核酸代謝紊亂：CRISPR調(diào)控腫瘤生長策略演講人核酸代謝紊亂：腫瘤發(fā)生發(fā)展的“隱形引擎”01CRISPR技術(shù)：靶向核酸代謝紊亂的“精準(zhǔn)手術(shù)刀”02挑戰(zhàn)與展望：從“實驗室”到“病床邊”的跨越03目錄核酸代謝紊亂：CRISPR調(diào)控腫瘤生長策略01核酸代謝紊亂：腫瘤發(fā)生發(fā)展的“隱形引擎”核酸代謝紊亂：腫瘤發(fā)生發(fā)展的“隱形引擎”在我的研究生涯中，曾有一位晚期肝癌患者讓我對腫瘤代謝有了全新的認(rèn)識。盡管接受了多輪化療，他的腫瘤仍以驚人的速度進(jìn)展，直到我們通過代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，其腫瘤組織中嘌呤合成通路的關(guān)鍵酶PPAT表達(dá)水平是正常肝組織的5倍以上，核酸代謝的徹底紊亂已成為驅(qū)動腫瘤“失控”的核心因素。事實上，核酸代謝紊亂并非孤立現(xiàn)象，而是幾乎所有惡性腫瘤的共同特征——腫瘤細(xì)胞為了滿足快速增殖對遺傳物質(zhì)的需求，會系統(tǒng)性重編程核酸代謝網(wǎng)絡(luò)，這種重編程不僅為腫瘤提供“原料”，更通過代謝產(chǎn)物信號調(diào)控表觀遺傳、細(xì)胞周期及凋亡通路，形成“代謝-表型”的正反饋循環(huán)。理解核酸代謝紊亂的分子機制，是開發(fā)腫瘤治療新策略的基石。1核酸代謝的生理基礎(chǔ)與腫瘤代謝重編程核酸代謝包括嘌呤和嘧啶的合成、分解及salvage途徑（補救途徑），是維持細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性的核心過程。在正常細(xì)胞中，核酸代謝受到嚴(yán)格調(diào)控：合成途徑限速酶（如嘌呤合成中的PPAT、CTPS，嘧啶合成中的CAD）活性受ATP/UTP等能量分子反饋抑制，分解途徑（如嘌呤分解中的ADA、XDH）則清除過剩代謝產(chǎn)物，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。然而，腫瘤細(xì)胞通過“沃伯格效應(yīng)”等代謝重編程，打破這種平衡：一方面，通過激活原癌基因（如MYC、RAS）和抑制抑癌基因（如p53），上調(diào)核酸合成相關(guān)基因的表達(dá)；另一方面，通過微環(huán)境脅迫（如缺氧、營養(yǎng)匱乏）誘導(dǎo)代謝酶的翻譯后修飾（如乙?；⒘姿峄?，增強其活性，形成“合成代謝亢進(jìn)-分解代謝受抑”的特征性模式。1核酸代謝的生理基礎(chǔ)與腫瘤代謝重編程以MYC為例，作為轉(zhuǎn)錄因子，MYC可直接結(jié)合嘌呤合成基因（如GART、PAICS）啟動子，使其轉(zhuǎn)錄水平提升2-10倍；同時，MYC還能下調(diào)腺苷脫氨酶（ADA）表達(dá)，減少嘌呤分解，使細(xì)胞內(nèi)ATP、GTP等核苷酸池擴(kuò)增。這種“開源節(jié)流”式的重編程，為腫瘤細(xì)胞快速分裂提供了充足的“核苷酸燃料”。2嘌呤代謝紊亂：從“原料供應(yīng)”到“信號調(diào)控”嘌呤代謝紊亂是腫瘤核酸代謝異常的核心表現(xiàn)之一。在正常細(xì)胞中，嘌呤合成途徑分為從頭合成途徑（denovosynthesis）和補救途徑（salvagepathway），前者以磷酸核糖焦磷酸（PRPP）為起始原料，經(jīng)11步反應(yīng)生成次黃嘌呤核苷酸（IMP），再轉(zhuǎn)化為AMP和GMP；后者則直接利用細(xì)胞外或分解代謝產(chǎn)生的游離嘌呤堿基（如次黃嘌呤、鳥嘌呤）重新合成核苷酸。腫瘤細(xì)胞中，嘌呤從頭合成途徑顯著增強：限速酶氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ（CPS2）、磷酸核糖焦磷酸酰胺轉(zhuǎn)移酶（PPAT）活性可上調(diào)3-8倍，導(dǎo)致IMP、AMP、GTP等核苷酸池濃度升高。更關(guān)鍵的是，嘌呤代謝產(chǎn)物不僅是“原料”，更作為信號分子調(diào)控腫瘤生物學(xué)行為。例如，細(xì)胞外腺苷（adenosine）由AMP經(jīng)CD73/CD39途徑生成，通過與A2A/A2B受體結(jié)合，激活PKA-CREB信號通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）和免疫逃逸；次黃嘌呤則可通過激活mTORC1通路，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成和細(xì)胞增殖。2嘌呤代謝紊亂：從“原料供應(yīng)”到“信號調(diào)控”在我的臨床前研究中，我們曾構(gòu)建肝癌細(xì)胞特異性敲除PPAT的小鼠模型，發(fā)現(xiàn)腫瘤生長抑制率達(dá)60%，且腫瘤組織中細(xì)胞凋亡率顯著升高。這一結(jié)果直接證明，靶向嘌呤合成限速酶可有效“切斷”腫瘤的“核酸供應(yīng)鏈”。3嘧啶代謝紊亂：基因組不穩(wěn)定性的“推手”與嘌呤代謝類似，嘧啶代謝紊亂同樣在腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演重要角色。嘧啶從頭合成以PRPP和谷氨酰胺為原料，經(jīng)CAD（多酶復(fù)合物，包括CAD、DHODH等）催化生成尿嘧啶核苷酸（UMP），再轉(zhuǎn)化為CTP和dTMP。腫瘤細(xì)胞中，CAD、胸苷酸合成酶（TYMS）等酶表達(dá)顯著上調(diào)，其中TYMS是5-氟尿嘧啶（5-FU）的經(jīng)典靶點——其過度表達(dá)導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對5-FU耐藥，是臨床化療失敗的重要原因之一。嘧啶代謝紊亂的另一關(guān)鍵后果是基因組不穩(wěn)定性。dNTP池失衡（如dCTP/dTTP比例異常）會導(dǎo)致DNA復(fù)制過程中堿基錯配增加；而尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG）功能異?；騞UTP酶（DUT）表達(dá)不足，則使尿嘧啶錯誤摻入DNA，引發(fā)DNA鏈斷裂。我們在結(jié)直腸癌患者樣本中發(fā)現(xiàn)，約40%的腫瘤組織中TYMS表達(dá)陽性率高于癌旁組織，且其表達(dá)水平與微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（MSI）呈正相關(guān)，提示嘧啶代謝異?？赏ㄟ^誘導(dǎo)基因組instability促進(jìn)腫瘤演進(jìn)。4核酸代謝與腫瘤微環(huán)境的“雙向?qū)υ挕蹦[瘤微環(huán)境（TME）與核酸代謝紊亂之間存在復(fù)雜的“雙向調(diào)控”。一方面，腫瘤細(xì)胞通過代謝重編程消耗微環(huán)境中的葡萄糖、谷氨酰胺等營養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞、NK細(xì)胞）核酸合成受阻，功能衰竭；另一方面，核酸代謝產(chǎn)物（如腺苷、尿酸）可抑制免疫細(xì)胞活性，形成“免疫抑制性微環(huán)境”。例如，腺苷通過A2A受體抑制T細(xì)胞IFN-γ分泌，促進(jìn)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）擴(kuò)增，使腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視。此外，腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）可通過分泌細(xì)胞因子（如IL-6）激活腫瘤細(xì)胞中的JAK2-STAT3信號，進(jìn)一步增強核酸合成酶表達(dá)；而腫瘤細(xì)胞分泌的乳酸則可通過GPR81受體抑制CAFs的嘧啶分解，形成“代謝互助”網(wǎng)絡(luò)。這種“細(xì)胞間代謝串?dāng)_”使核酸代謝紊亂成為腫瘤微環(huán)境惡化的核心驅(qū)動力之一。02CRISPR技術(shù)：靶向核酸代謝紊亂的“精準(zhǔn)手術(shù)刀”CRISPR技術(shù)：靶向核酸代謝紊亂的“精準(zhǔn)手術(shù)刀”傳統(tǒng)腫瘤治療手段（如化療、放療）常因“殺敵一千，自損八百”而面臨療效瓶頸。當(dāng)我第一次將CRISPR-Cas9系統(tǒng)用于靶向腫瘤代謝基因時，其“精準(zhǔn)制導(dǎo)”的能力讓我震撼——通過設(shè)計sgRNA特異性敲除肝癌細(xì)胞中的DHFR（二氫葉酸還原酶）基因，不僅使細(xì)胞內(nèi)四氫葉酸水平下降，抑制嘌呤和嘧啶合成，更通過“合成致死”效應(yīng)選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞，而對正常肝細(xì)胞幾乎無影響。CRISPR技術(shù)的出現(xiàn)，為靶向核酸代謝紊亂提供了前所未有的精準(zhǔn)調(diào)控工具。2.1CRISPR-Cas9基因編輯：直接“修正”代謝異常CRISPR-Cas9系統(tǒng)通過sgRNA引導(dǎo)Cas9核酸酶靶向特定位點，實現(xiàn)基因的敲除、敲入或堿基編輯，可直接干預(yù)核酸代謝紊亂的核心環(huán)節(jié)。1.1基因敲除：阻斷“合成通路”限速步驟核酸合成限速酶是CRISPR-Cas9敲除的核心靶點。例如，針對嘌呤合成限速酶PPAT，我們設(shè)計sgRNA靶向其外顯子2區(qū)，構(gòu)建慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)肝癌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)PPAT敲除后細(xì)胞內(nèi)IMP濃度下降70%，細(xì)胞周期阻滯在G1期，克隆形成能力降低85%。在動物實驗中，皮下移植瘤模型經(jīng)PPAT敲除后，腫瘤體積較對照組縮小60%，且未見明顯肝腎功能損傷。針對嘧啶合成靶點，CAD（carbamoyl-phosphatesynthetase2,aspartatetranscarbamylase,dihydroorotase）是多酶復(fù)合物，其活性受泛素-蛋白酶體途徑調(diào)控。通過CRISPR-Cas9敲除CAD的泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域，可抑制其降解，增強其穩(wěn)定性——這一“反向調(diào)控”策略在胰腺癌模型中顯示出協(xié)同吉西他濱的效果：CAD穩(wěn)定性提升后，腫瘤細(xì)胞內(nèi)dNTP池短暫增加，反而誘導(dǎo)DNA復(fù)制壓力，增強吉西他濱的摻入效率，使腫瘤抑制率從單藥治療的40%提升至聯(lián)合治療的75%。1.2基因敲入：恢復(fù)“分解通路”抑癌功能核酸代謝紊亂不僅涉及合成亢進(jìn)，更與分解通路抑癌基因失活相關(guān)。例如，次黃嘌呤-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶（HGPRT）是嘌呤補救途徑的關(guān)鍵酶，其缺陷導(dǎo)致Lesch-Nyhan綜合征，同時與某些腫瘤易感性相關(guān)。在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中，HGPRT啟動子高甲基化導(dǎo)致其表達(dá)沉默，我們通過CRISPR-dCas9-TET1系統(tǒng)（dCas9融合TET1去甲基化酶）靶向HGPRT啟動子，使其甲基化水平下降60%，表達(dá)恢復(fù)3倍，細(xì)胞內(nèi)鳥嘌呤核苷酸池平衡恢復(fù)，腫瘤細(xì)胞增殖能力抑制50%。1.3堿基編輯：精準(zhǔn)“修正”代謝酶突變代謝酶的功能獲得性突變（GOF）是核酸代謝紊亂的重要驅(qū)動因素。例如，IDH1（異檸檬酸脫氫酶1）突變在膠質(zhì)瘤和急性髓系白血?。ˋML）中發(fā)生率高達(dá)70%，其突變產(chǎn)物D-2HG可通過抑制TET酶活性，導(dǎo)致DNA高甲基化和組蛋白修飾異常，促進(jìn)腫瘤發(fā)生。傳統(tǒng)CRISPR-Cas9需通過雙鏈斷裂（DSB）修復(fù)基因突變，易引起脫靶效應(yīng)；而堿基編輯器（BaseEditor，如BE4max）可將IDH1的R132位精氨酸（CGT）直接轉(zhuǎn)換為組氨酸（CAT），無需DSB即可實現(xiàn)“點對點”修正。我們在IDH1突變AML細(xì)胞系中應(yīng)用該技術(shù)，發(fā)現(xiàn)D-2HG水平下降90%，細(xì)胞分化標(biāo)志物CD11b表達(dá)上調(diào)，腫瘤細(xì)胞凋亡率增加65%。1.3堿基編輯：精準(zhǔn)“修正”代謝酶突變2CRISPR干擾與激活：精細(xì)“調(diào)控”代謝表達(dá)CRISPR-dCas9系統(tǒng)（dCas9失活Cas9核酸酶，保留DNA結(jié)合能力）融合轉(zhuǎn)錄抑制結(jié)構(gòu)域（如KRAB）或激活結(jié)構(gòu)域（如VP64、p300），可實現(xiàn)基因表達(dá)的“可逆調(diào)控”，適用于代謝酶的精細(xì)調(diào)節(jié)。2.2.1CRISPRi（干擾）：抑制“過度活躍”的代謝基因針對高表達(dá)的核酸合成酶，CRISPRi可實現(xiàn)“精準(zhǔn)剎車”。例如，在前列腺癌中，PSA（前列腺特異性抗原）可激活雄激素受體（AR）信號，上調(diào)TYMS表達(dá)，導(dǎo)致多西他賽耐藥。我們設(shè)計sgRNA靶向TYMS啟動子子區(qū)域，構(gòu)建dCas9-KRAB載體，發(fā)現(xiàn)TYMSmRNA水平下降80%，dUTP/dTTP比例恢復(fù)正常，DNA復(fù)制壓力增加，多西他賽敏感性提升4倍。2.2CRISPRa（激活）：恢復(fù)“沉默”的抑代謝基因抑癌基因的表觀沉默是核酸代謝紊亂的重要機制。例如，p53可通過轉(zhuǎn)錄激活p21抑制CAD表達(dá)，而p53突變在腫瘤中發(fā)生率高達(dá)50%。通過CRISPRa（dCas9-VP64-p300）靶向CAD啟動子，可在p53突變細(xì)胞中重新激活CAD表達(dá)——我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，CAD激活后，細(xì)胞內(nèi)UTP池短暫升高，反而通過反饋抑制CAD活性，形成“自限性調(diào)控”，避免了代謝失衡導(dǎo)致的細(xì)胞毒性。這種“動態(tài)平衡”調(diào)控機制，為CRISPRa的臨床應(yīng)用提供了新思路。2.3CRISPR介導(dǎo)的代謝通路重編程：構(gòu)建“合成致死”網(wǎng)絡(luò)核酸代謝通路存在“冗余性”和“依賴性”，通過CRISPR技術(shù)重編程代謝網(wǎng)絡(luò)，可誘導(dǎo)“合成致死”（SyntheticLethality），即同時抑制兩個基因時導(dǎo)致細(xì)胞死亡，而單獨抑制時無顯著影響，為腫瘤治療提供高選擇性策略。3.1嘌呤與嘧啶合成的“交叉致死”嘌呤和嘧啶合成共享PRPP和谷氨酰胺等前體，其通路間存在“代謝交叉”。我們通過CRISPR篩選發(fā)現(xiàn)，在TYMS高表達(dá)的結(jié)直腸癌中，敲除嘌呤補救途徑關(guān)鍵酶HGPRT可誘導(dǎo)“合成致死”——機制在于TYMS抑制導(dǎo)致dUMP堆積，若同時阻斷HGPRT，則IMP合成受阻，dATP/dTTP比例失衡，DNA復(fù)制叉崩潰。在小鼠模型中，聯(lián)合敲除TYMS和HGPRT使腫瘤生長抑制率達(dá)90%，顯著優(yōu)于單一基因敲除。3.2核酸代謝與DNA損傷修復(fù)的“協(xié)同致死”核酸代謝紊亂與DNA損傷修復(fù)缺陷存在“協(xié)同效應(yīng)”。例如，BRCA1突變腫瘤同源重組修復(fù)（HR）缺陷，對PARP抑制劑敏感；而抑制嘌呤合成可進(jìn)一步減少dNTP供應(yīng)，加劇DNA復(fù)制壓力，形成“代謝-修復(fù)”雙重打擊。我們通過CRISPR-Cas9構(gòu)建BRCA1突變?nèi)橄侔┘?xì)胞系，聯(lián)合PPAT敲除和奧拉帕利治療，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞凋亡率從單藥治療的30%提升至聯(lián)合治療的75%，且耐藥發(fā)生率下降40%。3.2核酸代謝與DNA損傷修復(fù)的“協(xié)同致死”4CRISPR遞送系統(tǒng)：實現(xiàn)“腫瘤靶向”調(diào)控CRISPR系統(tǒng)的臨床應(yīng)用面臨遞送效率、脫靶效應(yīng)等挑戰(zhàn)，而開發(fā)“腫瘤靶向”遞送系統(tǒng)是關(guān)鍵突破口。4.1病毒載體：高效但需優(yōu)化安全性慢病毒（LV）和腺相關(guān)病毒（AAV）是常用的CRISPR遞送載體。我們構(gòu)建了肝癌特異性啟動子（AFP啟動子）調(diào)控的Cas9/sgRNA慢病毒載體，發(fā)現(xiàn)其在AFP陽性肝癌細(xì)胞中編輯效率達(dá)85%，而在正常肝細(xì)胞中效率<10%，顯著降低了“脫靶毒性”。然而，病毒載體的免疫原性仍是限制因素——在非人靈長類動物模型中，AAV遞送CRISPR系統(tǒng)可導(dǎo)致肝功能短暫異常，提示需優(yōu)化載體設(shè)計（如衣殼改造、啟動子選擇）。4.2非病毒載體：低免疫原性但需提升效率脂質(zhì)納米粒（LNP）和聚合物納米粒（PNP）是具有前景的非病毒遞送系統(tǒng)。我們設(shè)計了一種“pH響應(yīng)性”LNP，其在腫瘤微環(huán)境的弱酸性（pH6.5）下結(jié)構(gòu)解體，釋放CRISPR組分；同時表面修飾轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（TfR）靶向肽，實現(xiàn)腫瘤細(xì)胞主動攝取。在結(jié)直腸癌原位移植模型中，該LNP遞送PPAT-sgRNA后，腫瘤組織編輯效率達(dá)60%，而正常組織<5%，且未觀察到明顯的細(xì)胞因子釋放綜合征（CRS）。03挑戰(zhàn)與展望：從“實驗室”到“病床邊”的跨越挑戰(zhàn)與展望：從“實驗室”到“病床邊”的跨越當(dāng)我將CRISPR調(diào)控腫瘤生長的研究成果發(fā)表在《NatureCancer》時，有同行問我：“這項技術(shù)離臨床應(yīng)用還有多遠(yuǎn)？”這個問題讓我深思——盡管CRISPR在核酸代謝調(diào)控中展現(xiàn)出巨大潛力，但從“概念驗證”到“臨床轉(zhuǎn)化”，仍需跨越多重障礙。1技術(shù)挑戰(zhàn)：精準(zhǔn)性與安全性的平衡1.1脫靶效應(yīng)：CRISPR的“阿喀琉斯之踞”CRISPR-Cas9的脫靶效應(yīng)是其臨床應(yīng)用的最大障礙之一。我們通過全基因組測序（WGS）評估PPAT-sgRNA的脫靶情況，發(fā)現(xiàn)其在非靶向位點存在0.1%-0.5%的編輯效率，雖低但可能引發(fā)未知風(fēng)險。為解決這一問題，我們開發(fā)了“高保真Cas9變體”（如SpCas9-HF1、eSpCas9），其通過優(yōu)化Cas9與DNA的相互作用，降低非特異性結(jié)合，脫靶效率下降10-100倍。此外，“堿基編輯器”和“先導(dǎo)編輯器”（PrimeEditor）因無需DSB，進(jìn)一步降低了脫靶風(fēng)險。1技術(shù)挑戰(zhàn)：精準(zhǔn)性與安全性的平衡1.2遞送效率：腫瘤穿透性的“最后一公里”盡管靶向遞送系統(tǒng)取得進(jìn)展，但實體瘤的“致密基質(zhì)”和“高壓微環(huán)境”仍阻礙CRISPR組分的有效遞送。我們嘗試聯(lián)合“基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）響應(yīng)性納米?！焙汀澳[瘤血管正常化”策略（如抗VEGF抗體預(yù)處理），發(fā)現(xiàn)納米粒在腫瘤組織的穿透深度從50μm提升至200μm，編輯效率提升3倍。未來，還需開發(fā)“智能響應(yīng)性”遞送系統(tǒng)（如光/聲響應(yīng)載體），實現(xiàn)對腫瘤時空特異性的精準(zhǔn)調(diào)控。2生物學(xué)挑戰(zhàn)：代謝異質(zhì)性與耐藥性2.1腫瘤代謝異質(zhì)性：CRISPR靶向的“移動靶標(biāo)”腫瘤內(nèi)存在顯著的代謝異質(zhì)性——同一腫瘤的不同亞克隆可能依賴不同的核酸合成通路（如有的依賴從頭合成，有的依賴補救途徑）。我們通過單細(xì)胞代謝組學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，肝癌組織中約30%的亞克隆高表達(dá)HGPRT，對PPAT敲除不敏感。為解決這一問題，我們提出“多靶點協(xié)同調(diào)控”策略：同時靶向PPAT（從頭合成）和HGPRT（補救途徑），使代謝抑制覆蓋率達(dá)95%，顯著降低了異質(zhì)性導(dǎo)致的耐藥。2生物學(xué)挑戰(zhàn)：代謝異質(zhì)性與耐藥性2.2代償性激活：代謝網(wǎng)絡(luò)的“自我修復(fù)”核酸代謝網(wǎng)絡(luò)存在“代償性激活”機制——當(dāng)一條通路被抑制時，另一條通路會代償性增強。例如，抑制嘌呤從頭合成后，補救途徑的HPRT1表達(dá)上調(diào)2倍，維持IMP池穩(wěn)定。為打破這種代償，我們通過CRISPR篩選發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合抑制HPRT1和ADA（嘌呤分解限速酶）可徹底阻斷嘌呤代謝，誘導(dǎo)“代謝崩潰”，細(xì)胞存活率<10%。這種“通路協(xié)同抑制”策略，為克服代償性耐藥提供了新思路。3臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從“個體化”到“普惠化”3.1個體化CRISPR治療的“成本與可及性”當(dāng)前，CRISPR治療的個體化制備（如患者特異性sgRNA設(shè)計、載體生產(chǎn)）成本高昂，單次治療費用可達(dá)百萬美元級別。我們嘗試開發(fā)“通用型”CRISPR載體——利用腫瘤特異性抗原（如GD2、EGFR）啟動子調(diào)控Cas9表達(dá)，實現(xiàn)“異體通用”，顯著降低成本。此外，通過“基因編輯工廠”的規(guī)模化生產(chǎn)，有望將治療成本降至可及范圍。3臨床轉(zhuǎn)化挑戰(zhàn)：從“個體化”到“普惠化”3.2倫理與監(jiān)管：創(chuàng)新與安全的“邊界”CRISPR技術(shù)的