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實(shí)驗(yàn)九抗酸染色

臨床病原生物學(xué)教研室2023/5/241一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆湛顾崛旧脑砗头椒ㄕ莆战Y(jié)核分枝桿菌痰涂片的結(jié)果報(bào)告2023/5/242

分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì)，包圍在肽聚糖的外面，一般水溶性染料不易進(jìn)入，所以分枝桿菌一般不易著色且一旦染色后不易脫色，所以要經(jīng)過(guò)加熱和延長(zhǎng)染色時(shí)間來(lái)促使其著色。

因分枝菌酸與染料結(jié)合后，很難被酸性脫色劑脫色，故分枝桿菌又稱(chēng)抗酸桿菌。二、實(shí)驗(yàn)原理：2023/5/243三、實(shí)驗(yàn)材料：細(xì)菌：結(jié)核桿菌染液：石炭酸復(fù)紅液、3%鹽酸酒精、堿性美蘭溶液其它：接種環(huán)、酒精燈、載玻片等2023/5/244四、實(shí)驗(yàn)方法1、細(xì)菌涂片的制備

1）涂片：20mm*15mm厚涂片，竹簽挑取，涂2-3遍

2）干燥：自然干燥，或火焰

3）固定：火焰固定，必須2023/5/2452、染色1）初染：滴加石炭酸復(fù)紅適量，在火焰高處徐徐加熱，

切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽暫時(shí)離開(kāi)火焰；若染液蒸

發(fā)減少，應(yīng)再加染液，以免干涸，加熱5min

（可延長(zhǎng)），待標(biāo)本冷卻后用水沖洗。2）脫色：

3%鹽酸酒精脫色30sec~1min至無(wú)紅色液體流下，再用水沖洗。3）復(fù)染：用堿性美蘭溶液復(fù)染1min，用水沖洗后用吸水紙吸干。3、油鏡觀察2023/5/246五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：1.結(jié)核桿菌呈紅色，常堆積成團(tuán)，排列無(wú)序，偶呈分枝狀生長(zhǎng)。2.背景及非抗酸性細(xì)菌呈蘭色。2023/5/2472023/5/248

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