第一二三代測序技術(shù)20XX匯報人：XX目錄0102030405第一代測序技術(shù)第二代測序技術(shù)第三代測序技術(shù)測序技術(shù)的比較測序技術(shù)的發(fā)展趨勢測序技術(shù)的臨床應(yīng)用06第一代測序技術(shù)PARTONESanger測序原理ddNTP缺乏3'-OH，摻入后終止DNA鏈延伸，產(chǎn)生不同長度片段。鏈終止機制通過凝膠或毛細管電泳分離片段，按長度排序確定終止位置。電泳分離根據(jù)末端ddNTP類型及片段長度，從短到長依次確定堿基順序。序列讀取Sanger測序應(yīng)用用于單基因遺傳病診斷及腫瘤個體化用藥指導(dǎo)臨床診斷作為NGS結(jié)果驗證的金標(biāo)準(zhǔn)，確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性科研驗證應(yīng)用于微生物/真菌分類及病毒分型檢測微生物鑒定Sanger測序局限通量低成本高單次僅測短序列，全基因組測序成本超千萬美元生物學(xué)偏好性克隆困難區(qū)域易缺失，如著絲粒和端粒附近靈敏度有限制低豐度變異難檢測，如體細胞嵌合體第二代測序技術(shù)PARTTWO高通量測序原理01邊合成邊測序通過可逆終止末端實現(xiàn)，捕捉新添加堿基的熒光信號確定DNA序列。02橋式PCR擴增單鏈DNA與流動槽表面引物雜交，經(jīng)橋式PCR擴增形成DNA簇，增強信號。平臺技術(shù)比較邊合成邊測序，讀長短但通量高，成本低，適合大規(guī)模測序。Illumina平臺半導(dǎo)體測序，無需光學(xué)系統(tǒng)，適合擴增子測序，快速便捷。IonTorrent平臺第二代測序優(yōu)勢單次測序可獲數(shù)G數(shù)據(jù)，單位堿基成本低至0.01-0.1美元/Gb高通量低成本適用于全基因組測序、疾病研究、農(nóng)業(yè)育種等多領(lǐng)域應(yīng)用場景廣單堿基錯誤率低至0.1%以下，保障測序結(jié)果可靠性高準(zhǔn)確性第三代測序技術(shù)PARTTHREE單分子實時測序平均讀長超10kb，最高達2Mb，解決基因組重復(fù)區(qū)域和結(jié)構(gòu)變異難題。超長讀長優(yōu)勢支持實時數(shù)據(jù)生成與分析，動態(tài)調(diào)整實驗參數(shù)，適用于時間敏感型生物學(xué)問題。實時動態(tài)監(jiān)測第三代技術(shù)特點讀長可達數(shù)千至百萬堿基，減少拼接成本長讀長優(yōu)勢無需擴增，直接檢測DNA/RNA修飾及甲基化直接檢測修飾設(shè)備輕便，可實時快速獲得序列信息實時便攜測序應(yīng)用領(lǐng)域拓展長讀長助力復(fù)雜基因組拼接，提升組裝完整性。基因組研究提高微生物群落物種和基因功能注釋準(zhǔn)確性。宏基因組學(xué)精準(zhǔn)檢測結(jié)構(gòu)變異，助力罕見病與癌癥早篩。臨床診斷010203測序技術(shù)的比較PARTFOUR測序速度對比速度慢，需數(shù)周完成一代測序速度快，數(shù)天至一周二代測序速度最快，實時測序三代測序成本效益分析單樣本成本約3000元，準(zhǔn)確度高但通量低，適合小樣本驗證。一代測序成本01單樣本成本5000-8000元，通量高，適合大規(guī)?；蚪M測序。二代測序成本02單樣本成本100-200美元，讀長長，適合復(fù)雜區(qū)域測序。三代測序成本03精確度與誤差率原始準(zhǔn)確率高達99.99%，是臨床診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。一代測序單分子讀取錯誤率約10%-15%，需結(jié)合二代數(shù)據(jù)提高準(zhǔn)確性。三代測序單次讀取準(zhǔn)確率約98%，30×覆蓋可提升至99.9%以上。二代測序測序技術(shù)的發(fā)展趨勢PARTFIVE技術(shù)創(chuàng)新方向通過優(yōu)化測序反應(yīng)與算法，降低單分子測序錯誤率，提升測序精度。提升測序準(zhǔn)確性研發(fā)新技術(shù)突破讀長限制，實現(xiàn)超長序列連續(xù)讀取，簡化基因組組裝。延長測序讀長改進測序儀器與試劑，提高測序通量，推動測序技術(shù)普及應(yīng)用。降低測序成本行業(yè)應(yīng)用前景01精準(zhǔn)醫(yī)療突破三代測序助力腫瘤早篩與個性化用藥，推動臨床診斷革新02科研領(lǐng)域深化長讀長測序破解復(fù)雜基因組，加速物種進化與表觀遺傳研究生物信息學(xué)挑戰(zhàn)現(xiàn)有算法對復(fù)雜生物學(xué)情境適應(yīng)性差，需持續(xù)優(yōu)化不同組學(xué)數(shù)據(jù)差異大，建立可比對齊關(guān)系是關(guān)鍵海量測序數(shù)據(jù)帶來存儲與計算瓶頸，需高性能計算支持?jǐn)?shù)據(jù)規(guī)模龐大多組學(xué)整合難算法魯棒性弱測序技術(shù)的臨床應(yīng)用PARTSIX疾病診斷與治療通過全外顯子組測序，精準(zhǔn)診斷單基因遺傳病，如血友病、白化病等。遺傳病篩查01利用NGS技術(shù)檢測腫瘤突變基因，指導(dǎo)靶向藥物選擇，如EGFR突變檢測。腫瘤精準(zhǔn)治療02基因組學(xué)研究用于基因克隆驗證、單基因病診斷，如遺傳性血液病檢測。一代測序應(yīng)用實現(xiàn)大規(guī)?；蚪M測序，用于無創(chuàng)產(chǎn)前、腫瘤基因檢測。二代測序應(yīng)用長讀長助力復(fù)雜基因組拼接，檢測大片段結(jié)構(gòu)變異。三代測序應(yīng)用