高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1安徽省A10聯(lián)盟2024—2025學(xué)年高二下學(xué)期期中考試一、選擇題（本大題共15小題，每小題3分，共45分。每小題的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題目要求的）1.下列關(guān)于細(xì)胞工程的說(shuō)法正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理都是細(xì)胞的全能性B.PEG既可以用于動(dòng)物細(xì)胞融合，也能夠用于植物體細(xì)胞雜交C.懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因接觸抑制而分裂受阻D.抗體—藥物偶聯(lián)物主要利用其中的抗體殺死腫瘤細(xì)胞【答案】B〖祥解〗（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。（2）植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株．植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。（3）體細(xì)胞核移植：又稱(chēng)體細(xì)胞克隆，作為動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的常用技術(shù)手段，即把體細(xì)胞移入去核卵母細(xì)胞中，使其重組并能發(fā)育為新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體．用核移植方法獲得的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。【詳析】A、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；B、PEG既可以用于動(dòng)物細(xì)胞融合，也能夠用于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中原生質(zhì)體的融合，B正確；C、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因密度過(guò)大、有害代謝物積累而分裂受阻，貼壁細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；D、抗體一藥物偶聯(lián)物主要利用其上的抗體結(jié)構(gòu)來(lái)識(shí)別腫瘤細(xì)胞，起殺傷作用的是其上偶聯(lián)的藥物，D錯(cuò)誤。故選B。2.毛狀根是植物感染發(fā)根農(nóng)桿菌（其T﹣DNA含有生長(zhǎng)素合成基因）后產(chǎn)生的病理結(jié)構(gòu)，在生產(chǎn)某些次生代謝物方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。如圖為利用植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行次生代謝物生產(chǎn)的流程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3-1/2插入培養(yǎng)基B.培養(yǎng)體系1制備過(guò)程中導(dǎo)入外源基因可采用PEG介導(dǎo)法或花粉管通道法C.與培養(yǎng)體系1和2不同，培養(yǎng)體系3的獲得不需要添加外源植物激素D.培養(yǎng)體系1和3的制備都利用了基因重組原理，且可產(chǎn)生相同代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，整個(gè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，外植體需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。這樣既考慮了藥劑的消毒效果，又考慮了植物的耐受能力?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3-1/2插入培養(yǎng)基，這樣的操作可以為外植體提供合適的生長(zhǎng)環(huán)境，使其更好地脫分化形成愈傷組織，A正確；B、培養(yǎng)體系1是轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系，制備過(guò)程中導(dǎo)入外源基因可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法等，而PEG介導(dǎo)法常用于原生質(zhì)體的融合，不用于轉(zhuǎn)基因。花粉管通道法是將目的基因?qū)胫仓曛械氖荏w細(xì)胞，但在該情境下，沒(méi)有完整植株，所以不采用這種方法，B錯(cuò)誤；C、發(fā)根農(nóng)桿菌的T-DNA含有生長(zhǎng)素合成基因，被其誘導(dǎo)產(chǎn)生的毛狀根自身可以合成生長(zhǎng)素，所以與培養(yǎng)體系1和2不同，培養(yǎng)體系3（毛狀根培養(yǎng)體系）的獲得不需要添加外源植物激素，C正確；D、培養(yǎng)體系1是通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系，原理是基因重組。培養(yǎng)體系3是利用發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根，農(nóng)桿菌的T-DNA會(huì)整個(gè)到受體染色體上，利用了基因重組原理。并且培養(yǎng)體系1和3都可用于生產(chǎn)某些次生代謝物，有可能產(chǎn)生相同代謝產(chǎn)物，D正確。故選B。3.谷氨酸棒狀桿菌生長(zhǎng)的最適pH為7.0，發(fā)酵工程中通過(guò)以下代謝途徑發(fā)酵生產(chǎn)L-谷氨酰胺。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行發(fā)酵，其中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵B.發(fā)酵初期控制pH為7.0，后調(diào)為5.6，有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量C.提高谷氨酸脫氫酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量D.發(fā)酵結(jié)束后，采用適當(dāng)?shù)奶崛?、分離和純化措施可獲得L-谷氨酰胺【答案】C〖祥解〗（1）發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。發(fā)酵過(guò)程：菌種選育→菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)→培養(yǎng)基的配制→滅菌和接種→發(fā)酵條件的控制→分離和提純。（2）發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。（2）產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。如果產(chǎn)品是菌體，可采用過(guò)濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來(lái)。如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進(jìn)行提取。（4）發(fā)酵過(guò)程中要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件。（5）發(fā)酵過(guò)程般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡(jiǎn)單、污染小，反應(yīng)專(zhuān)一性強(qiáng)，因而可以得到較為專(zhuān)一的產(chǎn)物。【詳析】A、利用谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行發(fā)酵，其中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，A正確；B、谷氨酸棒狀桿菌生長(zhǎng)的最適pH為7.0，谷氨酰胺合成酶最適pH為5.6，因此發(fā)酵初期控制pH為7.0，有利于增加谷氨酸棒狀桿菌的數(shù)量，后調(diào)為5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，進(jìn)而提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量，B正確；C、由圖可知，提高谷氨酸脫氫酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量，但谷氨酸合成酶會(huì)使L-谷氨酰胺再轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺產(chǎn)量，C錯(cuò)誤；D、L-谷氨酰胺是細(xì)胞代謝產(chǎn)物，對(duì)細(xì)胞代謝產(chǎn)物可通過(guò)提取、分離和純化措施來(lái)獲得產(chǎn)品，D正確。故選C。4.下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.選育菌種是發(fā)酵工程的前提條件，該環(huán)節(jié)很大程度上決定生產(chǎn)發(fā)酵的成敗B.只有發(fā)酵工程中心環(huán)節(jié)結(jié)束時(shí)才需要檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)品濃度C.通過(guò)發(fā)酵工程獲得的單細(xì)胞蛋白可作為食品添加劑，也可制成微生物飼料D.微生物肥料利用了微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等來(lái)增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵和產(chǎn)品的分離、提純等方面?！驹斘觥緼、選育優(yōu)良菌種是發(fā)酵工程的關(guān)鍵步驟，菌種的優(yōu)劣很大程度上決定了發(fā)酵生產(chǎn)的成敗，A正確；B、在發(fā)酵工程的各個(gè)環(huán)節(jié)，包括菌種選育、發(fā)酵過(guò)程控制等，都需要檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)品濃度等參數(shù)，以確保發(fā)酵過(guò)程的順利進(jìn)行和產(chǎn)品質(zhì)量，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵工程獲得的單細(xì)胞蛋白富含蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可作為食品添加劑，也可制成微生物飼料，C正確；D、微生物肥料通過(guò)微生物的代謝活動(dòng)產(chǎn)生有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等，能夠增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)有重要作用，D正確。故選B。5.下圖表示取水稻的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)得到愈傷組織，再在一定條件下誘導(dǎo)形成試管苗的過(guò)程。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.愈傷組織在形成過(guò)程中，須從培養(yǎng)基中獲得水、無(wú)機(jī)鹽、小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.愈傷組織是花粉細(xì)胞通過(guò)脫分化形成的不定形的薄壁組織團(tuán)塊C.該過(guò)程為單倍體育種，極大的縮短了育種的年限D(zhuǎn).b試管中所含組織的全能性高于a試管和c試管【答案】C〖祥解〗單倍體育種原理：染色體變異，方法與優(yōu)點(diǎn)：花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，所獲得的植株一般是純合子，優(yōu)點(diǎn)是可以明顯縮短育種年限?！驹斘觥緼、愈傷組織在形成過(guò)程中，須從培養(yǎng)基中獲得水、無(wú)機(jī)鹽、小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，該過(guò)程為植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化過(guò)程，A正確；B、花粉細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織是不定形的薄壁組織團(tuán)塊，B正確；C、該過(guò)程為植物組織培養(yǎng)技術(shù)，獲得的是單倍體幼苗，沒(méi)有經(jīng)過(guò)秋水仙素處理，因而不是單倍體育種過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、b試管中所含組織是愈傷組織，是未分化的細(xì)胞，c試管中所含組織的全能性低于b試管的愈傷組織，a試管中花藥是分化之后的，全能性較愈傷組織低，D正確。故選C。6.我國(guó)科學(xué)家成功培育了體細(xì)胞克隆猴。在處理重構(gòu)胚時(shí)，將組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA、組蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA注入了重構(gòu)胚，促進(jìn)囊胚的發(fā)育，提高代孕母猴的妊娠率。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.除顯微操作去核外，還可采用梯度離心、紫外線(xiàn)照射、化學(xué)物質(zhì)處理法在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下使其中的DNA變性B.TSA能夠抑制組蛋白脫乙酰酶的作用從而降低組蛋白的乙酰化水平C.組蛋白去甲基化酶KDM4D能夠降低組蛋白的甲基化水平D.培育克隆猴對(duì)研究人類(lèi)疾病致病機(jī)制和研發(fā)新藥有重要意義【答案】B〖祥解〗細(xì)胞核移植概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物?！驹斘觥緼、在核移植過(guò)程中，去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核時(shí)，除顯微操作去核外，還可采用梯度離心、紫外線(xiàn)照射、化學(xué)物質(zhì)處理等方法，這些方法可以在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下使其中的DNA變性，A正確；B、組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA可抑制組蛋白脫乙酰酶的活性，從而抑制組蛋白脫乙酰作用，提高組蛋白的乙酰化水平，B錯(cuò)誤；C、組蛋白去甲基化酶KDM4D可促進(jìn)組蛋白去甲基化，從而能夠降低組蛋白的甲基化水平，C正確；D、猴屬于靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，與人更接近，培育遺傳背景相同的克隆猴對(duì)人類(lèi)疾病致病機(jī)制的研究、新藥研發(fā)等具有更重要的意義，D正確。故選B。7.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見(jiàn)下圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生DNA片段的長(zhǎng)度為（）A.2.5和11.5 B.14C5.5和8.5 D.6和8【答案】D〖祥解〗用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈，，說(shuō)明質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)；同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，說(shuō)明質(zhì)粒中含有2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)。【詳析】用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈，說(shuō)明質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)；同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，說(shuō)明質(zhì)粒中含有2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)。質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)，2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)。若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段為2種，總長(zhǎng)度為14kb，結(jié)合EcoRⅤ的酶切位點(diǎn)可知，ABC不符合題意，D符合題意。故選D。8.基因在不同生物間轉(zhuǎn)移的研究，推動(dòng)了遺傳學(xué)的發(fā)展。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，可證明DNA在同種生物不同個(gè)體之間轉(zhuǎn)移B.質(zhì)粒作為基因工程的載體可將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)物種間基因交流C.我國(guó)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的成功培育，實(shí)現(xiàn)了基因由植物向微生物的定向轉(zhuǎn)移D.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)現(xiàn)了基因轉(zhuǎn)移，實(shí)現(xiàn)了外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)【答案】C〖祥解〗肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型菌中存在某種轉(zhuǎn)化因子，能將S型菌轉(zhuǎn)化為R型菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)【詳析】A、在格里菲斯的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中，已經(jīng)加熱殺死的S型細(xì)菌中，必然含有某種“轉(zhuǎn)化因子”，使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌，這確實(shí)證明了DNA在同種生物不同個(gè)體之間的轉(zhuǎn)移，A正確；B、質(zhì)粒經(jīng)常被用作基因工程的載體，它可以將外源基因?qū)氲讲煌氖荏w細(xì)胞中，從而實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流，B正確；C、轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的培育實(shí)際上是將某些具有抗蟲(chóng)特性的基因（如Bt基因）從微生物（如蘇云金芽孢桿菌）轉(zhuǎn)移到植物（如棉花）中，而不是由植物向微生物轉(zhuǎn)移，C錯(cuò)誤；D、噬菌體是一種可以侵染細(xì)菌的病毒，它可以將自己的基因組（包含外源基因）注入到細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，從而實(shí)現(xiàn)外源基因在原核細(xì)胞（如細(xì)菌）中的表達(dá)，D正確。故選C。9.水蛭素是一種蛋白質(zhì)，可用于預(yù)防和治療血栓。研究人員發(fā)現(xiàn)用賴(lài)氨酸替換水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列敘述正確的是（）A.該項(xiàng)替換研究中，目前可行的直接操作對(duì)象是蛋白質(zhì)B.該項(xiàng)替換研究中，改造前后水蛭素的空間結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變C.該項(xiàng)替換研究的思路與按照中心法則合成蛋白質(zhì)的思路一致D.改造的水蛭素基因?qū)胛⑸锖罂衫冒l(fā)酵工程生產(chǎn)水蛭素【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程?！驹斘觥緼、蛋白質(zhì)工程的直接操作對(duì)象是基因而非蛋白質(zhì),通過(guò)修改基因序列來(lái)改變氨基酸組成，而非直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行操作，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)題意信息可知，將天冬酰胺（極性氨基酸）替換為賴(lài)氨酸（帶正電荷的堿性氨基酸），兩者的理化性質(zhì)差異顯著，可能導(dǎo)致局部電荷分布和空間結(jié)構(gòu)改變，從而影響蛋白質(zhì)功能，B錯(cuò)誤；C、中心法則是從DNA到RNA再到蛋白質(zhì)的正向流程，而蛋白質(zhì)工程的思路是逆向的：先設(shè)計(jì)所需蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再反向推導(dǎo)并修改基因序列。因此，兩者的研究思路并不一致，C錯(cuò)誤；D、改造后的水蛭素基因?qū)胛⑸铮ㄈ绱竽c桿菌或酵母菌）后，可通過(guò)發(fā)酵工程大規(guī)模生產(chǎn)水蛭素，D正確。故選D。10.如圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡(jiǎn)要過(guò)程，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.過(guò)程①中的兩個(gè)卵裂球只能取自桑葚胚B.過(guò)程③操作前需對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理C.可用分割針?lè)指顑?nèi)細(xì)胞團(tuán)做DNA分析，鑒定性別D.嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細(xì)胞全能性【答案】B〖祥解〗題圖分析，圖中為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡(jiǎn)要過(guò)程，其中①是獲取早期胚胎的過(guò)程，②是將白鼠和黑鼠的早期胚胎嵌合的過(guò)程，③是胚胎移植過(guò)程?！驹斘觥緼、過(guò)程①中的兩個(gè)卵裂球可以取自于桑葚胚，也可以取自卵裂期，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程③是胚胎移植過(guò)程，在進(jìn)行操作前，需要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生理變化是相同的，B正確；C、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將會(huì)發(fā)育為個(gè)體的各種組織，若可用分割針?lè)指顑?nèi)細(xì)胞團(tuán)會(huì)影響到胚胎發(fā)育，應(yīng)用分割針割取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，鑒定性別，C錯(cuò)誤；D、嵌合鼠能夠分化成完整個(gè)體，形成的根本依據(jù)是早期胚胎細(xì)胞的全能性，該過(guò)程不涉及基因重組，D錯(cuò)誤。故選B。11.隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，其安全性問(wèn)題引發(fā)了極大的關(guān)注，下列敘述正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品可能會(huì)引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)B.轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物都含有會(huì)危害健康的毒性蛋白C.轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可通過(guò)花粉將轉(zhuǎn)入的基因擴(kuò)散到所有作物D.對(duì)轉(zhuǎn)基因安全性的爭(zhēng)議源于對(duì)基因工程操作過(guò)程了解有限【答案】A〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），抗蟲(chóng)棉的種植，減少了農(nóng)藥的使用，有利于保護(hù)農(nóng)田的土壤環(huán)境?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品導(dǎo)入了新的基因，這些新基因表達(dá)出的蛋白質(zhì)等物質(zhì)有可能成為過(guò)敏原，從而引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，A正確；B、并非所有的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物都含有會(huì)危害健康的毒性蛋白，不能一概而論。許多轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的安全性評(píng)估的，其目的是獲得優(yōu)良性狀，如抗蟲(chóng)、抗病等，并不是為了產(chǎn)生毒性蛋白危害健康，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可通過(guò)花粉將轉(zhuǎn)入的基因擴(kuò)散到與之親緣關(guān)系較近的物種，而不是所有作物。因?yàn)椴煌锓N之間存在生殖隔離，基因難以隨意在不同物種間轉(zhuǎn)移，C錯(cuò)誤；D、對(duì)轉(zhuǎn)基因安全性的爭(zhēng)議主要源于轉(zhuǎn)基因生物可能帶來(lái)的多方面影響，如對(duì)生態(tài)環(huán)境、人體健康等方面潛在的未知風(fēng)險(xiǎn)，而不是僅僅因?yàn)閷?duì)基因工程操作過(guò)程了解有限，D錯(cuò)誤。故選A。12.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品，是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液中酒精濃度達(dá)到一定值后，會(huì)反饋抑制酵母菌自身相關(guān)酶的活性B.果酒發(fā)酵完成后進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛再將乙醛變?yōu)橐宜?，同時(shí)釋放CO2C.制作腐乳時(shí)，利用單一菌種毛霉分泌的脂肪酶和蛋白酶催化豆腐中蛋白質(zhì)水解成氨基酸D.制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體內(nèi)天然的乳酸菌來(lái)進(jìn)行發(fā)酵，控制好條件就不會(huì)生成亞硝酸鹽【答案】A〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的菌種主要是毛霉，代謝類(lèi)型是需氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是15-18℃，一定濕度。泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、在果酒發(fā)酵過(guò)程中，隨著發(fā)酵液中酒精濃度升高，當(dāng)達(dá)到一定值后，酒精會(huì)對(duì)酵母菌細(xì)胞內(nèi)參與酒精發(fā)酵的酶的活性產(chǎn)生抑制作用，這屬于典型的反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，A正確；B、果酒發(fā)酵完成后進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，該過(guò)程不會(huì)釋放CO?，B錯(cuò)誤；C、制作腐乳時(shí)有多種菌的參與，其中以毛霉為主，毛霉分泌的蛋白酶催化豆腐中蛋白質(zhì)水解成小分子肽和氨基酸，C錯(cuò)誤；D、制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來(lái)進(jìn)行發(fā)酵，控制好條件也會(huì)生成亞硝酸鹽，D錯(cuò)誤。故選A。13.某科研團(tuán)隊(duì)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行珍稀絲狀真菌發(fā)酵產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)。在無(wú)菌操作和培養(yǎng)基處理過(guò)程中，出現(xiàn)了以下幾種情況，其中處理方式不合理的是（）A.將培養(yǎng)皿洗凈晾干后，裝入金屬容器中進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后待溫度降至50℃左右時(shí)取出B.配制好的培養(yǎng)基用不完可放在4℃冰箱中保存，下次用時(shí)取出加熱融化后倒入培養(yǎng)皿中直接使用C.接種時(shí)先將接種環(huán)灼燒滅菌，冷卻后挑取絲狀真菌的孢子，整個(gè)接種過(guò)程始終在酒精燈火焰旁D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)含有真菌的培養(yǎng)基進(jìn)行濕熱滅菌處理，然后將廢棄物按生物安全要求分類(lèi)丟棄【答案】B〖祥解〗獲得純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的污染。無(wú)菌操作主要包括：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。③為避免周?chē)h(huán)境中的微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|?！驹斘觥緼、玻璃培養(yǎng)皿采用干熱滅菌，裝入金屬容器防止滅菌過(guò)程中損壞，待溫度降至50℃左右取出可避免因溫度驟變導(dǎo)致玻璃器皿破裂，A正確；B、配制好的培養(yǎng)基用不完可放在4℃冰箱中保存，使用前需先檢查有無(wú)污染，加熱融化后還需再次調(diào)節(jié)pH等參數(shù)，然后滅菌，不能直接加熱融化后就倒入培養(yǎng)皿直接使用，B錯(cuò)誤；C、接種環(huán)灼燒滅菌冷卻后挑取孢子，靠近酒精燈火焰操作可減少雜菌污染，C正確；D、對(duì)含有真菌的培養(yǎng)基濕熱滅菌處理后按生物安全要求丟棄，可防止微生物擴(kuò)散造成污染，D正確。故選B。14.某城市自來(lái)水廠(chǎng)的水質(zhì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，定期對(duì)出廠(chǎng)水樣中的大腸桿菌數(shù)量進(jìn)行定量測(cè)定，以確定水質(zhì)，一般采用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)。在整個(gè)操作及后續(xù)分析過(guò)程中，下列做法正確的是（）A.若想一次獲取稀釋倍數(shù)為103的水樣，則可將1mL水樣加入到99mL無(wú)菌水中制取B.梯度稀釋后每個(gè)稀釋度包括原水樣均涂布3個(gè)平板，并預(yù)留一個(gè)空白平板，以減小實(shí)驗(yàn)誤差C.應(yīng)配制選擇培養(yǎng)基進(jìn)行涂布，在完成涂布操作后，須立即將各組平板放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)時(shí)待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)選取菌落數(shù)最多的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，也可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板顯微觀察計(jì)數(shù)【答案】B〖祥解〗平板劃線(xiàn)法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面；稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，通?？捎糜趯?duì)微生物進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)如菌體位于大方格的雙線(xiàn)上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線(xiàn)不數(shù)下線(xiàn)，數(shù)左線(xiàn)不數(shù)右線(xiàn)，以減少誤差。即位于本格上線(xiàn)和左線(xiàn)上的細(xì)胞計(jì)入本格，本格的下線(xiàn)和右線(xiàn)上的細(xì)胞按規(guī)定計(jì)入相應(yīng)的格中。【詳析】A、稀釋倍數(shù)為103時(shí)，應(yīng)將1mL水樣加入到999mL無(wú)菌水中，A錯(cuò)誤；B、梯度稀釋后每個(gè)稀釋度包括原水樣均涂布3個(gè)平板，并預(yù)留一個(gè)空白平板，以減小實(shí)驗(yàn)誤差，自來(lái)水中大腸桿菌數(shù)量可能較少，原水樣也需要涂布培養(yǎng)，B正確；C、應(yīng)配制鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行涂布，涂布后需等待菌液被培養(yǎng)基吸收，再放入培養(yǎng)箱，否則菌液會(huì)在平板表面流動(dòng)，影響菌落分布和計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值，細(xì)菌可用細(xì)菌計(jì)數(shù)板進(jìn)行直接計(jì)數(shù)，但是自來(lái)水中可能有多種細(xì)菌顯微鏡觀察難以區(qū)分，D錯(cuò)誤。故選B15.依據(jù)《中華人民共和國(guó)生物安全法》，生物安全是指國(guó)家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒(méi)有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國(guó)家安全和持續(xù)發(fā)展的能力。下列敘述正確的是（）A.只要有證據(jù)表明某種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該全面禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用B.可通過(guò)基因編輯技術(shù)對(duì)基因進(jìn)行敲除、插入等，來(lái)設(shè)計(jì)完美試管嬰兒C.從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，不會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響D.高致病性微生物必須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)【答案】D〖祥解〗《中華人民共和國(guó)生物安全法》是為維護(hù)國(guó)家安全，防范和應(yīng)對(duì)生物安全風(fēng)險(xiǎn)，保障人民生命健康，保護(hù)生物資源和生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)生物技術(shù)健康發(fā)展，推動(dòng)構(gòu)建人類(lèi)命運(yùn)共同體，實(shí)現(xiàn)人與自然和諧共生，制定的法律。【詳析】A、轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，A錯(cuò)誤；B、利用基因編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒，設(shè)計(jì)完美試管嬰兒，已經(jīng)涉及到新生命的誕生，會(huì)造成生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題，B錯(cuò)誤；C、從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，由于短期內(nèi)天敵沒(méi)有資源和空間等的限制，可能會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響，C錯(cuò)誤；D、高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，D正確。故選D。二、非選擇題（本大題共5小題，共55分）16.番茄青枯病是由青枯雷爾氏菌引起的，具有較強(qiáng)的侵染力和破壞力。番茄青枯病可通過(guò)以根際促生菌作為拮抗微生物抵御青枯雷爾氏菌進(jìn)行生物防治。因此，發(fā)掘新的高效能拮抗青枯病病原菌的促生微生物具有重要意義。回答下列問(wèn)題：（1）進(jìn)行樣本采集及拮抗細(xì)菌菌株分離純化時(shí)，應(yīng)采集某地番茄青枯病發(fā)病果園中_______（填“健康”或“患病”）植株根際土壤。先稱(chēng)取1g土壤添加到盛有_________的三角瓶中均勻振蕩后，置于恒溫水浴15min。經(jīng)分離培養(yǎng)后，挑取單菌落進(jìn)行劃線(xiàn)純化。在第二次及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，目的是_______。（2）進(jìn)行拮抗細(xì)菌的分離篩選時(shí)，為比較不同根系微生物純化菌液對(duì)青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人員配制了含有青枯病病原菌的平板，在含青枯病病原菌平板上滴加________，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察并比較抑菌圈的大小，拮抗作用越強(qiáng)則________。（3）通過(guò)對(duì)拮抗細(xì)菌產(chǎn)酶活性進(jìn)行測(cè)定，篩選出4株菌株，隨后進(jìn)行青枯病預(yù)防實(shí)驗(yàn)。現(xiàn)有番茄幼苗、4種菌液、青枯菌菌液、無(wú)菌水等。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)比較菌株的預(yù)防效果：將生長(zhǎng)狀況相同且良好的幼苗平均分為5份，標(biāo)注1~5組。_________（補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)思路）?！敬鸢浮浚?）①.健康②.無(wú)菌水③.使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落（2）①.等量不同根系微生物菌液②.抑菌圈越大（3）1組噴灑無(wú)菌水和青枯菌菌液，2~5組分別噴灑等量的四種菌液，再?lài)姙⑶嗫菥?，培養(yǎng)一段時(shí)間觀察比對(duì)生長(zhǎng)及患病情況〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！窘馕觥浚?）拮抗細(xì)菌可通過(guò)拮抗青枯雷爾氏菌防止番茄青枯病的發(fā)生，在發(fā)病果園中存在青枯雷爾氏菌，其中健康的植株則是由于拮抗細(xì)菌的存在而使其保持健康，為了獲取拮抗菌株，應(yīng)選取健康植株的土壤；稱(chēng)取土壤后進(jìn)行稀釋?zhuān)褂脽o(wú)菌水進(jìn)行稀釋?zhuān)苊馔鈦?lái)微生物對(duì)純化的影響，因此先稱(chēng)取1g土壤添加到盛有無(wú)菌水的三角瓶中均勻振蕩后，置于恒溫水浴15min；經(jīng)分離培養(yǎng)后，挑取單菌落進(jìn)行劃線(xiàn)純化，所用方法是平板劃線(xiàn)法，通常使用的劃線(xiàn)工具是接種環(huán)；在第二次及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，目的是使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。（2）為比較不同根系微生物純化菌液對(duì)青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人員配制了含有青枯病病原菌的平板，含青枯病病原菌平板中滴加等量的不同根系微生物純化菌液，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察其抑菌圈的大??；根系微生物對(duì)青枯病病原菌有拮抗作用，會(huì)抑制其生存，滴加了根系微生物純化菌液的地方不會(huì)生長(zhǎng)青枯病病原菌，其周?chē)L(zhǎng)了青枯病病原菌，形成抑菌圈，所以拮抗作用越強(qiáng)則抑制菌圈越大。（3）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖沁M(jìn)行青枯病預(yù)防實(shí)驗(yàn)比較菌株的預(yù)防效果，故實(shí)驗(yàn)自變量為菌株的種類(lèi)，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程中，要遵循單一變量的原則，因此實(shí)驗(yàn)思路為：將生長(zhǎng)狀況相同且良好幼苗平均分為5等分，標(biāo)注1-5組，每組設(shè)三個(gè)平行組，1組噴灑無(wú)菌水（作為對(duì)照組）和青桔菌液，2-5組分別噴灑四種菌液，后噴灑青枯菌菌液，培養(yǎng)一段時(shí)間觀察比對(duì)生長(zhǎng)及患病情況。17.動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程在多領(lǐng)域展現(xiàn)出了巨大的發(fā)展?jié)摿??；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。培養(yǎng)時(shí)首先要對(duì)新鮮取材的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，可用機(jī)械的方法或用________等處理一段時(shí)間將其分散成單個(gè)細(xì)胞。貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，會(huì)發(fā)生______現(xiàn)象，這時(shí)就需要分瓶培養(yǎng)細(xì)胞。（2）動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)在單克隆抗體的制備過(guò)程中起了關(guān)鍵性作用。與普通抗體相比，單克隆抗體具有_______（答出2點(diǎn)）等優(yōu)點(diǎn)。請(qǐng)根據(jù)圖1描述ADC殺傷乳腺癌細(xì)胞的具體過(guò)程：_______。（3）轉(zhuǎn)基因試管?？缮a(chǎn)重組人乳鐵傳遞蛋白（rhLF），為生物制藥等領(lǐng)域提供關(guān)鍵原料，流程如圖2所示。過(guò)程①需要給母牛注射外源激素，其目的是_______。過(guò)程④中進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢(shì)是_______?！敬鸢浮浚?）①.胰蛋白酶（膠原蛋白酶）②.接觸抑制（2）①.準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合；可大量制備②.ADC識(shí)別乳腺癌細(xì)胞并與之結(jié)合，通過(guò)胞吞進(jìn)入細(xì)胞后被溶酶體降解，釋放出的藥物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，最終進(jìn)入并作用于細(xì)胞核，導(dǎo)致乳腺癌細(xì)胞凋亡（3）①.促使母牛超數(shù)排卵②.充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖潛力〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是指從動(dòng)物體內(nèi)取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)?！窘馕觥浚?）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，首先要對(duì)新鮮取材的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，可用機(jī)械的方法或用膠原蛋白酶（或胰蛋白酶）等處理一段時(shí)間將其分散成單個(gè)細(xì)胞。貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，這時(shí)就需要分瓶培養(yǎng)細(xì)胞，此后的培養(yǎng)叫做傳代培養(yǎng)。（2）單克隆抗體，與普通抗體相比較，具有如下優(yōu)點(diǎn)：①能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，并與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合；②可大量制備。ADC殺傷乳腺癌細(xì)胞的具體過(guò)程為：①ADC識(shí)別乳腺癌細(xì)胞并與乳腺癌細(xì)胞結(jié)合；②乳腺癌細(xì)胞通過(guò)胞吞作用，使ADC進(jìn)入細(xì)胞，并被細(xì)胞內(nèi)的溶酶體所降解；③ADC被降解后，釋放出藥物進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，并最終進(jìn)入、作用于細(xì)胞核，④細(xì)胞核啟動(dòng)凋亡程序?qū)е录?xì)胞凋亡。（3）過(guò)程①需要給母牛注射外源促性腺激素，使母牛超數(shù)排卵，以便獲得更多的胚胎。過(guò)程④是將胚胎移植到同期發(fā)情的代孕母牛體內(nèi)，進(jìn)行胚胎移植的優(yōu)勢(shì)主要在于可以充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖潛力。18.CRISPR-Cas9技術(shù)在基因編輯中運(yùn)用較多。該技術(shù)是以Cas9基因和能轉(zhuǎn)錄出與目標(biāo)DNA互補(bǔ)的向?qū)NA的基因作為目的基因，通過(guò)載體將其導(dǎo)入受體細(xì)胞中。表達(dá)出來(lái)的Cas9蛋白和向?qū)NA會(huì)形成復(fù)合物，向?qū)NA識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)DNA，Cas9蛋白切斷雙鏈DNA形成兩個(gè)末端。這兩個(gè)末端通過(guò)“斷裂修復(fù)”重新連接，實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)DNA進(jìn)行特定基因的敲除或插入，從而修復(fù)或改良機(jī)體功能，其過(guò)程如圖1。（1）基因工程中可用PCR技術(shù)獲取目的基因，PCR過(guò)程除了需要模板和引物外還需要的條件有______（答出2點(diǎn)即可）。若將一個(gè)Cas9蛋白基因經(jīng)PCR擴(kuò)增8輪，獲得的DNA片段中僅含有1種引物的DNA片段有______個(gè)。（2）利用CRISPR-Cas9技術(shù)在Gata基因序列的一端插入綠色熒光蛋白（GFP）基因，Cas9蛋白和向?qū)NA復(fù)合物相當(dāng)于限制酶，會(huì)破壞Gata基因序列上的______鍵，插入GFP基因后，構(gòu)建了圖2中的重組質(zhì)粒，其中終止子的作用是______。為了檢測(cè)GFP基因是否準(zhǔn)確插入圖2中的位置，最好選擇引物______（填序號(hào)）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后利用電泳技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。（3）實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。對(duì)小鼠體細(xì)胞DNA進(jìn)行PCR和電泳分析，得到如圖3的1～3種條帶結(jié)果，其中第______種條帶的結(jié)果為Gata3-GFP基因純合子的小鼠，理論上子代中Gata3-GFP基因純合子的比例為_(kāi)_____?！敬鸢浮浚?）①.4種游離的脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶、含Mg2+緩沖液②.2（2）①.磷酸二酯②.基因轉(zhuǎn)錄停止的區(qū)域③.①③（②④）（3）①.1②.1/4〖祥解〗PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫（經(jīng)常是60°C左右）時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度（72°C左右），DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補(bǔ)鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在變性溫度，復(fù)性溫度，延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制?！窘馕觥浚?）PCR過(guò)程除了需要模板和引物外，還需要的條件有4種游離的脫氧核苷酸（dNTP）、耐高溫的DNA聚合酶、含Mg2+緩沖液；無(wú)論P(yáng)CR擴(kuò)增多少次，只有最初的兩條模板鏈上不帶有引物，其他子代DNA均攜帶2個(gè)引物，因此PCR擴(kuò)增8輪，獲得的DNA片段中僅含有1種引物的DNA片段有2個(gè)。（2）Cas9蛋白和向?qū)NA復(fù)合物相當(dāng)于限制酶，會(huì)破壞Gata基因序列上的磷酸二酯鍵；終止子的作用是基因轉(zhuǎn)錄停止的區(qū)域；為了檢測(cè)GFP基因是否準(zhǔn)確插入圖2中的位置，最好選擇引物①③（②④），這樣可以檢測(cè)GFP基因恰好插入在Gata3的下游。（3）實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，小鼠基因型相當(dāng)于Aa，雜交后代的基因型及比例為AA∶Aa∶aa=1∶2∶1。其中Gata3-GFP基因由于插入了GFP基因，因此片段更長(zhǎng)（可以看做A），在電泳中距離點(diǎn)樣孔更近，因此片段1代表A基因，片段2代表a基因，據(jù)此可以判斷第1種電泳結(jié)果的基因型相當(dāng)于AA，第2種電泳結(jié)果相當(dāng)于Aa，第3種電泳結(jié)果相當(dāng)于aa，第1種條帶的結(jié)果為Gata3-GFP基因純合子的小鼠；理論上子代中Gata3-GFP基因純合子（即AA）的比例為1/4。19.二化螟的幼蟲(chóng)主要危害水稻的葉和莖，轉(zhuǎn)Bt基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵害?？蒲腥藛T構(gòu)建了GAL4/UAS基因調(diào)控系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因水稻，過(guò)程如圖1所示：GAL4/UAS系統(tǒng)調(diào)控基因表達(dá)的機(jī)理如圖2所示：UAS序列可抑制靶基因表達(dá)，GAL4蛋白是一種轉(zhuǎn)錄活性因子，可特異性地識(shí)別并結(jié)合UAS序列，激活UAS下游基因的轉(zhuǎn)錄。（1）圖1中①②操作過(guò)程涉及到的酶有______。③④過(guò)程除了要進(jìn)行目的基因的檢測(cè)和鑒定外，還需要進(jìn)行______才能將細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因個(gè)體。（2）現(xiàn)已獲得crylC基因、Bt基因和綠色熒光蛋白GFP基因，crylC基因能促進(jìn)Bt基因的表達(dá)。若要以GFP基因?yàn)闃?biāo)記基因篩選受體細(xì)胞，在構(gòu)建UAS-靶基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)將crylC、Bt、GFP三個(gè)基因插入到圖3（Ti質(zhì)粒的T-DNA片段示意圖）中的位置分別是______（用序號(hào)①②③作答）。（3）將GAL4轉(zhuǎn)基因個(gè)體與UAS-Bt轉(zhuǎn)基因個(gè)體雜交得，中出現(xiàn)了抗蟲(chóng)植株，其表現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀的原因是______。利用中抗蟲(chóng)個(gè)體自交得，若中表型及其比例為_(kāi)_____，則GAL4基因和Bt基因插入同一對(duì)同源染色體上；若中表型及其比例為_(kāi)_____，則GAL4基因和Bt基因插入兩對(duì)同源染色體上（假設(shè)插入的基因均有效，個(gè)體的存活率相等）。（4）采用在水稻葉片和莖鞘中特異性表達(dá)的GAL4基因的啟動(dòng)子，構(gòu)建表達(dá)載體，得到轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻，在食品安全方面的意義是______?！敬鸢浮浚?）①.限制酶、DNA連接酶②.植物組織培養(yǎng)（2）②③①（3）①.F1同時(shí)含有GAL4基因和UAS-Bt基因，GAL4基因表達(dá)產(chǎn)生的GAL4蛋白與UAS結(jié)合激活Bt基因的表達(dá)②.抗蟲(chóng)：不抗蟲(chóng)=1：1③.抗蟲(chóng)：不抗蟲(chóng)=9：7（4）利用GAL/UAS調(diào)控系統(tǒng)，使目的基因只在特定部位表達(dá)，而在人食用的部位不表達(dá)〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。【解析】（1）圖1中①②操作過(guò)程為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，該過(guò)程涉及的酶有限制酶和DNA連接酶（用于切割和連接目的基因與載體，構(gòu)建基因表達(dá)載體）。③④過(guò)程除了要進(jìn)行目的基因的檢測(cè)和鑒定外還需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)（原理為植物細(xì)胞的全能性）才能將細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因個(gè)體。（2）結(jié)合題干，若要以GFP基因?yàn)闃?biāo)記基因篩選受體細(xì)胞，通過(guò)特異性啟動(dòng)子-GALA調(diào)控UAS-靶基因的表達(dá)，且crylC基因能促進(jìn)Bt基因的表達(dá)，結(jié)合圖3，①處應(yīng)該插入標(biāo)記基因（GFP基因），②③處插入cry1C、Bt基因，即應(yīng)將cry1C、Bt、GFP三個(gè)基因插入到圖3所示T-DNA中的位置分別是②③①。（3）結(jié)合題干“轉(zhuǎn)Bt基因水稻能一定程度抵抗二化螟的侵害，cryIC基因能促進(jìn)Bt基因的表達(dá)”，推知將GAL4轉(zhuǎn)基因個(gè)體與UAS-Bt轉(zhuǎn)基因個(gè)體雜交得F1，F(xiàn)1全表現(xiàn)為抗蟲(chóng)，F(xiàn)1自交得F2，F(xiàn)1植株表現(xiàn)抗蟲(chóng)性狀的原因是F1同時(shí)含有GAL4基因和UAS-Bt基因，GAL4基因表達(dá)產(chǎn)生的GAL4蛋白與UAS結(jié)合激活Bt基因的表達(dá)。若GAL4基因（表示為G）和Bt基因（表示為B）插入一對(duì)同源染色體上，遵循基因的分離定律，F(xiàn)1為GB，F(xiàn)1自交得到1GG（不抗蟲(chóng)）、2GB（抗蟲(chóng)）、1BB（不抗蟲(chóng)），即F2中表型及其比例為抗蟲(chóng)：不抗蟲(chóng)=1：1；若GAL4基因（表示為G）和Bt基因（表示為B）插入兩對(duì)同源染色體上，遵循基因的自由組合定律，F(xiàn)1基因型為GOBO，F(xiàn)1自交得到9G_B_，其余7份要么只含有G或B或均不含，都表現(xiàn)為不抗蟲(chóng)，即F2中表型及其比例為抗蟲(chóng)：不抗蟲(chóng)=9：7。（4）結(jié)合題干信息，啟動(dòng)子具有特異性，構(gòu)建GAL4基因表達(dá)載體時(shí)采用葉片和莖鞘中特異性表達(dá)基因的啟動(dòng)子，可使靶基因只在植株葉片和莖鞘中表達(dá)，故該技術(shù)在提高食品安全方面可能存在一定的意義，具體表現(xiàn)為利用GAL/UAS調(diào)控系統(tǒng)，使目的基因只在特定部位表達(dá)，而在人食用的部位不表達(dá)。20.某科研團(tuán)隊(duì)想從土壤中分離乳酸菌進(jìn)行純培養(yǎng)及相關(guān)特性研究。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）配置用于乳酸菌純培養(yǎng)的培養(yǎng)基時(shí)，除了提供乳酸菌生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需調(diào)整培養(yǎng)基的pH，應(yīng)使用_______（填“酸性物質(zhì)”或“堿性物質(zhì)”）進(jìn)行調(diào)節(jié)，因?yàn)槿樗峋m宜在此pH值環(huán)境下生長(zhǎng)。（2）在無(wú)菌操作過(guò)程中，對(duì)玻璃器皿進(jìn)行滅菌可采用______法。對(duì)試管口、瓶口等容易被污染的部位，可采用_____法進(jìn)行滅菌。（3）利用稀釋涂布平板法進(jìn)行乳酸菌計(jì)數(shù)。將乳酸菌培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?0-4、10-5、10-6三個(gè)稀釋度的稀釋液各0.1mL分別涂布到多個(gè)平板上。在適宜條件下培養(yǎng)后，10??稀釋度平板上菌落數(shù)過(guò)多，無(wú)法計(jì)數(shù)；105稀釋度平板上平均菌落數(shù)為256個(gè)；10-6稀釋度平板上平均菌落數(shù)為23個(gè)。則每毫升乳酸菌培養(yǎng)液中的活菌數(shù)約為_(kāi)_____個(gè)。其中一個(gè)10-4稀釋度平板上的菌落分布不均勻，部分區(qū)域菌落密集，部分區(qū)域菌落稀疏，可能的原因是_______。（4）在進(jìn)行平板劃線(xiàn)法分離乳酸菌時(shí)，平板上出現(xiàn)了多種形態(tài)的菌落，原因可能是_______。五次劃線(xiàn)接種結(jié)束時(shí)，仍需要灼燒接種環(huán)目的是________?！敬鸢浮浚?）酸性物質(zhì)（2）①.干熱滅菌②.（火焰）灼燒（3）①.2.56×108②.涂布操作不規(guī)范未涂布均勻；涂布器灼燒后未充分冷卻，導(dǎo)致部分微生物被燙死（4）①.土壤樣品中存在多種微生物（無(wú)菌操作不規(guī)范，混入雜菌等）②.避免接種環(huán)上殘留的微生物污染實(shí)驗(yàn)室和環(huán)境，避免接種環(huán)上殘留的微生物感染實(shí)驗(yàn)人員〖祥解〗稀釋涂布法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落?！窘馕觥浚?）配置用于乳酸菌純培養(yǎng)的培養(yǎng)基時(shí)，除了提供乳酸菌生長(zhǎng)所需的碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需調(diào)整培養(yǎng)基的pH，應(yīng)使用“酸性物質(zhì)”進(jìn)行調(diào)節(jié)，因?yàn)槿樗峋m宜在此pH值環(huán)境下生長(zhǎng)，即酸性環(huán)境中乳酸菌會(huì)成為優(yōu)勢(shì)種。（2）在無(wú)菌操作過(guò)程中，對(duì)玻璃器皿的需要保持干燥的器皿在進(jìn)行滅菌時(shí)可采用干熱滅菌法。對(duì)試管口、瓶口等容易被污染的部位，可采用（火焰）灼燒法進(jìn)行滅菌，避免雜菌污染。（3）利用稀釋涂布平板法進(jìn)行乳酸菌計(jì)數(shù)。將乳酸菌培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)?04、105、106三個(gè)稀釋度的稀釋液各0.1mL分別涂布到多個(gè)平板上。在適宜條件下培養(yǎng)后，104稀釋度平板上菌落數(shù)過(guò)多，無(wú)法計(jì)數(shù)；105稀釋度平板上平均菌落數(shù)為256個(gè)；106稀釋度平板上平均菌落數(shù)為23個(gè)。由于用于統(tǒng)計(jì)的平板中菌落數(shù)在30~300之間的平板可以用于統(tǒng)計(jì)，因此，每毫升乳酸菌培養(yǎng)液中的活菌數(shù)約為256÷0.1×105=2.56×108個(gè)。其中一個(gè)10-4稀釋度平板上的菌落分布不均勻，部分區(qū)域菌落密集，部分區(qū)域菌落稀疏，這可能是涂布操作不規(guī)范未涂布均勻；涂布器灼燒后未充分冷卻，導(dǎo)致部分微生物被燙死。（4）在進(jìn)行平板劃線(xiàn)法分離乳酸菌時(shí)，平板上出現(xiàn)了多種形態(tài)的菌落，因?yàn)榫渚哂蟹N的特異性，因此該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說(shuō)明土壤樣品中存在多種微生物，另外無(wú)菌操作不規(guī)范，混入雜菌等也會(huì)出現(xiàn)上述現(xiàn)象。五次劃線(xiàn)接種結(jié)束時(shí)，仍需要灼燒接種環(huán)，這樣操作的目的是避免接種環(huán)上殘留的微生物污染實(shí)驗(yàn)室和環(huán)境，避免接種環(huán)上殘留的微生物感染實(shí)驗(yàn)人員。安徽省A10聯(lián)盟2024—2025學(xué)年高二下學(xué)期期中考試一、選擇題（本大題共15小題，每小題3分，共45分。每小題的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是最符合題目要求的）1.下列關(guān)于細(xì)胞工程的說(shuō)法正確的是（）A.植物組織培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理都是細(xì)胞的全能性B.PEG既可以用于動(dòng)物細(xì)胞融合，也能夠用于植物體細(xì)胞雜交C.懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因接觸抑制而分裂受阻D.抗體—藥物偶聯(lián)物主要利用其中的抗體殺死腫瘤細(xì)胞【答案】B〖祥解〗（1）植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。（2）植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株．植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能性。（3）體細(xì)胞核移植：又稱(chēng)體細(xì)胞克隆，作為動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的常用技術(shù)手段，即把體細(xì)胞移入去核卵母細(xì)胞中，使其重組并能發(fā)育為新的胚胎，這個(gè)胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體．用核移植方法獲得的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物?！驹斘觥緼、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；B、PEG既可以用于動(dòng)物細(xì)胞融合，也能夠用于植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中原生質(zhì)體的融合，B正確；C、懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因密度過(guò)大、有害代謝物積累而分裂受阻，貼壁細(xì)胞會(huì)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，C錯(cuò)誤；D、抗體一藥物偶聯(lián)物主要利用其上的抗體結(jié)構(gòu)來(lái)識(shí)別腫瘤細(xì)胞，起殺傷作用的是其上偶聯(lián)的藥物，D錯(cuò)誤。故選B。2.毛狀根是植物感染發(fā)根農(nóng)桿菌（其T﹣DNA含有生長(zhǎng)素合成基因）后產(chǎn)生的病理結(jié)構(gòu)，在生產(chǎn)某些次生代謝物方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。如圖為利用植物組織或細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行次生代謝物生產(chǎn)的流程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3-1/2插入培養(yǎng)基B.培養(yǎng)體系1制備過(guò)程中導(dǎo)入外源基因可采用PEG介導(dǎo)法或花粉管通道法C.與培養(yǎng)體系1和2不同，培養(yǎng)體系3的獲得不需要添加外源植物激素D.培養(yǎng)體系1和3的制備都利用了基因重組原理，且可產(chǎn)生相同代謝產(chǎn)物【答案】B〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，整個(gè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌無(wú)毒，外植體需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無(wú)菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無(wú)菌水清洗2-3次。這樣既考慮了藥劑的消毒效果，又考慮了植物的耐受能力?！驹斘觥緼、誘導(dǎo)愈傷組織時(shí)，在酒精燈火焰旁將外植體的1/3-1/2插入培養(yǎng)基，這樣的操作可以為外植體提供合適的生長(zhǎng)環(huán)境，使其更好地脫分化形成愈傷組織，A正確；B、培養(yǎng)體系1是轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系，制備過(guò)程中導(dǎo)入外源基因可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法等，而PEG介導(dǎo)法常用于原生質(zhì)體的融合，不用于轉(zhuǎn)基因。花粉管通道法是將目的基因?qū)胫仓曛械氖荏w細(xì)胞，但在該情境下，沒(méi)有完整植株，所以不采用這種方法，B錯(cuò)誤；C、發(fā)根農(nóng)桿菌的T-DNA含有生長(zhǎng)素合成基因，被其誘導(dǎo)產(chǎn)生的毛狀根自身可以合成生長(zhǎng)素，所以與培養(yǎng)體系1和2不同，培養(yǎng)體系3（毛狀根培養(yǎng)體系）的獲得不需要添加外源植物激素，C正確；D、培養(yǎng)體系1是通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系，原理是基因重組。培養(yǎng)體系3是利用發(fā)根農(nóng)桿菌誘導(dǎo)產(chǎn)生毛狀根，農(nóng)桿菌的T-DNA會(huì)整個(gè)到受體染色體上，利用了基因重組原理。并且培養(yǎng)體系1和3都可用于生產(chǎn)某些次生代謝物，有可能產(chǎn)生相同代謝產(chǎn)物，D正確。故選B。3.谷氨酸棒狀桿菌生長(zhǎng)的最適pH為7.0，發(fā)酵工程中通過(guò)以下代謝途徑發(fā)酵生產(chǎn)L-谷氨酰胺。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.利用谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行發(fā)酵，其中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵B.發(fā)酵初期控制pH為7.0，后調(diào)為5.6，有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量C.提高谷氨酸脫氫酶和谷氨酸合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量D.發(fā)酵結(jié)束后，采用適當(dāng)?shù)奶崛　⒎蛛x和純化措施可獲得L-谷氨酰胺【答案】C〖祥解〗（1）發(fā)酵是利用微生物，在適宜的條件下，將原料經(jīng)過(guò)特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類(lèi)所需要的產(chǎn)物的過(guò)程。發(fā)酵過(guò)程：菌種選育→菌種的擴(kuò)大培養(yǎng)→培養(yǎng)基的配制→滅菌和接種→發(fā)酵條件的控制→分離和提純。（2）發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。（2）產(chǎn)品不同，分離提純的方法一般不同。如果產(chǎn)品是菌體，可采用過(guò)濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中分離出來(lái)。如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸餾、離子交換等方法進(jìn)行提取。（4）發(fā)酵過(guò)程中要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件。（5）發(fā)酵過(guò)程般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡(jiǎn)單、污染小，反應(yīng)專(zhuān)一性強(qiáng)，因而可以得到較為專(zhuān)一的產(chǎn)物。【詳析】A、利用谷氨酸棒狀桿菌進(jìn)行發(fā)酵，其中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，A正確；B、谷氨酸棒狀桿菌生長(zhǎng)的最適pH為7.0，谷氨酰胺合成酶最適pH為5.6，因此發(fā)酵初期控制pH為7.0，有利于增加谷氨酸棒狀桿菌的數(shù)量，后調(diào)為5.6，有利于提高谷氨酰胺合成酶的活性，進(jìn)而提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量，B正確；C、由圖可知，提高谷氨酸脫氫酶和谷氨酰胺合成酶的活性有利于提高L-谷氨酰胺產(chǎn)量，但谷氨酸合成酶會(huì)使L-谷氨酰胺再轉(zhuǎn)化為L(zhǎng)-谷氨酸，反而降低L-谷氨酰胺產(chǎn)量，C錯(cuò)誤；D、L-谷氨酰胺是細(xì)胞代謝產(chǎn)物，對(duì)細(xì)胞代謝產(chǎn)物可通過(guò)提取、分離和純化措施來(lái)獲得產(chǎn)品，D正確。故選C。4.下列有關(guān)發(fā)酵工程及其應(yīng)用的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.選育菌種是發(fā)酵工程的前提條件，該環(huán)節(jié)很大程度上決定生產(chǎn)發(fā)酵的成敗B.只有發(fā)酵工程中心環(huán)節(jié)結(jié)束時(shí)才需要檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)品濃度C.通過(guò)發(fā)酵工程獲得的單細(xì)胞蛋白可作為食品添加劑，也可制成微生物飼料D.微生物肥料利用了微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等來(lái)增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌、接種、發(fā)酵和產(chǎn)品的分離、提純等方面。【詳析】A、選育優(yōu)良菌種是發(fā)酵工程的關(guān)鍵步驟，菌種的優(yōu)劣很大程度上決定了發(fā)酵生產(chǎn)的成敗，A正確；B、在發(fā)酵工程的各個(gè)環(huán)節(jié)，包括菌種選育、發(fā)酵過(guò)程控制等，都需要檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)品濃度等參數(shù)，以確保發(fā)酵過(guò)程的順利進(jìn)行和產(chǎn)品質(zhì)量，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵工程獲得的單細(xì)胞蛋白富含蛋白質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，可作為食品添加劑，也可制成微生物飼料，C正確；D、微生物肥料通過(guò)微生物的代謝活動(dòng)產(chǎn)生有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等，能夠增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)有重要作用，D正確。故選B。5.下圖表示取水稻的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)得到愈傷組織，再在一定條件下誘導(dǎo)形成試管苗的過(guò)程。下列相關(guān)敘述不正確的是（）A.愈傷組織在形成過(guò)程中，須從培養(yǎng)基中獲得水、無(wú)機(jī)鹽、小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)B.愈傷組織是花粉細(xì)胞通過(guò)脫分化形成的不定形的薄壁組織團(tuán)塊C.該過(guò)程為單倍體育種，極大的縮短了育種的年限D(zhuǎn).b試管中所含組織的全能性高于a試管和c試管【答案】C〖祥解〗單倍體育種原理：染色體變異，方法與優(yōu)點(diǎn)：花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再人工誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，所獲得的植株一般是純合子，優(yōu)點(diǎn)是可以明顯縮短育種年限?！驹斘觥緼、愈傷組織在形成過(guò)程中，須從培養(yǎng)基中獲得水、無(wú)機(jī)鹽、小分子有機(jī)物等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，該過(guò)程為植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的脫分化過(guò)程，A正確；B、花粉細(xì)胞通過(guò)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織是不定形的薄壁組織團(tuán)塊，B正確；C、該過(guò)程為植物組織培養(yǎng)技術(shù)，獲得的是單倍體幼苗，沒(méi)有經(jīng)過(guò)秋水仙素處理，因而不是單倍體育種過(guò)程，C錯(cuò)誤；D、b試管中所含組織是愈傷組織，是未分化的細(xì)胞，c試管中所含組織的全能性低于b試管的愈傷組織，a試管中花藥是分化之后的，全能性較愈傷組織低，D正確。故選C。6.我國(guó)科學(xué)家成功培育了體細(xì)胞克隆猴。在處理重構(gòu)胚時(shí)，將組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA、組蛋白去甲基化酶KDM4D的mRNA注入了重構(gòu)胚，促進(jìn)囊胚的發(fā)育，提高代孕母猴的妊娠率。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.除顯微操作去核外，還可采用梯度離心、紫外線(xiàn)照射、化學(xué)物質(zhì)處理法在沒(méi)有穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下使其中的DNA變性B.TSA能夠抑制組蛋白脫乙酰酶的作用從而降低組蛋白的乙?；紺.組蛋白去甲基化酶KDM4D能夠降低組蛋白的甲基化水平D.培育克隆猴對(duì)研究人類(lèi)疾病致病機(jī)制和研發(fā)新藥有重要意義【答案】B〖祥解〗細(xì)胞核移植概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物?！驹斘觥緼、在核移植過(guò)程中，去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核時(shí)，除顯微操作去核外，還可采用梯度離心、紫外線(xiàn)照射、化學(xué)物質(zhì)處理等方法，這些方法可以在不穿透卵母細(xì)胞透明帶的情況下使其中的DNA變性，A正確；B、組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA可抑制組蛋白脫乙酰酶的活性，從而抑制組蛋白脫乙酰作用，提高組蛋白的乙?；?，B錯(cuò)誤；C、組蛋白去甲基化酶KDM4D可促進(jìn)組蛋白去甲基化，從而能夠降低組蛋白的甲基化水平，C正確；D、猴屬于靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物，與人更接近，培育遺傳背景相同的克隆猴對(duì)人類(lèi)疾病致病機(jī)制的研究、新藥研發(fā)等具有更重要的意義，D正確。故選B。7.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見(jiàn)下圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生DNA片段的長(zhǎng)度為（）A.2.5和11.5 B.14C5.5和8.5 D.6和8【答案】D〖祥解〗用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈，，說(shuō)明質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)；同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，說(shuō)明質(zhì)粒中含有2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)?！驹斘觥坑孟拗泼窫coRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長(zhǎng)鏈，說(shuō)明質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)；同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，說(shuō)明質(zhì)粒中含有2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)。質(zhì)粒中含有1個(gè)EcoRⅤ切點(diǎn)，2個(gè)MboⅠ切點(diǎn)。若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段為2種，總長(zhǎng)度為14kb，結(jié)合EcoRⅤ的酶切位點(diǎn)可知，ABC不符合題意，D符合題意。故選D。8.基因在不同生物間轉(zhuǎn)移的研究，推動(dòng)了遺傳學(xué)的發(fā)展。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，可證明DNA在同種生物不同個(gè)體之間轉(zhuǎn)移B.質(zhì)粒作為基因工程的載體可將外源基因?qū)胧荏w細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)物種間基因交流C.我國(guó)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的成功培育，實(shí)現(xiàn)了基因由植物向微生物的定向轉(zhuǎn)移D.噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)現(xiàn)了基因轉(zhuǎn)移，實(shí)現(xiàn)了外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)【答案】C〖祥解〗肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)包括格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)和艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中格里菲思體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明S型菌中存在某種轉(zhuǎn)化因子，能將S型菌轉(zhuǎn)化為R型菌；艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)【詳析】A、在格里菲斯的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中，已經(jīng)加熱殺死的S型細(xì)菌中，必然含有某種“轉(zhuǎn)化因子”，使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌，這確實(shí)證明了DNA在同種生物不同個(gè)體之間的轉(zhuǎn)移，A正確；B、質(zhì)粒經(jīng)常被用作基因工程的載體，它可以將外源基因?qū)氲讲煌氖荏w細(xì)胞中，從而實(shí)現(xiàn)物種間的基因交流，B正確；C、轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的培育實(shí)際上是將某些具有抗蟲(chóng)特性的基因（如Bt基因）從微生物（如蘇云金芽孢桿菌）轉(zhuǎn)移到植物（如棉花）中，而不是由植物向微生物轉(zhuǎn)移，C錯(cuò)誤；D、噬菌體是一種可以侵染細(xì)菌的病毒，它可以將自己的基因組（包含外源基因）注入到細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)，從而實(shí)現(xiàn)外源基因在原核細(xì)胞（如細(xì)菌）中的表達(dá)，D正確。故選C。9.水蛭素是一種蛋白質(zhì)，可用于預(yù)防和治療血栓。研究人員發(fā)現(xiàn)用賴(lài)氨酸替換水蛭素第47位的天冬酰胺可以提高它的抗凝血活性。下列敘述正確的是（）A.該項(xiàng)替換研究中，目前可行的直接操作對(duì)象是蛋白質(zhì)B.該項(xiàng)替換研究中，改造前后水蛭素的空間結(jié)構(gòu)未發(fā)生改變C.該項(xiàng)替換研究的思路與按照中心法則合成蛋白質(zhì)的思路一致D.改造的水蛭素基因?qū)胛⑸锖罂衫冒l(fā)酵工程生產(chǎn)水蛭素【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來(lái)的第二代基因工程。【詳析】A、蛋白質(zhì)工程的直接操作對(duì)象是基因而非蛋白質(zhì),通過(guò)修改基因序列來(lái)改變氨基酸組成，而非直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行操作，A錯(cuò)誤；B、根據(jù)題意信息可知，將天冬酰胺（極性氨基酸）替換為賴(lài)氨酸（帶正電荷的堿性氨基酸），兩者的理化性質(zhì)差異顯著，可能導(dǎo)致局部電荷分布和空間結(jié)構(gòu)改變，從而影響蛋白質(zhì)功能，B錯(cuò)誤；C、中心法則是從DNA到RNA再到蛋白質(zhì)的正向流程，而蛋白質(zhì)工程的思路是逆向的：先設(shè)計(jì)所需蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，再反向推導(dǎo)并修改基因序列。因此，兩者的研究思路并不一致，C錯(cuò)誤；D、改造后的水蛭素基因?qū)胛⑸铮ㄈ绱竽c桿菌或酵母菌）后，可通過(guò)發(fā)酵工程大規(guī)模生產(chǎn)水蛭素，D正確。故選D。10.如圖為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡(jiǎn)要過(guò)程，下列相關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.過(guò)程①中的兩個(gè)卵裂球只能取自桑葚胚B.過(guò)程③操作前需對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理C.可用分割針?lè)指顑?nèi)細(xì)胞團(tuán)做DNA分析，鑒定性別D.嵌合鼠的培育依據(jù)的原理是基因重組和細(xì)胞全能性【答案】B〖祥解〗題圖分析，圖中為科研人員利用白鼠和黑鼠的早期胚胎培育黑白嵌合鼠的簡(jiǎn)要過(guò)程，其中①是獲取早期胚胎的過(guò)程，②是將白鼠和黑鼠的早期胚胎嵌合的過(guò)程，③是胚胎移植過(guò)程?！驹斘觥緼、過(guò)程①中的兩個(gè)卵裂球可以取自于桑葚胚，也可以取自卵裂期，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程③是胚胎移植過(guò)程，在進(jìn)行操作前，需要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，以保證受體與供體的生理變化是相同的，B正確；C、內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將會(huì)發(fā)育為個(gè)體的各種組織，若可用分割針?lè)指顑?nèi)細(xì)胞團(tuán)會(huì)影響到胚胎發(fā)育，應(yīng)用分割針割取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，鑒定性別，C錯(cuò)誤；D、嵌合鼠能夠分化成完整個(gè)體，形成的根本依據(jù)是早期胚胎細(xì)胞的全能性，該過(guò)程不涉及基因重組，D錯(cuò)誤。故選B。11.隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的發(fā)展，其安全性問(wèn)題引發(fā)了極大的關(guān)注，下列敘述正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品可能會(huì)引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)B.轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物都含有會(huì)危害健康的毒性蛋白C.轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可通過(guò)花粉將轉(zhuǎn)入的基因擴(kuò)散到所有作物D.對(duì)轉(zhuǎn)基因安全性的爭(zhēng)議源于對(duì)基因工程操作過(guò)程了解有限【答案】A〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問(wèn)題包括：食物安全（滯后效應(yīng)、過(guò)敏源、營(yíng)養(yǎng)成分改變）、生物安全（對(duì)生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對(duì)生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響），抗蟲(chóng)棉的種植，減少了農(nóng)藥的使用，有利于保護(hù)農(nóng)田的土壤環(huán)境?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品導(dǎo)入了新的基因，這些新基因表達(dá)出的蛋白質(zhì)等物質(zhì)有可能成為過(guò)敏原，從而引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，A正確；B、并非所有的轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物都含有會(huì)危害健康的毒性蛋白，不能一概而論。許多轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物是經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的安全性評(píng)估的，其目的是獲得優(yōu)良性狀，如抗蟲(chóng)、抗病等，并不是為了產(chǎn)生毒性蛋白危害健康，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物可通過(guò)花粉將轉(zhuǎn)入的基因擴(kuò)散到與之親緣關(guān)系較近的物種，而不是所有作物。因?yàn)椴煌锓N之間存在生殖隔離，基因難以隨意在不同物種間轉(zhuǎn)移，C錯(cuò)誤；D、對(duì)轉(zhuǎn)基因安全性的爭(zhēng)議主要源于轉(zhuǎn)基因生物可能帶來(lái)的多方面影響，如對(duì)生態(tài)環(huán)境、人體健康等方面潛在的未知風(fēng)險(xiǎn)，而不是僅僅因?yàn)閷?duì)基因工程操作過(guò)程了解有限，D錯(cuò)誤。故選A。12.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)制作食品，是我國(guó)傳統(tǒng)飲食文化的重要組成部分。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）A.果酒發(fā)酵時(shí)，發(fā)酵液中酒精濃度達(dá)到一定值后，會(huì)反饋抑制酵母菌自身相關(guān)酶的活性B.果酒發(fā)酵完成后進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛再將乙醛變?yōu)橐宜?，同時(shí)釋放CO2C.制作腐乳時(shí)，利用單一菌種毛霉分泌的脂肪酶和蛋白酶催化豆腐中蛋白質(zhì)水解成氨基酸D.制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體內(nèi)天然的乳酸菌來(lái)進(jìn)行發(fā)酵，控制好條件就不會(huì)生成亞硝酸鹽【答案】A〖祥解〗參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型。參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型。腐乳制作的菌種主要是毛霉，代謝類(lèi)型是需氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是15-18℃，一定濕度。泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、在果酒發(fā)酵過(guò)程中，隨著發(fā)酵液中酒精濃度升高，當(dāng)達(dá)到一定值后，酒精會(huì)對(duì)酵母菌細(xì)胞內(nèi)參與酒精發(fā)酵的酶的活性產(chǎn)生抑制作用，這屬于典型的反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，A正確；B、果酒發(fā)酵完成后進(jìn)行果醋發(fā)酵時(shí)，醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛，再將乙醛變?yōu)橐宜?，該過(guò)程不會(huì)釋放CO?，B錯(cuò)誤；C、制作腐乳時(shí)有多種菌的參與，其中以毛霉為主，毛霉分泌的蛋白酶催化豆腐中蛋白質(zhì)水解成小分子肽和氨基酸，C錯(cuò)誤；D、制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的乳酸菌來(lái)進(jìn)行發(fā)酵，控制好條件也會(huì)生成亞硝酸鹽，D錯(cuò)誤。故選A。13.某科研團(tuán)隊(duì)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行珍稀絲狀真菌發(fā)酵產(chǎn)酶實(shí)驗(yàn)。在無(wú)菌操作和培養(yǎng)基處理過(guò)程中，出現(xiàn)了以下幾種情況，其中處理方式不合理的是（）A.將培養(yǎng)皿洗凈晾干后，裝入金屬容器中進(jìn)行滅菌，滅菌結(jié)束后待溫度降至50℃左右時(shí)取出B.配制好的培養(yǎng)基用不完可放在4℃冰箱中保存，下次用時(shí)取出加熱融化后倒入培養(yǎng)皿中直接使用C.接種時(shí)先將接種環(huán)灼燒滅菌，冷卻后挑取絲狀真菌的孢子，整個(gè)接種過(guò)程始終在酒精燈火焰旁D.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)含有真菌的培養(yǎng)基進(jìn)行濕熱滅菌處理，然后將廢棄物按生物安全要求分類(lèi)丟棄【答案】B〖祥解〗獲得純凈微生物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的污染。無(wú)菌操作主要包括：①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌。③為避免周?chē)h(huán)境中的微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周?chē)奈锲废嘟佑|。【詳析】A、玻璃培養(yǎng)皿采用干熱滅菌，裝入金屬容器防止滅菌過(guò)程中損壞，待溫度降至50℃左右取出可避免因溫度驟變導(dǎo)致玻璃器皿破裂，A正確；B、配制好的培養(yǎng)基用不完可放在4℃冰箱中保存，使用前需先檢查有無(wú)污染，加熱融化后還需再次調(diào)節(jié)pH等參數(shù)，然后滅菌，不能直接加熱融化后就倒入培養(yǎng)皿直接使用，B錯(cuò)誤；C、接種環(huán)灼燒滅菌冷卻后挑取孢子，靠近酒精燈火焰操作可減少雜菌污染，C正確；D、對(duì)含有真菌的培養(yǎng)基濕熱滅菌處理后按生物安全要求丟棄，可防止微生物擴(kuò)散造成污染，D正確。故選B。14.某城市自來(lái)水廠(chǎng)的水質(zhì)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，定期對(duì)出廠(chǎng)水樣中的大腸桿菌數(shù)量進(jìn)行定量測(cè)定，以確定水質(zhì)，一般采用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)。在整個(gè)操作及后續(xù)分析過(guò)程中，下列做法正確的是（）A.若想一次獲取稀釋倍數(shù)為103的水樣，則可將1mL水樣加入到99mL無(wú)菌水中制取B.梯度稀釋后每個(gè)稀釋度包括原水樣均涂布3個(gè)平板，并預(yù)留一個(gè)空白平板，以減小實(shí)驗(yàn)誤差C.應(yīng)配制選擇培養(yǎng)基進(jìn)行涂布，在完成涂布操作后，須立即將各組平板放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)時(shí)待菌落數(shù)穩(wěn)定時(shí)選取菌落數(shù)最多的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，也可用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板顯微觀察計(jì)數(shù)【答案】B〖祥解〗平板劃線(xiàn)法是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面；稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，通?？捎糜趯?duì)微生物進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)時(shí)如菌體位于大方格的雙線(xiàn)上，計(jì)數(shù)時(shí)則數(shù)上線(xiàn)不數(shù)下線(xiàn)，數(shù)左線(xiàn)不數(shù)右線(xiàn)，以減少誤差。即位于本格上線(xiàn)和左線(xiàn)上的細(xì)胞計(jì)入本格，本格的下線(xiàn)和右線(xiàn)上的細(xì)胞按規(guī)定計(jì)入相應(yīng)的格中?！驹斘觥緼、稀釋倍數(shù)為103時(shí)，應(yīng)將1mL水樣加入到999mL無(wú)菌水中，A錯(cuò)誤；B、梯度稀釋后每個(gè)稀釋度包括原水樣均涂布3個(gè)平板，并預(yù)留一個(gè)空白平板，以減小實(shí)驗(yàn)誤差，自來(lái)水中大腸桿菌數(shù)量可能較少，原水樣也需要涂布培養(yǎng)，B正確；C、應(yīng)配制鑒別培養(yǎng)基進(jìn)行涂布，涂布后需等待菌液被培養(yǎng)基吸收，再放入培養(yǎng)箱，否則菌液會(huì)在平板表面流動(dòng)，影響菌落分布和計(jì)數(shù)，C錯(cuò)誤；D、應(yīng)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取平均值，細(xì)菌可用細(xì)菌計(jì)數(shù)板進(jìn)行直接計(jì)數(shù)，但是自來(lái)水中可能有多種細(xì)菌顯微鏡觀察難以區(qū)分，D錯(cuò)誤。故選B15.依據(jù)《中華人民共和國(guó)生物安全法》，生物安全是指國(guó)家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒(méi)有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國(guó)家安全和持續(xù)發(fā)展的能力。下列敘述正確的是（）A.只要有證據(jù)表明某種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該全面禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用B.可通過(guò)基因編輯技術(shù)對(duì)基因進(jìn)行敲除、插入等，來(lái)設(shè)計(jì)完美試管嬰兒C.從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，不會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響D.高致病性微生物必須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)【答案】D〖祥解〗《中華人民共和國(guó)生物安全法》是為維護(hù)國(guó)家安全，防范和應(yīng)對(duì)生物安全風(fēng)險(xiǎn)，保障人民生命健康，保護(hù)生物資源和生態(tài)環(huán)境，促進(jìn)生物技術(shù)健康發(fā)展，推動(dòng)構(gòu)建人類(lèi)命運(yùn)共同體，實(shí)現(xiàn)人與自然和諧共生，制定的法律?！驹斘觥緼、轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，A錯(cuò)誤；B、利用基因編輯技術(shù)設(shè)計(jì)試管嬰兒，設(shè)計(jì)完美試管嬰兒，已經(jīng)涉及到新生命的誕生，會(huì)造成生物技術(shù)安全與倫理問(wèn)題，B錯(cuò)誤；C、從外來(lái)入侵害蟲(chóng)的原產(chǎn)地引入天敵進(jìn)行治理，由于短期內(nèi)天敵沒(méi)有資源和空間等的限制，可能會(huì)對(duì)入侵地造成生態(tài)影響，C錯(cuò)誤；D、高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開(kāi)展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，D正確。故選D。二、非選擇題（本大題共5小題，共55分）16.番茄青枯病是由青枯雷爾氏菌引起的，具有較強(qiáng)的侵染力和破壞力。番茄青枯病可通過(guò)以根際促生菌作為拮抗微生物抵御青枯雷爾氏菌進(jìn)行生物防治。因此，發(fā)掘新的高效能拮抗青枯病病原菌的促生微生物具有重要意義。回答下列問(wèn)題：（1）進(jìn)行樣本采集及拮抗細(xì)菌菌株分離純化時(shí)，應(yīng)采集某地番茄青枯病發(fā)病果園中_______（填“健康”或“患病”）植株根際土壤。先稱(chēng)取1g土壤添加到盛有_________的三角瓶中均勻振蕩后，置于恒溫水浴15min。經(jīng)分離培養(yǎng)后，挑取單菌落進(jìn)行劃線(xiàn)純化。在第二次及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，目的是_______。（2）進(jìn)行拮抗細(xì)菌的分離篩選時(shí)，為比較不同根系微生物純化菌液對(duì)青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人員配制了含有青枯病病原菌的平板，在含青枯病病原菌平板上滴加________，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察并比較抑菌圈的大小，拮抗作用越強(qiáng)則________。（3）通過(guò)對(duì)拮抗細(xì)菌產(chǎn)酶活性進(jìn)行測(cè)定，篩選出4株菌株，隨后進(jìn)行青枯病預(yù)防實(shí)驗(yàn)?，F(xiàn)有番茄幼苗、4種菌液、青枯菌菌液、無(wú)菌水等。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)比較菌株的預(yù)防效果：將生長(zhǎng)狀況相同且良好的幼苗平均分為5份，標(biāo)注1~5組。_________（補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)思路）?！敬鸢浮浚?）①.健康②.無(wú)菌水③.使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落（2）①.等量不同根系微生物菌液②.抑菌圈越大（3）1組噴灑無(wú)菌水和青枯菌菌液，2~5組分別噴灑等量的四種菌液，再?lài)姙⑶嗫菥海囵B(yǎng)一段時(shí)間觀察比對(duì)生長(zhǎng)及患病情況〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法：①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！窘馕觥浚?）拮抗細(xì)菌可通過(guò)拮抗青枯雷爾氏菌防止番茄青枯病的發(fā)生，在發(fā)病果園中存在青枯雷爾氏菌，其中健康的植株則是由于拮抗細(xì)菌的存在而使其保持健康，為了獲取拮抗菌株，應(yīng)選取健康植株的土壤；稱(chēng)取土壤后進(jìn)行稀釋?zhuān)褂脽o(wú)菌水進(jìn)行稀釋?zhuān)苊馔鈦?lái)微生物對(duì)純化的影響，因此先稱(chēng)取1g土壤添加到盛有無(wú)菌水的三角瓶中均勻振蕩后，置于恒溫水浴15min；經(jīng)分離培養(yǎng)后，挑取單菌落進(jìn)行劃線(xiàn)純化，所用方法是平板劃線(xiàn)法，通常使用的劃線(xiàn)工具是接種環(huán)；在第二次及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)，目的是使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。（2）為比較不同根系微生物純化菌液對(duì)青枯病病原菌的拮抗作用效果，科研人員配制了含有青枯病病原菌的平板，含青枯病病原菌平板中滴加等量的不同根系微生物純化菌液，在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察其抑菌圈的大?。桓滴⑸飳?duì)青枯病病原菌有拮抗作用，會(huì)抑制其生存，滴加了根系微生物純化菌液的地方不會(huì)生長(zhǎng)青枯病病原菌，其周?chē)L(zhǎng)了青枯病病原菌，形成抑菌圈，所以拮抗作用越強(qiáng)則抑制菌圈越大。（3）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖沁M(jìn)行青枯病預(yù)防實(shí)驗(yàn)比較菌株的預(yù)防效果，故實(shí)驗(yàn)自變量為菌株的種類(lèi)，在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)過(guò)程中，要遵循單一變量的原則，因此實(shí)驗(yàn)思路為：將生長(zhǎng)狀況相同且良好幼苗平均分為5等分，標(biāo)注1-5組，每組設(shè)三個(gè)平行組，1組噴灑無(wú)菌水（作為對(duì)照組）和青桔菌液，2-5組分別噴灑四種菌液，后噴灑青枯菌菌液，培養(yǎng)一段時(shí)間觀察比對(duì)生長(zhǎng)及患病情況。