抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)_第1頁
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)_第2頁
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)_第3頁
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)_第4頁
抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)_第5頁
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第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的化學(xué)本質(zhì)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)影響抗原抗體反應(yīng)的因素抗原抗體反應(yīng)的化學(xué)本質(zhì)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)抗原抗體的結(jié)合力反應(yīng)過程抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵,通過非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力

一、抗原抗體結(jié)合力一、抗原抗體結(jié)合力*1.靜電引力*2.范德華引力*3.氫鍵結(jié)合力*4.疏水作用力

靜電引力(庫倫引力)

(electrostaticforces)(coulombicforces)

概念:抗原和抗體分子帶有相反電荷的氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力。

引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距離的平方成反比;平均鍵能約為

20.9kJ/mo1。范德華引力(VanderWaalsforces)概念:抗原和抗體相互接近時(shí),由于分子的極化作用而出現(xiàn)的引力。

結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程度的乘積成正比、與它們之間距離的7次方成反比,鍵能約為4.2~12.5kJ/mol。

這種引力的能量小于靜電引力。具有特異性。

概念:供氫體上的氫原子與受氫體原子間的引力。氫鍵結(jié)合力(hydregenbondforces)

供氫體:羧基、氨基和羥基受氫體:羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等能的大小取決于氫鍵的方向:氫鍵具有高度的方向性。氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6次方成反比,鍵能約20.9kJ/mol。

二、抗原抗體親和性(affinity)*親和性是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對(duì)應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的引力,這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。*親和力(avidity)是指反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)雜抗原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。親和力與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。親和力越大,抗原抗體結(jié)合越牢固。

親和常數(shù)親和常數(shù)K=

K值大的抗體與抗原牢固結(jié)合,不易解離,說明該抗體有高親和力??贵w與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng),在平衡時(shí)其血清學(xué)反應(yīng)條件下,抗原抗體均帶負(fù)電荷,使極化的水分子在其周圍形成水化層,成為親水膠體。

三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體

當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后,表面電荷減少,水化層變??;而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后,與水接觸的表面積減少,由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。在電解質(zhì)作用下,各疏水膠體之間靠攏,形成可見的抗原抗體復(fù)合物。

親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體示意圖親水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化NaCl可見反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)*1.特異性*2.比例性*3.可逆性

一、

特異性(specificity)*概念:抗原分子,只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性能。一、特異性*決定因素:由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。

抗體分子N端可變區(qū)形成3nm×1.5nm×0.7nm的槽溝,只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。*交叉反應(yīng)(crossreaction)兩種不同的抗原物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇,則可與彼此相應(yīng)的抗體反應(yīng)。特異性示意圖*最適比(optimalratio)或等價(jià)點(diǎn)(equivzlencepoint)最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度比或量比。

二、比例性(proportionality)等價(jià)帶(equivalencezone)抗原與抗體分子比例合適的范圍。帶現(xiàn)象:Ag與Ab比例不適而不出現(xiàn)可見反應(yīng)。*前帶(prozone)抗體過量時(shí)。*后帶(postzone)

抗原過量時(shí)。比例性示意圖抗體過量比例合適抗原的量抗原過量抗體沉淀的量前帶等價(jià)帶后帶

三、可逆性(reversibility)概念:是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后,在一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。

解離后抗原抗體仍保持原有特性。一定條件:低pH、高濃度鹽等。常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有:

3mol/L硫氰化鉀、pH2.40.1mol/L甘氨酸、

7mol/L尿素等??贵w混有SPAg抗體-SPAg抗體-SPAg分離劑一、抗原抗體結(jié)合二、分離抗體

可逆性示意圖抗體抗原抗體反應(yīng)影響因素一、反應(yīng)物自身因素*抗原:1.理化特性2.Ag決定簇?cái)?shù)量3.Ag決定簇種類*抗體:1.來源2.特異性與親和力3.濃度二、環(huán)境條件:*電解質(zhì):0.85%NaCl*酸堿度:pH6~9*溫度:15~40℃第三節(jié)抗原抗體反應(yīng)類型1.沉淀反應(yīng)2.凝集反應(yīng)3.補(bǔ)體參與的反應(yīng)4.中和反應(yīng)5.免疫標(biāo)記表

抗原抗體反應(yīng)的基本類型表反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)檢測(cè)方法敏感度沉淀反應(yīng)液相沉淀試驗(yàn)觀察沉淀、檢測(cè)濁度+,++++瓊脂凝膠擴(kuò)散觀察掃描沉淀線或環(huán)+凝膠電泳技術(shù)或峰或弧++補(bǔ)體參與反應(yīng)補(bǔ)體溶血試驗(yàn)以裸眼或光電

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