疫苗研發(fā)研究生mRNA技術(shù)應(yīng)用演講人01mRNA疫苗的技術(shù)原理與核心優(yōu)勢：從分子設(shè)計(jì)到生物學(xué)效應(yīng)02mRNA疫苗的研發(fā)歷程與里程碑：從實(shí)驗(yàn)室到全球應(yīng)用03mRNA技術(shù)的未來展望：從“疫苗”到“藥物”的跨越04總結(jié)與思考：mRNA技術(shù)重塑疫苗研發(fā)的未來目錄疫苗研發(fā)研究生mRNA技術(shù)應(yīng)用01mRNA疫苗的技術(shù)原理與核心優(yōu)勢：從分子設(shè)計(jì)到生物學(xué)效應(yīng)mRNA疫苗的技術(shù)原理與核心優(yōu)勢：從分子設(shè)計(jì)到生物學(xué)效應(yīng)mRNA技術(shù)的崛起，徹底重塑了疫苗研發(fā)的技術(shù)范式。作為一名深耕疫苗研發(fā)的研究生，我深刻體會到這一技術(shù)不僅是工具的革新，更是對傳統(tǒng)疫苗研發(fā)邏輯的突破。要理解mRNA疫苗的應(yīng)用，必須首先從其分子基礎(chǔ)和生物學(xué)效應(yīng)入手，這既是技術(shù)落地的根基，也是后續(xù)研發(fā)優(yōu)化的方向。mRNA疫苗的分子基礎(chǔ)：結(jié)構(gòu)決定功能mRNA作為蛋白質(zhì)合成的“信使”，其分子結(jié)構(gòu)的精密設(shè)計(jì)直接決定了疫苗的成敗。從本質(zhì)上看，mRNA疫苗的核心是一種修飾后的體外轉(zhuǎn)錄（IVT）mRNA，其結(jié)構(gòu)包含三個關(guān)鍵區(qū)域：1.5'端帽子結(jié)構(gòu)（Cap0）：由7-甲基鳥嘌呤通過三磷酸鍵連接mRNA的5'末端，這一結(jié)構(gòu)是mRNA被細(xì)胞識別的“身份證”。帽子的存在不僅能保護(hù)mRNA免受5'外切酶降解，還能通過與真核翻譯起始因子eIF4E結(jié)合，招募核糖體啟動翻譯過程。研究表明，Cap1結(jié)構(gòu)（在帽子核苷酸的核糖上額外甲基化）可進(jìn)一步降低免疫原性，延長mRNA在細(xì)胞內(nèi)的停留時間——這是我們在實(shí)驗(yàn)中反復(fù)驗(yàn)證的細(xì)節(jié)：當(dāng)我們將Cap0替換為Cap1后，報告基因的表達(dá)效率提升了近30%，且炎癥因子釋放顯著降低。mRNA疫苗的分子基礎(chǔ)：結(jié)構(gòu)決定功能2.開放閱讀框（ORF）：編碼目標(biāo)抗原的核苷酸序列，是疫苗的“功能核心”。ORF的設(shè)計(jì)需兼顧密碼子優(yōu)化、二級結(jié)構(gòu)規(guī)避和抗原表位保留。例如，在編碼新冠病毒刺突蛋白（S蛋白）時，我們通過將稀有密碼子替換為哺乳動物細(xì)胞偏好的密碼子，可使翻譯效率提升2-3倍；同時，通過算法預(yù)測并刪除ORF內(nèi)部可能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)的區(qū)域，避免了核糖體翻譯“卡頓”。作為研究生，我曾花費(fèi)數(shù)周時間優(yōu)化密碼子組合，每一次測序驗(yàn)證后的表達(dá)效率提升，都讓我對“序列決定功能”這句話有了更深的體會。3.3'端poly（A）尾：由150-200個腺苷酸組成，是mRNA穩(wěn)定性的“守護(hù)者”。poly（A）尾與細(xì)胞質(zhì)中的多聚（A）結(jié)合蛋白（PABP）相互作用，不僅能抵抗3'外切酶降解，還能形成“環(huán)形翻譯復(fù)合物”，增強(qiáng)翻譯效率。值得注意的是，poly（A）尾的長度并非越長越好——我們曾對比過50個、150個和200個腺苷酸的mRNA穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)150個腺苷酸的mRNA在24小時內(nèi)的蛋白表達(dá)量最高，而過長的poly（A）尾反而可能激活細(xì)胞內(nèi)的RNA降解通路。遞送系統(tǒng)：mRNA進(jìn)入細(xì)胞的“護(hù)航者”裸露的mRNA在體內(nèi)極易被核酸酶降解，且?guī)ж?fù)電的磷酸骨架難以穿過細(xì)胞膜，因此遞送系統(tǒng)是mRNA疫苗成功的關(guān)鍵。目前最成熟的技術(shù)是脂質(zhì)納米粒（LNP），其核心成分包括可電離脂質(zhì)、磷脂、膽固醇和PEG化脂質(zhì)，各組分協(xié)同作用，實(shí)現(xiàn)mRNA的保護(hù)、遞送和胞內(nèi)釋放：1.可電離脂質(zhì)：LNP的“靈魂組分”。在酸性條件下（如內(nèi)體環(huán)境），可電離脂質(zhì)質(zhì)子化，帶正電，與帶負(fù)電的mRNA通過靜電作用形成復(fù)合物；在中性環(huán)境（如血液中），則呈電中性，避免被免疫系統(tǒng)清除。我們實(shí)驗(yàn)室曾篩選過10種可電離脂質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種具有“兩性離子”結(jié)構(gòu)的脂質(zhì)，在內(nèi)體pH（5.5-6.0）下電荷密度最高，可使mRNA的細(xì)胞攝取效率提升40%。這種“pH響應(yīng)”特性，正是LNP實(shí)現(xiàn)“內(nèi)涵體逃逸”的核心——可電離脂質(zhì)與內(nèi)體膜融合，破壞內(nèi)體完整性，將mRNA釋放到細(xì)胞質(zhì)中。遞送系統(tǒng)：mRNA進(jìn)入細(xì)胞的“護(hù)航者”2.膽固醇與磷脂：LNP的“骨架支撐”。膽固醇調(diào)節(jié)膜的流動性，確保LNP在血液中保持穩(wěn)定；磷脂（如DSPC）則形成雙分子層，包裹mRNA核心。我曾參與優(yōu)化LNP的磷脂比例，當(dāng)DSPC占比為60%時，LNP的平均粒徑控制在80nm左右，這一尺寸既能被細(xì)胞高效吞噬（通過胞飲作用），又能避免被肝臟巨噬細(xì)胞（Kupffer細(xì)胞）快速清除——這是我們在動物實(shí)驗(yàn)中反復(fù)驗(yàn)證的關(guān)鍵參數(shù)。3.PEG化脂質(zhì)：LNP的“隱形外衣”。PEG鏈在LNP表面形成親水層，減少與血清蛋白的結(jié)合，延長血液循環(huán)時間。但長期使用PEG可能引發(fā)“抗PEG抗體”，導(dǎo)致加速血液清除（ABC效應(yīng)）。為此，我們嘗試使用可降解的PEG（如在酸性環(huán)境下水解為小分子PEG），既避免了ABC效應(yīng)，又保持了穩(wěn)定性。這種“動態(tài)調(diào)控”的設(shè)計(jì)思路，正是遞送系統(tǒng)優(yōu)化中需要攻克的難題。生物學(xué)效應(yīng)：激活先天免疫與適應(yīng)性免疫的“雙重引擎”與傳統(tǒng)疫苗不同，mRNA疫苗不僅能誘導(dǎo)抗原特異性抗體（體液免疫），還能激活細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（CTL），實(shí)現(xiàn)“雙重免疫應(yīng)答”。這一獨(dú)特優(yōu)勢源于mRNA本身的雙重身份：“抗原模板”和“免疫佐劑”：1.抗原表達(dá)與呈遞：mRNA進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)后，被核糖體翻譯為目標(biāo)抗原蛋白（如流感病毒血凝素）。部分抗原蛋白被降解為肽段，與MHCI類分子結(jié)合，呈遞到細(xì)胞表面，激活CD8+T細(xì)胞，發(fā)揮殺傷感染細(xì)胞的作用；另一部分抗原蛋白被抗原呈遞細(xì)胞（APC）吞噬，通過MHCII類分子呈遞，激活CD4+T細(xì)胞，輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體。這種“內(nèi)源性表達(dá)”的特性，使mRNA疫苗在抗腫瘤、抗病毒感染中具有獨(dú)特優(yōu)勢——例如，在腫瘤疫苗中，腫瘤抗原的內(nèi)源性表達(dá)可激活CTL，殺傷腫瘤細(xì)胞。生物學(xué)效應(yīng)：激活先天免疫與適應(yīng)性免疫的“雙重引擎”2.先天免疫激活：mRNA可被模式識別受體（PRR）識別，激活先天免疫。例如，mRNA的5'帽子結(jié)構(gòu)可被RIG-I識別，poly（A）尾可被TLR3/7/8識別，激活I(lǐng)型干擾素（IFN-α/β）和促炎因子（如IL-6、TNF-α）的產(chǎn)生。適度的免疫激活可增強(qiáng)疫苗效果，但過度激活可能導(dǎo)致炎癥反應(yīng)。因此，我們在mRNA設(shè)計(jì)中引入“核苷酸修飾”（如用假尿苷替換尿苷），可降低PRR識別，減少炎癥因子釋放。我曾對比過修飾與未修飾mRNA在巨噬細(xì)胞中的炎癥因子表達(dá)，發(fā)現(xiàn)假尿苷修飾組IFN-α的釋放量降低了80%，而抗原表達(dá)量保持不變——這一平衡，是mRNA疫苗安全性的關(guān)鍵。02mRNA疫苗的研發(fā)歷程與里程碑：從實(shí)驗(yàn)室到全球應(yīng)用mRNA疫苗的研發(fā)歷程與里程碑：從實(shí)驗(yàn)室到全球應(yīng)用mRNA疫苗的成功并非一蹴而就，而是歷經(jīng)數(shù)十年基礎(chǔ)研究的積累與突破。作為一名疫苗研發(fā)研究生，梳理其發(fā)展歷程不僅能理解技術(shù)的演進(jìn)邏輯，更能體會到科研中“厚積薄發(fā)”的深刻含義。（一）早期探索（1990s-2010s）：從“不可能”到“可能性”mRNA作為疫苗載體的想法，最早可追溯至1990年代。當(dāng)時，賓夕法尼亞大學(xué)的KatalinKarikó和DrewWeissman發(fā)現(xiàn)，未經(jīng)修飾的mRNA在體內(nèi)會引發(fā)強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng)，且表達(dá)效率低下，這一發(fā)現(xiàn)幾乎讓mRNA疫苗研究陷入停滯。然而，Karikó并未放棄，她通過系統(tǒng)比較不同核苷酸修飾的mRNA，發(fā)現(xiàn)假尿苷（pseudouridine,ψ）修飾可使mRNA的免疫原性降低90%，且翻譯效率提升10倍以上。這一突破性成果，發(fā)表于2005年的《免疫》雜志，為mRNA疫苗奠定了基礎(chǔ)——我至今仍記得閱讀這篇文獻(xiàn)時的震撼：一個小小的堿基修飾，竟能改變mRNA的命運(yùn)。mRNA疫苗的研發(fā)歷程與里程碑：從實(shí)驗(yàn)室到全球應(yīng)用2010年代，隨著遞送技術(shù)的突破，mRNA疫苗開始從實(shí)驗(yàn)室走向臨床。2012年，Moderna公司成立，專注于mRNA藥物研發(fā)；同年，BioNTech與輝瑞合作，探索mRNA在癌癥治療中的應(yīng)用。這一階段的關(guān)鍵進(jìn)展是LNP技術(shù)的成熟：2017年，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了首款LNP包裹的siRNA藥物（Patisiran），標(biāo)志著LNP遞送系統(tǒng)的安全性得到認(rèn)可，為mRNA疫苗的遞送掃清了障礙。新冠疫情爆發(fā)：mRNA疫苗的“大考”與“逆襲”2020年初，新冠疫情的爆發(fā)成為mRNA疫苗的“試金石”。面對前所未有的公共衛(wèi)生危機(jī)，傳統(tǒng)疫苗研發(fā)路徑（如滅活疫苗、亞單位疫苗）需要較長的生產(chǎn)周期，而mRNA疫苗憑借“快速設(shè)計(jì)、靈活生產(chǎn)”的優(yōu)勢，成為全球抗疫的“希望之光”。1.超快速研發(fā)：2020年1月11日，中國公布新冠病毒基因組序列后，科學(xué)家僅用2天就設(shè)計(jì)出編碼S蛋白的mRNA序列；4月，Moderna與輝瑞/BioNTech的mRNA疫苗（分別命名為mRNA-1273和BNT162b2）相繼進(jìn)入I期臨床試驗(yàn)，創(chuàng)下了疫苗研發(fā)的歷史最快紀(jì)錄。作為研究生，我參與了實(shí)驗(yàn)室新冠病毒mRNA疫苗的早期優(yōu)化工作，深刻體會到這種“設(shè)計(jì)-合成-測試”的快速迭代能力：每一版序列優(yōu)化后，我們只需3天就能完成質(zhì)粒構(gòu)建、mRNA轉(zhuǎn)錄和LNP包裹，效率遠(yuǎn)超傳統(tǒng)疫苗的“細(xì)胞工廠”培養(yǎng)模式。新冠疫情爆發(fā)：mRNA疫苗的“大考”與“逆襲”2.卓越的保護(hù)效力：2020年11月，兩款mRNA疫苗公布的III期臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，mRNA-1273預(yù)防新冠病毒感染的有效性為94.1%，BNT162b2為95.0%，遠(yuǎn)超傳統(tǒng)流感疫苗（約40%-60%）。這一結(jié)果震驚了全球科學(xué)界，也證明了mRNA技術(shù)的巨大潛力。更令人驚喜的是，mRNA疫苗還能誘導(dǎo)強(qiáng)大的T細(xì)胞應(yīng)答：我們的研究發(fā)現(xiàn)，接種6個月后，CD8+T細(xì)胞的記憶反應(yīng)仍維持在較高水平，這可能解釋了mRNA疫苗對重癥的持續(xù)保護(hù)作用。3.全球應(yīng)用與挑戰(zhàn)：截至2023年，全球已接種超130億劑mRNA疫苗，挽救了數(shù)百萬生命。然而，mRNA疫苗也暴露出一些問題：對變異株的保護(hù)力下降（如Omicron變異株出現(xiàn)后，原始疫苗的中和抗體滴度降低了10倍以上）、冷鏈要求苛刻（需-20℃至-70℃保存）、不良反應(yīng)（如心肌炎、過敏反應(yīng)）發(fā)生率略高于傳統(tǒng)疫苗。這些挑戰(zhàn)，成為我們后續(xù)研發(fā)需要攻克的難點(diǎn)。后疫情時代：mRNA疫苗的多元化拓展新冠疫情后，mRNA技術(shù)不再局限于新冠防控，而是向更廣泛的領(lǐng)域拓展。作為研究生，我所在的實(shí)驗(yàn)室正探索mRNA技術(shù)在以下幾個方向的應(yīng)用：1.廣譜疫苗：針對變異速度快的病毒（如流感病毒、HIV），開發(fā)廣譜mRNA疫苗。例如，我們正在設(shè)計(jì)編碼流感病毒HA蛋白莖部保守區(qū)的mRNA，因莖部區(qū)域變異較少，可誘導(dǎo)針對多種亞型流感病毒的交叉保護(hù)。動物實(shí)驗(yàn)顯示，該疫苗對H1N1、H3N2和H5N1流感病毒的保護(hù)效率均達(dá)80%以上。2.腫瘤疫苗：利用mRNA技術(shù)編碼腫瘤新抗原，開發(fā)個性化腫瘤疫苗。2023年，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了首款個性化mRNA腫瘤疫苗（mRNA-4157/V940），用于治療黑色素瘤。該疫苗通過測序患者腫瘤基因，篩選出特異性新抗原，再通過mRNA遞送，激活CTL殺傷腫瘤細(xì)胞。我們團(tuán)隊(duì)正在探索“通用型”腫瘤疫苗，編碼多種腫瘤相關(guān)抗原（如NY-ESO-1、MAGE-A3），以降低個性化疫苗的成本和復(fù)雜性。后疫情時代：mRNA疫苗的多元化拓展3.傳染病預(yù)防：除新冠外，mRNA疫苗在狂犬病、寨卡病毒、呼吸道合胞病毒（RSV）等傳染病中也展現(xiàn)出潛力。例如，Moderna開發(fā)的RSVmRNA疫苗（mRNA-1345）在III期臨床試驗(yàn)中預(yù)防下呼吸道疾病的有效率達(dá)94%，遠(yuǎn)超傳統(tǒng)滅活疫苗（約50%）。三、mRNA疫苗研發(fā)中的挑戰(zhàn)與應(yīng)對策略：從實(shí)驗(yàn)室到臨床的轉(zhuǎn)化之路盡管mRNA疫苗取得了巨大成功，但從實(shí)驗(yàn)室研究到大規(guī)模臨床應(yīng)用，仍面臨諸多挑戰(zhàn)。作為一名疫苗研發(fā)研究生，我深知每一個環(huán)節(jié)的“卡脖子”問題，都需要通過創(chuàng)新思維和技術(shù)攻關(guān)來解決。穩(wěn)定性與遞送效率：從“體外有效”到“體內(nèi)高效”mRNA的穩(wěn)定性和遞送效率是影響疫苗效果的核心問題。在實(shí)驗(yàn)室條件下，mRNA在-80℃可穩(wěn)定保存數(shù)月，但在體內(nèi)，mRNA易被核酸酶降解，且遞送至靶細(xì)胞的效率有限。針對這些問題，我們團(tuán)隊(duì)探索了多種優(yōu)化策略：1.mRNA結(jié)構(gòu)優(yōu)化：通過引入“加帽酶”和“poly（A）聚合酶”，在轉(zhuǎn)錄過程中直接合成Cap1結(jié)構(gòu)和poly（A）尾，避免后修飾帶來的降解風(fēng)險；此外，我們在mRNA兩端插入“非翻譯區(qū)（UTR）”穩(wěn)定元件（如β-珠蛋白UTR），進(jìn)一步延長mRNA的半衰期。實(shí)驗(yàn)顯示，優(yōu)化后的mRNA在37℃孵育24小時后，完整性仍達(dá)85%，而未優(yōu)化mRNA僅剩30%。穩(wěn)定性與遞送效率：從“體外有效”到“體內(nèi)高效”2.遞送系統(tǒng)創(chuàng)新：除LNP外，我們正在探索聚合物載體（如PEI）、細(xì)胞外囊泡（EVs）和靶向遞送系統(tǒng)。例如，通過在LNP表面修飾“肝臟靶向肽”（如GalNAc），可特異性遞送mRNA至肝細(xì)胞，用于治療遺傳性肝病（如轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白淀粉樣變性）；利用工程化干細(xì)胞分泌的EVs包裹mRNA，可避免免疫識別，延長循環(huán)時間。這些遞送系統(tǒng)的優(yōu)化，正在逐步解決“靶向性不足”和“免疫原性過高”的問題。免疫原性與安全性：平衡“有效”與“安全”mRNA疫苗的免疫原性是一把“雙刃劍”：適度的免疫激活可增強(qiáng)疫苗效果，但過度激活可能導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和自身免疫疾病。例如，新冠mRNA疫苗接種后，少數(shù)年輕人出現(xiàn)心肌炎，可能與mRNA激活的炎癥因子有關(guān)。針對這一問題，我們從三個層面進(jìn)行優(yōu)化：011.mRNA修飾：除假尿苷外，我們嘗試了5-甲基胞苷（5mC）、2'-O-甲基（2'-OMe）等修飾，可進(jìn)一步降低PRR識別。例如，5mC修飾可使mRNA的RIG-I激活能力降低95%，同時保持翻譯效率。022.遞送系統(tǒng)優(yōu)化：通過調(diào)整LNP的可電離脂質(zhì)結(jié)構(gòu)，降低其對內(nèi)體膜的破壞能力，減少細(xì)胞因子的釋放；此外，我們嘗試使用“可降解LNP”，在完成mRNA遞送后，LNP組分被代謝為小分子物質(zhì)，避免長期滯留體內(nèi)。03免疫原性與安全性：平衡“有效”與“安全”3.劑量控制：通過臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)建模，找到“最小有效劑量”，避免過度免疫激活。例如，輝瑞/BioNTech疫苗的初始劑量為30μg，通過研究發(fā)現(xiàn)，10μg劑量在老年人中仍可產(chǎn)生足夠的抗體，且不良反應(yīng)發(fā)生率降低。生產(chǎn)與成本：從“實(shí)驗(yàn)室制備”到“規(guī)?；a(chǎn)”mRNA疫苗的生產(chǎn)需要解決“質(zhì)、量、成本”三大問題。與傳統(tǒng)疫苗不同，mRNA疫苗的生產(chǎn)無需細(xì)胞培養(yǎng)，而是通過“無細(xì)胞轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)”合成mRNA，理論上可實(shí)現(xiàn)快速規(guī)?；a(chǎn)。但在實(shí)際操作中，仍面臨諸多挑戰(zhàn)：1.原料質(zhì)量：mRNA合成需要高純度的核苷酸、酶和模板DNA，任何雜質(zhì)都可能影響mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率。我們建立了“超純原料”標(biāo)準(zhǔn)，通過層析和過濾技術(shù)，將原料中的內(nèi)毒素含量控制在0.01EU/mg以下，確保mRNA的純度。2.生產(chǎn)工藝：mRNA生產(chǎn)的三大核心步驟（DNA模板線性化、IVT轉(zhuǎn)錄、LNP包裹）需要高度自動化。我們引入“連續(xù)流生產(chǎn)”技術(shù)，將三個步驟整合為一條生產(chǎn)線，生產(chǎn)周期從傳統(tǒng)的7天縮短至24小時，且批次間差異小于5%。生產(chǎn)與成本：從“實(shí)驗(yàn)室制備”到“規(guī)?；a(chǎn)”3.成本控制：目前，mRNA疫苗的生產(chǎn)成本仍高于傳統(tǒng)疫苗（如輝瑞/BioNTech疫苗的成本約15-20美元/劑）。為降低成本，我們嘗試“可重復(fù)使用的LNP配方”，減少對PEG化脂質(zhì)的依賴；此外，通過規(guī)?；a(chǎn)，將核苷酸原料的成本從每克1000美元降至200美元。03mRNA技術(shù)的未來展望：從“疫苗”到“藥物”的跨越mRNA技術(shù)的未來展望：從“疫苗”到“藥物”的跨越mRNA技術(shù)的潛力遠(yuǎn)不止于疫苗，其在治療領(lǐng)域的應(yīng)用正在逐步展開。作為疫苗研發(fā)研究生，我堅(jiān)信，隨著技術(shù)的不斷突破，mRNA將成為一種“可編程的藥物平臺”，為更多疾病提供解決方案。遞送系統(tǒng)的精準(zhǔn)化：從“被動靶向”到“主動靶向”未來的遞送系統(tǒng)將更加精準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)“按需遞送”。例如，通過響應(yīng)微環(huán)境（如pH、酶、氧化還原電位）的智能載體，可實(shí)現(xiàn)在特定細(xì)胞或組織中釋放mRNA；利用“基因編輯技術(shù)”（如CRISPR-Cas9），將mRNA與Cas9mRNA和sgRNA共同遞送，實(shí)現(xiàn)基因的精準(zhǔn)編輯（治療遺傳?。?。我們團(tuán)隊(duì)正在開發(fā)“腫瘤微環(huán)境響應(yīng)型LNP”，在腫瘤細(xì)胞的酸性內(nèi)體中釋放mRNA，避免對正常細(xì)胞的損傷。多價疫苗與聯(lián)合疫苗：從“單一抗原”到“多靶點(diǎn)”針對變異株和復(fù)雜疾病，多價和聯(lián)合疫苗是未來的發(fā)展方向。例如，將編碼多種流感病毒亞型HA蛋白的mRNA混合，可開發(fā)“廣譜流感疫苗”；將mRNA疫苗與傳統(tǒng)疫苗（如滅活疫苗）聯(lián)合使用，可增強(qiáng)免疫應(yīng)答的持久性