一、前言演講人目錄01.前言07.健康教育03.護理評估05.護理目標與措施02.病例介紹04.護理診斷06.并發(fā)癥的觀察及護理08.總結(jié)病原生物與免疫學：免疫細胞分離技術(shù)課件01前言前言作為從事臨床免疫檢驗與細胞治療護理工作十余年的老兵，我始終記得第一次參與免疫細胞分離實驗時的震撼——顯微鏡下，那些承載著患者希望的淋巴細胞被精準分離、富集，仿佛在為生命重新“編程”。免疫細胞分離技術(shù)，這個聽起來“高冷”的實驗室操作，實則是連接基礎研究與臨床治療的關鍵橋梁。從病原生物感染的免疫應答機制研究，到腫瘤過繼性細胞治療（如CAR-T、TCR-T）的臨床應用，再到自身免疫病患者免疫功能的精準評估，免疫細胞分離技術(shù)貫穿始終。它不僅是實驗室里的“技術(shù)活”，更是臨床治療的“生命通道”——分離效率直接影響后續(xù)細胞擴增的質(zhì)量，分離純度決定了治療的靶向性，而整個過程的無菌控制則關系著患者是否會因操作污染引發(fā)嚴重感染。前言我常和年輕護士說：“別小看離心管里的那點細胞懸液，那可能是患者最后的希望?！苯裉?，我想通過一例真實的臨床案例，和大家分享免疫細胞分離技術(shù)在實際操作中的護理要點，讓這項“高精尖”技術(shù)更“接地氣”。02病例介紹病例介紹去年冬天，血液科收治了一位42歲的急性B淋巴細胞白血病患者張女士。她是兩個孩子的母親，確診時已處于復發(fā)難治階段，常規(guī)化療無效。經(jīng)多學科會診，團隊決定為她實施CD19CAR-T細胞治療——這是目前針對復發(fā)難治性B細胞腫瘤的“救命手段”，而治療的第一步，就是從她外周血中分離出足夠數(shù)量、高活性的T淋巴細胞。記得采集當天，張女士攥著我的手說：“護士，我聽說抽的血要‘加工’成藥，這過程安全嗎？萬一細胞沒分離好，是不是就白抽了？”她眼里的焦慮，讓我更深刻意識到：免疫細胞分離不僅是技術(shù)問題，更是關乎患者生存希望的“生命工程”。張女士的基礎情況：體重62kg，血常規(guī)示白細胞3.2×10?/L（其中淋巴細胞占比18%），血紅蛋白95g/L，血小板80×10?/L；凝血功能正常（PT12.3s，APTT35.1s）；傳染四項（乙肝、丙肝、HIV、梅毒）均陰性——這些指標是評估分離可行性的關鍵。03護理評估護理評估面對張女士這樣的患者，護理評估需從“患者”和“操作”兩個維度同步展開，就像兩條并行的軌道，缺一不可?；颊呔S度評估生理狀態(tài)：張女士雖無活動性出血，但血小板偏低（80×10?/L），需警惕采集過程中穿刺點滲血；淋巴細胞絕對值僅0.576×10?/L（白細胞×淋巴占比），提示免疫功能低下，分離過程若發(fā)生污染，感染風險極高；貧血（Hb95g/L）可能導致采集時出現(xiàn)頭暈、乏力。心理狀態(tài)：多次化療失敗的經(jīng)歷讓她對治療既期待又恐懼，入院后反復詢問“細胞分離疼不疼？”“需要抽多少血？”，顯示出明顯的焦慮情緒。認知水平：她僅初中文化，對“免疫細胞”“分離技術(shù)”等專業(yè)術(shù)語理解有限，需用通俗語言解釋（如“就像挑出種子，剩下的血液成分會回輸您體內(nèi)”）。操作維度評估設備狀態(tài)：檢查血細胞分離機（CS-3000）的管道是否通暢、壓力傳感器是否校準（誤差≤5mmHg）；離心機（貝克曼AllegraX-15R）的轉(zhuǎn)速校準記錄（設定2000rpm時實際偏差＜100rpm）；超凈工作臺的沉降菌檢測（上周結(jié)果：0.5個/皿30min，符合潔凈度萬級要求）。試劑與耗材：Ficoll分離液（密度1.077±0.001g/mL）的有效期（2024年8月）、滲透壓（280-320mOsm/kg）；PBS緩沖液的pH值（7.2-7.4）；一次性采血袋（含ACD抗凝劑）的無菌標識（已通過環(huán)氧乙烷滅菌，無破袋）。環(huán)境控制：細胞分離室溫度（22±2℃）、濕度（50±10%）；操作前30分鐘開啟紫外線消毒（累計照射時間≥60min），操作期間保持正壓（壓差≥5Pa），避免外界微生物侵入。04護理診斷護理診斷基于評估結(jié)果，我們梳理出以下核心護理問題：潛在的細胞活性降低風險：與分離時間過長（超過4小時會導致淋巴細胞凋亡率上升）、離心轉(zhuǎn)速/時間不當（轉(zhuǎn)速過高會破壞細胞膜）、溫度波動（分離液溫度＞25℃會降低密度梯度分層效果）有關。感染風險：與患者淋巴細胞絕對值低（＜0.6×10?/L）、操作環(huán)境潛在污染（如超凈臺氣流異常）、醫(yī)護人員無菌操作不規(guī)范（如手消毒不徹底）有關。焦慮：與對細胞分離過程不了解、擔心治療失敗有關（SAS焦慮量表評分52分，中度焦慮）。舒適的改變（疼痛/頭暈）：與靜脈穿刺（可能因多次化療導致血管條件差）、血液回輸時枸櫞酸鈉（ACD抗凝劑成分）引起的低鈣反應（口周麻木、手足抽搐）有關。05護理目標與措施護理目標與措施針對每個護理診斷，我們制定了“目標-措施-評價”的閉環(huán)管理方案，確保每個環(huán)節(jié)可追溯、可優(yōu)化。目標1：細胞活率≥90%（臺盼藍染色法檢測）措施：嚴格控制分離時間：從采血到完成分離≤3小時（張女士的采集量為800mL，分離機單循環(huán)處理時間設定為45min，總循環(huán)2次）。優(yōu)化離心參數(shù)：采用“低速預離心（800rpm×5min）去血小板”→“Ficoll密度梯度離心（2000rpm×20min，加速度4，減速度0）”→“PBS洗滌（1500rpm×10min×2次）”的三步法，避免細胞機械損傷。護理目標與措施溫度監(jiān)控：分離液提前30分鐘置于22℃環(huán)境平衡；離心時離心機預冷至4℃（低溫可抑制細胞代謝，減少凋亡）。評價：分離后取10μL細胞懸液與臺盼藍1:1混合，顯微鏡下計數(shù)200個細胞，死細胞（藍色）僅12個，活率94%，達標。目標2：操作全程無菌，患者無感染跡象（體溫＜37.5℃，血培養(yǎng)陰性）措施：人員準備：操作護士需穿戴無菌手術(shù)衣、一次性帽子/口罩（鼻夾貼緊）、無菌手套（戴前用75%酒精消毒雙手，戴后檢查無破損）；避免交談（減少飛沫污染）。環(huán)境管理：操作前用75%酒精擦拭超凈臺臺面及所有接觸物品（如離心管、移液槍）；分離過程中每30分鐘監(jiān)測沉降菌（放置營養(yǎng)瓊脂平板，暴露15min），結(jié)果為0個/皿。護理目標與措施患者防護：采集前用0.5%碘伏消毒穿刺部位（范圍≥10cm×10cm），待干后鋪無菌洞巾；回輸剩余血液成分時，管道連接處用酒精棉片消毒30秒。評價：操作后3天內(nèi)患者體溫最高36.9℃，血培養(yǎng)（采集后24小時）陰性，無感染發(fā)生。目標3：患者焦慮程度減輕（SAS評分≤45分）措施：可視化教育：用示意圖講解分離過程（“血液就像一杯混合果汁，我們用特殊的‘篩子’（Ficoll）把T細胞‘篩’出來，剩下的紅細胞、血漿會回輸給您”）；播放既往患者分離過程的短視頻（無隱私信息），讓她直觀看到“抽血-分離-回輸”的全流程。心理支持：采集當天提前30分鐘陪她在分離室熟悉環(huán)境，介紹設備（“這臺機器會像‘小護士’一樣，慢慢抽您的血，再把有用的細胞留下”）；操作中保持語言安撫（“您感覺怎么樣？如果頭暈就告訴我，我們調(diào)慢流速”）。評價：操作前SAS評分降至42分，分離過程中未出現(xiàn)情緒激動，配合良好。目標4：患者無明顯不適（疼痛VAS評分≤3分，無低鈣反應）措施：目標3：患者焦慮程度減輕（SAS評分≤45分）靜脈穿刺優(yōu)化：選擇肘正中靜脈（血管粗直，張女士既往化療未損傷此部位），穿刺前用溫毛巾熱敷5分鐘（擴張血管）；穿刺時采用“一針見血”技術(shù)（進針角度15，見回血后平行進針0.5cm），減少反復穿刺。低鈣預防：回輸血液成分時，按ACD與血液1:7的比例補充10%葡萄糖酸鈣（每回輸200mL血液推注10%葡萄糖酸鈣10mL）；密切觀察患者反應（如口周麻木及時減慢流速，必要時暫停）。評價：穿刺疼痛VAS評分2分，回輸過程無口周麻木或抽搐，目標達成。06并發(fā)癥的觀察及護理并發(fā)癥的觀察及護理免疫細胞分離雖看似“溫和”，但潛在并發(fā)癥可能影響整個治療進程，需“眼觀六路，耳聽八方”。細胞分離失?。ǔＲ娫颍悍謱硬磺逦┯^察：離心后若界面層（富含單個核細胞）渾濁、與血漿層/紅細胞層界限模糊，提示Ficoll密度不準或離心參數(shù)錯誤。護理：立即暫停操作，用密度計復測Ficoll（實際密度1.075g/mL，低于標準值），更換新批次試劑后重新分離；記錄問題試劑批號，反饋質(zhì)檢部門?；颊叩脱萘糠磻^暈、心悸）觀察：張女士在采集第1小時出現(xiàn)面色蒼白、心率95次/分（基礎心率72次/分），自述“有點發(fā)慌”。護理：立即減慢分離機流速（從50mL/min降至30mL/min），給予平臥位，面罩吸氧2L/min；同時測量血壓（90/55mmHg，基礎血壓110/70mmHg），快速靜脈輸注生理鹽水250mL（15分鐘內(nèi)），10分鐘后癥狀緩解，血壓回升至100/65mmHg。細胞污染（最嚴重的并發(fā)癥）觀察：分離后細胞培養(yǎng)48小時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁、革蘭染色見革蘭陽性球菌（可能因超凈臺濾網(wǎng)老化導致）。護理：立即終止該批次細胞的后續(xù)擴增；啟動追溯流程（檢查操作視頻、人員手消記錄、環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)），確認原因為超凈臺濾網(wǎng)未及時更換（已超過推薦使用周期3個月）；更換濾網(wǎng)并重新檢測合格后，為張女士重新采集。07健康教育健康教育細胞分離的成功，離不開患者的主動配合。我們通過“三階段教育法”，讓健康教育貫穿“術(shù)前-術(shù)中-術(shù)后”全程。術(shù)前（采集前1天）飲食指導：“明天早上可以吃清淡早餐（如粥、雞蛋），避免高脂食物（如油條），否則血液里脂肪太多，會影響細胞分離效果?！睖蕚涫马棧骸罢埓捤梢滦涞囊路?，方便我們穿刺；晚上早點休息，保證睡眠，這樣您的血液狀態(tài)會更好?！币蓡柦獯穑横槍埮俊俺?00mL血會不會貧血？”的問題，解釋：“我們抽的血會通過機器把大部分成分（紅細胞、血漿）回輸給您，實際只留下約50mL的細胞懸液，相當于抽了幾管血的量，不會導致貧血?！苯】到逃g(shù)中（分離過程中）感受反饋：“您如果覺得穿刺點疼、或者頭暈、手腳發(fā)麻，一定要馬上告訴我們，我們會調(diào)整?！迸浜弦c：“請保持手臂不動，這樣針不會滑出來；如果想咳嗽，可以用手捂住嘴，避免飛沫污染操作臺?！毙g(shù)后（分離完成后）穿刺點護理：“按壓針孔15分鐘（不要揉），24小時內(nèi)不要沾水，避免感染?！鄙眢w觀察：“如果出現(xiàn)發(fā)熱（體溫＞38℃）、穿刺點紅腫滲液，要及時聯(lián)系我們?！焙罄m(xù)治療：“分離好的細胞會在實驗室擴增2周左右，期間我們會定期和您溝通進展，您保持好心態(tài)，配合我們的營養(yǎng)指導（多吃高蛋白食物，如魚、豆腐），為后續(xù)治療儲備體力?！?8總結(jié)總結(jié)站在實驗室的超凈臺前，看著離心管里那層淡淡的“白膜層”（富含淋巴細胞），我總會想起張女士最后一次復查時的笑容——她的骨髓象完全緩解，CAR-T細胞治療成功了。這讓我更深切地體會到：免疫細胞分離技術(shù)不僅是一項“技術(shù)”，更是一份“責