度下，孕激素含量下降最為明顯。在睪酮含量上，與對(duì)照組相比，各實(shí)驗(yàn)組睪酮含量無明顯變化（P>0.05），表明雙酚A對(duì)胎盤細(xì)胞系中睪酮的合成影響不顯著。<插入圖5：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中雌激素含量變化折線圖><插入圖6：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖><插入圖5：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中雌激素含量變化折線圖><插入圖6：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖><插入圖6：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中孕激素含量變化柱狀圖>類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平檢測結(jié)果顯示，細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因作為雌激素合成的關(guān)鍵酶基因，隨著雙酚A濃度的增加，其mRNA表達(dá)水平呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢（圖7）。在10^{-9}mol/L雙酚A濃度下，CYP19A1基因的mRNA表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組（P<0.05），而當(dāng)濃度達(dá)到10^{-6}mol/L時(shí)，其表達(dá)水平顯著低于對(duì)照組（P<0.05）。3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）基因參與孕激素和雄激素的合成，隨著雙酚A濃度的升高，3β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平逐漸降低（圖8）。各實(shí)驗(yàn)組3β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平均顯著低于對(duì)照組（P<0.05），且在高濃度雙酚A處理下，表達(dá)水平下降更為明顯。17β-羥基類固醇脫氫酶（17β-HSD）基因在雌激素和雄激素的合成過程中發(fā)揮重要作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，17β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平在雙酚A處理后無明顯變化（P>0.05），表明雙酚A對(duì)該基因的表達(dá)影響較小。<插入圖7：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中CYP19A1基因mRNA表達(dá)水平變化折線圖><插入圖8：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖><插入圖7：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中CYP19A1基因mRNA表達(dá)水平變化折線圖><插入圖8：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖><插入圖8：不同濃度雙酚A處理下JEG-3細(xì)胞系中3β-HSD基因mRNA表達(dá)水平變化柱狀圖>綜上所述，雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成具有顯著影響，且這種影響呈現(xiàn)出濃度依賴性。低濃度的雙酚A可能通過上調(diào)CYP19A1基因的表達(dá)，促進(jìn)雌激素的合成，而高濃度的雙酚A則可能抑制CYP19A1基因的表達(dá)，減少雌激素的合成。同時(shí)，雙酚A對(duì)孕激素合成的抑制作用可能是通過下調(diào)3β-HSD基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。雙酚A對(duì)睪酮合成及17β-HSD基因表達(dá)影響不明顯，說明其對(duì)這方面的作用相對(duì)較弱。這些結(jié)果表明，雙酚A作為一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，能夠干擾胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成，進(jìn)而可能對(duì)胎兒的正常發(fā)育產(chǎn)生不良影響。4.3影響機(jī)制探討雙酚A是一種典型的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，具有擬雌激素和抗雄激素等生物學(xué)活性。其化學(xué)結(jié)構(gòu)與天然雌激素雌二醇相似，這使得雙酚A能夠與雌激素受體（ER）發(fā)生特異性結(jié)合。雌激素受體主要有ERα和ERβ兩種亞型，在人類胎盤細(xì)胞系中均有表達(dá)。雙酚A與雌激素受體結(jié)合后，形成雙酚A-雌激素受體復(fù)合物，這種復(fù)合物能夠進(jìn)入細(xì)胞核，與特定的DNA序列，即雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合。然而，雙酚A-雌激素受體復(fù)合物與ERE結(jié)合后，其對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用與天然雌激素-雌激素受體復(fù)合物存在差異。研究表明，低濃度的雙酚A可能通過與雌激素受體結(jié)合，招募某些轉(zhuǎn)錄激活因子，促進(jìn)與雌激素合成相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。例如，在本實(shí)驗(yàn)中，低濃度雙酚A處理下，細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因的mRNA表達(dá)水平升高，從而促進(jìn)雌激素的合成。而高濃度的雙酚A可能導(dǎo)致復(fù)合物招募轉(zhuǎn)錄抑制因子，抑制相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。當(dāng)雙酚A濃度較高時(shí)，CYP19A1基因的mRNA表達(dá)水平降低，雌激素合成減少。此外，雙酚A還可能通過與其他核受體相互作用，如雄激素受體（AR）、甲狀腺激素受體（TR）等，干擾它們的正常信號(hào)傳導(dǎo)通路，間接影響類固醇激素的合成。有研究發(fā)現(xiàn)，雙酚A可以與雄激素受體結(jié)合，抑制雄激素的作用，進(jìn)而影響類固醇激素的合成和代謝。雙酚A還可能對(duì)參與類固醇激素合成的關(guān)鍵酶的活性產(chǎn)生直接影響。細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）是雌激素合成過程中的關(guān)鍵酶，它催化雄激素向雌激素的轉(zhuǎn)化。雙酚A可能通過與CYP19A1酶分子直接相互作用，改變其空間構(gòu)象，從而影響其催化活性。高濃度的雙酚A可能抑制CYP19A1酶的活性中心與底物的結(jié)合，降低酶的催化效率，導(dǎo)致雌激素合成減少。3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）在孕激素和雄激素的合成過程中起著重要作用，雙酚A可能通過影響3β-HSD的活性，干擾孕激素和雄激素的合成。具體來說，雙酚A可能抑制3β-HSD的活性，使孕烯醇酮向孕酮的轉(zhuǎn)化受阻，從而導(dǎo)致孕激素合成減少。研究表明，雙酚A可以與3β-HSD的活性位點(diǎn)結(jié)合，抑制其催化活性，進(jìn)而影響類固醇激素的合成。此外，雙酚A還可能通過影響細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)通路來干擾類固醇激素的合成。絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路在細(xì)胞的增殖、分化和代謝調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。雙酚A可以激活MAPK信號(hào)通路，該通路的激活可能會(huì)影響轉(zhuǎn)錄因子的活性，如磷酸化的ERK1/2可以進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)某些轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化狀態(tài)，從而影響類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)。磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信號(hào)通路也參與細(xì)胞的多種生理過程。雙酚A可能干擾PI3K/Akt信號(hào)通路，影響細(xì)胞的存活和代謝，進(jìn)而對(duì)胎盤細(xì)胞的功能產(chǎn)生影響，最終影響類固醇激素的合成。有研究發(fā)現(xiàn)，雙酚A處理后，PI3K/Akt信號(hào)通路的關(guān)鍵蛋白表達(dá)和磷酸化水平發(fā)生改變，導(dǎo)致該通路的活性受到抑制，從而影響類固醇激素的合成。五、己烯雌酚和雙酚A影響的對(duì)比分析5.1影響程度對(duì)比在對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響程度上，己烯雌酚和雙酚A既有相似之處，也存在明顯差異。在雌激素合成方面，二者均呈現(xiàn)出低濃度促進(jìn)、高濃度抑制的趨勢。己烯雌酚在濃度為10^{-8}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高達(dá)到峰值，隨后隨著濃度增加而下降。雙酚A則在10^{-9}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高至峰值，之后隨著濃度升高而降低。從峰值濃度來看，雙酚A促進(jìn)雌激素合成的峰值濃度比己烯雌酚低一個(gè)數(shù)量級(jí)，這表明雙酚A在較低濃度下就能對(duì)雌激素合成產(chǎn)生明顯的促進(jìn)作用。在高濃度抑制階段，當(dāng)己烯雌酚濃度達(dá)到10^{-5}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著低于對(duì)照組；雙酚A在濃度為10^{-6}mol/L時(shí)，雌激素含量就顯著低于對(duì)照組。這說明雙酚A在相對(duì)較低的濃度下就能對(duì)雌激素合成產(chǎn)生明顯的抑制作用，其抑制效果在較低濃度時(shí)更為顯著。這種差異可能與二者和雌激素受體的結(jié)合能力以及對(duì)相關(guān)信號(hào)通路的激活或抑制程度不同有關(guān)。己烯雌酚與雌激素受體的親和力較強(qiáng)，可能在較高濃度下才會(huì)對(duì)受體介導(dǎo)的信號(hào)通路產(chǎn)生強(qiáng)烈干擾，從而抑制雌激素合成；而雙酚A雖然與雌激素受體親和力相對(duì)較弱，但可能更容易激活某些抑制性信號(hào)通路，導(dǎo)致在較低濃度下就出現(xiàn)雌激素合成的抑制。對(duì)于孕激素合成，己烯雌酚和雙酚A都表現(xiàn)出抑制作用，且隨著濃度升高抑制作用增強(qiáng)。然而，抑制程度存在差異。己烯雌酚在10^{-5}mol/L濃度下，孕激素含量下降明顯。雙酚A在10^{-6}mol/L濃度下，孕激素含量下降最為明顯。雙酚A在相對(duì)較低的濃度下就能對(duì)孕激素合成產(chǎn)生顯著抑制，這可能是因?yàn)殡p酚A對(duì)3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）活性的抑制作用更為敏感。3β-HSD是孕激素合成的關(guān)鍵酶，雙酚A可能更容易與該酶結(jié)合，改變其活性中心的構(gòu)象，從而抑制孕激素的合成。在對(duì)睪酮合成的影響上，己烯雌酚和雙酚A對(duì)胎盤細(xì)胞系中睪酮的合成均無明顯影響。這表明二者對(duì)睪酮合成相關(guān)的酶和信號(hào)通路的干擾作用較弱，睪酮的合成相對(duì)較為穩(wěn)定，不易受到這兩種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的影響。在對(duì)類固醇激素合成相關(guān)基因表達(dá)的影響方面，對(duì)于細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因，己烯雌酚和雙酚A均使其表達(dá)呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。但己烯雌酚在10^{-8}mol/L時(shí)，CYP19A1基因的mRNA表達(dá)水平顯著升高；雙酚A在10^{-9}mol/L時(shí)，該基因表達(dá)顯著升高。雙酚A在較低濃度下就能對(duì)CYP19A1基因表達(dá)產(chǎn)生促進(jìn)作用。在抑制階段，己烯雌酚在10^{-5}mol/L時(shí)，CYP19A1基因表達(dá)顯著降低；雙酚A在10^{-6}mol/L時(shí)，表達(dá)顯著降低。雙酚A在較低濃度下就可抑制該基因表達(dá)，這可能與它們對(duì)轉(zhuǎn)錄因子的招募和調(diào)控能力不同有關(guān)。對(duì)于3β-HSD基因，二者均使其表達(dá)逐漸降低，但雙酚A在較低濃度下就表現(xiàn)出明顯的抑制作用，這進(jìn)一步說明了雙酚A對(duì)孕激素合成相關(guān)基因的影響更為敏感。而17β-HSD基因的mRNA表達(dá)水平在己烯雌酚和雙酚A處理后均無明顯變化，表明二者對(duì)該基因的表達(dá)調(diào)控作用不明顯。5.2影響機(jī)制對(duì)比己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響機(jī)制既有相同之處，也存在差異，這與它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。二者化學(xué)結(jié)構(gòu)具有一定相似性，都含有酚羥基，這使得它們能夠與雌激素受體（ER）發(fā)生特異性結(jié)合。己烯雌酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)為(E)-4,4'-(1,2-二乙基-1,2-亞乙烯基)雙苯酚，雙酚A的化學(xué)結(jié)構(gòu)為2,2-雙(4-羥基苯基)丙烷，相似的結(jié)構(gòu)賦予了它們類似的生物學(xué)活性。當(dāng)它們與雌激素受體結(jié)合后，都能形成相應(yīng)的復(fù)合物，進(jìn)而進(jìn)入細(xì)胞核與雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合，影響基因的轉(zhuǎn)錄過程。在雌激素合成方面，低濃度時(shí)，二者都能通過與雌激素受體結(jié)合，招募轉(zhuǎn)錄激活因子，促進(jìn)細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因的轉(zhuǎn)錄，從而增加雌激素的合成。然而，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)也存在差異，己烯雌酚的分子中含有乙烯基，而雙酚A的分子中含有異丙基，這種結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致它們在與雌激素受體的結(jié)合能力以及對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響上有所不同。己烯雌酚與雌激素受體的親和力相對(duì)較強(qiáng)，其與受體結(jié)合后形成的復(fù)合物對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用更為顯著。研究表明，己烯雌酚-雌激素受體復(fù)合物在招募轉(zhuǎn)錄因子時(shí)，能夠更有效地促進(jìn)某些基因的表達(dá)，同時(shí)也能更強(qiáng)烈地抑制其他基因的表達(dá)。相比之下，雙酚A與雌激素受體的親和力較弱，但其對(duì)某些信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活或抑制作用可能更為敏感。雙酚A可能更容易激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，該通路的激活會(huì)影響轉(zhuǎn)錄因子的活性，進(jìn)而對(duì)類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)產(chǎn)生影響。此外，雙酚A還可能通過與其他核受體相互作用，如雄激素受體（AR）、甲狀腺激素受體（TR）等，干擾它們的正常信號(hào)傳導(dǎo)通路，間接影響類固醇激素的合成，而己烯雌酚在這方面的作用相對(duì)較弱。在對(duì)參與類固醇激素合成的關(guān)鍵酶的影響方面，己烯雌酚和雙酚A都能對(duì)細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）和3β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）的活性產(chǎn)生影響。高濃度時(shí)，二者都能抑制CYP19A1酶的活性，減少雌激素的合成；都能抑制3β-HSD的活性，阻礙孕烯醇酮向孕酮的轉(zhuǎn)化，從而降低孕激素的合成。但它們對(duì)酶活性的影響程度和方式可能存在差異。己烯雌酚可能通過與酶分子直接相互作用，改變其空間構(gòu)象，從而影響酶的活性中心與底物的結(jié)合。雙酚A除了與酶分子直接作用外，還可能通過影響細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)通路，間接調(diào)節(jié)酶的活性。研究發(fā)現(xiàn)，雙酚A可以通過激活MAPK信號(hào)通路，調(diào)節(jié)某些蛋白激酶的活性，這些蛋白激酶可能會(huì)對(duì)CYP19A1和3β-HSD的磷酸化狀態(tài)產(chǎn)生影響，進(jìn)而改變酶的活性。六、對(duì)人體健康的危害及防治建議6.1對(duì)人體健康的潛在危害己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的干擾，會(huì)對(duì)孕婦、胎兒及后代健康產(chǎn)生多方面的不良影響。對(duì)于孕婦而言，己烯雌酚和雙酚A干擾胎盤類固醇激素合成后，可能導(dǎo)致孕期激素失衡。雌激素和孕激素水平的異常變化，會(huì)影響子宮的正常生理功能，增加孕期并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。研究表明，孕期接觸己烯雌酚可能會(huì)使孕婦出現(xiàn)妊娠高血壓綜合征、妊娠期糖尿病等疾病的概率升高。雙酚A暴露也與孕婦甲狀腺功能異常相關(guān)，甲狀腺激素與類固醇激素相互作用，共同維持妊娠的正常進(jìn)行，雙酚A導(dǎo)致的甲狀腺功能異?？赡苓M(jìn)一步加重孕期激素紊亂，影響孕婦的身體健康。此外，激素失衡還可能導(dǎo)致孕婦情緒波動(dòng)、焦慮、抑郁等心理問題，對(duì)孕婦的心理健康產(chǎn)生負(fù)面影響。對(duì)胎兒的發(fā)育來說，影響更為嚴(yán)重。在胎兒發(fā)育的關(guān)鍵時(shí)期，類固醇激素對(duì)器官的形成和發(fā)育起著至關(guān)重要的作用。己烯雌酚和雙酚A干擾雌激素和孕激素的合成，會(huì)影響胎兒生殖器官的正常發(fā)育。孕期接觸己烯雌酚的女性，其女兒可能出現(xiàn)陰道腺病、陰道透明細(xì)胞癌等生殖系統(tǒng)疾病，兒子則可能出現(xiàn)睪丸發(fā)育不全、隱睪、精子數(shù)量減少和活力下降等問題。雙酚A也會(huì)對(duì)胎兒生殖系統(tǒng)發(fā)育產(chǎn)生不良影響，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，孕期暴露于雙酚A的小鼠，其后代雄性小鼠的睪丸重量減輕，生精細(xì)胞數(shù)量減少，雌性小鼠的卵巢功能受損，動(dòng)情周期紊亂。此外，胎兒的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育也會(huì)受到影響。雌激素和孕激素在胎兒神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育過程中參與神經(jīng)細(xì)胞的增殖、分化、遷移和凋亡等過程，己烯雌酚和雙酚A干擾這些激素的合成，可能導(dǎo)致胎兒神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育異常，增加自閉癥、多動(dòng)癥等神經(jīng)發(fā)育障礙疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。有研究對(duì)孕期暴露于雙酚A的兒童進(jìn)行跟蹤調(diào)查，發(fā)現(xiàn)其在認(rèn)知、行為和情緒方面存在問題的概率更高。對(duì)于后代成年后的健康，己烯雌酚和雙酚A的影響也不容忽視。早期的暴露可能會(huì)導(dǎo)致代謝紊亂，增加肥胖、糖尿病等代謝性疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，孕期暴露于雙酚A的大鼠，其后代在成年后出現(xiàn)肥胖和胰島素抵抗的概率明顯增加。這可能是因?yàn)殡p酚A干擾了胎盤激素的合成，影響了胎兒脂肪細(xì)胞的分化和代謝調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)。己烯雌酚和雙酚A還可能影響免疫系統(tǒng)的發(fā)育和功能，使后代更容易受到感染性疾病的侵襲。研究發(fā)現(xiàn)，孕期接觸己烯雌酚的女性，其后代的免疫細(xì)胞功能可能存在異常，對(duì)病原體的抵抗力下降。此外，心血管系統(tǒng)也可能受到影響，增加心血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。有研究表明，雙酚A暴露與血壓升高、心血管疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)，其機(jī)制可能與干擾激素信號(hào)傳導(dǎo)、影響血管內(nèi)皮細(xì)胞功能等有關(guān)。6.2防治措施與建議為了減少己烯雌酚和雙酚A的暴露，降低其對(duì)人體健康的風(fēng)險(xiǎn)，需要從監(jiān)管、替代品研發(fā)、公眾意識(shí)提升等多個(gè)方面采取綜合措施。在監(jiān)管方面，政府應(yīng)加強(qiáng)對(duì)己烯雌酚和雙酚A生產(chǎn)、使用和排放的監(jiān)管力度。制定嚴(yán)格的法律法規(guī)，明確限制己烯雌酚在醫(yī)藥和畜牧養(yǎng)殖業(yè)中的使用，禁止其在食品領(lǐng)域的應(yīng)用。對(duì)于雙酚A，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)其在塑料制品生產(chǎn)中的使用規(guī)范，制定嚴(yán)格的遷移限量標(biāo)準(zhǔn)，確保食品包裝材料、嬰兒奶瓶等與食品接觸的塑料制品中雙酚A的遷移量符合安全要求。加強(qiáng)對(duì)工業(yè)廢水和廢棄物排放的監(jiān)管，嚴(yán)格控制含有己烯雌酚和雙酚A的廢水和廢棄物的排放，要求企業(yè)必須對(duì)其進(jìn)行有效的處理，達(dá)標(biāo)后才能排放。加大對(duì)違規(guī)行為的處罰力度，提高企業(yè)的違法成本，以確保相關(guān)法規(guī)的有效執(zhí)行。建立健全環(huán)境監(jiān)測體系，定期對(duì)水體、土壤、空氣等環(huán)境介質(zhì)中的己烯雌酚和雙酚A含量進(jìn)行監(jiān)測，及時(shí)掌握其環(huán)境濃度和分布情況，為評(píng)估其對(duì)環(huán)境和人體健康的影響提供數(shù)據(jù)支持。加強(qiáng)對(duì)食品中己烯雌酚和雙酚A殘留的檢測，建立完善的食品安全檢測體系，確保消費(fèi)者的飲食安全。在替代品研發(fā)方面，鼓勵(lì)科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)加大對(duì)己烯雌酚和雙酚A替代品的研發(fā)投入。對(duì)于己烯雌酚，研發(fā)具有相同或更好治療效果且安全性更高的藥物替代品，用于治療相關(guān)婦科疾病。在畜牧養(yǎng)殖業(yè)中，研發(fā)安全有效的促生長劑替代品，以替代己烯雌酚的使用。對(duì)于雙酚A，開發(fā)新型的無毒或低毒的塑料材料，如聚乳酸（PLA）、聚羥基脂肪酸酯（PHA）等生物可降解塑料，以及其他不含雙酚A的聚合物材料，用于替代聚碳酸酯和環(huán)氧樹脂等含有雙酚A的材料。這些替代品應(yīng)具有良好的性能，能夠滿足實(shí)際應(yīng)用的需求，同時(shí)要確保其在生產(chǎn)、使用和廢棄過程中對(duì)環(huán)境和人體健康的影響較小。在公眾意識(shí)提升方面，加強(qiáng)對(duì)己烯雌酚和雙酚A危害的宣傳教育，提高公眾的環(huán)保意識(shí)和健康意識(shí)。通過媒體、網(wǎng)絡(luò)、科普講座等多種渠道，向公眾普及己烯雌酚和雙酚A的相關(guān)知識(shí)，包括其來源、危害、暴露途徑以及預(yù)防措施等。使公眾了解到日常生活中如何減少與己烯雌酚和雙酚A的接觸，如選擇合適的食品包裝材料、避免使用含雙酚A的塑料制品等。鼓勵(lì)公眾在日常生活中采取綠色消費(fèi)行為，選擇環(huán)保、安全的產(chǎn)品。支持和推動(dòng)綠色消費(fèi)運(yùn)動(dòng)，倡導(dǎo)消費(fèi)者購買不含有害化學(xué)物質(zhì)的產(chǎn)品，促使企業(yè)生產(chǎn)更加環(huán)保和健康的產(chǎn)品。通過消費(fèi)者的選擇來引導(dǎo)市場，推動(dòng)企業(yè)淘汰含有己烯雌酚和雙酚A的產(chǎn)品，采用更加安全的替代品。七、結(jié)論與展望7.1研究總結(jié)本研究通過嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和多維度的分析方法，深入探討了己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系類固醇激素合成的影響及其作用機(jī)制，并評(píng)估了它們對(duì)人體健康的潛在危害，取得了一系列具有重要科學(xué)價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義的研究成果。在實(shí)驗(yàn)研究中，選取了BeWo細(xì)胞系和JEG-3細(xì)胞系分別進(jìn)行己烯雌酚和雙酚A的處理實(shí)驗(yàn)。通過ELISA法和HPLC-MS/MS技術(shù)精確檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中類固醇激素的含量，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)和qRT-PCR技術(shù)準(zhǔn)確測定類固醇激素合成相關(guān)基因的mRNA表達(dá)水平。結(jié)果表明，己烯雌酚和雙酚A對(duì)人類胎盤細(xì)胞系中類固醇激素的合成均具有顯著影響，且這種影響呈現(xiàn)出明顯的濃度依賴性。在雌激素合成方面，二者均表現(xiàn)出低濃度促進(jìn)、高濃度抑制的趨勢。己烯雌酚在濃度為10^{-8}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高達(dá)到峰值，隨后隨著濃度增加而下降；雙酚A在10^{-9}mol/L時(shí)，雌激素含量顯著升高至峰值，之后隨著濃度升高而降低。這表明它們在低濃度時(shí)可能通過激活相關(guān)信號(hào)通路，促進(jìn)雌激素合成關(guān)鍵酶基因的表達(dá)，從而增加雌激素的合成；而在高濃度時(shí)，則可能抑制這些信號(hào)通路或直接抑制關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致雌激素合成減少。對(duì)于孕激素合成，己烯雌酚和雙酚A都表現(xiàn)出抑制作用，且隨著濃度升高抑制作用增強(qiáng)。隨著己烯雌酚和雙酚A濃度的增加，孕激素含量逐漸下降，這可能是因?yàn)樗鼈円种屏?β-羥基類固醇脫氫酶（3β-HSD）基因的表達(dá)或該酶的活性，使孕烯醇酮向孕酮的轉(zhuǎn)化受阻，進(jìn)而減少了孕激素的合成。在對(duì)睪酮合成的影響上，己烯雌酚和雙酚A對(duì)胎盤細(xì)胞系中睪酮的合成均無明顯影響，說明它們對(duì)睪酮合成相關(guān)的酶和信號(hào)通路的干擾作用較弱，睪酮的合成相對(duì)較為穩(wěn)定，不易受到這兩種環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的影響。在影響機(jī)制方面，己烯雌酚和雙酚A的化學(xué)結(jié)構(gòu)與天然雌激素相似，都能夠與雌激素受體（ER）發(fā)生特異性結(jié)合。它們與雌激素受體結(jié)合后形成的復(fù)合物進(jìn)入細(xì)胞核，與雌激素反應(yīng)元件（ERE）結(jié)合，從而影響基因的轉(zhuǎn)錄過程。低濃度時(shí)，二者都能通過與雌激素受體結(jié)合，招募轉(zhuǎn)錄激活因子，促進(jìn)細(xì)胞色素P450芳香化酶（CYP19A1）基因的轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而增加雌激素的合成；高濃度時(shí)，則可能招募轉(zhuǎn)錄抑制因子，抑制相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄。此外，它們還能對(duì)參與類固醇激素合成的關(guān)鍵酶的活性產(chǎn)生直接影響。高濃度時(shí)，二者都能抑制CYP19A1酶的活性，減少雌激素的合成；都能抑制3β-HSD的活性，阻礙孕烯醇酮向孕酮的轉(zhuǎn)化，從而降低孕激素的合成。但由于它們化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異，在與雌激素受體的結(jié)合能力以及對(duì)信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響上存在不同。己烯雌酚與雌激素受體的親和力相對(duì)較強(qiáng)，對(duì)基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用更為顯著；雙酚A與雌激素受體的親和力較弱，但其對(duì)某些信號(hào)傳導(dǎo)通路的激活或抑制作用可能更為敏感，更容易激活絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號(hào)通路，通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子的活性，間接影響類固醇激素合成相關(guān)基因的表達(dá)。己烯雌酚和雙酚A對(duì)人體健康具有潛在危害。對(duì)孕婦而言，它們干擾胎盤類固醇激素合成后，可能導(dǎo)致孕期激