溶瘤病毒質(zhì)控工程師崗位招聘考試試卷及答案溶瘤病毒質(zhì)控工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（10題，1分/題）1.溶瘤病毒常用載體類型包括腺病毒、______病毒、皰疹病毒等。2.溶瘤病毒滴度檢測最常用的方法是______（半數(shù)組織培養(yǎng)感染劑量法）。3.宿主細胞殘留DNA檢測常用______或熒光定量PCR。4.溶瘤病毒生產(chǎn)遵循的質(zhì)量管理規(guī)范是______（GoodManufacturingPractice）。5.純度檢測常用方法是______（十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳）。6.安全性質(zhì)控需檢測病毒是否具備______（正常細胞致病性）。7.病毒包裝關(guān)鍵參數(shù)包括溫度、______和時間。8.滅活驗證目的是確認病毒失去______能力。9.內(nèi)毒素檢測常用______法。10.產(chǎn)品可追溯記錄需包含______、工藝參數(shù)及檢測結(jié)果。答案：1.痘苗2.TCID503.斑點雜交4.GMP5.SDS.致病性7.pH8.感染9.鱟試劑10.原材料信息二、單項選擇題（10題，2分/題）1.溶瘤病毒滴度檢測核心是確定（）A.總病毒顆粒數(shù)B.感染性病毒比例C.病毒蛋白量D.核酸含量2.不屬于宿主殘留污染物的是（）A.宿主DNAB.宿主蛋白C.病毒衣殼蛋白D.培養(yǎng)基成分3.生產(chǎn)環(huán)境潔凈度級別是（）A.A級B.B級C.C級D.D級4.復(fù)制能力檢測常用（）A.空斑實驗B.qPCRC.WesternblotD.細胞毒性實驗5.內(nèi)毒素限值通常為（）A.<0.5EU/mlB.<1EU/mlC.<5EU/mlD.<10EU/ml6.可用于純度檢測的是（）A.TCID50B.HPLCC.ELISAD.流式細胞術(shù)7.滅活驗證需包含（）A.僅滅活后檢測B.滅活前后對比C.僅陽性對照D.僅陰性對照8.宿主殘留蛋白檢測常用（）A.斑點雜交B.免疫印跡C.分光光度法D.氣相色譜9.記錄保存至有效期后（）A.1年B.2年C.3年D.5年10.安全性質(zhì)控關(guān)鍵項目是（）A.滴度穩(wěn)定性B.純度C.致病性D.核酸完整性答案：1.B2.C3.A4.A5.A6.B7.B8.B9.A10.C三、多項選擇題（10題，2分/題）1.質(zhì)控核心指標(biāo)包括（）A.滴度B.純度C.復(fù)制能力D.安全性E.宿主殘留2.滴度檢測常用方法（）A.TCID50B.PFUC.qPCRD.空斑實驗E.ELISA3.宿主殘留污染物（）A.宿主DNAB.宿主蛋白C.內(nèi)毒素D.病毒核酸E.培養(yǎng)基成分4.GMP要求包括（）A.人員培訓(xùn)B.環(huán)境監(jiān)控C.記錄追溯D.工藝驗證E.原材料檢驗5.安全性質(zhì)控項目（）A.致病性B.內(nèi)毒素C.無菌D.熱源E.復(fù)制能力6.純度檢測方法（）A.SDSB.HPLCC.WesternblotD.流式E.分光光度7.關(guān)鍵質(zhì)控節(jié)點（）A.細胞培養(yǎng)B.病毒收獲C.純化D.滅活E.包裝8.滴度穩(wěn)定性檢測目的（）A.確認儲存條件B.確定有效期C.評估工藝穩(wěn)定性D.檢測純度E.檢測安全性9.宿主殘留DNA限值（）A.<10pg/劑量B.<100pg/劑量C.<1ng/劑量D.<10ng/劑量E.<100ng/劑量10.無菌檢測方法（）A.薄膜過濾法B.直接接種法C.鱟試劑法D.qPCRE.ELISA答案：1.ABCDE2.ABD3.ABC4.ABCDE5.ABCDE6.AB7.ABCDE8.ABC9.AB10.AB四、判斷題（10題，2分/題）1.無需檢測宿主殘留DNA。（）2.生產(chǎn)全程需記錄可追溯。（）3.滴度僅需檢測總病毒顆粒數(shù)。（）4.內(nèi)毒素限值<1EU/ml。（）5.純化后無需檢測復(fù)制能力。（）6.生產(chǎn)環(huán)境達A級潔凈度。（）7.無菌檢測需立即進行。（）8.質(zhì)控方法需驗證特異性、準確性。（）9.宿主殘留蛋白限值<10ng/劑量。（）10.有效期基于滴度穩(wěn)定性確定。（）答案：1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.×8.√9.√10.√五、簡答題（4題，5分/題）1.簡述溶瘤病毒滴度檢測常用方法及原理。答案：常用TCID50和PFU。TCID50：病毒梯度稀釋感染敏感細胞，觀察50%細胞病變的稀釋度，反映感染性病毒量；PFU：病毒感染單層細胞形成空斑，每個空斑對應(yīng)1個感染性顆粒，直接計數(shù)。兩者均針對感染性病毒，是滴度核心檢測方法。2.宿主殘留蛋白檢測的意義？答案：宿主殘留蛋白是潛在免疫原，可能引發(fā)過敏/免疫反應(yīng)。檢測意義：①確認純化工藝有效性，減少殘留；②控制殘留量在安全限值（<10ng/劑量），保障臨床安全；③符合GMP及監(jiān)管要求，確保質(zhì)量一致性。3.GMP對生產(chǎn)質(zhì)控的核心要求？答案：①人員：培訓(xùn)合格持證；②環(huán)境：A級潔凈度，定期監(jiān)控；③原材料：檢驗合格，記錄來源；④工藝：驗證關(guān)鍵步驟（純化、滅活），控制參數(shù)；⑤檢測：建立合格方法，檢測核心指標(biāo)；⑥記錄：全程追溯，保存至有效期后1年；⑦驗證：工藝及方法需驗證，確保穩(wěn)定。4.安全性質(zhì)控關(guān)鍵項目？答案：①無菌檢測：無微生物污染；②內(nèi)毒素：<0.5EU/ml；③致病性：僅腫瘤細胞復(fù)制，無正常細胞損傷；④宿主殘留：DNA<10pg/劑量、蛋白<10ng/劑量；⑤熱源檢測：無致熱物質(zhì)；⑥滅活驗證：完全失去感染能力（滅活病毒）。六、討論題（2題，5分/題）1.若純化后純度未達標(biāo)，分析原因及解決思路。答案：可能原因：①純化參數(shù)不當(dāng)（洗脫梯度不合理）；②收獲液雜質(zhì)多（細胞碎片未去除）；③純化柱性能下降（填料老化）；④過濾失效（濾膜堵塞）。解決思路：①優(yōu)化純化參數(shù)（調(diào)整洗脫梯度、流速）；②增加前處理（離心/過濾去碎片）；③更換/再生純化柱；④驗證過濾系統(tǒng)，更換合適濾膜；⑤增加二次純化（離子交換+凝膠過濾）提升純度。2.如何建立質(zhì)控方法驗證方案？答案：方案包含：①目的：確認方法可靠性；②指標(biāo)：特異性（無交叉反應(yīng)）、準確性