樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷研究演講人2026-01-0804/樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑的設(shè)計(jì)與優(yōu)化03/TIGIT抑制劑的機(jī)制與遞送挑戰(zhàn)02/樹(shù)枝狀大分子的特性與遞送優(yōu)勢(shì)01/引言：腫瘤免疫治療的新挑戰(zhàn)與遞送系統(tǒng)的破局價(jià)值06/臨床轉(zhuǎn)化前景與未來(lái)方向05/預(yù)臨床研究進(jìn)展與挑戰(zhàn)07/總結(jié)與展望目錄樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷研究01引言：腫瘤免疫治療的新挑戰(zhàn)與遞送系統(tǒng)的破局價(jià)值ONE引言：腫瘤免疫治療的新挑戰(zhàn)與遞送系統(tǒng)的破局價(jià)值腫瘤免疫治療作為繼手術(shù)、放療、化療后的第四大治療模式，已徹底改變多種惡性腫瘤的治療格局。以PD-1/PD-L1抑制劑為代表的免疫檢查點(diǎn)阻斷（ImmuneCheckpointBlockade,ICB）療法通過(guò)解除腫瘤微環(huán)境（TumorMicroenvironment,TME）中的免疫抑制，重新激活T細(xì)胞抗腫瘤活性，在黑色素瘤、非小細(xì)胞肺癌等多種腫瘤中取得顯著突破。然而，臨床數(shù)據(jù)顯示，僅約20%-30%的患者能從單一PD-1/PD-L1抑制劑中獲益，其主要耐藥機(jī)制包括：T細(xì)胞耗竭、免疫抑制性細(xì)胞浸潤(rùn)（如調(diào)節(jié)性T細(xì)胞、髓源性抑制細(xì)胞）、以及TIGIT（TcellimmunoreceptorwithIgandITIMdomains）等新型免疫檢查點(diǎn)的異常高表達(dá)。引言：腫瘤免疫治療的新挑戰(zhàn)與遞送系統(tǒng)的破局價(jià)值TIGIT作為近年來(lái)的免疫治療新靶點(diǎn)，主要表達(dá)于活化的T細(xì)胞、NK細(xì)胞及調(diào)節(jié)性T細(xì)胞表面，通過(guò)與CD155（PVR）結(jié)合，傳遞抑制性信號(hào)，抑制T細(xì)胞活化及NK細(xì)胞細(xì)胞毒性，同時(shí)促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞增殖，形成免疫抑制微環(huán)境。研究表明，TIGIT在多種腫瘤（如肺癌、結(jié)直腸癌、黑色素瘤）中高表達(dá)，且與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)。靶向TIGIT的單抗（如Tiragolumab、Domvanalimab）在臨床前和早期臨床中顯示出與PD-1抑制劑聯(lián)用的協(xié)同效應(yīng)，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨遞送效率低、腫瘤蓄積不足、系統(tǒng)性毒性（如免疫相關(guān)adverseevents,irAEs）等挑戰(zhàn)。引言：腫瘤免疫治療的新挑戰(zhàn)與遞送系統(tǒng)的破局價(jià)值傳統(tǒng)遞送系統(tǒng)（如脂質(zhì)體、高分子納米粒、病毒載體）在遞送免疫檢查點(diǎn)抑制劑時(shí)存在諸多局限：包封率低、藥物突釋導(dǎo)致全身毒性、缺乏靶向性導(dǎo)致腫瘤部位蓄積不足、以及易被單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)（MPS）清除等。樹(shù)枝狀大分子（Dendrimer）作為一類(lèi)高度支化、結(jié)構(gòu)精確、表面功能基團(tuán)可調(diào)控的高分子納米材料，憑借其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)優(yōu)勢(shì)（如納米級(jí)尺寸、可控的表面修飾、良好的生物相容性、以及易于載藥的功能基團(tuán)），為解決TIGIT抑制劑的遞送瓶頸提供了全新思路。本文旨在系統(tǒng)闡述樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的研究進(jìn)展，從樹(shù)枝狀大分子的特性與遞送優(yōu)勢(shì)、TIGIT抑制劑的遞送挑戰(zhàn)、樹(shù)枝狀大分子-TIGIT抑制劑的構(gòu)建與優(yōu)化、聯(lián)合PD-1阻斷的協(xié)同機(jī)制、預(yù)臨床研究進(jìn)展，到臨床轉(zhuǎn)化前景與挑戰(zhàn)，為腫瘤免疫治療的遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)提供理論依據(jù)和實(shí)踐參考。02樹(shù)枝狀大分子的特性與遞送優(yōu)勢(shì)ONE樹(shù)枝狀大分子的結(jié)構(gòu)與理化特性樹(shù)枝狀大分子是由核心分子出發(fā)，通過(guò)逐步重復(fù)的支化反應(yīng)合成的一類(lèi)高度有序、三維立體結(jié)構(gòu)的大分子，其典型特征包括：1.精確的分子結(jié)構(gòu)與單分散性：與傳統(tǒng)高分子聚合物（如聚乳酸-羥基乙酸共聚物，PLGA）的多分散性不同，樹(shù)枝狀大分子通過(guò)“發(fā)散法”或“收斂法”合成，每一代（Generation,G）的分子量、尺寸、表面官能團(tuán)數(shù)量均高度可控，例如，第4代（G4）聚酰胺-胺（PAMAM）樹(shù)枝狀大分子的分子量約為14,215Da，表面有64個(gè)氨基官能團(tuán)，單分散性指數(shù)（PDI）小于0.1。2.納米級(jí)尺寸與高支化度：樹(shù)枝狀大分子的尺寸通常在1-10nm范圍內(nèi)，可滿足EPR效應(yīng)（EnhancedPermeabilityandRetentioneffect）的要求，促進(jìn)其在腫瘤組織的被動(dòng)靶向蓄積；同時(shí)，其三維球狀結(jié)構(gòu)具有內(nèi)部空腔和表面功能基團(tuán)，可同時(shí)負(fù)載多種藥物（如TIGIT抑制劑與PD-1抑制劑）。樹(shù)枝狀大分子的結(jié)構(gòu)與理化特性3.豐富的表面官能團(tuán)：樹(shù)枝狀大分子的表面可修飾氨基、羧基、羥基等官能團(tuán)，通過(guò)化學(xué)偶聯(lián)可引入靶向配體（如抗體、肽段、葉酸）、親水性聚合物（如聚乙二醇，PEG）以延長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間、以及刺激響應(yīng)性基團(tuán)（如pH敏感的腙鍵、酶敏感的肽鍵）以實(shí)現(xiàn)藥物控釋。樹(shù)枝狀大分子作為藥物遞送系統(tǒng)的核心優(yōu)勢(shì)相較于傳統(tǒng)遞送系統(tǒng)，樹(shù)枝狀大分子在遞送免疫檢查點(diǎn)抑制劑時(shí)展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)：1.高效載藥與藥物保護(hù)：樹(shù)枝狀大分子的內(nèi)部空腔可通過(guò)疏水相互作用、氫鍵或靜電作用負(fù)載藥物（如小分子TIGIT抑制劑），表面官能團(tuán)可通過(guò)共價(jià)鍵偶聯(lián)大分子藥物（如TIGIT單抗），避免藥物在血液循環(huán)中被降解或清除。例如，研究顯示，PAMAM樹(shù)枝狀大分子對(duì)小分子TIGIT抑制劑（如BMS-986207）的包封率可達(dá)85%以上，顯著高于脂質(zhì)體（約60%）和PLGA納米粒（約50%）。2.靶向遞送與腫瘤蓄積：通過(guò)表面修飾靶向配體（如抗CD155抗體、腫瘤特異性肽），樹(shù)枝狀大分子可主動(dòng)靶向腫瘤細(xì)胞或腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs），提高腫瘤部位的藥物濃度。例如，CD155在多種腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)，而正常組織低表達(dá)，因此抗CD155修飾的樹(shù)枝狀大分子可特異性結(jié)合腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)TIGIT抑制劑的內(nèi)吞和細(xì)胞內(nèi)釋放。樹(shù)枝狀大分子作為藥物遞送系統(tǒng)的核心優(yōu)勢(shì)3.可控釋放與減少系統(tǒng)性毒性：通過(guò)引入刺激響應(yīng)性鍵（如腫瘤微環(huán)境中的酸性pH敏感的腙鍵、基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）敏感的肽鍵），可實(shí)現(xiàn)藥物的“按需釋放”，即在腫瘤部位特異性釋放藥物，而在正常組織中保持穩(wěn)定，從而降低irAEs等系統(tǒng)性毒性。例如，pH敏感的PAMAM-樹(shù)枝狀大分子在pH6.5（腫瘤微環(huán)境）下的藥物釋放速率是pH7.4（正常血液環(huán)境）的5倍以上。4.免疫調(diào)節(jié)功能：部分樹(shù)枝狀大分子（如PAMAM）本身具有免疫調(diào)節(jié)活性，可通過(guò)激活樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）促進(jìn)T細(xì)胞活化，或通過(guò)調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化（M1型）改善免疫微環(huán)境，與免疫檢查點(diǎn)抑制劑產(chǎn)生協(xié)同作用。例如，研究顯示，未修飾的PAMAM樹(shù)枝狀大分子可促進(jìn)DCs表面MHC-II和CD86的表達(dá)，增強(qiáng)抗原提呈能力，從而增強(qiáng)PD-1抑制劑的療效。03TIGIT抑制劑的機(jī)制與遞送挑戰(zhàn)ONETIGIT的生物學(xué)功能與抑制劑作用機(jī)制TIGIT是Ig超家族成員，胞外段含有IgV樣結(jié)構(gòu)域，胞內(nèi)段含有免疫受體酪氨酸抑制基序（ITIM）和免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)換基序（ITSM）。其配體包括CD155（PVR）、CD112（Nectin-2）等，廣泛表達(dá)于腫瘤細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞（APCs）及基質(zhì)細(xì)胞。TIGIT通過(guò)以下機(jī)制發(fā)揮免疫抑制作用：1.抑制T細(xì)胞活化：TIGIT與CD155結(jié)合后，通過(guò)ITIM/ITSM招募磷酸酶（如SHP-1/SHP-2），抑制TCR信號(hào)通路下游的ZAP70、LAT等分子的磷酸化，抑制T細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子（如IFN-γ、IL-2）分泌。2.抑制NK細(xì)胞功能：TIGIT與CD155結(jié)合后，抑制NK細(xì)胞表面CD16分子的表達(dá)，降低其抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性（ADCC）。3.促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Tregs）增殖：TIGIT高表達(dá)于Tregs，通過(guò)與CTIGIT的生物學(xué)功能與抑制劑作用機(jī)制D155結(jié)合增強(qiáng)Tregs的抑制功能，進(jìn)一步抑制效應(yīng)T細(xì)胞活性。目前，TIGIT抑制劑主要包括三類(lèi)：-抗TIGIT單克隆抗體：如Tiragolumab（羅氏）、Domvanalimab（阿斯利康），通過(guò)阻斷TIGIT與CD155的結(jié)合，解除T細(xì)胞和NK細(xì)胞的抑制。-TIGIT-Fc融合蛋白：如BMS-986207（百時(shí)美施貴寶），通過(guò)Fc段競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合CD155，阻斷TIGIT-CD155相互作用。-小分子TIGIT抑制劑：如LY3410718（禮來(lái)），通過(guò)抑制TIGIT的ITIM磷酸化，阻斷下游抑制信號(hào)。TIGIT抑制劑的遞送挑戰(zhàn)盡管TIGIT抑制劑在臨床前研究中顯示出良好的抗腫瘤活性，但其臨床轉(zhuǎn)化仍面臨以下遞送挑戰(zhàn)：1.分子大小差異導(dǎo)致的遞送效率差異：抗TIGIT單抗（約150kDa）屬于大分子藥物，難以穿透腫瘤細(xì)胞膜，主要作用于細(xì)胞外TIGIT；而小分子TIGIT抑制劑（約500Da）可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，但易被腎臟清除，半衰期短（約2-6小時(shí)）。不同類(lèi)型的抑制劑需要不同的遞送策略。2.腫瘤微環(huán)境的免疫抑制屏障：TME中異常的血管結(jié)構(gòu)（如血管內(nèi)皮細(xì)胞緊密連接）、高間質(zhì)壓力（IFP）以及細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）的沉積（如膠原纖維），阻礙藥物向腫瘤深部滲透，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部藥物濃度不均。TIGIT抑制劑的遞送挑戰(zhàn)3.系統(tǒng)性毒性：抗TIGIT單抗的irAEs（如皮疹、結(jié)腸炎、肺炎）發(fā)生率約為15%-30%，與小分子抑制劑相比，其更易引發(fā)全身性免疫激活。此外，游離抗體可與血液中的CD155結(jié)合，導(dǎo)致“靶點(diǎn)介導(dǎo)的藥物清除”（TMDD），降低藥物在腫瘤部位的蓄積。4.聯(lián)合給藥的遞送協(xié)同性：TIGIT抑制劑與PD-1抑制劑聯(lián)用時(shí)，需實(shí)現(xiàn)兩種藥物在腫瘤部位的同步遞送和時(shí)空協(xié)同，但傳統(tǒng)聯(lián)合給藥（靜脈注射兩種游離藥物）難以滿足這一需求，可能導(dǎo)致藥物相互作用或療效抵消。04樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑的設(shè)計(jì)與優(yōu)化ONE樹(shù)枝狀大分子的選擇與修飾針對(duì)TIGIT抑制劑的類(lèi)型和遞送挑戰(zhàn)，樹(shù)枝狀大分子的選擇與修飾需遵循以下原則：1.樹(shù)枝狀大分子的類(lèi)型選擇：-PAMAM樹(shù)枝狀大分子：最常用的樹(shù)枝狀大分子，表面氨基易于功能化，可通過(guò)乙?；{(diào)節(jié)表面電荷（如乙酰化PAMAM降低正電荷，減少血液蛋白吸附），或通過(guò)PEG化延長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間。-聚酯樹(shù)枝狀大分子：如聚乳酸（PLA）樹(shù)枝狀大分子，具有良好的生物可降解性，降解產(chǎn)物為乳酸，可被機(jī)體代謝，長(zhǎng)期毒性低。-肽樹(shù)枝狀大分子：以氨基酸為構(gòu)建單元，具有良好的生物相容性和靶向性，可模擬天然蛋白的結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)與靶點(diǎn)的結(jié)合能力。樹(shù)枝狀大分子的選擇與修飾2.表面修飾策略：-PEG化修飾：通過(guò)枝接PEG（分子量2,000-5,000Da），可減少樹(shù)枝狀大分子與MPS的相互作用，延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間（如PEG化PAMAM的半衰期可從2小時(shí)延長(zhǎng)至24小時(shí)以上），提高EPR效應(yīng)介導(dǎo)的腫瘤蓄積。-靶向配體修飾：根據(jù)TIGIT抑制劑的靶點(diǎn)（T細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞），選擇不同的靶向配體：-靶向腫瘤細(xì)胞：抗CD155抗體、CD155特異性肽（如PVR01）、葉酸（高表達(dá)于卵巢癌、肺癌等）等，通過(guò)樹(shù)枝狀大分子的表面羧基或氨基偶聯(lián)，實(shí)現(xiàn)主動(dòng)靶向。-靶向T細(xì)胞：抗CD3抗體、T細(xì)胞特異性肽（如識(shí)別TCR的肽段），促進(jìn)TIGIT抑制劑在T細(xì)胞表面的富集，增強(qiáng)抑制作用。樹(shù)枝狀大分子的選擇與修飾-刺激響應(yīng)性修飾：引入pH敏感基團(tuán)（如腙鍵、縮酮）、酶敏感基團(tuán)（如MMPs敏感的GPLGVRG肽、組織蛋白酶B敏感的Val-Cit鍵），或還原敏感基團(tuán)（如二硫鍵），實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤微環(huán)境（酸性pH、高M(jìn)MPs表達(dá)、高谷胱甘肽濃度）中的特異性釋放。TIGIT抑制劑在樹(shù)枝狀大分子上的負(fù)載方式根據(jù)TIGIT抑制劑的類(lèi)型（單抗、小分子），負(fù)載方式可分為以下兩類(lèi)：1.物理包埋：適用于小分子TIGIT抑制劑，通過(guò)疏水相互作用、氫鍵或范德華力將藥物包埋于樹(shù)枝狀大分子的內(nèi)部空腔或表面。例如，將小分子TIGIT抑制劑BMS-986207與PAMAM樹(shù)枝狀大分子（G4）混合，通過(guò)透析法包埋，包封率可達(dá)80%以上，載藥量約為15%（w/w）。2.共價(jià)偶聯(lián)：適用于大分子TIGIT抑制劑（如單抗），通過(guò)樹(shù)枝狀大分子的表面官能團(tuán)（氨基、羧基）與抗體的氨基或羧基形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵（如酰胺鍵、酯鍵）。例如，采用EDC/NHS化學(xué)法，將抗TIGIT單抗（Tiragolumab）的羧基與PEG化PAMAM的氨基偶聯(lián)，偶聯(lián)效率約為70%，每個(gè)樹(shù)枝狀大分子可偶聯(lián)2-3個(gè)抗體分子。遞送系統(tǒng)的優(yōu)化策略為提高樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑的效率，需從以下方面進(jìn)行優(yōu)化：1.尺寸調(diào)控：樹(shù)枝狀大分子的尺寸直接影響其腫瘤蓄積和細(xì)胞攝取。研究表明，尺寸在50-200nm的納米?？勺罴牙肊PR效應(yīng)，因此可通過(guò)控制樹(shù)枝狀大分子的代數(shù)（如G4PAMAM尺寸約4.5nm，G6約6.7nm）或組裝成larger復(fù)合納米粒（如樹(shù)枝狀大分子-脂質(zhì)復(fù)合體）來(lái)優(yōu)化尺寸。2.電荷調(diào)控：樹(shù)枝狀大分子的表面電荷影響其與細(xì)胞膜的相互作用和血液穩(wěn)定性。正電荷（如未修飾的PAMAM）易與帶負(fù)電的細(xì)胞膜結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞攝取，但易被MPS清除；負(fù)電荷（如羧基修飾PAMAM）可減少血液蛋白吸附，但細(xì)胞攝取效率降低。因此，可通過(guò)調(diào)節(jié)氨基與羧基的比例（如氨基/羧基=1:1）實(shí)現(xiàn)電荷neutrality，平衡血液循環(huán)時(shí)間和細(xì)胞攝取。遞送系統(tǒng)的優(yōu)化策略3.雙載藥系統(tǒng)：為實(shí)現(xiàn)TIGIT抑制劑與PD-1抑制劑的聯(lián)合遞送，可構(gòu)建樹(shù)枝狀大分子的雙載藥系統(tǒng)：-內(nèi)部空腔負(fù)載小分子TIGIT抑制劑：如BMS-986207，-表面偶聯(lián)抗TIGIT單抗：如Tiragolumab，或通過(guò)不同的響應(yīng)性鍵（如pH敏感鍵和酶敏感鍵）實(shí)現(xiàn)兩種藥物的順序釋放。例如，研究顯示，pH敏感的PAMAM樹(shù)枝狀大分子先在腫瘤微環(huán)境中釋放小分子TIGIT抑制劑（抑制細(xì)胞內(nèi)TIGIT信號(hào)），隨后在細(xì)胞內(nèi)酶（如組織蛋白酶B）的作用下釋放抗TIGIT單抗（阻斷細(xì)胞外TIGIT-CD155相互作用），實(shí)現(xiàn)時(shí)空協(xié)同。五、樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的協(xié)同機(jī)制TIGIT與PD-1的互補(bǔ)性免疫抑制機(jī)制TIGIT與PD-1分別作用于T細(xì)胞活化的不同階段，具有互補(bǔ)的免疫抑制機(jī)制：-TIGIT抑制初始T細(xì)胞活化：TIGIT在初始T細(xì)胞表面低表達(dá)，但當(dāng)T細(xì)胞通過(guò)TCR識(shí)別腫瘤抗原后，TIGIT表達(dá)上調(diào)，通過(guò)與CD155結(jié)合抑制初始T細(xì)胞的活化，阻止其分化為效應(yīng)T細(xì)胞。-PD-1抑制耗竭T細(xì)胞功能：PD-1在長(zhǎng)期暴露于抗原的耗竭T細(xì)胞表面高表達(dá)，通過(guò)與PD-L1結(jié)合抑制T細(xì)胞的增殖、細(xì)胞因子分泌和細(xì)胞毒性，導(dǎo)致T細(xì)胞功能喪失。因此，同時(shí)阻斷TIGIT和PD-1可從“初始T細(xì)胞活化”和“耗竭T細(xì)胞逆轉(zhuǎn)”兩個(gè)環(huán)節(jié)解除免疫抑制，產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)。臨床前研究顯示，TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1抑制劑的抗腫瘤活性顯著優(yōu)于單藥，例如，在小鼠MC38結(jié)腸癌模型中，聯(lián)合給藥組的腫瘤抑制率（TIR）為85%，而TIGIT單抗組為50%，PD-1單抗組為45%。樹(shù)枝狀大分子介導(dǎo)的協(xié)同遞送機(jī)制樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的協(xié)同作用，不僅源于兩種藥物的機(jī)制互補(bǔ)，更得益于遞送系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的“時(shí)空協(xié)同”和“劑量?jī)?yōu)化”：1.腫瘤部位同步蓄積：通過(guò)被動(dòng)靶向（EPR效應(yīng)）和主動(dòng)靶向（配體修飾），樹(shù)枝狀大分子可將TIGIT抑制劑和PD-1抑制劑共同遞送至腫瘤部位，提高局部藥物濃度。例如，研究顯示，樹(shù)枝狀大分子遞送的TIGIT抑制劑和PD-1抑制劑在腫瘤組織的濃度分別是游離藥物的5倍和3倍，且兩種藥物的濃度比值與最佳協(xié)同比例（1:1）一致。2.細(xì)胞內(nèi)順序釋放：通過(guò)設(shè)計(jì)不同的響應(yīng)性鍵，可實(shí)現(xiàn)兩種藥物的順序釋放。例如，先釋放小分子TIGIT抑制劑（抑制細(xì)胞內(nèi)TIGIT信號(hào)），再釋放PD-1抑制劑（阻斷細(xì)胞外PD-1-PD-L1相互作用），或先釋放PD-1抑制劑（逆轉(zhuǎn)耗竭T細(xì)胞功能），再釋放TIGIT抑制劑（維持T細(xì)胞活化狀態(tài)）。這種順序釋放可最大化協(xié)同效應(yīng)，避免藥物相互作用。樹(shù)枝狀大分子介導(dǎo)的協(xié)同遞送機(jī)制01-激活樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）：通過(guò)表面修飾的TLR激動(dòng)劑（如CpGODN），促進(jìn)DCs成熟，增強(qiáng)抗原提呈能力，從而增強(qiáng)PD-1抑制劑的療效。02-調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞極化：通過(guò)負(fù)載IL-12或抗IL-10抗體，促進(jìn)巨噬細(xì)胞從M2型（免疫抑制型）向M1型（免疫激活型）轉(zhuǎn)化，減少Tregs浸潤(rùn)。03-降低免疫抑制分子表達(dá)：通過(guò)siRNA負(fù)載樹(shù)枝狀大分子，敲低TGF-β或IDO的表達(dá)，解除TME中的免疫抑制。3.免疫微環(huán)境的重塑：樹(shù)枝狀大分子本身具有免疫調(diào)節(jié)功能，可改善TME的免疫抑制狀態(tài)：協(xié)同效應(yīng)的體內(nèi)外驗(yàn)證1.體外實(shí)驗(yàn)：在T細(xì)胞-T細(xì)胞共培養(yǎng)體系中，樹(shù)枝狀大分子遞送的TIGIT抑制劑（抗TIGIT單抗）和PD-1抑制劑（PD-1單抗）聯(lián)合處理可顯著提高T細(xì)胞的增殖能力（較單藥提高2倍）和IFN-γ分泌水平（較單藥提高3倍）；在NK細(xì)胞-腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系中，聯(lián)合處理可增強(qiáng)NK細(xì)胞的ADCC活性（腫瘤細(xì)胞殺傷率從40%提高到75%）。2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)：在B16F10黑色素瘤小鼠模型中，樹(shù)枝狀大分子遞送的TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1抑制劑治療組的小鼠生存期延長(zhǎng)至60天，而單藥組分別為30天（TIGIT抑制劑）和35天（PD-1抑制劑），且腫瘤組織中CD8+T細(xì)胞浸潤(rùn)比例顯著提高（從10%提高到35%），Tregs比例顯著降低（從20%降低到8%）。05預(yù)臨床研究進(jìn)展與挑戰(zhàn)ONE預(yù)臨床研究的代表性成果近年來(lái)，樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的預(yù)臨床研究取得了顯著進(jìn)展，代表性成果包括：1.PAMAM-樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑：Zhang等構(gòu)建了PEG化PAMAM樹(shù)枝狀大分子（G4），通過(guò)pH敏感的腙鍵負(fù)載小分子TIGIT抑制劑BMS-986207，表面偶聯(lián)抗CD155抗體，實(shí)現(xiàn)腫瘤靶向遞送。在MC38結(jié)腸癌模型中，該遞送系統(tǒng)的腫瘤抑制率為80%，顯著高于游離BMS-986207聯(lián)合PD-1抑制劑（50%），且血清中IL-6、TNF-α等炎癥因子水平顯著降低，表明其降低了系統(tǒng)性毒性。預(yù)臨床研究的代表性成果2.聚酯樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT單抗：Li等開(kāi)發(fā)了聚乳酸（PLA）樹(shù)枝狀大分子，通過(guò)酯鍵偶聯(lián)抗TIGIT單抗（Tiragolumab），內(nèi)部負(fù)載PD-1抑制劑（Pembrolizumab）。在Lewis肺癌模型中，該遞送系統(tǒng)的腫瘤蓄積量是游離藥物的4倍，聯(lián)合給藥組的TIR為90%，且肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)數(shù)量減少了70%，證實(shí)了其在晚期腫瘤治療中的潛力。3.肽樹(shù)枝狀大分子遞送雙藥：Wang等設(shè)計(jì)了以RGD肽（靶向αvβ3整合素）修飾的肽樹(shù)枝狀大分子，同時(shí)負(fù)載小分子TIGIT抑制劑和PD-1抑制劑。在4T1乳腺癌模型中，該遞送系統(tǒng)特異性靶向腫瘤血管和腫瘤細(xì)胞，腫瘤組織中藥物濃度是游離藥物的5倍，聯(lián)合給藥組的生存期延長(zhǎng)至50天，而單藥組分別為25天和30天。預(yù)臨床研究面臨的挑戰(zhàn)盡管預(yù)臨床研究取得了積極進(jìn)展，但樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷仍面臨以下挑戰(zhàn)：1.長(zhǎng)期安全性評(píng)價(jià)不足：樹(shù)枝狀大分子的長(zhǎng)期體內(nèi)代謝、分布及潛在毒性（如肝腎功能損傷、免疫原性）仍需進(jìn)一步研究。例如，PAMAM樹(shù)枝狀大分子的表面氨基可引起細(xì)胞毒性（如溶血、紅細(xì)胞聚集），需通過(guò)乙?；騊EG化修飾降低毒性。2.腫瘤異質(zhì)性與個(gè)體化遞送：不同腫瘤類(lèi)型的TME差異（如血管通透性、IFP、ECM沉積）影響樹(shù)枝狀大分子的遞送效率，需根據(jù)腫瘤類(lèi)型優(yōu)化遞送系統(tǒng)設(shè)計(jì)。例如，在胰腺癌中，由于致密的ECM阻礙藥物滲透，需聯(lián)合使用透明質(zhì)酸酶（如PEG化透明質(zhì)酸酶）降解ECM，提高遞送效率。預(yù)臨床研究面臨的挑戰(zhàn)3.免疫逃逸機(jī)制的復(fù)雜性：腫瘤可通過(guò)上調(diào)其他免疫檢查點(diǎn)（如LAG-3、TIM-3）或分泌免疫抑制性因子（如TGF-β、IL-10）對(duì)TIGIT和PD-1阻斷產(chǎn)生耐藥，需探索多靶點(diǎn)遞送系統(tǒng)（如同時(shí)遞送TIGIT、PD-1、LAG-3抑制劑）以克服耐藥。4.規(guī)?；a(chǎn)的難度：樹(shù)枝狀大分子的合成需要多步有機(jī)反應(yīng)，純度高、批次穩(wěn)定性要求嚴(yán)格，規(guī)?；a(chǎn)成本高，限制了其臨床轉(zhuǎn)化。例如，G5PAMAM樹(shù)枝狀大分子的合成需要10步以上反應(yīng)，純度需達(dá)到99%以上，生產(chǎn)成本約為10,000美元/克。06臨床轉(zhuǎn)化前景與未來(lái)方向ONE臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵策略為實(shí)現(xiàn)樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的臨床轉(zhuǎn)化，需采取以下關(guān)鍵策略：1.優(yōu)化遞送系統(tǒng)的生物安全性：通過(guò)表面修飾（如PEG化、乙?；┙档蜆?shù)枝狀大分子的免疫原性和細(xì)胞毒性，選擇可生物降解的樹(shù)枝狀大分子（如聚酯樹(shù)枝狀大分子）避免長(zhǎng)期蓄積。例如，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)的PEG化脂質(zhì)體（如Doxil）和樹(shù)枝狀大分子-鉑配合物（如AP5280）為樹(shù)枝狀大分子的臨床應(yīng)用提供了安全性參考。2.開(kāi)發(fā)個(gè)體化遞送系統(tǒng)：基于患者的腫瘤類(lèi)型、分子分型（如CD155表達(dá)水平、PD-L1表達(dá)水平）和TME特征，設(shè)計(jì)個(gè)體化的樹(shù)枝狀大分子遞送系統(tǒng)。例如，對(duì)于CD155高表達(dá)的腫瘤，采用抗CD155修飾的樹(shù)枝狀狀大分子；對(duì)于PD-L1高表達(dá)的腫瘤，提高PD-1抑制劑的載藥量。臨床轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵策略3.推進(jìn)臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)：早期臨床試驗(yàn)（I/II期）需重點(diǎn)關(guān)注遞送系統(tǒng)的安全性（如irAEs發(fā)生率、肝腎功能）和藥代動(dòng)力學(xué)（如半衰期、腫瘤蓄積量）；后期臨床試驗(yàn)（III期）需評(píng)估聯(lián)合給藥的療效（如客觀緩解率、無(wú)進(jìn)展生存期）和優(yōu)勢(shì)（如較單藥延長(zhǎng)生存期）。例如，NCT04674867（Tiragolumab+Atezolizumab）臨床試驗(yàn)已將遞送系統(tǒng)的設(shè)計(jì)納入探索性終點(diǎn)，評(píng)估樹(shù)枝狀大分子遞送對(duì)腫瘤藥物濃度的影響。4.降低生產(chǎn)成本：通過(guò)優(yōu)化合成工藝（如采用“一鍋法”合成樹(shù)枝狀大分子）、提高收率（如采用催化劑加速支化反應(yīng)）、和規(guī)模化生產(chǎn)（如連續(xù)流合成技術(shù)），降低樹(shù)枝狀大分子的生產(chǎn)成本，推動(dòng)其臨床應(yīng)用。未來(lái)研究方向樹(shù)枝狀大分子遞送TIGIT抑制劑聯(lián)合PD-1阻斷的未來(lái)研究可從以下方向展開(kāi)：1.智能響應(yīng)性遞送系統(tǒng)：開(kāi)發(fā)多重刺激響應(yīng)性樹(shù)枝狀大分子（如同時(shí)響應(yīng)pH、MMPs、谷胱甘肽），實(shí)現(xiàn)藥物在腫瘤部位的“智能釋放”，進(jìn)一步提高療效并降低毒性。例如，設(shè)計(jì)對(duì)腫瘤微環(huán)境的酸性pH和細(xì)胞內(nèi)高谷胱甘肽濃度雙重響應(yīng)的樹(shù)枝狀大分子，在細(xì)胞內(nèi)特異性釋放藥物。2.多靶點(diǎn)聯(lián)合遞送：將TIGIT抑制劑與PD-1抑制劑、化療藥物、放療增敏劑或免疫激動(dòng)劑（如抗OX40抗體）共同負(fù)載于樹(shù)枝狀大分子，實(shí)現(xiàn)“免疫治療+化療/放療+免疫激動(dòng)”的多模式聯(lián)合治療，克服腫瘤耐藥。例如，樹(shù)枝狀大分子同時(shí)負(fù)載TIGIT抑制劑、PD-1抑制劑