《NY/T1154.16-2013農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗(yàn)準(zhǔn)則

殺蟲劑

第16部分

：對粉虱類害蟲活性試驗(yàn)

瓊脂保濕浸葉法》(2026年)深度解析目錄一

標(biāo)準(zhǔn)核心框架揭秘：

瓊脂保濕浸葉法為何成為粉虱類殺蟲劑活性測定的黃金準(zhǔn)則？

專家視角拆解試驗(yàn)邏輯與應(yīng)用邊界二

粉虱類害蟲特性與測定痛點(diǎn)突破：

標(biāo)準(zhǔn)如何針對性解決寄主專一性

抗藥性監(jiān)測等行業(yè)難題？

深度剖析試驗(yàn)設(shè)計科學(xué)性三

試驗(yàn)材料與儀器的精準(zhǔn)選型

：從瓊脂配方到飼養(yǎng)設(shè)備，

哪些參數(shù)直接決定測定結(jié)果有效性？

行業(yè)趨勢下的選型指南四

試驗(yàn)操作全流程精細(xì)化解讀：

浸葉處理

保濕條件控制等關(guān)鍵步驟如何規(guī)避誤差？

專家手把手教你規(guī)范操作要點(diǎn)五

供試?yán)ハx飼養(yǎng)與處理的核心要求：

蟲齡一致性

健康狀態(tài)把控有何秘訣？

未來標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)的發(fā)展方向探析六

藥劑稀釋與處理的科學(xué)性：

濃度梯度設(shè)置

藥液穩(wěn)定性控制如何契合標(biāo)準(zhǔn)要求？

熱點(diǎn)問題與解決方案深度剖析七

試驗(yàn)條件調(diào)控的關(guān)鍵技術(shù)：

溫度

濕度

光照等環(huán)境因子如何影響試驗(yàn)準(zhǔn)確性？

前瞻性解讀環(huán)境控制智能化趨勢八

結(jié)果記錄與數(shù)據(jù)處理的規(guī)范方法：

死亡率計算

校正公式應(yīng)用有何講究？

專家解析數(shù)據(jù)可靠性驗(yàn)證要點(diǎn)九

標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用場景與拓展邊界：

除常規(guī)活性測定外，

如何支撐抗藥性監(jiān)測

新藥研發(fā)等多元需求？

行業(yè)應(yīng)用熱點(diǎn)探討十

標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施中的常見疑點(diǎn)與優(yōu)化路徑：

實(shí)際操作中哪些問題頻發(fā)？

結(jié)合未來趨勢的標(biāo)準(zhǔn)完善建議與落地指導(dǎo)標(biāo)準(zhǔn)核心框架揭秘：瓊脂保濕浸葉法為何成為粉虱類殺蟲劑活性測定的黃金準(zhǔn)則？專家視角拆解試驗(yàn)邏輯與應(yīng)用邊界標(biāo)準(zhǔn)制定的行業(yè)背景與核心目標(biāo)01本標(biāo)準(zhǔn)制定源于粉虱類害蟲對農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的嚴(yán)重威脅，及此前測定方法不統(tǒng)一導(dǎo)致的結(jié)果可比性差問題。核心目標(biāo)是建立科學(xué)規(guī)范的室內(nèi)生物測定方法，為殺蟲劑活性評價登記審批及抗藥性監(jiān)測提供統(tǒng)一技術(shù)依據(jù)，保障農(nóng)藥應(yīng)用的精準(zhǔn)性與有效性。02（二）瓊脂保濕浸葉法的技術(shù)原理與優(yōu)勢該方法以瓊脂為保濕載體，通過浸葉處理讓粉虱取食帶藥葉片，利用瓊脂鎖水特性維持葉片新鮮度，確保試蟲正常取食。相比傳統(tǒng)方法，其優(yōu)勢在于保濕持久葉片不易腐爛，能準(zhǔn)確反映藥劑實(shí)際活性，且操作簡便重復(fù)性強(qiáng)。12（三）標(biāo)準(zhǔn)適用范圍與應(yīng)用場景界定適用于各類殺蟲劑對粉虱類害蟲（如煙粉虱溫室白粉虱）室內(nèi)活性測定，涵蓋農(nóng)藥研發(fā)篩選產(chǎn)品質(zhì)量檢測抗藥性監(jiān)測等場景。明確排除野外田間測定及非粉虱類刺吸式害蟲的活性評價，避免應(yīng)用邊界模糊。標(biāo)準(zhǔn)核心框架與邏輯體系解析01標(biāo)準(zhǔn)圍繞“材料-操作-條件-結(jié)果”構(gòu)建邏輯體系，從試驗(yàn)準(zhǔn)備操作流程條件控制到數(shù)據(jù)處理形成閉環(huán)。核心框架凸顯“科學(xué)性規(guī)范性實(shí)用性”，每個環(huán)節(jié)都服務(wù)于結(jié)果的準(zhǔn)確性與可比性，為行業(yè)提供統(tǒng)一技術(shù)遵循。02粉虱類害蟲特性與測定痛點(diǎn)突破：標(biāo)準(zhǔn)如何針對性解決寄主專一性抗藥性監(jiān)測等行業(yè)難題？深度剖析試驗(yàn)設(shè)計科學(xué)性粉虱類害蟲的生物學(xué)特性與危害特點(diǎn)01粉虱類害蟲體型小繁殖快，寄主范圍廣，且具刺吸式口器，易產(chǎn)生抗藥性。其若蟲固定取食成蟲活躍的特性，導(dǎo)致傳統(tǒng)測定方法難以精準(zhǔn)把控取食劑量，這是活性測定的核心痛點(diǎn)。02（二）傳統(tǒng)測定方法的局限性與行業(yè)需求01傳統(tǒng)噴霧法點(diǎn)滴法存在藥劑附著不均試蟲取食難以量化等問題，無法滿足精準(zhǔn)評價需求。行業(yè)亟需一種能模擬自然取食狀態(tài)有效控制變量的標(biāo)準(zhǔn)化方法，解決寄主專一性帶來的測定差異。02標(biāo)準(zhǔn)采用“浸葉+瓊脂保濕”模式，契合粉虱取食葉片的習(xí)性；明確寄主植物選擇要求，匹配粉虱寄主專一性；設(shè)置統(tǒng)一蟲齡與飼養(yǎng)條件，減少抗藥性個體差異對結(jié)果的影響，實(shí)現(xiàn)痛點(diǎn)精準(zhǔn)突破。（三）標(biāo)準(zhǔn)針對粉虱特性的試驗(yàn)設(shè)計優(yōu)化010201試驗(yàn)設(shè)計科學(xué)性的專家驗(yàn)證與解讀從生物學(xué)角度看，標(biāo)準(zhǔn)通過控制寄主蟲齡環(huán)境等變量，滿足生物測定的“單一變量原則”；從統(tǒng)計學(xué)角度，明確重復(fù)次數(shù)與樣本量，保障結(jié)果可靠性，其設(shè)計邏輯經(jīng)行業(yè)專家驗(yàn)證，符合科學(xué)測定規(guī)范。0102試驗(yàn)材料與儀器的精準(zhǔn)選型：從瓊脂配方到飼養(yǎng)設(shè)備，哪些參數(shù)直接決定測定結(jié)果有效性？行業(yè)趨勢下的選型指南核心材料：瓊脂的選型標(biāo)準(zhǔn)與配方要求需選用純度≥99%的瓊脂粉，凝固點(diǎn)控制在36-40℃,配方為1.5%-2.0%瓊脂水溶液（質(zhì)量體積比）。瓊脂純度不足或濃度偏差會導(dǎo)致保濕效果不佳，葉片失水或瓊脂過軟影響試蟲活動，直接降低結(jié)果有效性。（二）寄主植物的選擇原則與預(yù)處理要求選擇粉虱嗜食的健康寄主（如黃瓜番茄），要求葉片無病蟲害生長健壯，葉齡為3-5片真葉期。預(yù)處理需清洗晾干，避免葉片表面殘留水分或污染物影響藥劑附著，確保試蟲正常取食。12（三）試驗(yàn)儀器的關(guān)鍵參數(shù)與選型標(biāo)準(zhǔn)01飼養(yǎng)容器需選用透明透氣的廣口瓶（容積500-1000mL），帶透氣蓋；天平精度≥0.001g，移液器精度≥0.01mL；培養(yǎng)箱需控溫精度±1℃控濕精度±5%，光照強(qiáng)度可調(diào)節(jié)，這些參數(shù)是保證試驗(yàn)一致性的基礎(chǔ)。02行業(yè)選型趨勢：綠色化與精準(zhǔn)化發(fā)展方向未來試驗(yàn)材料將更注重環(huán)保型瓊脂替代產(chǎn)品研發(fā)，儀器向智能化升級，如帶數(shù)據(jù)記錄功能的培養(yǎng)箱自動配液設(shè)備，減少人為誤差，同時滿足綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展對試驗(yàn)過程環(huán)保性的要求。試驗(yàn)操作全流程精細(xì)化解讀：浸葉處理保濕條件控制等關(guān)鍵步驟如何規(guī)避誤差？專家手把手教你規(guī)范操作要點(diǎn)試驗(yàn)準(zhǔn)備階段的操作規(guī)范與誤差防控提前24小時調(diào)試培養(yǎng)箱至設(shè)定條件，檢查儀器精度；寄主葉片裁剪為3-5cm2大小，確保試蟲取食面積均勻；瓊脂溶液現(xiàn)配現(xiàn)用，加熱溶解后冷卻至45-50℃再倒入培養(yǎng)皿，避免溫度過高損傷葉片。12（二）浸葉處理的核心步驟與操作技巧01將葉片完全浸入藥液中，浸泡時間嚴(yán)格控制在10-15秒，期間輕輕晃動藥液，確保葉片正反面藥劑附著均勻。取出后自然瀝干30分鐘，避免藥液滴落導(dǎo)致劑量偏差，瀝干后迅速置于瓊脂培養(yǎng)基上。02（三）保濕條件控制的關(guān)鍵技術(shù)與注意事項(xiàng)01瓊脂培養(yǎng)基厚度控制在0.5-1cm，確保保濕效果；培養(yǎng)皿加蓋后留有縫隙透氣，避免濕度飽和導(dǎo)致葉片霉變；試驗(yàn)期間定期觀察瓊脂狀態(tài)，若出現(xiàn)干燥及時補(bǔ)充少量無菌水，維持濕度穩(wěn)定。02試蟲接入與飼養(yǎng)的規(guī)范操作要點(diǎn)采用毛筆輕輕接入試蟲，避免機(jī)械損傷；每培養(yǎng)皿接入試蟲數(shù)量為20-30頭，確保樣本量滿足統(tǒng)計要求；接入后迅速加蓋，放置于培養(yǎng)箱指定位置，避免搬運(yùn)過程中試蟲逃逸或受應(yīng)激影響。12供試?yán)ハx飼養(yǎng)與處理的核心要求：蟲齡一致性健康狀態(tài)把控有何秘訣？未來標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)的發(fā)展方向探析供試粉虱的蟲源選擇與純度要求蟲源需來自無藥劑污染的飼養(yǎng)種群，優(yōu)先選擇敏感品系作為對照；確保蟲源純度，避免混雜其他害蟲或天敵，必要時通過形態(tài)鑒定確認(rèn)，防止雜蟲影響試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。（二）蟲齡一致性的控制方法與判斷標(biāo)準(zhǔn)選擇同一卵塊孵化飼養(yǎng)條件一致的若蟲或成蟲，若蟲以3齡若蟲為宜，成蟲羽化時間差不超過24小時。通過體長測量形態(tài)觀察判斷蟲齡，確保試蟲生理狀態(tài)一致，減少個體差異帶來的誤差。（三）試蟲健康狀態(tài)的把控要點(diǎn)與預(yù)處理01健康試蟲應(yīng)體型飽滿活動活躍，無畸形或病害癥狀；接入試驗(yàn)前，在無藥寄主上饑餓處理4-6小時，確保試蟲取食意愿強(qiáng)烈，能快速接觸并取食帶藥葉片，保證試驗(yàn)效率。02未來標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)的發(fā)展趨勢與技術(shù)升級將引入智能化飼養(yǎng)設(shè)備，實(shí)現(xiàn)溫度濕度光照的精準(zhǔn)自動控制；建立蟲源標(biāo)準(zhǔn)化保存體系，通過低溫冷藏等技術(shù)維持蟲源穩(wěn)定性；開發(fā)人工飼料替代天然寄主，降低寄主差異對試驗(yàn)的影響。藥劑稀釋與處理的科學(xué)性：濃度梯度設(shè)置藥液穩(wěn)定性控制如何契合標(biāo)準(zhǔn)要求？熱點(diǎn)問題與解決方案深度剖析藥劑稀釋的基本原則與計算方法01遵循“倍比稀釋法”，根據(jù)藥劑預(yù)期活性設(shè)置5-7個濃度梯度，涵蓋致死劑量范圍；計算時需準(zhǔn)確換算藥劑有效成分含量，公式為：所需母液體積=（目標(biāo)濃度×目標(biāo)體積）/母液濃度，避免濃度計算錯誤。02（二）濃度梯度設(shè)置的科學(xué)依據(jù)與優(yōu)化技巧01以預(yù)試驗(yàn)結(jié)果為基礎(chǔ)，確保最低濃度死亡率接近0%，最高濃度死亡率接近100%；梯度間隔以2-5倍為宜，如1525125mg/L，便于后續(xù)毒力回歸分析；針對高活性藥劑，可采用對數(shù)梯度設(shè)置。02（三）藥液穩(wěn)定性的影響因素與控制措施藥液穩(wěn)定性受溫度光照pH值影響，需現(xiàn)配現(xiàn)用，配藥后2小時內(nèi)完成浸葉處理；避免在強(qiáng)光高溫環(huán)境下配藥，必要時加入穩(wěn)定劑；選用去離子水配藥，控制pH值在6.0-7.0之間。行業(yè)熱點(diǎn)問題與針對性解決方案熱點(diǎn)問題包括低濃度藥劑附著不均乳油類藥劑乳化不良等。解決方案：低濃度藥液中加入0.01%吐溫-80提高附著性；乳油類藥劑先加少量有機(jī)溶劑溶解，再逐步稀釋，確保乳化完全。12試驗(yàn)條件調(diào)控的關(guān)鍵技術(shù)：溫度濕度光照等環(huán)境因子如何影響試驗(yàn)準(zhǔn)確性？前瞻性解讀環(huán)境控制智能化趨勢01溫度調(diào)控的標(biāo)準(zhǔn)要求與影響機(jī)制02標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定試驗(yàn)溫度控制在25±1℃,溫度過高會加速藥劑分解，降低活性；溫度過低則抑制試蟲代謝與取食，導(dǎo)致死亡率偏低。需通過培養(yǎng)箱精準(zhǔn)控溫，避免晝夜溫差超過2℃。（二）濕度控制的核心參數(shù)與調(diào)控方法相對濕度應(yīng)保持在70%-80%，濕度過低會導(dǎo)致葉片快速失水試蟲脫水死亡；濕度過高易引發(fā)葉片霉變?？赏ㄟ^瓊脂保濕與培養(yǎng)箱加濕功能結(jié)合調(diào)控，定期監(jiān)測濕度并及時調(diào)整。（三）光照條件的規(guī)范設(shè)置與作用原理采用16L:8D（光照：黑暗）的光周期，光照強(qiáng)度為2000-3000lx。適宜光照能維持試蟲正常生理節(jié)律，促進(jìn)取食；避免強(qiáng)光直射，防止藥液光解，影響測定結(jié)果真實(shí)性。環(huán)境控制智能化趨勢與技術(shù)應(yīng)用未來將普及帶物聯(lián)網(wǎng)功能的智能培養(yǎng)箱，實(shí)現(xiàn)環(huán)境參數(shù)實(shí)時監(jiān)測與遠(yuǎn)程調(diào)控；通過傳感器數(shù)據(jù)反饋，自動調(diào)節(jié)溫濕度光照，減少人為干預(yù)；建立環(huán)境參數(shù)數(shù)據(jù)庫，實(shí)現(xiàn)試驗(yàn)條件可追溯。0102結(jié)果記錄與數(shù)據(jù)處理的規(guī)范方法：死亡率計算校正公式應(yīng)用有何講究？專家解析數(shù)據(jù)可靠性驗(yàn)證要點(diǎn)結(jié)果記錄的時間節(jié)點(diǎn)與規(guī)范要求01分別在處理后24h48h72h記錄試蟲死亡數(shù)，死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)為觸之不動無呼吸反應(yīng)；記錄時需注明每個濃度梯度的存活數(shù)死亡數(shù)，同時記錄葉片狀態(tài)環(huán)境參數(shù)，確保數(shù)據(jù)完整可追溯。02（二）死亡率與校正死亡率的計算方法死亡率（%）=（死亡蟲數(shù)/供試蟲數(shù)）×100；當(dāng)對照組死亡率在5%-20%時，需用Abbott公式校正：校正死亡率（%）=（處理組死亡率-對照組死亡率）/（1-對照組死亡率）×100，對照組死亡率超過20%需重做試驗(yàn)。（三）毒力參數(shù)計算與結(jié)果表達(dá)規(guī)范通過SPSS等軟件進(jìn)行毒力回歸分析，計算LC5?（半數(shù)致死濃度）LC9?（90%致死濃度）及置信區(qū)間；結(jié)果表達(dá)需注明藥劑名稱試蟲種類蟲齡處理時間，毒力參數(shù)保留兩位小數(shù)，確保規(guī)范性。數(shù)據(jù)可靠性驗(yàn)證的核心要點(diǎn)驗(yàn)證要點(diǎn)包括：重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果變異系數(shù)≤15%；毒力回歸方程相關(guān)系數(shù)r≥0.95；置信區(qū)間范圍合理，無異常偏離。通過多維度驗(yàn)證，確保數(shù)據(jù)真實(shí)可靠，符合標(biāo)準(zhǔn)要求。標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用場景與拓展邊界：除常規(guī)活性測定外，如何支撐抗藥性監(jiān)測新藥研發(fā)等多元需求？行業(yè)應(yīng)用熱點(diǎn)探討常規(guī)殺蟲劑活性測定的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用流程01按標(biāo)準(zhǔn)流程完成試驗(yàn)設(shè)計操作數(shù)據(jù)處理，通過LC5?值評價藥劑活性高低，為農(nóng)藥登記產(chǎn)品質(zhì)量檢測提供直接依據(jù)。應(yīng)用中需嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)要求，確保結(jié)果具有可比性。02No.1（二）抗藥性監(jiān)測中的拓展應(yīng)用與技術(shù)調(diào)整No.2通過測定田間種群與敏感品系的LC5?比值，判斷抗藥性水平（比值≥5為抗藥性）。應(yīng)用時需保持試驗(yàn)條件一致，調(diào)整濃度梯度以適配田間種群敏感性，確保監(jiān)測結(jié)果準(zhǔn)確。（三）新藥研發(fā)中的高通量篩選應(yīng)用將標(biāo)準(zhǔn)方法優(yōu)化為高通量模式，采用96孔板培養(yǎng)，自動化完成浸葉接蟲計數(shù)，提高篩選效率。適用于新藥研發(fā)初期的活性篩查，快速篩選出具有潛力的化合物，縮短研發(fā)周期。12行業(yè)應(yīng)用熱點(diǎn)與典型案例分析01當(dāng)前熱點(diǎn)包括生物農(nóng)藥活性評價混配藥劑協(xié)同作用測定等。典型案例：某生物農(nóng)藥企業(yè)采用該標(biāo)