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厭氧菌的培養(yǎng)方法物理方法包括遮斷空氣法、煮沸法、真空法、空氣置換法、氣體噴射法或轉(zhuǎn)管法等化學(xué)方法包括焦性沒(méi)食子酸法、鐵絲絨法、保險(xiǎn)粉法等生物學(xué)方法包括與需氧菌共生好氧法、燕麥發(fā)芽法等混合法包括厭氧罐(袋)法、厭氧手套箱法或厭氧室法、空氣置換鐵絲絨法、空氣置換鈀粒法等。21液體培養(yǎng)基的厭氧培養(yǎng)法培養(yǎng)基煮沸:驅(qū)氣后置流水中急速冷卻添加還原劑:
0.03~0.05%L-鹽酸半胱氨酸
0.01~0.02%硫乙醇鈉
0.5~1%葡萄糖
0.1%抗壞血酸其它還原劑添加瓊脂32固體培養(yǎng)基的厭氧培養(yǎng)法厭氧罐法簡(jiǎn)易厭氧罐和厭氧袋法鋼絲絨法焦性沒(méi)食子酸法抽氣換氣厭氧培養(yǎng)法生物好氧厭氧培養(yǎng)法轉(zhuǎn)管技術(shù)和氣體噴射培養(yǎng)法厭氧手套箱法(又稱厭氧室法)42.1Gas-pak法5
原理111116
厭氧指示劑亞甲基蘭指示劑盧卡斯固體厭氧指示劑布魯氏指示劑7
亞甲基蘭指示劑6%葡萄糖水溶液20.1N氫氧化鈉水溶液0.10.05%亞甲基蘭水溶液0.2
厭氧無(wú)色殘存有氧氣藍(lán)色
8大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了,稍作休息大家有疑問(wèn)的,可以詢問(wèn)和交流9盧卡斯固體厭氧指示劑2%硼砂溶液5毫升9%硫乙醇酸1毫升酚紅溶液0.1~0.2毫升0.02%美蘭溶液10毫升瓊脂1%厭氧無(wú)色殘存有氧氣藍(lán)色10
布魯氏指示劑60%羥甲基氨基甲酯14%葡萄糖10.02%美藍(lán)1
厭氧無(wú)色殘存有氧氣藍(lán)色11Gas-Pak罐的使用操作程序平皿培養(yǎng)基裝入平皿架中置厭氧罐內(nèi);打開(kāi)內(nèi)蓋居中金屬網(wǎng)袋,裝入觸媒鈀粒;打開(kāi)錫箔紙袋,取出厭氧指示劑片;剪開(kāi)氣體發(fā)生袋一角,注入10毫升水,迅速緊閉罐蓋,置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。約經(jīng)5~10分鐘后,放入?yún)捬踔甘緞┢?22.2.1簡(jiǎn)易厭氧罐干燥器容內(nèi)徑(厘米)容器1容器2容器3
容積(毫升)硼氫鈉氯化鈷0.2克檸檬酸0.6克
15cm(約2150毫升)或和
0.6克鈀粒1.5克碳酸氫鈉0.7克18cm(約3500毫升)硼氫鈉氯化鈷0.33克檸檬酸1克或和
1克鈀粒2克碳酸氫鈉1.15克132.2.2厭氧袋法聚碳酸酯(復(fù)合塑料膜)制厭氧袋產(chǎn)氣袋厭氧指示劑觸媒
141516172.2.3保險(xiǎn)粉的厭氧罐培養(yǎng)法
二亞硫酸鈉(Na2S2O4)碳酸氫鈉無(wú)水硫酸鈉
不用觸媒182.3鋼絲絨法
酸性硫酸銅溶液鋼(鐵)絲絨銅和鐵的絡(luò)合物
O2厭氧指示劑19酸性硫酸銅溶液:將自來(lái)水1升加硫酸銅60g,吐溫-8020ml,加熱溶解后,又加入2N的硫酸90ml,最后加水至6升;方法:取5~6g鋼絲絨/L,于1~1.5升酸性硫酸銅溶液浸泡30~60s,鋼絲絨變成紅銅色,擠凈液體置鋁質(zhì)或玻璃容器中,放入?yún)捬豕迌?nèi)。隨后將厭氧指示劑放入,密封厭氧罐,1~4h后可達(dá)厭氧狀態(tài)202.4焦性沒(méi)食子酸法
焦性末食子酸粉末,NaHCO3或NaOH溶液無(wú)菌玻片已接種細(xì)菌的平板倒扣在上面融化的白蠟封邊
212.5抽氣換氣厭氧培養(yǎng)法玻璃干燥罐混合氣鋼瓶:10%二氧化碳、10%的氫氣、80%的氮?dú)馊ㄩy觸媒:鈀粒/浸泡鋼絲絨/氯化鈷
厭氧指示劑22232.6生物好氧厭氧培養(yǎng)法皰肉培養(yǎng)基:牛肉渣0.5g
牛肉浸液7ml
液面上加蓋3~4mm厚的融化凡士林,滅菌。生物好氧厭氧培養(yǎng)方法242.7轉(zhuǎn)管技術(shù)和氣體噴射培養(yǎng)法252.8厭氧手套箱法又稱厭氧室法26273厭氧培養(yǎng)方法的選擇亨格特的預(yù)還原滅菌厭氧培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)管技術(shù)、氣體噴射培養(yǎng)法
厭氧手套箱培養(yǎng)法用于要求嚴(yán)格的厭氧培養(yǎng)法的微生態(tài)學(xué)(正常菌群)的研究工作厭氧罐(袋)法結(jié)合其它厭氧培養(yǎng)方法
不適用于對(duì)氧極其敏感的厭氧菌。但是在臨床細(xì)菌的檢驗(yàn)工作中,可以充分使用此法分離感染癥中的厭氧病原菌。
284厭氧菌的保存4.1繼代保存:以GAM半固體流動(dòng)培養(yǎng)基和TE
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