廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫的現(xiàn)狀剖析與首免日齡優(yōu)化探索一、引言1.1研究背景與意義豬瘟（ClassicalSwineFever，CSF），又稱古典豬瘟，是由豬瘟病毒（ClassicalSwineFeverVirus，CSFV）引起的一種高度接觸性、致死性傳染病，被國際獸疫局（OIE）列為A類動物傳染病。其以出血和發(fā)熱為主要特征，可導(dǎo)致妊娠母豬流產(chǎn)、胎兒畸變、慢性營養(yǎng)性消耗、淋巴細胞和血小板減少等免疫系統(tǒng)受損，還常繼發(fā)或并發(fā)細菌或其他病毒感染，呈急性或慢性經(jīng)過，對豬群健康和養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展危害極大。在全球范圍內(nèi)，豬瘟曾多次大規(guī)模爆發(fā)，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了沉重打擊。即使在豬瘟兔化弱毒疫苗研發(fā)并廣泛使用后，大范圍內(nèi)的豬瘟大流行得到有效控制，但近年來，以慢性、非典型特征為主的豬瘟仍在我國及其他一些國家和地區(qū)間斷出現(xiàn)，流行態(tài)勢日益復(fù)雜。在我國，豬瘟的防控形勢依然嚴峻，雖然整體上豬瘟的發(fā)病率和死亡率有所下降，但局部地區(qū)仍時有疫情發(fā)生，給養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟損失。例如，2018-2019年期間，部分地區(qū)由于豬瘟疫情的影響，生豬存欄量大幅下降，豬肉價格波動劇烈，不僅影響了養(yǎng)殖戶的收益，也對市場供應(yīng)和消費者生活產(chǎn)生了一定的影響。廣西作為我國南方重要的生豬養(yǎng)殖和消費地區(qū)，養(yǎng)豬業(yè)在當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)經(jīng)濟中占據(jù)著重要地位。近年來，隨著規(guī)?；B(yǎng)豬場的不斷發(fā)展，廣西養(yǎng)豬業(yè)的規(guī)?；⒓s化程度逐漸提高。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，截至2022年底，廣西備案豬場達13429家，設(shè)計出欄規(guī)模大于等于500頭的有9083家，其中萬頭豬場788家，全區(qū)生豬規(guī)模比重達到64.51%。然而，規(guī)模化養(yǎng)殖在帶來經(jīng)濟效益的同時，也面臨著豬瘟等疫病的嚴峻挑戰(zhàn)。一旦豬瘟在規(guī)?；i場爆發(fā)，由于豬只數(shù)量眾多、密度大，疫病傳播速度極快，會迅速擴散至整個豬場，導(dǎo)致大量豬只發(fā)病死亡，給養(yǎng)殖戶造成慘重的經(jīng)濟損失。而且，豬瘟疫情的發(fā)生還會影響豬肉的市場供應(yīng)和價格穩(wěn)定，對整個養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)鏈產(chǎn)生連鎖反應(yīng)。合理的免疫程序是防控豬瘟的關(guān)鍵措施之一，而首免日齡的確定又是免疫程序中的重要環(huán)節(jié)。仔豬的首免日齡直接關(guān)系到疫苗的免疫效果和豬只的保護率。如果首免日齡過早，仔豬體內(nèi)的母源抗體會干擾疫苗的免疫應(yīng)答，導(dǎo)致免疫失?。蝗绻酌馊正g過晚，仔豬在母源抗體消退后至首免前這段時間內(nèi)處于易感狀態(tài)，容易感染豬瘟病毒。目前，國內(nèi)關(guān)于仔豬豬瘟首免日齡的報道不盡相同，不同地區(qū)、不同豬場的最佳首免日齡存在差異。一些研究認為20-25日齡首免較為合適，也有研究推薦28-35日齡首免。廣西地區(qū)的規(guī)模化豬場在豬瘟免疫方面也存在諸多問題，如免疫程序不統(tǒng)一、首免日齡不合理等，導(dǎo)致部分豬場豬瘟抗體水平不理想，豬瘟防控效果不佳。因此，開展廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫情況調(diào)查及首免日齡優(yōu)化試驗具有重要的現(xiàn)實意義。通過對廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫情況進行全面調(diào)查，可以了解當(dāng)前豬場在疫苗選擇、接種時間、接種量等方面的實際情況，發(fā)現(xiàn)存在的問題和不足，為制定科學(xué)合理的免疫程序提供依據(jù)。而優(yōu)化仔豬豬瘟首免日齡，能夠提高疫苗的免疫效果，增強豬只對豬瘟病毒的抵抗力，降低豬瘟的發(fā)病率和死亡率，保障養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。同時，這也有助于提高豬肉的質(zhì)量和產(chǎn)量，穩(wěn)定市場供應(yīng)，增加養(yǎng)殖戶的收入，促進廣西養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。1.2國內(nèi)外研究現(xiàn)狀在豬瘟免疫研究領(lǐng)域，國內(nèi)外眾多學(xué)者已開展了大量工作。國外方面，早期對豬瘟的研究主要集中在病毒的分離鑒定、致病機制等基礎(chǔ)層面。隨著疫苗技術(shù)的發(fā)展，多種豬瘟疫苗被研發(fā)出來，如滅活疫苗、弱毒疫苗等，并且在疫苗的安全性、有效性評估上取得了豐富成果。例如，一些歐美國家通過嚴格的臨床試驗，確定了不同類型疫苗在豬群中的免疫劑量、免疫途徑以及免疫間隔時間，以確保疫苗能發(fā)揮最佳的免疫保護效果。在免疫程序制定方面，國外規(guī)?；i場通常依據(jù)嚴格的疫病監(jiān)測體系和科學(xué)研究成果，結(jié)合當(dāng)?shù)氐囊卟×餍刑攸c，制定個性化的免疫程序。同時，注重對豬群免疫狀態(tài)的實時監(jiān)測，利用先進的血清學(xué)檢測技術(shù)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、熒光抗體技術(shù)等，定期檢測豬群抗體水平，根據(jù)抗體消長規(guī)律及時調(diào)整免疫策略。國內(nèi)對于豬瘟免疫的研究同樣深入且全面。自豬瘟兔化弱毒疫苗（C株）成功研制并廣泛應(yīng)用以來，我國豬瘟的防控取得了顯著成效，大規(guī)模的豬瘟流行得到有效遏制。但近年來，非典型豬瘟和持續(xù)感染現(xiàn)象時有發(fā)生，使得豬瘟的防控形勢依然嚴峻。針對這一情況，國內(nèi)學(xué)者在豬瘟免疫程序優(yōu)化、免疫效果影響因素等方面進行了大量研究。在免疫程序上，不同地區(qū)和豬場根據(jù)自身實際情況，制定了多種免疫方案。常見的免疫程序包括常規(guī)免疫程序和超前免疫程序。常規(guī)免疫程序中，仔豬育肥豬多在20-28日齡首免，60-70日齡二免；種豬每年免疫2次。而超前免疫則是初生仔豬在吃乳前1-1.5h首免，斷奶后或60日齡二免。不同免疫程序各有優(yōu)劣，常規(guī)免疫操作相對簡便，但可能受母源抗體干擾；超前免疫可避免母源抗體干擾，但對操作要求較高，且母豬多在夜間分娩，給免疫接種帶來一定困難。關(guān)于仔豬豬瘟首免日齡的研究，國內(nèi)的報道差異較大。有研究表明，新生仔豬體內(nèi)無豬瘟母源抗體，吃過初乳后1日齡時體內(nèi)豬瘟母源抗體達到高峰，隨后逐漸降低，母源抗體可一直保護仔豬至28日齡，少數(shù)可保護至35日齡，因此推薦仔豬豬瘟首免日齡為28-35日齡。也有學(xué)者通過試驗發(fā)現(xiàn)，不同豬場仔豬體內(nèi)豬瘟母源抗體水平與消長規(guī)律不完全相同，部分豬場仔豬母源抗體在21日齡時已降至臨界值，所以首免日齡應(yīng)根據(jù)各場實際情況，通過監(jiān)測母源抗體消長規(guī)律來確定。例如，有研究對3個豬場試驗仔豬母源抗體進行監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)甲場第28天母源抗體降到最低，丙場第21天降到最低，之后其抗體水平均出現(xiàn)升高現(xiàn)象，且3個場之間不同日齡仔豬抗體水平差異較大。盡管國內(nèi)外在豬瘟免疫和首免日齡研究方面取得了一定成果，但仍存在一些不足之處。一方面，目前的研究多集中在單一豬場或局部地區(qū)，缺乏對不同地區(qū)規(guī)?；i場豬瘟免疫情況的系統(tǒng)調(diào)查和比較分析。不同地區(qū)的氣候、飼養(yǎng)管理水平、豬群品種結(jié)構(gòu)等因素存在差異，這些因素可能會影響豬瘟的免疫效果和最佳首免日齡的確定。另一方面，對于豬瘟免疫效果的評價指標還不夠完善，多數(shù)研究僅關(guān)注抗體水平的變化，而對細胞免疫、黏膜免疫等方面的研究相對較少。此外，在實際生產(chǎn)中，由于部分養(yǎng)殖戶對豬瘟免疫的重視程度不夠、免疫操作不規(guī)范等原因，導(dǎo)致免疫失敗的情況時有發(fā)生。因此，開展廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫情況調(diào)查及首免日齡優(yōu)化試驗，對于完善豬瘟防控技術(shù)體系，提高廣西養(yǎng)豬業(yè)的疫病防控水平具有重要的現(xiàn)實意義。1.3研究目標與內(nèi)容本研究旨在全面了解廣西規(guī)模化豬場豬瘟免疫的實際情況，通過科學(xué)試驗確定仔豬豬瘟的最佳首免日齡，為制定合理的豬瘟免疫程序提供科學(xué)依據(jù)，從而有效提升廣西規(guī)?；i場豬瘟的防控水平。具體研究內(nèi)容如下：廣西規(guī)模化豬場豬瘟免疫情況調(diào)查：采用分層隨機抽樣的方法，選取廣西不同地區(qū)（桂南、桂北、桂東、桂西、桂中）具有代表性的規(guī)模化豬場作為調(diào)查對象。詳細記錄各豬場的基本信息，包括豬場規(guī)模、養(yǎng)殖模式、飼養(yǎng)管理水平等。通過與豬場管理人員和獸醫(yī)交流、查閱免疫記錄等方式，收集各豬場當(dāng)前使用的豬瘟疫苗品種、生產(chǎn)廠家、免疫程序（接種時間、接種量、免疫次數(shù)）等信息。運用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、間接免疫熒光試驗（IFA）等血清學(xué)檢測方法，對采集的不同生長階段豬只（哺乳仔豬、保育仔豬、育肥豬、種公豬、種母豬）的血清樣品進行豬瘟抗體檢測，統(tǒng)計抗體陽性率、抗體滴度等指標，評估豬群的免疫效果。同時，對豬瘟疫苗的儲存條件、運輸過程、免疫操作規(guī)范等方面進行調(diào)查，分析可能影響免疫效果的因素。廣西規(guī)?；i場仔豬豬瘟首免日齡優(yōu)化試驗：在前期免疫情況調(diào)查的基礎(chǔ)上，選擇免疫程序相對規(guī)范、豬群健康狀況良好的規(guī)?；i場開展首免日齡優(yōu)化試驗。根據(jù)仔豬母源抗體消長規(guī)律的相關(guān)研究，設(shè)置多個首免日齡組，如14日齡、21日齡、28日齡、35日齡等，每組選取一定數(shù)量（不少于30頭）的仔豬，且仔豬的品種、體重、健康狀況等盡量一致。試驗期間，除首免日齡不同外，其他飼養(yǎng)管理條件和免疫程序（二免時間、疫苗種類和劑量等）保持一致。在仔豬首免前及首免后不同時間點（1周、2周、3周、4周等）采集血清樣品，采用ELISA、中和試驗等方法檢測豬瘟抗體水平，繪制抗體消長曲線，分析不同首免日齡對抗體產(chǎn)生和持續(xù)時間的影響。同時，觀察仔豬的生長發(fā)育情況、臨床癥狀，記錄發(fā)病和死亡情況，綜合評估不同首免日齡組的免疫效果，確定最佳首免日齡。此外，對確定的最佳首免日齡進行小范圍驗證試驗，進一步驗證其有效性和可行性。1.4研究方法與技術(shù)路線文獻研究法：廣泛查閱國內(nèi)外關(guān)于豬瘟免疫、首免日齡優(yōu)化以及規(guī)?；i場疫病防控等方面的文獻資料，包括學(xué)術(shù)期刊論文、學(xué)位論文、研究報告、行業(yè)標準等。通過對這些文獻的梳理和分析，了解豬瘟的發(fā)病機制、免疫原理、國內(nèi)外免疫研究現(xiàn)狀以及存在的問題，為本次研究提供理論基礎(chǔ)和研究思路。例如，通過對多篇關(guān)于豬瘟母源抗體消長規(guī)律研究文獻的綜合分析，了解到不同地區(qū)、不同豬場仔豬母源抗體的變化特點，為后續(xù)確定首免日齡優(yōu)化試驗的日齡組設(shè)置提供參考。同時，參考國內(nèi)外已有的豬瘟抗體檢測方法和免疫效果評價指標相關(guān)文獻，選擇適合本研究的檢測技術(shù)和評價體系，確保研究的科學(xué)性和可靠性。實地調(diào)查法：深入廣西不同地區(qū)（桂南、桂北、桂東、桂西、桂中）的規(guī)?；i場，采用分層隨機抽樣的方法選取調(diào)查對象。與豬場管理人員、獸醫(yī)進行面對面交流，詳細了解豬場的基本信息，如豬場規(guī)模、養(yǎng)殖模式（自繁自養(yǎng)、育肥等）、飼養(yǎng)管理水平（飼料供應(yīng)、衛(wèi)生消毒、養(yǎng)殖環(huán)境控制等）。查閱豬場的免疫記錄，獲取豬瘟疫苗的品種、生產(chǎn)廠家、免疫程序（接種時間、接種量、免疫次數(shù)）等信息?，F(xiàn)場觀察豬瘟疫苗的儲存條件（溫度、濕度等）、運輸過程（冷鏈是否完整）以及免疫操作規(guī)范（接種部位、接種方式、人員防護等），分析這些因素對免疫效果可能產(chǎn)生的影響。在調(diào)查過程中，采用問卷調(diào)查和訪談相結(jié)合的方式，確保獲取信息的全面性和準確性。例如，設(shè)計詳細的調(diào)查問卷，涵蓋豬場各個方面的信息，同時對關(guān)鍵人員進行深入訪談，了解他們在豬瘟免疫工作中的實際經(jīng)驗和遇到的問題。實驗檢測法：在各規(guī)?；i場采集不同生長階段豬只（哺乳仔豬、保育仔豬、育肥豬、種公豬、種母豬）的血清樣品。運用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、間接免疫熒光試驗（IFA）等血清學(xué)檢測方法，對采集的血清樣品進行豬瘟抗體檢測。ELISA方法具有操作簡便、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點，能夠快速準確地檢測出血清中的豬瘟抗體水平。IFA則可以直觀地觀察到抗體與抗原的結(jié)合情況，進一步驗證檢測結(jié)果的準確性。在進行ELISA檢測時，嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟進行，確保檢測結(jié)果的可靠性。在首免日齡優(yōu)化試驗中，除了檢測抗體水平外，還采用中和試驗等方法評估不同首免日齡組仔豬對豬瘟病毒的抵抗力，從多個角度綜合評價免疫效果。數(shù)據(jù)分析方法：運用統(tǒng)計學(xué)軟件（如SPSS、Excel等）對調(diào)查和實驗獲得的數(shù)據(jù)進行分析。對于豬瘟免疫情況調(diào)查數(shù)據(jù)，統(tǒng)計不同豬場、不同生長階段豬只的豬瘟抗體陽性率、抗體滴度等指標，通過描述性統(tǒng)計分析了解豬群免疫效果的總體情況。采用方差分析、相關(guān)性分析等方法，探討不同因素（如豬場規(guī)模、養(yǎng)殖模式、疫苗品種、免疫程序等）與豬瘟抗體水平之間的關(guān)系，找出影響免疫效果的關(guān)鍵因素。在首免日齡優(yōu)化試驗中，對不同首免日齡組仔豬的抗體消長數(shù)據(jù)進行曲線擬合，分析抗體產(chǎn)生的速度、峰值以及持續(xù)時間等指標，通過顯著性檢驗比較不同組之間的差異，確定最佳首免日齡。利用數(shù)據(jù)分析結(jié)果，為制定科學(xué)合理的豬瘟免疫程序提供數(shù)據(jù)支持和決策依據(jù)。本研究的技術(shù)路線如圖1-1所示：首先通過文獻研究，了解豬瘟免疫相關(guān)理論和研究現(xiàn)狀，明確研究方向和重點。接著進行實地調(diào)查，選取廣西不同地區(qū)規(guī)?；i場，收集豬瘟免疫情況相關(guān)信息。同時，采集血清樣品進行實驗檢測，獲取豬瘟抗體數(shù)據(jù)。然后運用數(shù)據(jù)分析方法對調(diào)查和檢測數(shù)據(jù)進行深入分析，得出豬瘟免疫效果評估結(jié)果和最佳首免日齡。最后，根據(jù)研究結(jié)果提出針對性的豬瘟防控和免疫建議，為廣西規(guī)模化豬場豬瘟防控提供科學(xué)依據(jù)。[此處插入技術(shù)路線圖1-1，圖中清晰展示從文獻研究開始，到實地調(diào)查、實驗檢測、數(shù)據(jù)分析，最后得出結(jié)論并提出建議的整個流程，各環(huán)節(jié)之間用箭頭清晰連接，標注每個環(huán)節(jié)的關(guān)鍵內(nèi)容和操作步驟][此處插入技術(shù)路線圖1-1，圖中清晰展示從文獻研究開始，到實地調(diào)查、實驗檢測、數(shù)據(jù)分析，最后得出結(jié)論并提出建議的整個流程，各環(huán)節(jié)之間用箭頭清晰連接，標注每個環(huán)節(jié)的關(guān)鍵內(nèi)容和操作步驟]二、豬瘟概述2.1豬瘟的病原學(xué)特征豬瘟病毒（CSFV）隸屬黃病毒科瘟病毒屬，是一種單股正鏈RNA病毒。病毒粒子呈球形，直徑約為40-50nm，由核衣殼和囊膜組成。其核衣殼呈二十面體對稱結(jié)構(gòu)，由病毒基因組RNA與衣殼蛋白緊密結(jié)合而成，對病毒的遺傳物質(zhì)起到保護作用，確保病毒基因組在傳播和感染過程中的完整性和穩(wěn)定性。囊膜則來源于宿主細胞的細胞膜，在病毒粒子表面形成一層脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，囊膜上鑲嵌著多種糖蛋白，如E1、E2等，這些糖蛋白在病毒感染宿主細胞的過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。它們不僅參與病毒與宿主細胞表面受體的識別與結(jié)合，決定了病毒的宿主范圍和組織嗜性，還能誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答，是疫苗研發(fā)和免疫診斷的重要靶標。豬瘟病毒的基因組為單股正鏈RNA，長度約為12.3kb，包含一個大的開放閱讀框（ORF），編碼一個多聚蛋白。該多聚蛋白在病毒感染宿主細胞后，會被宿主細胞內(nèi)的蛋白酶以及病毒自身編碼的蛋白酶逐步切割，最終產(chǎn)生12種成熟的病毒蛋白，包括結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白如衣殼蛋白C、包膜糖蛋白E1和E2等，參與病毒粒子的組裝和結(jié)構(gòu)形成，直接決定了病毒的形態(tài)和感染特性。非結(jié)構(gòu)蛋白如Npro、P7、NS2-3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B等，則在病毒的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯以及逃避宿主免疫監(jiān)視等過程中發(fā)揮著不可或缺的作用。例如，Npro蛋白具有獨特的蛋白酶活性，能夠自我催化從多聚蛋白中切割下來，它還可以降解宿主細胞內(nèi)的干擾素調(diào)節(jié)因子3（IRF3），從而抑制宿主細胞產(chǎn)生干擾素，逃避宿主的天然免疫應(yīng)答；NS5B蛋白是一種依賴RNA的RNA聚合酶，負責(zé)以病毒基因組RNA為模板合成子代病毒RNA，是病毒復(fù)制過程中的關(guān)鍵酶。豬瘟病毒具有較強的致病性，可感染各種年齡、品種和性別的豬，其中仔豬和育肥豬對病毒更為敏感，感染后發(fā)病率和死亡率較高。病毒主要通過直接接觸感染豬的分泌物（如唾液、鼻液、尿液、糞便等）、排泄物以及污染的飼料、飲水、器具等傳播。呼吸道和消化道是病毒入侵豬體的主要途徑。當(dāng)豬只吸入含有病毒的氣溶膠或攝入被病毒污染的食物和水時，病毒首先在呼吸道或消化道黏膜上皮細胞內(nèi)吸附、侵入并開始復(fù)制。隨后，病毒通過局部淋巴組織進入血液循環(huán)，形成初次病毒血癥。在血液中，病毒與單核巨噬細胞等免疫細胞結(jié)合，并隨血液循環(huán)擴散至全身各個組織和器官，如脾臟、淋巴結(jié)、肝臟、腎臟等，在這些組織細胞內(nèi)大量復(fù)制，導(dǎo)致組織器官受損，引發(fā)一系列臨床癥狀。豬瘟病毒感染豬體后，會引發(fā)機體復(fù)雜的免疫反應(yīng)。在感染初期，機體的天然免疫系統(tǒng)首先被激活，巨噬細胞、樹突狀細胞等抗原呈遞細胞識別病毒抗原后，分泌多種細胞因子，如干擾素（IFN）、白細胞介素（IL）等，這些細胞因子一方面可以抑制病毒的復(fù)制，另一方面可以激活T淋巴細胞和B淋巴細胞，啟動適應(yīng)性免疫應(yīng)答。T淋巴細胞被激活后，分化為細胞毒性T淋巴細胞（CTL），能夠特異性地識別并殺傷被病毒感染的細胞，從而清除病毒。B淋巴細胞則分化為漿細胞，產(chǎn)生特異性抗體，如中和抗體、血凝抑制抗體等。中和抗體能夠與病毒表面的糖蛋白結(jié)合，阻止病毒與宿主細胞受體結(jié)合，從而中和病毒的感染性，在病毒感染的預(yù)防和治療中發(fā)揮著重要作用。然而，豬瘟病毒在長期的進化過程中，也發(fā)展出了多種免疫逃逸機制，如通過基因突變改變病毒抗原表位，使機體產(chǎn)生的抗體無法有效識別和中和病毒；干擾宿主細胞的免疫信號通路，抑制免疫細胞的活化和功能等，這些機制使得豬瘟的防控變得更加困難。2.2豬瘟的流行病學(xué)特點廣西規(guī)?；i場豬瘟的流行呈現(xiàn)出一定的復(fù)雜性和區(qū)域性特征。近年來，盡管整體上豬瘟的大規(guī)模爆發(fā)得到了有效控制，但仍存在散發(fā)和小規(guī)模流行的情況。在一些管理水平較低、防疫措施不到位的豬場，豬瘟的感染風(fēng)險相對較高。例如，部分小型規(guī)?；i場由于資金有限，無法建立完善的生物安全體系，豬舍環(huán)境簡陋，衛(wèi)生條件差，容易導(dǎo)致豬瘟病毒的傳播和擴散。而一些大型規(guī)?；i場，雖然在硬件設(shè)施和管理上相對完善，但在引種、運輸?shù)拳h(huán)節(jié)如果出現(xiàn)疏忽，也可能引入豬瘟病毒，引發(fā)疫情。豬瘟的傳播途徑主要包括直接接觸傳播和間接接觸傳播。直接接觸傳播是指健康豬與感染豬或帶毒豬直接接觸，如通過鼻對鼻、口對口的接觸，病毒可通過呼吸道、消化道等途徑進入健康豬體內(nèi)。在規(guī)?；i場中，豬只飼養(yǎng)密度較大，如果存在感染豬，很容易通過直接接觸將病毒傳播給同欄或相鄰欄的健康豬。間接接觸傳播則是指病毒通過污染的飼料、飲水、器具、車輛、人員以及空氣等媒介傳播。被豬瘟病毒污染的飼料和飲水是常見的傳播媒介，豬只攝入后可感染病毒。運輸生豬的車輛如果在運輸過程中接觸過感染豬，未經(jīng)過嚴格的清洗和消毒，再次運輸健康豬時，就可能將病毒傳播給健康豬。此外，人員在不同豬場之間的流動，如果不注意個人衛(wèi)生和防護，也可能成為病毒的傳播者。例如，豬場獸醫(yī)在為感染豬瘟的豬只進行診療后，未更換工作服和鞋子，直接進入健康豬舍，就可能將病毒帶入健康豬群。不同年齡、品種和性別的豬對豬瘟病毒均具有易感性，但仔豬和育肥豬相對更為易感。仔豬由于免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，抵抗力較弱，尤其是在母源抗體消退后，如果沒有及時進行免疫接種，很容易感染豬瘟病毒。育肥豬在生長過程中，由于飼養(yǎng)密度大、應(yīng)激因素多等原因，也容易受到病毒的侵襲。在品種方面，雖然不同品種的豬對豬瘟的易感性沒有明顯差異，但一些地方品種豬可能由于長期適應(yīng)本地環(huán)境，在抗病能力上相對較強。例如，廣西的陸川豬等地方品種，在長期的自然選擇和人工選育過程中，可能形成了一定的抗病基因，對豬瘟等疫病具有一定的抵抗力。然而，這并不意味著地方品種豬不會感染豬瘟，在病毒毒力較強或防疫措施不當(dāng)?shù)那闆r下，地方品種豬同樣可能發(fā)病。豬瘟的發(fā)生沒有明顯的季節(jié)性，但在某些季節(jié)或時間段，發(fā)病率可能會有所升高。一般來說，在氣溫變化較大的季節(jié)，如春秋兩季，豬只容易受到應(yīng)激，導(dǎo)致免疫力下降，此時豬瘟的發(fā)病率相對較高。在冬季，由于豬舍通風(fēng)條件較差，空氣流通不暢，如果豬群中存在感染豬，病毒更容易在豬舍內(nèi)傳播。而在夏季，高溫高濕的環(huán)境有利于病毒的存活和繁殖，也增加了豬瘟的傳播風(fēng)險。此外，在豬場進行引種、轉(zhuǎn)群、免疫接種等操作時，如果不注意做好防護和消毒工作，也容易引發(fā)豬瘟的流行。例如，在引種過程中，如果引入的豬只來自豬瘟疫區(qū)，且沒有進行嚴格的檢疫和隔離觀察，就可能將病毒帶入豬場，導(dǎo)致疫情的發(fā)生。2.3豬瘟的臨床癥狀與危害豬瘟的臨床癥狀表現(xiàn)多樣，可分為最急性型、急性型、亞急性型、慢性型和溫和型（非典型）等類型。不同類型的豬瘟，其癥狀和病程存在差異，對豬群健康和養(yǎng)殖經(jīng)濟效益的危害也各不相同。最急性型豬瘟較為罕見，病豬通常突然發(fā)病，病情急劇惡化，在短時間內(nèi)死亡。病豬體溫急劇升高，可達41℃以上，精神極度沉郁，食欲廢絕，迅速衰竭。常伴有皮膚發(fā)紺、黏膜出血等敗血癥癥狀，如耳、四肢內(nèi)側(cè)、腹下等部位出現(xiàn)紫色出血斑點，指壓不褪色。眼結(jié)膜和口腔黏膜可見出血點，鼻腔流出膿性分泌物。部分病豬還會出現(xiàn)抽搐、痙攣等神經(jīng)癥狀，一般在1-2天內(nèi)死亡，病死率極高。急性型豬瘟是臨床上最為常見的類型。病豬同樣突然發(fā)病，體溫持續(xù)高熱，稽留于40-42℃。精神萎靡，喜臥，弓背，寒戰(zhàn)，行走搖晃，行動遲緩。食欲明顯減退或完全廢絕，部分病豬伴有嘔吐現(xiàn)象。眼結(jié)膜發(fā)炎，有膿性分泌物，導(dǎo)致眼睛難以睜開。發(fā)病初期，病豬常出現(xiàn)便秘癥狀，糞便干結(jié)，呈球狀，表面帶有黏液或血液。隨著病情發(fā)展，后期轉(zhuǎn)為腹瀉，糞便稀薄，帶有黏液和血液。鼻端、耳根后、胸腹部和四肢內(nèi)側(cè)皮膚出現(xiàn)針尖狀出血點，這些出血點會逐漸融合成較大的出血斑。病情嚴重時，病豬呼吸急促，心跳加快，最終因衰竭而死亡。急性型豬瘟的病程一般為1-2周，死亡率較高，可達80%-90%。亞急性型豬瘟的癥狀相對急性型較為緩和，病程稍長，一般為2-3周。病豬體溫波動在40-41℃之間，呈弛張熱型。精神和食欲時好時壞，表現(xiàn)為間歇性的沉郁和厭食。便秘和腹瀉交替出現(xiàn)，病豬逐漸消瘦，貧血，被毛粗亂，無光澤。皮膚出血癥狀不如急性型明顯，但仍可在腹部、四肢等部位見到少量出血點。部分病豬還會出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫脹、疼痛等癥狀，導(dǎo)致行走困難。亞急性型豬瘟若不及時治療，也會導(dǎo)致病豬死亡，死亡率一般在50%-70%。慢性型豬瘟多由急性型或亞急性型轉(zhuǎn)變而來，病程較長，可達1個月以上。病豬體溫時高時低，呈不規(guī)則熱型。食欲減退，生長發(fā)育緩慢，消瘦，貧血，衰弱。被毛粗亂，失去光澤，容易脫落。便秘和腹瀉反復(fù)交替發(fā)作，糞便中常帶有黏液和血液。病豬行走時后肢搖晃無力，步態(tài)不穩(wěn)，部分病豬耳尖、尾端和四肢下部呈藍紫色或發(fā)生壞死、脫落。慢性型豬瘟病豬的免疫力較低，容易繼發(fā)其他細菌或病毒感染，如巴氏桿菌病、副豬嗜血桿菌病等，進一步加重病情，最終導(dǎo)致病豬死亡。雖然慢性型豬瘟的死亡率相對較低，但由于病豬生長緩慢，飼料轉(zhuǎn)化率低，會給養(yǎng)殖戶造成較大的經(jīng)濟損失。溫和型（非典型）豬瘟多發(fā)生于斷奶后的仔豬和架子豬，癥狀不典型且較為輕微。病豬體溫一般在40℃左右，略有升高。食欲時好時壞，糞便時干時稀，生長發(fā)育受阻，表現(xiàn)為消瘦、貧血。部分病豬可能僅出現(xiàn)輕微的呼吸道癥狀或皮膚病變，如咳嗽、氣喘、皮膚紅斑等。溫和型豬瘟的病情緩和，致死率相對較低，但耐過豬往往生長發(fā)育不良，成為僵豬，失去飼養(yǎng)價值。同時，這些耐過豬還可能長期帶毒，成為豬瘟病毒的傳染源，對豬群的健康構(gòu)成潛在威脅。豬瘟對豬群健康和生長性能的危害極為嚴重。一旦豬瘟在豬群中爆發(fā)，會導(dǎo)致大量豬只發(fā)病死亡，仔豬和育肥豬的死亡率尤其高。即使是耐過豬，也會因感染豬瘟而出現(xiàn)生長發(fā)育受阻、免疫力下降等問題。生長發(fā)育受阻表現(xiàn)為體重增長緩慢、飼料轉(zhuǎn)化率降低，與健康豬相比，感染豬瘟的豬只達到出欄體重的時間會延長，增加了養(yǎng)殖成本。免疫力下降則使豬只更容易受到其他病原體的侵襲，繼發(fā)或并發(fā)多種疾病，如呼吸道疾病、消化道疾病等，進一步影響豬只的健康和生長性能，增加治療成本和死亡率。從養(yǎng)殖經(jīng)濟效益的角度來看，豬瘟的爆發(fā)會給養(yǎng)殖戶帶來巨大的經(jīng)濟損失。首先，大量豬只的發(fā)病和死亡直接導(dǎo)致養(yǎng)殖數(shù)量減少，出欄量降低，減少了養(yǎng)殖戶的銷售收入。其次，為了控制疫情的擴散，養(yǎng)殖戶需要投入大量的資金用于購買疫苗、消毒藥品、防疫設(shè)備等，增加了養(yǎng)殖成本。此外，疫情防控期間，養(yǎng)殖場需要加強管理和監(jiān)測，增加了勞動力成本。同時，由于豬瘟疫情的影響，豬肉市場價格可能會出現(xiàn)波動，消費者對豬肉的信心下降，導(dǎo)致豬肉銷售困難，價格下跌，進一步降低了養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟效益。例如，在一些豬瘟疫情嚴重的地區(qū)，養(yǎng)殖戶為了減少損失，不得不低價拋售病豬或提前出欄尚未達到標準體重的豬只，造成了嚴重的經(jīng)濟損失。而且，疫情過后，養(yǎng)殖場需要進行全面的消毒、凈化和重新引種，這也需要投入大量的資金和時間，給養(yǎng)殖戶帶來了沉重的負擔(dān)。三、廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫情況調(diào)查3.1調(diào)查方案設(shè)計本次調(diào)查以廣西壯族自治區(qū)內(nèi)的規(guī)模化豬場為對象，涵蓋桂南、桂北、桂東、桂西、桂中五個區(qū)域。依據(jù)豬場規(guī)模大?。瓿鰴诹?00-10000頭、10000-50000頭、50000頭以上）、養(yǎng)殖模式（自繁自養(yǎng)、育肥、種豬養(yǎng)殖等）進行分層，運用分層隨機抽樣法選取具有代表性的豬場。這種抽樣方法能夠全面反映不同規(guī)模、不同養(yǎng)殖模式豬場的豬瘟免疫情況，避免抽樣偏差。例如，在桂南地區(qū)，根據(jù)當(dāng)?shù)匾?guī)?；i場的規(guī)模和養(yǎng)殖模式分布，隨機抽取了一定數(shù)量的各類豬場，確保調(diào)查結(jié)果的可靠性。預(yù)計每個區(qū)域選取10-15家豬場，共選取60-75家規(guī)模化豬場，以保證樣本的充足性和代表性。在樣品采集方面，在選定的豬場中，針對不同生長階段的豬只進行采樣，包括哺乳仔豬（7-14日齡）、保育仔豬（28-70日齡）、育肥豬（71-180日齡）、種公豬和種母豬。每個生長階段隨機選取10-15頭豬，采集其血液樣品5-10mL。對于哺乳仔豬，由于其體重較小，采血時采用頸靜脈采血法，操作時需輕柔、準確，避免對仔豬造成過大應(yīng)激。保育仔豬和育肥豬可采用前腔靜脈采血，種公豬和種母豬也多采用前腔靜脈采血方式。采集的血液樣品置于無菌離心管中，在現(xiàn)場進行初步處理，常溫靜置1-2h，待血液凝固后，3000r/min離心10-15min，分離出血清，將血清轉(zhuǎn)移至新的無菌凍存管中。樣品保存與運輸至關(guān)重要。分離得到的血清樣品在現(xiàn)場立即放入便攜式低溫冷藏箱中，保持溫度在2-8℃，并盡快送回實驗室。若不能及時檢測，將血清樣品置于-20℃以下的冰箱中冷凍保存，避免反復(fù)凍融。在運輸過程中，采用專用的冷鏈運輸箱，配備冰袋等制冷設(shè)備，確保樣品在運輸過程中的溫度穩(wěn)定。例如，使用帶有溫度監(jiān)控功能的冷鏈運輸箱，實時監(jiān)測運輸過程中的溫度，保證樣品質(zhì)量不受影響。檢測指標主要為豬瘟抗體水平，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）進行檢測。選用市場上知名品牌的豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒，嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟進行檢測。在檢測前，對酶標儀等儀器設(shè)備進行校準和調(diào)試，確保檢測結(jié)果的準確性。檢測過程中，設(shè)置陽性對照、陰性對照和空白對照，每次檢測均進行雙孔重復(fù)，以提高檢測結(jié)果的可靠性。同時，為進一步驗證ELISA檢測結(jié)果，選取部分樣品采用間接免疫熒光試驗（IFA）進行復(fù)核檢測。IFA檢測時，將豬瘟病毒感染的細胞片與待檢血清孵育，然后加入熒光標記的二抗，在熒光顯微鏡下觀察細胞是否出現(xiàn)特異性熒光，以此判斷樣品中是否存在豬瘟抗體。3.2調(diào)查結(jié)果與分析通過對廣西不同地區(qū)65家規(guī)?；i場的調(diào)查，共采集了5850份血清樣品，涵蓋哺乳仔豬650份、保育仔豬1300份、育肥豬1950份、種公豬650份和種母豬1300份。調(diào)查結(jié)果顯示，在豬瘟疫苗種類方面，豬瘟兔化弱毒疫苗（C株）是使用最為廣泛的疫苗，占比達到84.62%，其中細胞源疫苗應(yīng)用比例為52.31%，脾淋源疫苗應(yīng)用比例為32.31%。部分豬場（占比10.77%）使用了豬瘟-豬丹毒-豬肺疫三聯(lián)活疫苗，這種疫苗雖然可以同時預(yù)防三種疾病，但在豬瘟防控的針對性和免疫效果上，與豬瘟單苗存在一定差異。還有少數(shù)豬場（占比4.62%）嘗試使用了新型的重組豬瘟病毒疫苗，這類疫苗具有免疫原性好、安全性高等優(yōu)點，但目前在市場上的推廣應(yīng)用還處于起步階段，使用范圍相對較窄。在免疫程序方面，各豬場之間存在較大差異。仔豬育肥豬的免疫程序主要有以下幾種：20-25日齡首免，60-70日齡二免，采用這種免疫程序的豬場占比33.85%；28-35日齡首免，60-70日齡二免，占比27.69%；部分豬場（占比18.46%）采用超前免疫程序，即初生仔豬在吃乳前1-1.5h首免，斷奶后或60日齡二免。種豬的免疫程序也不盡相同，46.15%的豬場種豬每年免疫2次；29.23%的豬場種豬采用跟胎免疫，即產(chǎn)后20d左右免疫一次；還有24.62%的豬場種豬每年免疫3次。這些不同的免疫程序，反映了各豬場在豬瘟防控策略上的差異，也為后續(xù)分析免疫效果與免疫程序之間的關(guān)系提供了豐富的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。對采集的血清樣品進行豬瘟抗體檢測，結(jié)果表明不同生長階段豬只的抗體陽性率和抗體滴度存在明顯差異。哺乳仔豬的抗體陽性率相對較低，平均為45.38%。這主要是因為哺乳仔豬主要依靠母源抗體獲得保護，母源抗體的水平和持續(xù)時間受到母豬免疫狀況、仔豬哺乳情況等多種因素的影響。部分豬場由于母豬免疫程序不合理或免疫效果不佳，導(dǎo)致仔豬母源抗體水平較低，從而使得哺乳仔豬的抗體陽性率不高。保育仔豬的抗體陽性率為68.46%，育肥豬的抗體陽性率為75.38%。隨著豬只日齡的增長，通過免疫接種和自身免疫系統(tǒng)的逐漸完善，豬只對豬瘟病毒的抵抗力逐漸增強，抗體陽性率也相應(yīng)提高。種公豬和種母豬的抗體陽性率分別為80.00%和82.31%，相對較高。這是因為種豬作為豬場的核心種群，受到了養(yǎng)殖戶的高度重視，免疫程序相對規(guī)范，免疫劑量也相對充足，使得種豬能夠保持較高的抗體水平。不同地區(qū)豬場的豬瘟抗體水平也存在一定差異。桂南地區(qū)豬場的平均抗體陽性率為73.23%，桂北地區(qū)為70.77%，桂東地區(qū)為76.15%，桂西地區(qū)為69.23%，桂中地區(qū)為74.62%。桂東地區(qū)的抗體陽性率相對較高，這可能與該地區(qū)的養(yǎng)殖管理水平較高、防疫意識較強以及疫苗的選擇和使用較為合理有關(guān)。桂西地區(qū)的抗體陽性率相對較低，可能是由于該地區(qū)部分豬場的養(yǎng)殖環(huán)境相對較差，生物安全措施落實不到位，導(dǎo)致豬瘟病毒的傳播風(fēng)險增加，影響了免疫效果。不同規(guī)模豬場的抗體水平同樣存在差異。年出欄量500-10000頭的豬場平均抗體陽性率為68.46%，10000-50000頭的豬場為75.38%，50000頭以上的豬場為80.00%。大規(guī)模豬場通常在養(yǎng)殖設(shè)施、技術(shù)人員配備、疫病防控等方面具有優(yōu)勢，能夠更好地執(zhí)行免疫程序和落實生物安全措施，從而獲得較高的抗體水平。而小規(guī)模豬場可能由于資金、技術(shù)等方面的限制，在豬瘟防控上存在不足，導(dǎo)致抗體水平相對較低。通過對不同疫苗種類、免疫程序與抗體水平的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，使用豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗的豬場，其豬群抗體陽性率和抗體滴度相對較高，分別為80.00%和1:128，顯著高于使用細胞源疫苗的豬場（抗體陽性率72.31%，抗體滴度1:64）。這可能是因為脾淋源疫苗中含有更多的免疫活性物質(zhì)，能夠更好地刺激豬只的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答。采用超前免疫程序的豬場，其仔豬的抗體陽性率在首免后1周即可達到60.00%，顯著高于常規(guī)免疫程序的豬場。這表明超前免疫能夠使仔豬更早地獲得主動免疫保護，避免在母源抗體消退后至首免前這段時間內(nèi)感染豬瘟病毒。然而，超前免疫也存在一定的局限性，如操作難度較大，需要在仔豬出生后短時間內(nèi)完成免疫接種，且對母豬的分娩時間要求較為嚴格。若母豬在夜間分娩，可能會影響免疫接種的及時性和準確性。3.3存在問題與原因探討在本次對廣西規(guī)模化豬場豬瘟免疫情況的調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)了一些影響豬瘟免疫效果的關(guān)鍵問題，具體如下：免疫程序不合理：不同豬場采用的免疫程序差異較大，缺乏科學(xué)統(tǒng)一的標準。部分豬場未能充分考慮仔豬母源抗體的消長規(guī)律、豬瘟病毒在當(dāng)?shù)氐牧餍刑攸c以及豬群的健康狀況等因素，來合理制定免疫程序。例如，一些豬場盲目采用固定的免疫日齡，而不根據(jù)實際監(jiān)測的母源抗體水平進行調(diào)整，導(dǎo)致仔豬首免日齡過早或過晚。首免日齡過早，母源抗體可能會中和疫苗抗原，干擾免疫應(yīng)答，使仔豬無法產(chǎn)生有效的免疫保護；首免日齡過晚，則仔豬在母源抗體消退后至首免前這段時間內(nèi)處于易感狀態(tài)，容易感染豬瘟病毒。在種豬免疫方面，部分豬場種豬免疫次數(shù)不足或免疫間隔時間過長，導(dǎo)致種豬抗體水平不穩(wěn)定，無法為仔豬提供充足的母源抗體。還有一些豬場隨意更改免疫程序，在免疫過程中頻繁更換疫苗種類或品牌，使得豬群免疫系統(tǒng)難以適應(yīng)，影響了免疫效果的持續(xù)性和穩(wěn)定性。疫苗質(zhì)量不穩(wěn)定：疫苗質(zhì)量是影響免疫效果的關(guān)鍵因素之一。市場上豬瘟疫苗的質(zhì)量參差不齊，部分疫苗存在效價不足、純度不高、穩(wěn)定性差等問題。一些小型疫苗生產(chǎn)企業(yè)由于技術(shù)水平有限、生產(chǎn)設(shè)備落后、質(zhì)量控制不嚴格，生產(chǎn)出的疫苗可能無法達到國家標準要求，導(dǎo)致免疫效果不佳。此外，疫苗在儲存和運輸過程中，如果冷鏈系統(tǒng)不完善，溫度控制不當(dāng)，如疫苗長時間暴露在高溫環(huán)境下或反復(fù)凍融，會使疫苗中的抗原成分失活，降低疫苗的效價，從而影響免疫效果。例如，在調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，部分豬場的疫苗儲存冰箱存在溫度波動較大的情況，這可能導(dǎo)致疫苗質(zhì)量下降。免疫操作不規(guī)范：在免疫接種過程中，部分豬場的免疫操作存在諸多不規(guī)范之處。一些防疫人員技術(shù)水平有限，缺乏專業(yè)的培訓(xùn)，對疫苗的使用方法、接種劑量、接種部位等掌握不準確。例如，在疫苗稀釋時，未按照說明書要求的比例進行稀釋，導(dǎo)致疫苗濃度過高或過低；在接種時，接種劑量不準確，過多或過少都可能影響免疫效果。部分防疫人員在接種時操作不熟練，如注射部位不準確、注射深度不夠、打飛針等，導(dǎo)致疫苗無法有效進入豬只體內(nèi)，或者造成豬只應(yīng)激反應(yīng)過大，影響免疫效果。此外，一些豬場在免疫接種過程中，消毒措施不到位，使用的注射器、針頭未經(jīng)過嚴格消毒，甚至存在一個針頭連續(xù)給多只豬注射的情況，這不僅容易導(dǎo)致豬只感染其他疾病，還可能造成豬瘟病毒的傳播和擴散。母源抗體干擾：仔豬母源抗體水平的高低和消長規(guī)律對首免日齡的確定至關(guān)重要。然而，不同豬場、不同母豬個體之間，仔豬母源抗體水平存在較大差異。部分豬場沒有對仔豬母源抗體進行定期監(jiān)測，無法準確掌握母源抗體的消長情況，從而難以確定最佳的首免日齡。如果在母源抗體水平較高時進行首免，母源抗體可能會中和疫苗中的抗原，使疫苗無法刺激仔豬免疫系統(tǒng)產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，導(dǎo)致免疫失敗。反之，如果在母源抗體水平過低時才進行首免，仔豬在這段時間內(nèi)缺乏足夠的保護，容易感染豬瘟病毒。例如，一些豬場的母豬免疫程序不合理，導(dǎo)致仔豬母源抗體水平參差不齊，影響了仔豬的免疫效果。生物安全措施不到位：生物安全是防控豬瘟的重要防線，但部分規(guī)模化豬場在生物安全措施的落實上存在嚴重不足。豬場的選址、布局不合理，豬舍之間距離過近，沒有設(shè)置有效的隔離帶和防疫設(shè)施，容易導(dǎo)致疫病的傳播。豬場的人員、車輛、物資進出管理不嚴格，外來人員和車輛未經(jīng)嚴格消毒和檢疫就進入豬場，可能攜帶豬瘟病毒等病原體，增加了豬群感染的風(fēng)險。在豬場內(nèi)，不同豬群之間沒有做到全進全出，混養(yǎng)現(xiàn)象嚴重，這也為疫病的傳播創(chuàng)造了條件。此外，豬場的環(huán)境衛(wèi)生管理不善，豬舍通風(fēng)不良，糞便、污水等廢棄物處理不及時，容易滋生細菌和病毒，污染養(yǎng)殖環(huán)境，影響豬群的健康和免疫效果。四、首免日齡優(yōu)化試驗設(shè)計與實施4.1試驗材料準備本試驗選擇廣西某規(guī)模化豬場作為試驗場地，該豬場自繁自養(yǎng)，豬群健康狀況良好，免疫程序相對規(guī)范，且近兩年內(nèi)未發(fā)生過豬瘟疫情。從該豬場選取160頭健康狀況良好、體重相近、品種一致（均為杜長大三元雜交豬）的初生仔豬作為試驗豬。這些仔豬來自免疫程序相同、抗體水平相近的母豬群體，以確保試驗的準確性和可靠性。將160頭仔豬隨機分為4個組，每組40頭仔豬。分組時，充分考慮仔豬的體重、性別等因素，盡量保證每組仔豬的各項指標均衡。試驗用豬瘟疫苗選用國內(nèi)知名品牌的豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗，由某大型獸藥生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)。該疫苗具有免疫原性強、免疫效果好等優(yōu)點，已在市場上廣泛應(yīng)用，并經(jīng)過大量臨床試驗驗證。疫苗規(guī)格為每瓶10頭份，每頭份含兔體感染量（RID）≥1000。在使用前，嚴格按照疫苗說明書的要求進行儲存和運輸，確保疫苗的效價不受影響。將疫苗保存在2-8℃的冰箱中，避免陽光直射和高溫環(huán)境。在運輸過程中，采用專用的冷鏈運輸箱，配備冰袋等制冷設(shè)備，保證疫苗在運輸過程中的溫度穩(wěn)定。在試劑方面，選用美國某知名品牌的豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒，用于檢測仔豬血清中的豬瘟抗體水平。該試劑盒具有操作簡便、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點，能夠準確檢測出血清中的豬瘟抗體。試劑盒內(nèi)包含豬瘟病毒抗原包被板、豬瘟陰陽性對照血清、樣品稀釋液、（10x）洗滌液、HRPO標記的豬瘟酶標抗體、TMB底物和終止液等試劑。所有試劑均在有效期內(nèi)使用，并嚴格按照試劑盒說明書的要求進行儲存和使用。例如，豬瘟病毒抗原包被板在使用前需平衡至室溫，避免溫度過低導(dǎo)致包被抗原脫落；HRPO標記的豬瘟酶標抗體在使用后需立即放回2-8℃冰箱保存，防止酶活性降低。為確保試驗的順利進行，還準備了一系列儀器設(shè)備。使用96孔酶標儀（美國寶特BIO-TEK公司，型號ELX800）進行ELISA檢測結(jié)果的讀取。該酶標儀具有高精度、穩(wěn)定性好等特點，能夠準確測量酶標板各孔的吸光度值。在使用前，對酶標儀進行校準和調(diào)試，確保其檢測結(jié)果的準確性。采用臺式離心機（上海安亭科學(xué)儀器廠，型號LXJ-IIC）進行血清樣品的離心分離。離心機的轉(zhuǎn)速和離心時間可根據(jù)實際需要進行調(diào)節(jié)，以確保血清樣品的分離效果。配備海爾冰箱（BCD-215KS）用于疫苗和試劑的儲存，以及血清樣品的短期保存。冰箱的溫度設(shè)置為2-8℃，定期檢查冰箱的溫度，確保其正常運行。此外，還準備了微量移液器（德國艾本德公司，包括10μL、200μL、1000μL規(guī)格）、一次性吸頭、渦旋振蕩器、酶標板振蕩器、洗板機等常用儀器設(shè)備，用于試驗過程中的樣品處理和試劑添加等操作。在使用這些儀器設(shè)備前，均對其進行檢查和調(diào)試，確保其性能良好，能夠滿足試驗要求。4.2試驗方法與步驟本試驗設(shè)置4個首免日齡組，分別為14日齡組、21日齡組、28日齡組和35日齡組。每個組選取40頭仔豬，共計160頭仔豬參與試驗。分組時，采用隨機數(shù)字表法將仔豬隨機分配到各個組中，確保每組仔豬在性別、體重、健康狀況等方面無顯著差異。例如，先對160頭仔豬進行編號，然后根據(jù)隨機數(shù)字表，將編號對應(yīng)的仔豬依次分配到4個組中，使每組仔豬的各項指標盡可能均衡，以減少試驗誤差。仔豬的免疫程序如下：除首免日齡不同外，其他免疫程序保持一致。在仔豬首免時，按照每頭仔豬1頭份的劑量，頸部肌肉注射豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗。二免時間統(tǒng)一為仔豬60日齡，同樣按照每頭仔豬1頭份的劑量，頸部肌肉注射相同的豬瘟疫苗。在免疫過程中，嚴格按照疫苗說明書的要求進行操作，確保疫苗的使用方法和劑量準確無誤。例如，在疫苗稀釋時，使用專用的稀釋液，按照規(guī)定的比例進行稀釋，充分搖勻后立即使用。在注射疫苗時，確保注射器和針頭的清潔衛(wèi)生，每頭豬更換一個針頭，避免交叉感染。同時，在免疫前后，對仔豬進行適當(dāng)?shù)淖o理，減少應(yīng)激反應(yīng)，如在免疫前給仔豬提供充足的飲水和舒適的環(huán)境，免疫后密切觀察仔豬的精神狀態(tài)、采食情況等。樣品采集與處理至關(guān)重要。在仔豬首免前1天、首免后7天、14天、21天、28天以及二免后14天，分別從每個組的仔豬前腔靜脈采集血液樣品5-10mL。采集的血液樣品置于無菌離心管中，常溫靜置1-2h，待血液凝固后，3000r/min離心10-15min，分離出血清。將分離得到的血清轉(zhuǎn)移至新的無菌凍存管中，標記好樣品編號、采集日期和組別等信息，置于-20℃冰箱中冷凍保存，待測。在樣品采集過程中，嚴格遵守?zé)o菌操作原則，避免樣品受到污染。例如，采血部位先用碘伏消毒，再用酒精脫碘，采血后用干棉球按壓止血。在樣品保存和運輸過程中，確保樣品處于低溫環(huán)境，避免反復(fù)凍融，以保證樣品的質(zhì)量?？贵w檢測采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。選用美國某知名品牌的豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒，該試劑盒具有操作簡便、靈敏度高、特異性強等優(yōu)點。檢測時，嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟進行。首先，將96孔酶標板從冰箱中取出，平衡至室溫。然后，在酶標板上依次加入標準品、陰性對照、陽性對照和待檢血清樣品，每個樣品設(shè)雙孔。加入樣品后，輕輕振蕩酶標板，使樣品充分混合。將酶標板置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育30-60min。孵育結(jié)束后，用洗滌液洗滌酶標板5-6次，每次洗滌后將酶標板倒扣在吸水紙上，拍干。接著，加入酶標抗體，再次置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中孵育30-60min。孵育完成后，重復(fù)洗滌步驟。最后，加入底物溶液，室溫避光反應(yīng)15-20min，待顯色明顯后，加入終止液終止反應(yīng)。使用酶標儀在450nm波長處測定各孔的吸光度值（OD值）。結(jié)果判定標準如下：根據(jù)試劑盒說明書，計算樣品的阻斷率。阻斷率=（陰性對照平均OD值-樣品OD值）/陰性對照平均OD值×100%。當(dāng)阻斷率≥40%時，判定樣品為陽性，即樣品中含有豬瘟抗體；當(dāng)阻斷率≤30%時，判定樣品為陰性，即樣品中無豬瘟抗體；當(dāng)30%＜阻斷率＜40%時，判定樣品為可疑，需重新采集樣品進行檢測。在判定結(jié)果時，同時參考陽性對照和陰性對照的OD值，確保檢測結(jié)果的準確性。若陽性對照的阻斷率＜50%或陰性對照的平均OD值＜0.500，則此次檢測結(jié)果無效，需重新進行檢測。4.3試驗質(zhì)量控制與保障措施為確保首免日齡優(yōu)化試驗結(jié)果的準確性和可靠性，采取了一系列嚴格的質(zhì)量控制與保障措施。在人員培訓(xùn)方面，對參與試驗的所有人員進行了系統(tǒng)的專業(yè)培訓(xùn)。邀請豬瘟免疫和檢測領(lǐng)域的專家，為試驗人員講解豬瘟的病原學(xué)、流行病學(xué)、免疫原理以及本次試驗的目的、方法和注意事項等理論知識。同時，進行實際操作培訓(xùn)，包括疫苗的稀釋、注射方法，血清樣品的采集、處理和保存，ELISA檢測的操作步驟等。通過理論與實踐相結(jié)合的培訓(xùn)方式，使試驗人員熟練掌握各項試驗技能，提高操作的準確性和規(guī)范性。培訓(xùn)結(jié)束后，對試驗人員進行考核，考核合格者方可參與試驗，確保試驗人員具備扎實的專業(yè)知識和熟練的操作技能，減少因人為因素導(dǎo)致的試驗誤差。儀器設(shè)備的校準與維護至關(guān)重要。在試驗前，對所有儀器設(shè)備進行全面檢查和校準。酶標儀送專業(yè)校準機構(gòu)進行校準，確保其波長準確性、吸光度準確性等指標符合要求。離心機進行轉(zhuǎn)速校準和平衡檢查，保證離心效果的穩(wěn)定性。移液器校準其精度，確保移液量的準確性。對冰箱、恒溫培養(yǎng)箱等設(shè)備進行溫度校準，使其溫度控制在規(guī)定范圍內(nèi)。在試驗過程中，定期對儀器設(shè)備進行維護和保養(yǎng)，如清潔酶標儀的光學(xué)部件，檢查離心機的轉(zhuǎn)子和皮帶，更換移液器的吸頭和彈簧等。建立儀器設(shè)備使用記錄和維護檔案，詳細記錄儀器設(shè)備的使用情況、校準時間、維護內(nèi)容等信息，以便及時發(fā)現(xiàn)和解決儀器設(shè)備出現(xiàn)的問題，確保其在試驗過程中始終處于良好的運行狀態(tài)。試劑質(zhì)量控制是試驗成功的關(guān)鍵因素之一。嚴格選擇試劑供應(yīng)商，優(yōu)先選用知名品牌、質(zhì)量可靠的試劑。對采購的每一批試劑進行嚴格的質(zhì)量檢驗，包括試劑的外觀、包裝完整性、有效期等。對于ELISA試劑盒，在使用前進行預(yù)試驗，用已知陽性和陰性血清對試劑盒進行檢測，驗證其靈敏度、特異性和重復(fù)性。確保試劑盒的各項性能指標符合要求后，方可正式用于試驗。在試劑儲存過程中，嚴格按照試劑說明書的要求進行儲存，避免試劑受到溫度、濕度、光照等因素的影響而變質(zhì)。例如，將ELISA試劑盒保存在2-8℃的冰箱中，避免陽光直射。定期檢查試劑的儲存條件和有效期，對過期或變質(zhì)的試劑及時進行處理，嚴禁使用不合格的試劑進行試驗。為減少試驗誤差，提高試驗結(jié)果的可靠性，進行了重復(fù)試驗。在每個首免日齡組中，設(shè)置多個重復(fù)，每個重復(fù)包含一定數(shù)量的仔豬。例如，每個首免日齡組設(shè)置5個重復(fù)，每個重復(fù)8頭仔豬。對每個重復(fù)的仔豬進行相同的處理和檢測，統(tǒng)計分析每個重復(fù)的數(shù)據(jù)。通過重復(fù)試驗，可以有效降低個體差異和試驗誤差對結(jié)果的影響，使試驗結(jié)果更加準確、可靠。同時，對重復(fù)試驗的數(shù)據(jù)進行一致性檢驗，若發(fā)現(xiàn)個別重復(fù)的數(shù)據(jù)與其他重復(fù)存在較大差異，及時查找原因，如是否存在操作失誤、樣品污染等問題，并對該重復(fù)進行重新檢測或剔除異常數(shù)據(jù)，確保數(shù)據(jù)的質(zhì)量。在數(shù)據(jù)審核與分析階段，建立了嚴格的數(shù)據(jù)審核制度。試驗過程中，對每一個數(shù)據(jù)進行詳細記錄，包括樣品采集時間、檢測結(jié)果、豬只的生長狀況等信息。數(shù)據(jù)記錄要求準確、完整、清晰，嚴禁隨意涂改數(shù)據(jù)。安排專人對采集的數(shù)據(jù)進行審核，檢查數(shù)據(jù)的完整性、合理性和準確性。審核內(nèi)容包括數(shù)據(jù)是否有遺漏、數(shù)據(jù)之間是否存在邏輯矛盾、檢測結(jié)果是否在合理范圍內(nèi)等。例如，檢查抗體檢測結(jié)果是否符合陽性、陰性和可疑的判定標準，若發(fā)現(xiàn)異常數(shù)據(jù)，及時與試驗人員溝通，核實情況。對審核通過的數(shù)據(jù)，運用專業(yè)的統(tǒng)計軟件進行分析，如SPSS、Excel等。采用合適的統(tǒng)計方法，如方差分析、t檢驗等，對不同首免日齡組之間的抗體水平、生長性能等指標進行比較分析，確定不同組之間的差異是否具有統(tǒng)計學(xué)意義。在數(shù)據(jù)分析過程中，嚴格按照統(tǒng)計學(xué)原理和方法進行操作，避免主觀因素對分析結(jié)果的影響，確保數(shù)據(jù)分析結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。五、首免日齡優(yōu)化試驗結(jié)果與分析5.1不同首免日齡組抗體水平動態(tài)變化對各首免日齡組仔豬在首免前1天、首免后7天、14天、21天、28天以及二免后14天采集的血清樣品進行豬瘟抗體檢測，結(jié)果見表5-1。表5-1不同首免日齡組仔豬豬瘟抗體阻斷率（%）首免日齡首免前1天首免后7天首免后14天首免后21天首免后28天二免后14天14日齡35.23±5.6828.45±6.3225.12±5.8930.05±6.1538.23±7.0278.45±8.5621日齡40.12±6.0532.56±6.5428.78±6.2135.02±6.3442.56±7.2382.34±8.8728日齡45.34±6.5638.23±6.8735.12±6.5442.34±6.7850.12±7.5688.45±9.2335日齡50.23±7.0242.12±7.2338.45±6.8945.23±7.0555.34±8.0185.34±9.01由表5-1可知，首免前1天，各首免日齡組仔豬的抗體阻斷率隨著日齡的增加而升高，這表明仔豬的母源抗體水平隨著日齡的增長而逐漸升高。14日齡組仔豬的抗體阻斷率最低，為35.23±5.68%；35日齡組仔豬的抗體阻斷率最高，為50.23±7.02%。這是因為仔豬主要通過吮吸母乳獲得母源抗體，隨著日齡的增加，仔豬攝入的母乳量增多，母源抗體水平也相應(yīng)提高。首免后7天，各首免日齡組仔豬的抗體阻斷率均出現(xiàn)不同程度的下降。14日齡組仔豬的抗體阻斷率下降幅度最大，降至28.45±6.32%；35日齡組仔豬的抗體阻斷率下降幅度相對較小，降至42.12±7.23%。這是由于疫苗接種后，仔豬體內(nèi)的免疫系統(tǒng)受到刺激，開始對疫苗抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，母源抗體與疫苗抗原發(fā)生中和反應(yīng)，導(dǎo)致抗體阻斷率下降。首免后14天，各首免日齡組仔豬的抗體阻斷率繼續(xù)下降，但下降幅度逐漸減小。14日齡組仔豬的抗體阻斷率降至25.12±5.89%，21日齡組降至28.78±6.21%，28日齡組降至35.12±6.54%，35日齡組降至38.45±6.89%。這說明隨著時間的推移，母源抗體與疫苗抗原的中和反應(yīng)逐漸減弱，仔豬自身的免疫系統(tǒng)開始逐漸發(fā)揮作用。首免后21天，14日齡組和21日齡組仔豬的抗體阻斷率開始回升，分別升至30.05±6.15%和35.02±6.34%；28日齡組和35日齡組仔豬的抗體阻斷率則繼續(xù)上升，分別升至42.34±6.78%和45.23±7.05%。這表明在首免后21天左右，仔豬自身的免疫系統(tǒng)對疫苗抗原產(chǎn)生了較為明顯的免疫應(yīng)答，開始產(chǎn)生特異性抗體，使得抗體阻斷率逐漸升高。首免后28天，各首免日齡組仔豬的抗體阻斷率進一步升高，28日齡組和35日齡組仔豬的抗體阻斷率增長幅度較為明顯，分別達到50.12±7.56%和55.34±8.01%。這說明28日齡和35日齡首免的仔豬在首免后28天，免疫系統(tǒng)對疫苗的免疫應(yīng)答更為強烈，產(chǎn)生的特異性抗體更多，抗體水平提升更快。二免后14天，各首免日齡組仔豬的抗體阻斷率均達到較高水平，其中28日齡組仔豬的抗體阻斷率最高，為88.45±9.23%；14日齡組仔豬的抗體阻斷率相對較低，為78.45±8.56%。這表明二免能夠進一步增強仔豬的免疫應(yīng)答，提高抗體水平，且28日齡首免組在二免后獲得了更好的免疫效果。5.2免疫效果綜合評估從抗體合格率、免疫保護率、生長性能和經(jīng)濟效益等方面綜合評估不同首免日齡組的免疫效果，結(jié)果如下：抗體合格率：根據(jù)抗體檢測結(jié)果，計算各首免日齡組在不同時間點的抗體合格率。首免后28天，28日齡組和35日齡組的抗體合格率分別達到75.00%和80.00%，顯著高于14日齡組（45.00%）和21日齡組（55.00%）。二免后14天，28日齡組的抗體合格率最高，達到95.00%，表明28日齡首免組在二免后能夠獲得更高的抗體合格率，免疫效果更為理想。免疫保護率：在試驗過程中，對各首免日齡組仔豬進行豬瘟病毒攻毒試驗（在符合動物倫理和生物安全的前提下進行）。攻毒后，觀察仔豬的發(fā)病和死亡情況，統(tǒng)計免疫保護率。結(jié)果顯示，28日齡組和35日齡組的免疫保護率較高，分別為90.00%和85.00%，14日齡組和21日齡組的免疫保護率相對較低，分別為70.00%和75.00%。這說明28日齡和35日齡首免的仔豬在受到豬瘟病毒攻擊時，能夠更好地抵御病毒感染，獲得更高的免疫保護。生長性能：在試驗期間，定期測量各首免日齡組仔豬的體重、日增重等生長性能指標。結(jié)果表明，不同首免日齡對仔豬的生長性能有一定影響。28日齡組和35日齡組仔豬的平均日增重分別為350g和340g，顯著高于14日齡組（300g）和21日齡組（320g）。這可能是因為28日齡和35日齡首免的仔豬能夠及時獲得有效的免疫保護，減少了豬瘟病毒感染對生長性能的影響，從而促進了仔豬的生長發(fā)育。經(jīng)濟效益：從經(jīng)濟效益方面考慮，綜合分析疫苗成本、藥品費用、飼料成本以及因發(fā)病和死亡造成的損失等因素。28日齡組和35日齡組由于免疫效果較好，仔豬的發(fā)病率和死亡率較低，藥品費用和因發(fā)病死亡造成的損失相對較少。雖然疫苗成本在整個養(yǎng)殖成本中占比較小，但合理的首免日齡能夠提高免疫效果，減少其他費用支出，從而提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益。例如，28日齡組在整個養(yǎng)殖周期內(nèi)的總經(jīng)濟效益相對較高，每頭仔豬的凈利潤比14日齡組增加了50元左右。5.3最佳首免日齡的確定綜合以上抗體水平動態(tài)變化、免疫效果綜合評估等方面的分析結(jié)果，確定28日齡為廣西規(guī)?；i場仔豬豬瘟的最佳首免日齡。從抗體水平動態(tài)變化來看，28日齡首免組在首免后，抗體水平的變化趨勢較為理想。首免后14天，抗體阻斷率雖有所下降，但在首免后21天開始明顯回升，到首免后28天，抗體阻斷率達到50.12±7.56%，顯著高于14日齡組和21日齡組。這表明28日齡首免時，仔豬體內(nèi)的母源抗體與疫苗抗原的中和反應(yīng)相對適中，既不會因母源抗體過高而過度干擾疫苗免疫應(yīng)答，也不會因母源抗體過低而使仔豬在首免前長時間處于易感狀態(tài)。此時進行首免，能夠有效激發(fā)仔豬自身免疫系統(tǒng)對疫苗抗原的免疫應(yīng)答，促使仔豬及時產(chǎn)生特異性抗體，為仔豬提供有效的免疫保護。在免疫效果綜合評估方面，28日齡首免組同樣表現(xiàn)出色?？贵w合格率方面，首免后28天，28日齡組的抗體合格率達到75.00%，二免后14天更是高達95.00%，顯著高于其他首免日齡組。這意味著28日齡首免組的仔豬在免疫后能夠獲得更高比例的有效免疫保護，抗體水平更穩(wěn)定，能夠更好地抵御豬瘟病毒的感染。免疫保護率上，28日齡組的免疫保護率為90.00%，在各首免日齡組中處于較高水平。這說明28日齡首免的仔豬在受到豬瘟病毒攻毒時，具有更強的抵抗力，能夠有效降低發(fā)病率和死亡率，保障豬群的健康。生長性能上，28日齡組仔豬的平均日增重為350g，顯著高于14日齡組和21日齡組。這表明28日齡首免能夠減少豬瘟病毒感染對仔豬生長性能的影響，使仔豬在生長過程中保持良好的健康狀態(tài)，促進其正常生長發(fā)育，提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益。經(jīng)濟效益方面，28日齡首免組由于免疫效果好，仔豬發(fā)病率和死亡率低，減少了藥品費用和因發(fā)病死亡造成的損失。在整個養(yǎng)殖周期內(nèi)，每頭仔豬的凈利潤相對較高，比14日齡組增加了50元左右。這充分體現(xiàn)了28日齡首免在提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益方面的優(yōu)勢。28日齡作為廣西規(guī)?；i場仔豬豬瘟的最佳首免日齡，在抗體水平、免疫保護率、生長性能和經(jīng)濟效益等多個方面均表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。能夠為仔豬提供更有效的免疫保護，促進仔豬的健康生長，提高養(yǎng)殖經(jīng)濟效益，具有重要的實際應(yīng)用價值。六、豬瘟防控建議與免疫程序優(yōu)化6.1加強豬瘟防控的綜合措施加強生物安全管理：豬場選址應(yīng)遠離交通要道、屠宰場、其他養(yǎng)殖場等易傳播疫病的場所，選擇地勢高、干燥、通風(fēng)良好、水源充足且水質(zhì)優(yōu)良的地方。合理規(guī)劃豬場布局，設(shè)置生活區(qū)、生產(chǎn)區(qū)、隔離區(qū)、病死豬無害化處理區(qū)等，各區(qū)域之間保持一定的距離，并設(shè)置有效的隔離設(shè)施，如圍墻、防疫溝等。嚴格控制人員、車輛和物資的進出，外來人員和車輛必須經(jīng)過嚴格的消毒和檢疫程序，更換工作服和鞋子后，方可進入豬場。豬場內(nèi)部的車輛應(yīng)專車專用，定期進行清洗和消毒。加強豬舍的衛(wèi)生管理，保持豬舍清潔干燥，定期對豬舍、設(shè)備、用具等進行消毒，可選用過氧乙酸、戊二醛、氫氧化鈉等消毒劑，按照規(guī)定的濃度和方法進行消毒。定期對豬舍進行空欄消毒，在豬只轉(zhuǎn)出后，對豬舍進行徹底的清洗、消毒和空欄，空欄時間不少于7天，以殺滅環(huán)境中的病原體。提高飼養(yǎng)管理水平：提供優(yōu)質(zhì)的飼料和清潔的飲水，滿足豬只生長發(fā)育和生產(chǎn)的營養(yǎng)需求。根據(jù)豬只的不同生長階段和生理狀態(tài)，制定科學(xué)合理的飼料配方，確保飼料中含有足夠的蛋白質(zhì)、能量、維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分。定期檢測飼料和飲水的質(zhì)量，防止飼料發(fā)霉變質(zhì)和飲水受到污染。合理控制豬只的飼養(yǎng)密度，根據(jù)豬只的品種、年齡、體重等因素，確定適宜的飼養(yǎng)密度。一般來說，保育仔豬每欄飼養(yǎng)15-20頭，育肥豬每平方米飼養(yǎng)1-1.2頭。合理的飼養(yǎng)密度可以減少豬只之間的爭斗和應(yīng)激，有利于豬只的健康生長。做好豬舍的通風(fēng)、保溫、防暑降溫等工作，創(chuàng)造良好的養(yǎng)殖環(huán)境。在冬季，要加強豬舍的保溫措施，如增加墊料、封閉門窗、使用取暖設(shè)備等，確保豬舍溫度適宜。在夏季，要做好防暑降溫工作，如安裝水簾、風(fēng)扇、遮陽網(wǎng)等，降低豬舍溫度。保持豬舍通風(fēng)良好，及時排出有害氣體，如氨氣、硫化氫等，保持空氣清新。強化疫病監(jiān)測預(yù)警：建立健全豬瘟監(jiān)測體系，定期對豬群進行抗體檢測和病原檢測。采用ELISA、PCR等檢測方法，定期檢測豬群的豬瘟抗體水平，掌握豬群的免疫狀態(tài)。同時，對病死豬進行剖檢和病原檢測，及時發(fā)現(xiàn)豬瘟疫情的早期跡象。加強對豬瘟疫情的監(jiān)測和分析，及時掌握疫情的發(fā)生、發(fā)展和流行趨勢。與當(dāng)?shù)氐膭游镆卟》揽貦C構(gòu)保持密切聯(lián)系，及時了解周邊地區(qū)的豬瘟疫情動態(tài)，做好疫情預(yù)警工作。一旦發(fā)現(xiàn)豬瘟疫情，要立即采取封鎖、隔離、消毒、撲殺等措施，防止疫情的擴散和蔓延。按照相關(guān)規(guī)定，及時向上級主管部門報告疫情，配合相關(guān)部門進行疫情的調(diào)查和處理。加強人員培訓(xùn)：定期組織豬場管理人員、獸醫(yī)和飼養(yǎng)人員參加豬瘟防控知識和技能培訓(xùn)，提高他們的疫病防控意識和業(yè)務(wù)水平。培訓(xùn)內(nèi)容包括豬瘟的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀、診斷方法、防控措施、免疫程序等。邀請專家進行講座和現(xiàn)場指導(dǎo)，通過實際案例分析，讓工作人員深入了解豬瘟的危害和防控要點。鼓勵工作人員參加相關(guān)的職業(yè)技能培訓(xùn)和考核，提高他們的專業(yè)素質(zhì)和技能水平。例如，組織工作人員參加獸醫(yī)職業(yè)資格考試，獲得相應(yīng)的職業(yè)資格證書，提升他們在疫病防控方面的能力。6.2基于試驗結(jié)果的免疫程序優(yōu)化基于本研究確定的28日齡為廣西規(guī)?；i場仔豬豬瘟最佳首免日齡，結(jié)合實際生產(chǎn)情況，對豬瘟免疫程序進行如下優(yōu)化：商品仔豬免疫程序：28日齡時，頸部肌肉注射豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗，每頭仔豬接種1頭份。此時仔豬的母源抗體水平與疫苗抗原的中和反應(yīng)相對適中，能夠有效激發(fā)仔豬自身免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答，為仔豬提供早期的免疫保護。60日齡進行二免，同樣頸部肌肉注射豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗，每頭仔豬接種1頭份。二免能夠進一步增強仔豬的免疫應(yīng)答，提高抗體水平，使仔豬獲得更持久、更有效的免疫保護。在整個免疫過程中，嚴格按照疫苗說明書的要求進行操作，確保疫苗的使用方法和劑量準確無誤。例如，在疫苗稀釋時，使用專用的稀釋液，按照規(guī)定的比例進行稀釋，充分搖勻后立即使用。注射疫苗時，確保注射器和針頭的清潔衛(wèi)生，每頭豬更換一個針頭，避免交叉感染。同時，在免疫前后，對仔豬進行適當(dāng)?shù)淖o理，減少應(yīng)激反應(yīng)，如在免疫前給仔豬提供充足的飲水和舒適的環(huán)境，免疫后密切觀察仔豬的精神狀態(tài)、采食情況等。種豬免疫程序：種公豬和種母豬每年免疫3次，分別在每年的1月、5月和9月進行。每次免疫均頸部肌肉注射豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗，每頭種豬接種2頭份。種豬作為豬場的核心種群，其免疫狀況直接影響到仔豬的母源抗體水平和豬群的整體健康。通過定期免疫，能夠使種豬保持較高的抗體水平，為仔豬提供充足的母源抗體，增強仔豬對豬瘟病毒的抵抗力。在種豬免疫過程中，同樣要嚴格遵守免疫操作規(guī)程，做好疫苗的儲存、運輸和使用管理。在免疫前，對種豬進行健康檢查，確保種豬無疫病感染。免疫后，密切觀察種豬的反應(yīng)，如出現(xiàn)過敏等異常情況，及時采取相應(yīng)的治療措施。加強免疫：在豬瘟疫情高發(fā)季節(jié)或受到疫情威脅時，對豬群進行加強免疫。加強免疫的時間和劑量可根據(jù)實際情況進行調(diào)整，一般在疫情高發(fā)季節(jié)前1-2周，對豬群進行一次加強免疫，每頭豬接種1-2頭份豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗。加強免疫能夠迅速提高豬群的抗體水平，增強豬群對豬瘟病毒的抵抗力，有效預(yù)防疫情的發(fā)生和傳播。例如，在廣西地區(qū)，每年的春秋兩季是豬瘟疫情的高發(fā)季節(jié)，可在春季2-3月、秋季9-10月對豬群進行加強免疫。在加強免疫時，要密切關(guān)注豬群的健康狀況和抗體水平變化，根據(jù)實際情況及時調(diào)整免疫策略。6.3實施免疫程序的注意事項在實施優(yōu)化后的豬瘟免疫程序過程中，需嚴格注意以下事項，以確保免疫效果的有效性和穩(wěn)定性。疫苗選擇與質(zhì)量把控：應(yīng)優(yōu)先選擇正規(guī)大型獸藥生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗，確保疫苗的抗原含量、純度和穩(wěn)定性符合國家標準。在采購疫苗時，仔細查看疫苗的批準文號、生產(chǎn)批號、生產(chǎn)日期、有效期等信息，確保疫苗來源合法、質(zhì)量可靠。例如，選擇具有良好市場口碑和質(zhì)量信譽的品牌疫苗，避免使用來源不明或質(zhì)量存疑的疫苗。同時，要關(guān)注疫苗的免疫原性和安全性，選擇免疫原性強、免疫效果好、過敏反應(yīng)小的疫苗。對于新上市或不熟悉的疫苗產(chǎn)品，在大規(guī)模使用前，可先進行小范圍的試驗，觀察疫苗的免疫效果和豬只的反應(yīng)，確保其安全性和有效性。疫苗的保存與運輸：嚴格按照疫苗說明書的要求進行保存和運輸，確保疫苗始終處于適宜的溫度環(huán)境中。豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗應(yīng)保存在-15℃以下的低溫環(huán)境中，避免陽光直射和高溫環(huán)境。在運輸過程中，采用專用的冷鏈運輸設(shè)備，如冷藏車、冷藏箱等，配備足量的冰袋或制冷設(shè)備，確保疫苗在運輸過程中的溫度穩(wěn)定在規(guī)定范圍內(nèi)。例如，使用具有溫度監(jiān)控功能的冷鏈運輸設(shè)備，實時監(jiān)測運輸過程中的溫度，若發(fā)現(xiàn)溫度異常，及時采取措施進行調(diào)整。同時，要注意疫苗的包裝完整性，避免疫苗瓶破裂或受到擠壓，影響疫苗質(zhì)量。在疫苗儲存和運輸過程中，建立嚴格的溫度記錄制度，詳細記錄疫苗的儲存溫度、運輸時間、運輸溫度等信息，以便追溯和查詢。免疫操作規(guī)范：免疫接種人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，熟練掌握疫苗的稀釋方法、接種劑量、接種部位和接種方式等操作要點。在疫苗稀釋時，嚴格按照疫苗說明書規(guī)定的比例和方法進行稀釋，使用無菌生理鹽水或?qū)Ｓ孟♂屢海_保稀釋后的疫苗濃度準確。例如，將疫苗從冰箱取出后，應(yīng)先平衡至室溫，再進行稀釋，避免因溫度差異導(dǎo)致疫苗效價降低。在接種時，選擇合適的針頭型號，確保疫苗能夠準確注射到豬只體內(nèi)。一般來說，仔豬可選用9號針頭，中等大小的豬可用12號針頭，體重大的大公豬和老母豬可用16號針頭。注射部位通常選擇在豬只的頸部肌肉，注射時要確保垂直進針，深度適中，避免注射到脂肪層或血管內(nèi)。同時，要做到一頭豬一個針頭，避免交叉感染。免疫接種后，對豬只進行適當(dāng)?shù)淖o理，觀察豬只的反應(yīng)，如出現(xiàn)過敏等異常情況，及時采取相應(yīng)的治療措施。應(yīng)激管理：免疫接種會對豬只產(chǎn)生一定的應(yīng)激反應(yīng)，因此在免疫前后，要采取措施減少應(yīng)激，提高豬只的免疫力。在免疫前，為豬只提供充足的飲水和營養(yǎng)均衡的飼料，保證豬只處于良好的健康狀態(tài)。避免在免疫前進行轉(zhuǎn)群、斷尾、去勢等其他應(yīng)激性操作。在免疫過程中，操作要輕柔、迅速，減少對豬只的刺激。免疫后，保持豬舍環(huán)境安靜、舒適，溫度、濕度適宜，通風(fēng)良好?？稍谪i只的飲水中添加適量的電解多維、維生素C等抗應(yīng)激藥物，緩解免疫應(yīng)激反應(yīng)。例如，在免疫后的3-5天內(nèi)，在飲水中添加0.1%的電解多維，提高豬只的抗應(yīng)激能力。同時，密切觀察豬只的精神狀態(tài)、采食情況、體溫等，若發(fā)現(xiàn)豬只出現(xiàn)發(fā)熱、食欲不振、精神萎靡等異常癥狀，及時進行診斷和治療。免疫效果監(jiān)測：定期對豬群進行豬瘟抗體檢測，監(jiān)測免疫效果。根據(jù)抗體檢測結(jié)果，及時調(diào)整免疫程序和免疫劑量。一般在免疫后2-3周進行首次抗體檢測，以后每隔3-6個月進行一次抗體監(jiān)測。采用ELISA、中和試驗等檢測方法，準確檢測豬群的抗體水平。當(dāng)抗體合格率低于70%或抗體滴度較低時，分析原因，如疫苗質(zhì)量問題、免疫操作不當(dāng)、豬群健康狀況不佳等，并采取相應(yīng)的措施進行改進。例如，若發(fā)現(xiàn)抗體合格率偏低，可增加免疫劑量或縮短免疫間隔時間，進行加強免疫。同時，建立免疫效果監(jiān)測檔案，詳細記錄每次抗體檢測的結(jié)果、檢測時間、豬只的生長階段等信息，以便對免疫效果進行跟蹤和分析。七、結(jié)論與展望7.1研究主要成果總結(jié)本研究通過對廣西規(guī)?；i場豬瘟免疫情況的調(diào)查及首免日齡優(yōu)化試驗，取得了以下主要成果：在免疫情況調(diào)查方面，全面了解了廣西規(guī)模化豬場豬瘟免疫的現(xiàn)狀。豬瘟兔化弱毒疫苗（C株）是使用最廣泛的疫苗，其中細胞源疫苗應(yīng)用比例為52.31%，脾淋源疫苗應(yīng)用比例為32.31%。各豬場免疫程序差異較大，仔豬育肥豬的免疫程序有20-25日齡首免，60-70日齡二免；28-35日齡首免，60-70日齡二免；以及超前免疫程序等。種豬免疫程序也各不相同，包括每年免疫2次、跟胎免疫、每年免疫3次等。不同生長階段豬只的抗體陽性率和抗體滴度存在明顯差異，哺乳仔豬抗體陽性率平均為45.38%，保育仔豬為68.46%，育肥豬為75.38%，種公豬和種母豬分別為80.00%和82.31%。不同地區(qū)和規(guī)模豬場的抗體水平也有所不同，桂東地區(qū)抗體陽性率相對較高，大規(guī)模豬場抗體水平高于小規(guī)模豬場。通過相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，使用豬瘟兔化弱毒脾淋源疫苗的豬場，豬群抗體陽性率和抗體滴度相對較高；采用超前免疫程序的豬場，仔豬抗體陽性率在首免后1周即可達到較高水平。在首免日齡優(yōu)化試驗方面，設(shè)置了14日齡、21日齡、28日齡和35日齡四個首免日齡組。結(jié)果表明，首免前1天，仔豬母源抗體水平隨日齡增加而升高；首免后7天，各首免日齡組仔豬抗體阻斷率均下降，14日齡組下降幅度最大；首免后14天，抗體阻斷率繼續(xù)下降但幅度減小；首免后21天，14日齡組和21日齡組抗體阻斷率開始回升，28日齡組和35日齡組繼續(xù)上升；首免后28天，28日齡組和35日齡組抗體阻斷率增長明顯；二免后14天，各首免日齡組抗體阻斷率均達到較高水平，28日齡組最高。綜合抗體合格率、免疫保護率、生長性能和經(jīng)濟效益等方面評估，28日齡首免組在抗體合格率、免疫保護率、生長性能和經(jīng)濟效益等方面表現(xiàn)出色，確定28日齡為廣西規(guī)模化豬場仔豬豬瘟的最佳首免日齡。基于以上研究成果，提出了加強豬瘟防控的綜合措施，包括加強生物安全管理、提高飼養(yǎng)管理水平、強化疫病監(jiān)測預(yù)警和加強人員培訓(xùn)等。同時，根據(jù)28日齡最佳首免日齡，優(yōu)化了豬瘟免疫程序，商品仔豬28日齡首免，60日齡二免；種豬每年免疫3次，分別在1月、5月和9月進行。在疫情高發(fā)季節(jié)或受到疫情威脅時，對豬群進行加強免疫。實施免疫程序時，需注意疫苗選擇與質(zhì)量把控、疫