2026年生物化學(xué)（核酸提取技術(shù)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿(mǎn)分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題共40分）答題要求：本大題共20小題，每小題2分，在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.核酸提取過(guò)程中，常用的蛋白酶K的作用是A.水解蛋白質(zhì)B.降解核酸C.促進(jìn)核酸溶解D.抑制核酸酶活性答案：A2.以下哪種方法可用于去除核酸溶液中的蛋白質(zhì)雜質(zhì)A.加熱B.離心C.酚/氯仿抽提D.透析答案：C3.在核酸提取時(shí)，EDTA的主要作用是A.調(diào)節(jié)pH值B.抑制核酸酶C.沉淀核酸D.促進(jìn)核酸與蛋白質(zhì)分離答案：B4.提取DNA時(shí)，常用的裂解細(xì)胞的方法不包括A.機(jī)械破碎B.酶解C.酸堿處理D.加熱答案：C5.核酸提取過(guò)程中，異丙醇的作用是A.沉淀核酸B.溶解核酸C.去除雜質(zhì)D.抑制酶活性答案：A6.用于RNA提取的試劑通常需要經(jīng)過(guò)特殊處理以去除A.DNA酶B.RNA酶C.蛋白酶D.脂肪酶答案：B7.提取核酸時(shí)，氯仿的作用主要是A.使蛋白質(zhì)變性B.沉淀核酸C.促進(jìn)相分離D.抑制核酸降解答案：C8.以下哪種核酸提取方法適用于大量樣本A.柱式提取法B.酚/氯仿抽提法C.磁珠法D.離心柱法答案：A9.在核酸提取中，乙醇沉淀核酸時(shí)，最佳的乙醇濃度一般為A.50%B.70%C.95%D.無(wú)水乙醇答案：C10.核酸提取過(guò)程中，防止RNA降解的關(guān)鍵步驟是A.低溫操作B.加入RNase抑制劑C.快速提取D.以上都是答案：D11.提取植物核酸時(shí)，需要先進(jìn)行的預(yù)處理是A.研磨B.離心C.過(guò)濾D.勻漿答案：A12.用于核酸提取的樣本保存液中通常含有A.乙醇B.甲醛C.甘油D.乙二胺四乙酸答案：D13.核酸提取過(guò)程中，使用離心機(jī)的目的主要是A.沉淀雜質(zhì)B.分離不同相C.濃縮核酸D.以上都是答案：D14.提取病毒核酸時(shí)，需要先進(jìn)行的操作是A.病毒培養(yǎng)B.病毒滅活C.樣本稀釋D.離心答案：B15.核酸提取過(guò)程中，硅膠膜柱法的原理是A.核酸與硅膠膜特異性結(jié)合B.核酸被硅膠膜吸附C.核酸在硅膠膜上沉淀D.核酸與硅膠膜發(fā)生化學(xué)反應(yīng)答案：A16.以下哪種物質(zhì)可用于核酸定量A.考馬斯亮藍(lán)B.溴酚藍(lán)C.二苯胺D.酚紅答案：C17.核酸提取后，檢測(cè)其純度常用的指標(biāo)是A.A260/A280B.A260/A230C.A280/A230D.以上都是答案：D18.提取動(dòng)物組織核酸時(shí)，常用的緩沖液是A.Tris-HCl緩沖液B.PBS緩沖液C.檸檬酸緩沖液D.硼酸緩沖液答案：A19.在核酸提取過(guò)程中，以下哪種操作可能導(dǎo)致核酸降解A.劇烈振蕩B.長(zhǎng)時(shí)間離心C.高溫孵育D.以上都是答案：D20.核酸提取后，保存核酸的最佳條件是A.低溫干燥B.常溫保存C.高溫保存D.酸性環(huán)境保存答案：A第II卷（非選擇題共60分）答題要求：請(qǐng)根據(jù)題目要求，在相應(yīng)位置準(zhǔn)確作答。21.（共10分）簡(jiǎn)述核酸提取的基本流程。答案：核酸提取基本流程包括：樣本預(yù)處理，如破碎細(xì)胞等；裂解細(xì)胞，釋放核酸；去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，常用酚/氯仿抽提等方法；核酸沉淀，如用異丙醇或乙醇等；洗滌沉淀，去除殘留雜質(zhì)；溶解核酸于適當(dāng)緩沖液中。22.（共10分）說(shuō)明在核酸提取過(guò)程中，如何防止核酸的降解。答案：防止核酸降解措施有：全程低溫操作，減少核酸酶活性；加入RNase抑制劑（提取RNA時(shí)）或使用無(wú)核酸酶的試劑；快速提取，減少核酸暴露于核酸酶環(huán)境的時(shí)間；避免劇烈振蕩等可能損傷核酸的操作；提取后的核酸及時(shí)保存于合適條件，如低溫干燥。23.（共10分）分析比較酚/氯仿抽提法和柱式提取法的優(yōu)缺點(diǎn)。答案：酚/氯仿抽提法優(yōu)點(diǎn)是經(jīng)典，能有效去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，適用于多種樣本；缺點(diǎn)是操作較繁瑣，有一定毒性，對(duì)操作人員要求高。柱式提取法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速，可自動(dòng)化，能較好保留核酸完整性；缺點(diǎn)是成本相對(duì)較高，某些柱式方法對(duì)樣本量和濃度有一定要求。24.（共15分）材料：從某細(xì)胞系中提取核酸，提取過(guò)程中發(fā)現(xiàn)核酸產(chǎn)量較低。請(qǐng)分析可能導(dǎo)致核酸產(chǎn)量低的原因，并提出相應(yīng)的解決措施。答案：可能原因及解決措施：樣本量不足，應(yīng)確保足夠的細(xì)胞量用于提??；細(xì)胞裂解不完全，可優(yōu)化裂解方法或延長(zhǎng)裂解時(shí)間；提取過(guò)程中核酸損失過(guò)多，如操作不當(dāng)導(dǎo)致吸附、沉淀?yè)p失，需規(guī)范操作；核酸酶污染，要使用無(wú)核酸酶試劑和耗材，加入抑制劑。25.（共15分）材料：提取植物葉片核酸時(shí)，得到的核酸溶液經(jīng)檢測(cè)純度較低，A260/A280比值小于1.8。請(qǐng)分析可能導(dǎo)致純度低的原因，并說(shuō)明如何提高核酸純度。答案：可能原因：蛋白質(zhì)殘留，未有效