登革熱疫苗的免疫原性提升策略綜述演講人01登革熱疫苗的免疫原性提升策略綜述02抗原設(shè)計(jì)優(yōu)化：突破免疫原性瓶頸的核心基礎(chǔ)03佐劑系統(tǒng)開(kāi)發(fā)：激活免疫應(yīng)答的“助推器”04免疫程序優(yōu)化：實(shí)現(xiàn)持久保護(hù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)05黏膜免疫誘導(dǎo)：阻斷病毒傳播的“第一道防線(xiàn)”06聯(lián)合免疫策略：提升廣譜保護(hù)的有效途徑07新型技術(shù)平臺(tái)應(yīng)用：引領(lǐng)疫苗研發(fā)的未來(lái)方向08總結(jié)與展望：邁向高效廣譜登革熱疫苗的新時(shí)代目錄01登革熱疫苗的免疫原性提升策略綜述登革熱疫苗的免疫原性提升策略綜述作為全球范圍內(nèi)快速蔓延的蚊媒傳染病，登革熱由登革病毒（DENV）引起，每年可能導(dǎo)致1億至4億感染病例，其中約50萬(wàn)例發(fā)展為重癥，如登革出血熱和登革休克綜合征。目前，登革熱疫苗的研發(fā)已成為全球公共衛(wèi)生領(lǐng)域的重點(diǎn)與難點(diǎn)，而疫苗的免疫原性——即誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答的能力，直接決定了疫苗的保護(hù)效力。然而，登革病毒的血清型多樣性（DENV-1至DENV-4）、抗體依賴(lài)增強(qiáng)作用（ADE）以及病毒本身的免疫逃逸機(jī)制，均對(duì)疫苗免疫原性提出了嚴(yán)峻挑戰(zhàn)?；诖?，本文將從抗原設(shè)計(jì)優(yōu)化、佐劑系統(tǒng)開(kāi)發(fā)、免疫程序調(diào)整、黏膜免疫誘導(dǎo)、聯(lián)合免疫策略及新型技術(shù)平臺(tái)應(yīng)用六大維度，系統(tǒng)綜述登革熱疫苗免疫原性提升的最新研究進(jìn)展與未來(lái)方向，以期為高效登革熱疫苗的研發(fā)提供理論參考與實(shí)踐指導(dǎo)。02抗原設(shè)計(jì)優(yōu)化：突破免疫原性瓶頸的核心基礎(chǔ)抗原設(shè)計(jì)優(yōu)化：突破免疫原性瓶頸的核心基礎(chǔ)抗原作為疫苗的核心組分，其結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)與免疫原性直接相關(guān)。登革病毒為單股正鏈RNA病毒，其包膜（E）蛋白是誘導(dǎo)中和抗體的主要靶點(diǎn)，但E蛋白的構(gòu)象易變性和血清型交叉反應(yīng)性，使得傳統(tǒng)滅活疫苗或減毒活疫苗難以同時(shí)誘導(dǎo)針對(duì)四個(gè)血清型的均衡保護(hù)性免疫。因此，通過(guò)抗原工程改造優(yōu)化抗原設(shè)計(jì)，已成為提升登革熱疫苗免疫原性的首要策略。1E蛋白結(jié)構(gòu)域的精準(zhǔn)修飾與穩(wěn)定化E蛋白包含三個(gè)結(jié)構(gòu)域（DI、DII、DIII），其中DII的融合環(huán)（fusionloop,FL）是病毒入侵宿主細(xì)胞的關(guān)鍵區(qū)域，也是中和抗體的主要結(jié)合位點(diǎn)。然而，F(xiàn)L區(qū)域高度保守且呈疏水性，易誘導(dǎo)非中和或亞中和抗體，從而增加ADE風(fēng)險(xiǎn)。為解決這一問(wèn)題，研究者通過(guò)結(jié)構(gòu)生物學(xué)技術(shù)（如X射線(xiàn)晶體學(xué)、冷凍電鏡）解析E蛋白三維結(jié)構(gòu)，針對(duì)FL區(qū)域進(jìn)行理性設(shè)計(jì)。例如，通過(guò)引入半胱氨酸突變（如E306-308C）形成二硫鍵，可穩(wěn)定E蛋白的天然構(gòu)象，增強(qiáng)其免疫原性；同時(shí)，在FL區(qū)域替換親水性氨基酸（如T307I），可降低其疏水性，減少非特異性抗體結(jié)合，從而提高中和抗體的特異性。1E蛋白結(jié)構(gòu)域的精準(zhǔn)修飾與穩(wěn)定化此外，DIII是血清型特異性中和抗體的主要識(shí)別區(qū)域，通過(guò)將DIII與病毒樣顆粒（VLP）載體（如乙型肝炎病毒核心抗原）融合，可呈現(xiàn)高密度的構(gòu)象表位，顯著增強(qiáng)B細(xì)胞活化與抗體親和力成熟。例如，研究表明，DENV-2DIII-VLP免疫小鼠后，誘導(dǎo)的中和抗體滴度比可溶性DIII蛋白高10倍以上，且對(duì)同型病毒的攻擊提供了完全保護(hù)。2嵌合病毒與多價(jià)抗原的協(xié)同設(shè)計(jì)針對(duì)登革病毒四型交叉免疫的特點(diǎn)，嵌合病毒疫苗成為當(dāng)前研發(fā)的主流方向之一。其核心是將一種血清型（如黃熱病毒17D減毒株）的骨架與另一種血清型的E/M蛋白基因替換，從而構(gòu)建嵌合病毒。例如，CYD-TDV（Dengvaxia?）是首個(gè)獲批的登革熱疫苗，其以黃熱病毒17D為骨架，嵌合DENV-1至DENV-4的prM/E基因，臨床數(shù)據(jù)顯示其在血清陽(yáng)性人群中總體保護(hù)效力為60.8%，但在血清陰性人群中因ADE風(fēng)險(xiǎn)僅推薦用于既往感染者。為進(jìn)一步提升四價(jià)均衡免疫原性，研究者開(kāi)發(fā)了“四嵌合”疫苗（如TAK-003，即Qdenga?），其采用DENV-2減毒株（PDK-53）為骨架，嵌合DENV-1、DENV-3、DENV-4的prM/E基因。II期臨床試驗(yàn)顯示，TAK-003在2-12歲兒童中誘導(dǎo)的四價(jià)中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率均超過(guò)95%，2嵌合病毒與多價(jià)抗原的協(xié)同設(shè)計(jì)且對(duì)重癥的保護(hù)效力達(dá)90%以上。此外，多價(jià)亞單位疫苗（如重組E蛋白四價(jià)混合物）通過(guò)優(yōu)化各血清型抗原比例，可避免“免疫優(yōu)勢(shì)偏差”（即某一血清型抗原過(guò)度競(jìng)爭(zhēng)免疫應(yīng)答資源），從而實(shí)現(xiàn)四價(jià)免疫的均衡性。3免疫原性表位聚焦與改造表位疫苗是抗原設(shè)計(jì)的另一前沿方向，通過(guò)篩選并優(yōu)化B細(xì)胞表位和T細(xì)胞表位，可精準(zhǔn)誘導(dǎo)靶向免疫應(yīng)答。例如，針對(duì)DENV的T細(xì)胞表位（如E蛋白中的HLA-A02:01限制性表位），通過(guò)引入突變?cè)鰪?qiáng)其與MHC分子的親和力，可提高CD8+T細(xì)胞的活化效率；同時(shí)，將B細(xì)胞表位（如DIII區(qū)的關(guān)鍵中和表位）與載體蛋白（如破傷風(fēng)類(lèi)毒素）偶聯(lián)，可增強(qiáng)表位的免疫原性。值得注意的是，表位設(shè)計(jì)需兼顧“廣譜性”與“安全性”。例如，DENV的保守表位（如E蛋白的莖區(qū)）雖可誘導(dǎo)交叉中和抗體，但可能因抗體親和力不足而無(wú)法有效阻斷病毒入侵；而高變異性表位雖具血清型特異性，但易因病毒變異導(dǎo)致免疫逃逸。因此，通過(guò)計(jì)算免疫學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)合體外篩選，構(gòu)建“保守-高變”嵌合表位，成為平衡廣譜性與特異性的有效途徑。03佐劑系統(tǒng)開(kāi)發(fā)：激活免疫應(yīng)答的“助推器”佐劑系統(tǒng)開(kāi)發(fā)：激活免疫應(yīng)答的“助推器”佐劑是通過(guò)增強(qiáng)抗原提呈、激活免疫細(xì)胞或延長(zhǎng)抗原滯留時(shí)間，從而提升疫苗免疫原性的非特異性免疫增強(qiáng)劑。登革熱疫苗因抗原復(fù)雜且需誘導(dǎo)強(qiáng)效體液與細(xì)胞免疫，對(duì)佐劑的選擇尤為關(guān)鍵。傳統(tǒng)佐劑（如氫氧化鋁）雖安全性高，但僅能誘導(dǎo)Th2型免疫應(yīng)答，難以有效激活細(xì)胞免疫；而新型佐劑則通過(guò)模擬病原體相關(guān)分子模式（PAMPs），激活固有免疫，從而增強(qiáng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答。1水佐劑與油乳佐劑的協(xié)同應(yīng)用鋁佐劑是最早被應(yīng)用于疫苗的傳統(tǒng)佐劑，其主要通過(guò)促進(jìn)抗原提呈細(xì)胞（APC）吞噬、延緩抗原釋放，增強(qiáng)抗體應(yīng)答。然而，鋁佐劑對(duì)細(xì)胞免疫的誘導(dǎo)能力有限，因此在登革熱疫苗中常與其他佐劑聯(lián)用。例如，AS03（α-生育酚與角鯊烯的油水乳劑）與鋁佐劑聯(lián)合使用時(shí)，可顯著增強(qiáng)樹(shù)突狀細(xì)胞（DC）的成熟與抗原提呈功能，促進(jìn)Th1/Th17型免疫應(yīng)答。研究表明，含AS03的嵌合登革熱疫苗在動(dòng)物模型中誘導(dǎo)的中和抗體滴度較鋁佐劑組高3-5倍，且CD8+T細(xì)胞數(shù)量增加2倍以上。MF59（含單磷酰脂質(zhì)AA的油乳佐劑）則通過(guò)激活TLR4信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥因子（如IL-6、TNF-α）分泌，增強(qiáng)APC的遷移與T細(xì)胞活化。目前，MF89已應(yīng)用于流感疫苗，其在登革熱疫苗中的初步顯示，可顯著提高血清陰性人群的抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率，并降低ADE風(fēng)險(xiǎn)。2TLR激動(dòng)劑與STING激動(dòng)劑的精準(zhǔn)調(diào)控模式識(shí)別受體（PRR）激動(dòng)劑是當(dāng)前新型佐劑研發(fā)的熱點(diǎn)，其通過(guò)激活固有免疫的關(guān)鍵通路，誘導(dǎo)強(qiáng)效且持久的適應(yīng)性免疫。TLR3激動(dòng)劑（如聚I:C）可模擬病毒dsRNA，激活MDA5和RIG-I通路，誘導(dǎo)I型干擾素（IFN-α/β）產(chǎn)生，從而增強(qiáng)DC成熟與交叉提呈功能；TLR7/8激動(dòng)劑（如R848）則通過(guò)激活MyD88通路，促進(jìn)B細(xì)胞增殖與抗體類(lèi)別轉(zhuǎn)換。例如，將TLR3激動(dòng)劑與重組E蛋白聯(lián)合免疫小鼠，可誘導(dǎo)高滴度的交叉中和抗體及IFN-γ+CD8+T細(xì)胞，對(duì)四種血清型的攻擊均提供保護(hù)。STING（干擾素基因刺激因子）激動(dòng)劑（如cGAMP）則通過(guò)激活cGAS-STING通路，誘導(dǎo)I型干擾素與趨化因子分泌，增強(qiáng)DC與T細(xì)胞的浸潤(rùn)。研究表明，STING激動(dòng)劑可顯著提高登革熱疫苗在黏膜部位的免疫原性，誘導(dǎo)黏膜IgA抗體分泌，從而阻斷病毒入侵與傳播。3納米佐劑與靶向遞送系統(tǒng)的構(gòu)建納米佐劑通過(guò)控制抗原與佐劑的釋放動(dòng)力學(xué)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)的免疫調(diào)控。例如，脂質(zhì)體納米粒可包裹抗原與TLR激動(dòng)劑，通過(guò)表面修飾甘露糖靶向DC表面的甘露糖受體，提高抗原提呈效率；聚合物納米粒（如PLGA）則可實(shí)現(xiàn)抗原的緩釋?zhuān)娱L(zhǎng)免疫刺激時(shí)間。此外，外泌體作為天然納米載體，可攜帶抗原與免疫刺激分子，通過(guò)其表面黏附分子靶向淋巴結(jié)中的APC，從而降低佐劑用量并提高安全性。例如，一項(xiàng)研究將DENVE蛋白與TLR9激動(dòng)劑CpG包裹于陽(yáng)離子脂質(zhì)體中，經(jīng)皮下注射后，小鼠血清中特異性IgG滴度較游離抗原組提高10倍，且記憶B細(xì)胞數(shù)量增加5倍，為納米佐劑在登革熱疫苗中的應(yīng)用提供了有力證據(jù)。04免疫程序優(yōu)化：實(shí)現(xiàn)持久保護(hù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)免疫程序優(yōu)化：實(shí)現(xiàn)持久保護(hù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)疫苗的免疫程序（包括接種途徑、劑量間隔、加強(qiáng)針策略等）直接影響免疫原性的強(qiáng)度與持久性。登革熱疫苗因需誘導(dǎo)四價(jià)均衡免疫且避免ADE，其免疫程序的設(shè)計(jì)需綜合考慮年齡、免疫狀態(tài)及病毒血清型特點(diǎn)。1基礎(chǔ)免疫與加強(qiáng)針的協(xié)同策略基礎(chǔ)免疫（通常為2-3劑）旨在激活初始免疫應(yīng)答，而加強(qiáng)針則通過(guò)重復(fù)抗原刺激，促進(jìn)記憶細(xì)胞分化與抗體親和力成熟。對(duì)于登革熱疫苗，兩劑基礎(chǔ)免疫（0、6個(gè)月）可誘導(dǎo)較高的抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率，但抗體滴度在12個(gè)月后顯著下降；而在此基礎(chǔ)上增加一劑加強(qiáng)針（如0、6、12個(gè)月），可使抗體滴度維持至少24個(gè)月，且對(duì)重癥的保護(hù)效力提升至80%以上。值得注意的是，血清狀態(tài)（即是否曾感染登革病毒）是免疫程序設(shè)計(jì)的關(guān)鍵變量。對(duì)于血清陰性人群，兩劑基礎(chǔ)免疫可能因ADE風(fēng)險(xiǎn)不足，需采用“低劑量-多劑次”策略（如0、3、6個(gè)月三劑），逐步誘導(dǎo)平衡的免疫應(yīng)答；而對(duì)于血清陽(yáng)性人群，兩劑免疫即可產(chǎn)生高效保護(hù)。因此，基于血清學(xué)檢測(cè)的個(gè)體化免疫程序，是未來(lái)登革熱疫苗應(yīng)用的重要方向。2不同接種途徑的免疫原性差異接種途徑?jīng)Q定了抗原的遞送部位與免疫誘導(dǎo)類(lèi)型。傳統(tǒng)皮下注射或肌肉注射可誘導(dǎo)全身性免疫應(yīng)答，但抗原易被血液快速清除；而黏膜接種（如鼻噴、口服）則可在黏膜部位（如呼吸道、腸道）分泌IgA抗體，形成“第一道防線(xiàn)”，同時(shí)誘導(dǎo)系統(tǒng)性免疫。例如，鼻噴登革熱疫苗（以腺病毒為載體）可在小鼠呼吸道黏膜中分泌IgA，血清中和抗體滴度與肌肉注射相當(dāng)，且對(duì)黏膜病毒攻擊的保護(hù)效力更高。此外，皮內(nèi)接種因皮膚富含DC，可提高抗原提呈效率，從而降低抗原用量。研究表明，皮內(nèi)接種1/10劑量的嵌合登革熱疫苗，即可誘導(dǎo)與皮下接種等效的抗體滴度，為資源有限地區(qū)的疫苗推廣提供了可能。3特殊人群的免疫程序調(diào)整兒童、老年人及免疫缺陷者是登革熱的高危人群，但其免疫應(yīng)答能力與普通人群存在差異。對(duì)于兒童（尤其是2-5歲），因免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育完全，需采用“低劑量-多劑次”策略，同時(shí)結(jié)合新型佐劑（如AS03）以增強(qiáng)免疫原性；而對(duì)于老年人，因免疫衰老導(dǎo)致T細(xì)胞功能下降，需增加加強(qiáng)針頻率（如每3年一劑）以維持保護(hù)效力。對(duì)于HIV感染者等免疫缺陷人群，登革熱疫苗的安全性是首要考慮因素。目前，滅活疫苗因其不含活病毒，被認(rèn)為是相對(duì)安全的選擇，但其免疫原性可能因免疫抑制而降低。因此，針對(duì)此類(lèi)人群，需開(kāi)發(fā)高抗原濃度、強(qiáng)效佐劑的疫苗，并通過(guò)定期監(jiān)測(cè)抗體水平調(diào)整免疫程序。05黏膜免疫誘導(dǎo)：阻斷病毒傳播的“第一道防線(xiàn)”黏膜免疫誘導(dǎo)：阻斷病毒傳播的“第一道防線(xiàn)”登革病毒通過(guò)蚊蟲(chóng)叮咬經(jīng)皮膚侵入人體，最初在局部皮膚組織復(fù)制，隨后進(jìn)入血液循環(huán)。因此，誘導(dǎo)黏膜免疫（如皮膚黏膜、呼吸道黏膜）可在病毒入侵部位產(chǎn)生中和抗體（IgA）與效應(yīng)T細(xì)胞，阻斷病毒擴(kuò)散與傳播。然而，傳統(tǒng)肌肉注射疫苗主要誘導(dǎo)系統(tǒng)性免疫，對(duì)黏膜部位的免疫保護(hù)有限，因此黏膜免疫誘導(dǎo)成為登革熱疫苗免疫原性提升的重要方向。1黏膜疫苗的遞送系統(tǒng)優(yōu)化黏膜疫苗需克服黏膜屏障（如酶降解、黏液清除）才能到達(dá)免疫誘導(dǎo)部位，因此遞送系統(tǒng)的設(shè)計(jì)至關(guān)重要。病毒載體（如腺病毒、流感病毒）因具有天然的黏膜嗜性，是黏膜疫苗的理想載體。例如，以復(fù)制缺陷型腺病毒為載體，攜帶DENVE基因的鼻噴疫苗，可在小鼠呼吸道黏膜中誘導(dǎo)IgA抗體，并激活黏膜組織中的記憶B細(xì)胞，對(duì)鼻內(nèi)攻擊的DENV提供完全保護(hù)。此外，納米載體（如殼聚糖、脂質(zhì)體）可通過(guò)正電荷與黏膜上皮細(xì)胞的負(fù)電荷結(jié)合，增強(qiáng)黏附與滲透性；而細(xì)菌外膜囊泡（OMVs）則可作為天然納米載體，攜帶抗原與佐劑，通過(guò)M細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)至黏膜下淋巴組織，激活免疫應(yīng)答。例如，將DENVE蛋白與CpG包裹于殼聚糖納米粒中，經(jīng)鼻黏膜免疫后，小鼠肺組織中的IgA抗體滴度較肌肉注射組高5倍，且血清中和抗體滴度顯著提升。2黏膜佐劑的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用黏膜免疫需強(qiáng)效佐劑以克服黏膜的免疫耐受性。其中，霍亂毒素B亞基（CTB）和熱不穩(wěn)定腸毒素（LT）是經(jīng)典的黏膜佐劑，通過(guò)結(jié)合GM1神經(jīng)節(jié)苷脂，增強(qiáng)抗原提呈細(xì)胞的吞噬與轉(zhuǎn)運(yùn)能力；然而，其神經(jīng)毒性限制了臨床應(yīng)用。為解決這一問(wèn)題，研究者開(kāi)發(fā)了CTB/LT突變體（如CTB-E51D、LT-R192G），在保留佐劑活性的同時(shí)顯著降低毒性。例如，CTB-E51D與DENVE蛋白聯(lián)合鼻噴免疫小鼠，可誘導(dǎo)高滴度的黏膜IgA與血清IgG，并對(duì)DENV攻擊提供80%的保護(hù)效力。此外，TLR激動(dòng)劑（如TLR9激動(dòng)劑CpG、TLR3激動(dòng)劑聚I:C）也可作為黏膜佐劑，通過(guò)激活固有免疫增強(qiáng)黏膜免疫應(yīng)答。例如，聚I:C與重組E蛋白聯(lián)合鼻噴，可誘導(dǎo)小鼠呼吸道黏膜中的IFN-γ分泌，增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒性，從而有效清除病毒感染的細(xì)胞。3黏膜免疫與系統(tǒng)性免疫的協(xié)同效應(yīng)黏膜免疫與系統(tǒng)性免疫并非相互獨(dú)立，而是通過(guò)“共同黏膜免疫系統(tǒng)（CMIS）”相互協(xié)調(diào)。例如，鼻黏膜免疫后，活化的淋巴細(xì)胞可經(jīng)血液循環(huán)遷移至遠(yuǎn)端黏膜部位（如生殖道、腸道），產(chǎn)生廣泛的黏膜保護(hù)；同時(shí)，黏膜IgA可經(jīng)黏膜上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)至黏膜表面，與病毒結(jié)合，阻斷其入侵靶細(xì)胞。研究表明，鼻黏膜免疫聯(lián)合肌肉注射（即“prime-boost”策略）可顯著增強(qiáng)免疫原性：先通過(guò)鼻黏膜免疫誘導(dǎo)初始黏膜免疫，再通過(guò)肌肉注射加強(qiáng)系統(tǒng)性免疫，可同時(shí)產(chǎn)生高滴度的黏膜IgA與血清中和抗體，且抗體持續(xù)時(shí)間顯著延長(zhǎng)。例如，以腺病毒載體鼻黏膜免疫后，再用重組E蛋白肌肉注射加強(qiáng)，小鼠血清中和抗體滴度較單一免疫組高3倍，且對(duì)致死量DENV攻擊的生存率達(dá)100%。06聯(lián)合免疫策略：提升廣譜保護(hù)的有效途徑聯(lián)合免疫策略：提升廣譜保護(hù)的有效途徑登革病毒與黃熱病毒、寨卡病毒（ZIKV）、基孔肯雅熱病毒（CHIKV）同屬黃病毒科，其E蛋白存在一定的交叉抗原性。此外，登革流行地區(qū)常存在多種蟲(chóng)媒病毒共流行，因此開(kāi)發(fā)聯(lián)合疫苗可同時(shí)預(yù)防多種疾病，減少接種次數(shù)，提高依從性，并通過(guò)交叉免疫增強(qiáng)登革熱疫苗的免疫原性。1黃熱病-登革熱聯(lián)合疫苗黃熱病與登革熱在流行區(qū)域（如非洲、拉丁美洲）存在重疊，且均為蚊媒傳播，聯(lián)合疫苗的研發(fā)具有公共衛(wèi)生意義。目前，以黃熱病毒17D減毒株為骨架，嵌合DENV-2prM/E基因的疫苗（如YF-DENV）已進(jìn)入臨床試驗(yàn)。結(jié)果顯示，YF-D免疫后可同時(shí)誘導(dǎo)黃熱病毒中和抗體與DENV-2中和抗體，且兩種抗體的陽(yáng)轉(zhuǎn)率均達(dá)90%以上，無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)。為進(jìn)一步擴(kuò)展四價(jià)覆蓋，研究者開(kāi)發(fā)了“黃熱病-四價(jià)登革”嵌合疫苗，即在YF-D基礎(chǔ)上嵌合DENV-1、DENV-3、DENV-4的prM/E基因。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示，該疫苗可誘導(dǎo)針對(duì)五種病毒的中和抗體，且對(duì)DENV的攻擊保護(hù)效力與單價(jià)登革疫苗相當(dāng)，為聯(lián)合疫苗的研發(fā)提供了新思路。2寨卡病毒-登革熱聯(lián)合疫苗寨卡病毒與登革病毒存在血清學(xué)交叉反應(yīng)，且寨卡感染可導(dǎo)致小頭畸形等嚴(yán)重并發(fā)癥，因此在登革流行地區(qū)，寨卡-登革聯(lián)合疫苗具有重要價(jià)值。例如，以腺病毒為載體，同時(shí)表達(dá)ZIKVE蛋白與DENVE蛋白的疫苗，可在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)針對(duì)兩種病毒的中和抗體，且交叉反應(yīng)性抗體無(wú)明顯干擾。此外，mRNA疫苗平臺(tái)因其快速、靈活的特點(diǎn)，適用于聯(lián)合疫苗開(kāi)發(fā)：將ZIKVEmRNA與四價(jià)DENVEmRNA混合后脂質(zhì)體包裹，經(jīng)肌肉注射免疫，可誘導(dǎo)高滴度的雙價(jià)中和抗體，且對(duì)兩種病毒的攻擊均提供保護(hù)。3多聯(lián)疫苗的免疫原性平衡聯(lián)合疫苗需解決各組分間的免疫原性平衡問(wèn)題，避免“免疫競(jìng)爭(zhēng)”（即某一組分過(guò)度消耗免疫資源，導(dǎo)致其他組分免疫應(yīng)答低下）。例如，在黃熱病-登革熱聯(lián)合疫苗中，通過(guò)調(diào)整嵌合病毒的E蛋白表達(dá)量，可使黃熱病毒與登革病毒的抗體滴度達(dá)到均衡；而在多價(jià)亞單位疫苗中，通過(guò)優(yōu)化各血清型抗原的物理混合比例（如DENV-1:DENV-2:DENV-3:DENV-4=1:1:1:1），可避免“免疫優(yōu)勢(shì)偏差”，確保四價(jià)免疫的均衡性。此外，佐劑的選擇對(duì)聯(lián)合疫苗的免疫原性至關(guān)重要。例如，TLR激動(dòng)劑可同時(shí)激活多種病原體的免疫應(yīng)答，適用于聯(lián)合疫苗；而鋁佐劑則可能導(dǎo)致不同抗原的吸附效率差異，需通過(guò)佐劑-抗原比例優(yōu)化來(lái)解決。07新型技術(shù)平臺(tái)應(yīng)用：引領(lǐng)疫苗研發(fā)的未來(lái)方向新型技術(shù)平臺(tái)應(yīng)用：引領(lǐng)疫苗研發(fā)的未來(lái)方向隨著生物技術(shù)的快速發(fā)展，新型疫苗技術(shù)平臺(tái)（如mRNA、DNA病毒載體、合成生物學(xué)等）為登革熱疫苗免疫原性提升提供了全新工具。這些平臺(tái)具有設(shè)計(jì)靈活、生產(chǎn)快速、安全性高等優(yōu)勢(shì)，在應(yīng)對(duì)病毒變異與突發(fā)疫情中展現(xiàn)出巨大潛力。1mRNA疫苗：快速設(shè)計(jì)與高效表達(dá)mRNA疫苗通過(guò)將編碼抗原的mRNA遞送至細(xì)胞內(nèi)，利用宿主細(xì)胞的翻譯系統(tǒng)表達(dá)抗原，從而誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。其核心優(yōu)勢(shì)在于可快速響應(yīng)病毒變異：一旦病毒基因序列解析完成，即可在數(shù)周內(nèi)設(shè)計(jì)出候選疫苗。例如，Moderna與IAVI合作開(kāi)發(fā)的mRNA-1815疫苗，編碼DENV-1至DENV-4的M-E蛋白，在I期臨床試驗(yàn)中，兩劑免疫后四價(jià)中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)100%，且抗體滴度顯著高于自然感染人群。為提高mRNA疫苗的免疫原性，研究者通過(guò)優(yōu)化核苷酸修飾（如假尿苷修飾）降低mRNA的免疫原性，減少炎癥反應(yīng)；同時(shí)，通過(guò)脂質(zhì)納米粒（LNP）的表面修飾（如PEG化、靶向肽），增強(qiáng)mRNA的遞送效率與細(xì)胞靶向性。此外，自擴(kuò)增mRNA（saRNA）可在細(xì)胞內(nèi)自我復(fù)制，僅需低劑量即可誘導(dǎo)強(qiáng)效免疫，為登革熱疫苗的減量增效提供了可能。2DNA疫苗：穩(wěn)定存儲(chǔ)與遞送優(yōu)化DNA疫苗是將編碼抗原的質(zhì)粒DNA通過(guò)肌肉注射或基因槍遞送至體內(nèi)，被細(xì)胞攝取后表達(dá)抗原，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。其優(yōu)勢(shì)在于穩(wěn)定性高、易于儲(chǔ)存運(yùn)輸，且無(wú)整合風(fēng)險(xiǎn)。然而，DNA疫苗的免疫原性較弱，需借助遞送系統(tǒng)與佐劑優(yōu)化。例如，通過(guò)電穿孔技術(shù)可提高DNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取效率，增強(qiáng)抗原表達(dá)；而將編碼E蛋白的DNA質(zhì)粒與TLR9激動(dòng)劑CpG聯(lián)合免疫，可顯著提高中和抗體滴度與細(xì)胞免疫應(yīng)答。目前，VRC-DEN501（編碼DENV-1至DENV-4的prM-E蛋白）已進(jìn)入II期臨床試驗(yàn)，結(jié)果顯示，兩劑免疫后四價(jià)中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率為75%-90%，且加強(qiáng)針后抗體滴度進(jìn)一步提升，表明DNA疫苗在登革熱免疫原性提升中具有應(yīng)用潛力。3合成生物學(xué)與病毒樣顆粒（VLP）合成生物學(xué)通過(guò)設(shè)計(jì)與構(gòu)建人工生物系統(tǒng)，可精確調(diào)控病毒抗原的結(jié)構(gòu)與免疫原性。VLP是病毒的結(jié)構(gòu)模擬物，不含病毒遺傳物質(zhì)，安全性高，且可呈現(xiàn)高密度的構(gòu)象表位，有效激活B細(xì)胞。例如，通過(guò)酵母表達(dá)系統(tǒng)組裝的DENVVLP，其E蛋白的構(gòu)象與天然病毒高度相似，免疫后可