“會(huì)發(fā)光”的定點(diǎn)標(biāo)記蛋白：助力體內(nèi)CAR-T從概念驗(yàn)證突破臨床試驗(yàn)研究十年前，CAR-T療法因其在血液腫瘤中的驚艷療效而震動(dòng)醫(yī)療屆，但其漫長(zhǎng)的體外制備周期和百萬元一針的高昂價(jià)格讓患者望而止步。尤其是CAR-T在實(shí)體瘤領(lǐng)域的舉步維艱，更是限制了其可擴(kuò)展性和可及性。為何患者的“救命稻草”遙不可及呢？為克服以上瓶頸，體內(nèi)（invivo）CAR-T技術(shù)快速興起。該技術(shù)通過病毒載體或納米遞送系統(tǒng)將CAR基因直接導(dǎo)入患者T細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)原位編程、擴(kuò)增和功能化，省去體外加工步驟，患者可即時(shí)接受治療。將天價(jià)打下來，體內(nèi)CAR-T的費(fèi)用預(yù)估將是傳統(tǒng)的1/10，在普惠性方面帶來根本性改善，且免除化療預(yù)處理，也會(huì)讓危重患者受益?，F(xiàn)在，體內(nèi)CAR-T技術(shù)已從概念驗(yàn)證走向臨床試驗(yàn)。CAR-T細(xì)胞的動(dòng)態(tài)分布、擴(kuò)增效率、功能持久性、藥代動(dòng)力學(xué)等精準(zhǔn)檢測(cè)，直接關(guān)系劑量?jī)?yōu)化、安全性評(píng)估及療效預(yù)測(cè)。義翹神州創(chuàng)新性推出“會(huì)發(fā)光”定點(diǎn)標(biāo)記重組蛋白，為體內(nèi)CAR-T研發(fā)提供高效分析工具。一、Invivo

CAR-T：“即用現(xiàn)貨型”范式轉(zhuǎn)換體內(nèi)（Invivo）CAR-T細(xì)胞療法的核心是直接向患者體內(nèi)注射攜帶CAR基因的載體，并通過基因編輯優(yōu)化和精準(zhǔn)的靶向策略，提升治療特異性及降低毒性。體內(nèi)CAR-T無需抽血和體外培養(yǎng)，經(jīng)過靜脈注射，病毒或脂質(zhì)納米顆粒載體如同“生物導(dǎo)彈”在體內(nèi)精準(zhǔn)識(shí)別并改造T細(xì)胞或其它免疫細(xì)胞，使其原位轉(zhuǎn)化為能夠殺傷腫瘤細(xì)胞的CAR-T細(xì)胞，具有“即用現(xiàn)貨型”的便捷性和可擴(kuò)展性。體內(nèi)CAR-T技術(shù)流程示意圖（源自文獻(xiàn)：doi:10.1038/s41392-025-02269-w）體內(nèi)CAR-T技術(shù)將傳統(tǒng)的體外CAR-T“精英療法”轉(zhuǎn)變?yōu)椤捌栈莘桨浮?。以患者自身為“?xì)胞工廠”，流程簡(jiǎn)單，1-3天即可完成治療，傳統(tǒng)CAR-T需要7-22天。載體可批量生產(chǎn)、凍存儲(chǔ)存，具有通用型（Off-the-Shelf）屬性，預(yù)計(jì)規(guī)模化生產(chǎn)能將成本降低50-90%，未來有望降至萬元。體內(nèi)CAR-T技術(shù)無需健康T細(xì)胞，無需清淋預(yù)處理，CRS風(fēng)險(xiǎn)顯著降低，適用人群更廣。二、Invivo

CAR-T：從實(shí)驗(yàn)室到臨床研究目前，全球尚無體內(nèi)（Invivo）CAR-T產(chǎn)品獲批上市，該技術(shù)正處于概念驗(yàn)證到早期臨床開發(fā)的關(guān)鍵期。Invivo

CAR-T于2017年首次完成概念性驗(yàn)證，截止2025年底，全球范圍已超過30項(xiàng)體內(nèi)CAR-T臨床試驗(yàn)在進(jìn)行，且已發(fā)表首批臨床數(shù)據(jù)，標(biāo)志著Invivo

CAR-T技術(shù)的臨床轉(zhuǎn)化進(jìn)入重要的里程牌。1，血液系統(tǒng)惡性腫瘤2025年7月2日，Lancet發(fā)表了首個(gè)采用invivo

CAR-T細(xì)胞治療多發(fā)性骨髓瘤的臨床數(shù)據(jù)。ESO-T01由EsoBiotec（阿斯利康子公司）和普瑞金合作開發(fā)，利用具備免疫屏蔽功能的慢病毒載體，搭載靶向BCMA的人源化單域抗體。數(shù)據(jù)顯示針對(duì)復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤（RRMM），4例患者客觀緩解率（ORR）達(dá)100%，觀察到可控的細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS），未檢測(cè)到神經(jīng)毒性（ICANS），初步驗(yàn)證了安全性。Interius的靶向CD20的INT2104項(xiàng)目和Umoja的靶向CD19的UB-VV111，已經(jīng)進(jìn)入臨床Ⅰ期試驗(yàn)，適應(yīng)癥分別為B細(xì)胞惡性腫瘤和血液腫瘤。2，實(shí)體瘤體內(nèi)CAR-T是突破實(shí)體瘤微環(huán)境屏障的全新嘗試。通過精準(zhǔn)局部給藥，如卵巢癌腹腔給藥或膠質(zhì)母細(xì)胞瘤腦室內(nèi)給藥，使腫瘤部位的CAR-T細(xì)胞富集，減少全身毒性。聯(lián)合生物材料或納米載體，共遞送IL-12、TGF-β等免疫調(diào)節(jié)分子，逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境。目前已在胃癌、黑色素瘤、腎癌等多種實(shí)體瘤中進(jìn)行探索。CREATEMedicines開發(fā)的MT-302利用包裹在脂質(zhì)納米顆粒（LNP）中的mRNA，在體內(nèi)重編程循環(huán)免疫細(xì)胞，使其表達(dá)靶向TROP2的CAR，在實(shí)體瘤模型中顯示出向腫瘤組織浸潤及激活干擾素信號(hào)的能力，但2025年11月7日公布的臨床試驗(yàn)結(jié)果不佳。3，自身免疫性疾病Invivo

CAR-T真正的爆發(fā)點(diǎn)也許是自身免疫性疾病。傳統(tǒng)CAR-T已在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）、重癥肌無力（MG）、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）、多發(fā)性硬化（MS）等自免疾病中表現(xiàn)出良好效果，但由于流程復(fù)雜、成本高昂，100萬元的治療費(fèi)用讓患者寧可忍受疾病的痛苦。Invivo

CAR-T完美的規(guī)避了這個(gè)問題，既保留了CAR-T的治療優(yōu)勢(shì)，同時(shí)又大幅降低治療負(fù)擔(dān)和安全風(fēng)險(xiǎn)。AbbVie、Sanofi等大廠率先將Invivo

CAR-T重點(diǎn)布局在自免而非腫瘤，也是對(duì)這一邏輯的認(rèn)可。目前，Invivo

CAR-T臨床研究主要針對(duì)B細(xì)胞介導(dǎo)的自免疾病，如用CD19CAR-T或BCMACAR-T治療SLE、MG等。2025年9月18日NEJM（新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志）在線發(fā)表全球首次基于脂質(zhì)納米顆粒（LNP）體內(nèi)CAR-T治療SLE的臨床研究結(jié)果，5名患者全部有效，或終結(jié)終身服藥。研究發(fā)現(xiàn)CAR-T細(xì)胞在6小時(shí)達(dá)到峰值，2-3天后“功成身退”（回歸基線），90%以上的CAR都表達(dá)在目標(biāo)CD8+T細(xì)胞上。副作用可控，未出現(xiàn)3-4級(jí)細(xì)胞因子釋放綜合征和神經(jīng)毒性，沒有肝損傷，總體比傳統(tǒng)CAR-T安全。Capstan、Immorna、ShenzenMagicRNA等多家公司已啟動(dòng)針對(duì)自身免疫病的臨床試驗(yàn)。三、Invivo

CAR-T：關(guān)鍵考量CAR-T療法已在癌癥和自免疾病的治療中展現(xiàn)療效。盡管前景廣闊，Invivo

CAR-T在精準(zhǔn)靶向、安全控制及實(shí)體瘤微環(huán)境適應(yīng)性方面仍面臨嚴(yán)峻挑戰(zhàn)。靶向特異性是基礎(chǔ)，需通過抗CD3或抗TCR配體等受體介導(dǎo)策略，讓遞送系統(tǒng)只轉(zhuǎn)導(dǎo)所需的免疫細(xì)胞亞群。遞送載體的選擇和設(shè)計(jì)要結(jié)合治療場(chǎng)景，考慮有效載荷類型（如mRNA、DNA、Cas9）和生物分布。轉(zhuǎn)基因設(shè)計(jì)需搭配免疫細(xì)胞特異性啟動(dòng)子和優(yōu)化的CAR結(jié)構(gòu)，還要通過MHC-I敲除、CD47過表達(dá)等策略降低免疫原性，避免載體被免疫系統(tǒng)識(shí)別。安全性監(jiān)測(cè)要重點(diǎn)關(guān)注細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）、免疫效應(yīng)細(xì)胞相關(guān)神經(jīng)毒性綜合征（ICANS）和插入突變等風(fēng)險(xiǎn)。了解CAR-T細(xì)胞的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)，包括擴(kuò)增、組織分布和持久性，能為給藥劑量和治療窗口提供依據(jù)。嚴(yán)格的監(jiān)管和轉(zhuǎn)化規(guī)劃，包括經(jīng)過驗(yàn)證的臨床前模型、質(zhì)量控制和臨床試驗(yàn)終點(diǎn)，也至關(guān)重要。體內(nèi)CAR-T在臨床應(yīng)用中的關(guān)鍵考量（源自文獻(xiàn)：doi:10.1016/j.xcrm.2025.102337）體內(nèi)CAR-T通過革新遞送系統(tǒng)與CAR設(shè)計(jì)，克服了傳統(tǒng)體外CAR-T的核心瓶頸，在血液腫瘤、實(shí)體瘤、自身免疫性疾病和感染性疾病等多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大應(yīng)用潛力。未來，體內(nèi)CAR-T有望實(shí)現(xiàn)靶向效率翻倍、成本大幅降低。同時(shí)體內(nèi)CAR-T技術(shù)的臨床開發(fā)面臨著獨(dú)特的挑戰(zhàn)。細(xì)胞的動(dòng)態(tài)分布、擴(kuò)增動(dòng)力學(xué)、功能持久性及脫靶效應(yīng)的精確監(jiān)測(cè)，直接決定劑量?jī)?yōu)化、安全性評(píng)估與療效預(yù)測(cè)。傳統(tǒng)檢測(cè)方法受限于靈敏度不足、背景信號(hào)干擾及標(biāo)準(zhǔn)化困難，難以滿足從臨床前研究到商業(yè)化質(zhì)控（CMC）的嚴(yán)苛要求。四、定點(diǎn)標(biāo)記蛋白賦能CAR-T精準(zhǔn)分析義翹神州深耕藥物靶點(diǎn)試劑開發(fā)18年，依托近萬種重組蛋白產(chǎn)品庫與技術(shù)積累，創(chuàng)新性推出“會(huì)發(fā)光”的定點(diǎn)標(biāo)記重組蛋白，為體內(nèi)CAR-T研發(fā)提供高分辨分析工具：·

高活性：在特定位置標(biāo)記，遠(yuǎn)離活性功能區(qū)的小標(biāo)簽上標(biāo)記，不干擾蛋白活性。·

高特異性：標(biāo)記僅發(fā)生于小標(biāo)簽上，無其它背景。·

高穩(wěn)定性：標(biāo)記數(shù)量確定，不影響蛋白結(jié)構(gòu)，保持蛋白天然構(gòu)象?！?/p>

高一致性：批內(nèi)高度均質(zhì)性，批間高度一致性。定點(diǎn)標(biāo)記蛋白經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)可特異性識(shí)別相應(yīng)CAR細(xì)胞，滿足不同研究需求，如細(xì)胞藥物質(zhì)控和檢測(cè)、抗體篩選、蛋白互作研究等，顯著提升檢測(cè)的靈敏度、特異性與準(zhǔn)確性，已成為細(xì)胞治療制品質(zhì)量控制與特性分析的核心工具，為加速細(xì)胞治療藥物的臨床轉(zhuǎn)化與產(chǎn)業(yè)化進(jìn)程提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。免責(zé)聲明：義翹神州內(nèi)容團(tuán)隊(duì)僅是分享和解讀公開的研究論文及其發(fā)現(xiàn)，專注于介紹全球生物醫(yī)藥研究新進(jìn)展。本文僅作信息交流用，文中觀點(diǎn)不代表義翹神州立場(chǎng)。隨著對(duì)疾病機(jī)制研究的深入，新的實(shí)驗(yàn)結(jié)果或結(jié)論可能會(huì)修改或推翻文中的描述，還請(qǐng)大家理解。本文不屬于治療方案推薦，如需獲得治療方案指導(dǎo)，請(qǐng)前往正規(guī)醫(yī)院就診。【參考文獻(xiàn)】1.Zugasti,I.etal.CAR-Tcelltherapyforcancer:currentchallengesandfuturedirections.SigTransductTargetTher,2025./10.1038/s41392-025-02269-w2.

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