2025年中職第一學年（生物技術應用）細胞培養(yǎng)技能試題及答案

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______第I卷（選擇題，共40分）答題要求：本卷共20小題，每小題2分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。請將正確答案的序號填在括號內。1.細胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基是（）A.生理鹽水B.血清C.葡萄糖溶液D.磷酸鹽緩沖液答案：B2.細胞培養(yǎng)時，對培養(yǎng)環(huán)境的pH要求一般在（）A.5.0-6.0B.6.5-7.0C.7.2-7.4D.8.0-9.0答案：C3.細胞培養(yǎng)的無菌操作中，常用的消毒劑是（）A.酒精B.碘伏C.新潔爾滅D.以上都是答案：D4.細胞培養(yǎng)過程中，防止微生物污染的關鍵是（）A.培養(yǎng)箱的清潔B.培養(yǎng)基的質量C.嚴格的無菌操作D.細胞的密度答案：C5.用于細胞培養(yǎng)的血清通常來自（）A.人B.牛C.羊D.豬答案：B6.細胞培養(yǎng)時，血清的作用不包括（）A.提供營養(yǎng)物質B.調節(jié)pH值C.促進細胞貼壁D.抑制細胞生長答案：D7.細胞培養(yǎng)的溫度一般為（）A.20℃B.25℃C.30℃D.37℃答案：D8.細胞培養(yǎng)中，傳代培養(yǎng)的目的是（）A.增加細胞數量B.保持細胞活性C.防止細胞老化D.以上都是答案：D9.細胞傳代時，胰蛋白酶的作用是（）A.消化細胞間的連接B.分解培養(yǎng)基中的蛋白質C.促進細胞生長D.調節(jié)細胞代謝答案：A10.細胞培養(yǎng)過程中，觀察細胞形態(tài)常用的顯微鏡是（）A.普通光學顯微鏡B.電子顯微鏡C.熒光顯微鏡D.倒置顯微鏡答案：D11.細胞培養(yǎng)時，細胞密度過高會導致（）A.細胞生長加快B.細胞代謝增強C.細胞死亡D.細胞分化答案：C12.細胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境主要包括（）A.氧氣和二氧化碳B.氮氣和氫氣C.氧氣和氮氣D.二氧化碳和氫氣答案：A13.細胞培養(yǎng)中，二氧化碳的作用是（）A.調節(jié)pH值B.促進細胞呼吸C.提供營養(yǎng)D.抑制微生物生長答案：A14.細胞培養(yǎng)的器皿在使用前需要進行的處理是（）A.清洗B.消毒C.滅菌D.以上都是答案：D15.細胞培養(yǎng)過程中，發(fā)現培養(yǎng)基變色，可能的原因是（）A.細胞代謝產物積累B.微生物污染C.培養(yǎng)基過期D.以上都是答案：D16.細胞培養(yǎng)時，常用的細胞凍存液中含有（）A.甘油B.二甲基亞砜C.血清D.以上都是答案：D17.細胞凍存的溫度一般為（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃答案：C18.細胞復蘇時，需要將凍存管迅速放入（）A.37℃水浴B.4℃冰箱C.-20℃冰箱D.-80℃冰箱答案：A19.細胞培養(yǎng)中，支原體污染的檢測方法不包括（）A.熒光定量PCRB.電子顯微鏡觀察C.細胞形態(tài)觀察D.酶聯免疫吸附試驗答案：C20.細胞培養(yǎng)過程中，如何判斷細胞是否處于對數生長期（）A.細胞數量快速增加B.細胞形態(tài)正常C.培養(yǎng)基pH值穩(wěn)定D.以上都是答案：D第II卷（非選擇題，共60分）（一）填空題（每題2分，共10分）1.細胞培養(yǎng)的基本條件包括合適的培養(yǎng)基、適宜的溫度、______、______等。答案：氣體環(huán)境、無菌環(huán)境2.細胞培養(yǎng)中常用的消化液有______和______。答案：胰蛋白酶、膠原酶3.細胞傳代的步驟一般包括______、______、______等。答案：消化細胞、離心收集、接種培養(yǎng)4.細胞培養(yǎng)時，常見的污染類型有______污染、______污染和______污染。答案：細菌、真菌、支原體5.細胞凍存的原則是______、______、______。答案：慢凍、快融、適量保護劑（二）簡答題（每題5分，共20分）1.簡述細胞培養(yǎng)的基本流程。答案：首先準備合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)器皿，進行滅菌處理。然后選取合適的細胞，進行復蘇或傳代操作，接種到培養(yǎng)器皿中，置于適宜的溫度、氣體環(huán)境等條件下培養(yǎng)，期間要注意觀察細胞生長狀態(tài)，適時進行傳代等操作，同時防止污染。2.細胞培養(yǎng)過程中如何防止微生物污染？答案：嚴格進行無菌操作，包括實驗環(huán)境的清潔消毒、培養(yǎng)器皿和培養(yǎng)基的滅菌處理、操作人員的規(guī)范操作等。在操作過程中，避免交叉污染，定期對培養(yǎng)環(huán)境和細胞進行檢測，一旦發(fā)現污染及時處理。3.簡述血清在細胞培養(yǎng)中的作用。答案：血清能提供細胞生長所需的多種營養(yǎng)物質，如氨基酸、維生素、礦物質等；含有多種生長因子，可促進細胞的生長、增殖和分化；還能調節(jié)培養(yǎng)基的pH值，并且對細胞有一定的保護作用，有助于維持細胞的正常生理功能。4.細胞傳代時需要注意哪些事項？答案：傳代時機要合適，當細胞生長達到一定密度時進行傳代。消化時間要恰當，避免過度消化或消化不足。傳代比例要合理，根據細胞類型和生長狀態(tài)確定合適的接種密度。操作過程要嚴格無菌，防止污染。傳代后要密切觀察細胞的生長情況，及時調整培養(yǎng)條件。（三）實驗設計題（10分）設計一個實驗，探究不同濃度的生長因子對某種細胞生長的影響。答案：準備若干個培養(yǎng)瓶，分別加入等量且含有不同濃度生長因子的培養(yǎng)基。將同種細胞接種到各個培養(yǎng)瓶中，接種密度相同。置于相同的適宜培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，定期觀察細胞的生長狀態(tài)，如細胞數量、細胞形態(tài)等。記錄不同時間點的數據，分析不同濃度生長因子對細胞生長的影響，如生長速度、增殖能力等，得出相應結論。（四）材料分析題（10分）材料：在細胞培養(yǎng)過程中，某同學發(fā)現培養(yǎng)的細胞生長緩慢，培養(yǎng)基顏色變黃，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)異常。問題：請分析可能導致這些現象的原因，并提出相應的解決措施。答案：細胞生長緩慢可能是培養(yǎng)基營養(yǎng)不足、血清質量不佳、培養(yǎng)條件不合適等原因。培養(yǎng)基顏色變黃可能是細胞代謝產物積累、微生物污染等。細胞形態(tài)異?？赡苁鞘艿轿廴尽⑴囵B(yǎng)條件改變、傳代不當等。解決措施：更換優(yōu)質培養(yǎng)基和血清，檢查培養(yǎng)條件并調整，檢測是否有污染，如有污染及時處理，規(guī)范傳代操作等。（五）綜合應用題（10分）某生物技術公司要進行某種細胞的大規(guī)模培養(yǎng)用于生產生物制品，你作為技術人員，請闡述整個細胞培養(yǎng)過程中的關鍵環(huán)節(jié)及注意事項。答案：關鍵環(huán)節(jié)包括細胞的復蘇、培