核酸檢測試劑盒生產(chǎn)技術(shù)員崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.核酸的基本組成單位是______。2.核酸檢測試劑盒中，特異性識(shí)別靶序列的核心成分是______和探針。3.PCR反應(yīng)的三個(gè)基本步驟是變性、退火和______。4.試劑盒生產(chǎn)潔凈區(qū)通常要求的級(jí)別是______級(jí)。5.SOP的中文全稱是______。6.以RNA為模板合成cDNA的酶是______。7.目前核酸提取常用的方法是______法。8.影響試劑盒有效期的關(guān)鍵因素是______。9.試劑盒生產(chǎn)需遵循的質(zhì)量管理規(guī)范縮寫是______。10.處理感染性樣本的生物安全柜通常為______級(jí)。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.PCR反應(yīng)中，退火溫度主要由以下哪項(xiàng)決定？（）A.模板長度B.引物Tm值C.dNTP濃度D.酶活性2.核酸提取過程中，去除蛋白質(zhì)常用的試劑是（）A.蛋白酶KB.DEPC水C.乙醇D.異丙醇3.試劑盒生產(chǎn)潔凈區(qū)的適宜溫濕度范圍是（）A.18-22℃，30-50%RHB.20-24℃，45-60%RHC.22-26℃，50-70%RHD.25-28℃，60-80%RH4.以下哪項(xiàng)是試劑盒包裝的核心要求？（）A.美觀B.密封性C.輕便D.彩色印刷5.核酸檢測假陰性結(jié)果的常見原因不包括（）A.樣本采集不足B.核酸提取失敗C.引物非特異性結(jié)合D.試劑過期6.預(yù)防RNA酶污染的常用處理方法是（）A.高壓滅菌B.DEPC處理C.紫外線照射D.酒精擦拭7.熒光定量PCR檢測的信號(hào)來源是（）A.瓊脂糖電泳條帶B.熒光探針結(jié)合C.溴化乙錠染色D.比色反應(yīng)8.試劑盒原料檢驗(yàn)的核心目的是（）A.降低成本B.保證質(zhì)量一致性C.加快生產(chǎn)速度D.簡化流程9.生物安全柜操作時(shí)，手臂放入工作區(qū)的正確要求是（）A.快速插入B.緩慢垂直放入C.傾斜放入D.無特殊要求10.核酸檢測試劑盒通常的儲(chǔ)存溫度是（）A.4℃B.-20℃C.0℃D.室溫三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.核酸檢測試劑盒的核心成分包括（）A.引物B.探針C.Taq酶D.dNTPE.緩沖液2.潔凈區(qū)管理的關(guān)鍵要求有（）A.定期清潔消毒B.人員更衣規(guī)范C.物料傳遞滅菌D.定期氣流驗(yàn)證E.隨意進(jìn)出3.核酸提取的磁珠法步驟包括（）A.樣本裂解B.核酸結(jié)合磁珠C.洗滌雜質(zhì)D.核酸洗脫E.酶切4.核酸檢測假陽性結(jié)果的常見原因有（）A.樣本交叉污染B.試劑污染C.儀器污染D.引物二聚體E.樣本量不足5.GMP要求中“防止交叉污染”的措施包括（）A.專用設(shè)備分區(qū)B.物料單向流向C.人員分區(qū)更衣D.定期環(huán)境監(jiān)測E.共用工具6.生物安全柜使用的注意事項(xiàng)有（）A.定期校準(zhǔn)B.避免遮擋進(jìn)風(fēng)口C.定期氣流檢測D.實(shí)驗(yàn)后消毒E.直接放置酒精燈7.試劑盒成品檢驗(yàn)的主要項(xiàng)目包括（）A.外觀檢查B.特異性C.靈敏度D.穩(wěn)定性E.無菌性8.PCR反應(yīng)體系的必要組成成分有（）A.模板核酸B.引物C.Taq酶D.dNTPE.甘油9.試劑盒儲(chǔ)存的關(guān)鍵要求是（）A.避光B.低溫C.干燥D.密封E.高溫10.生物安全防護(hù)中，BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室適用于處理（）A.高致病性病原體B.中等致病性病原體C.常見呼吸道病原體D.無致病性微生物E.烈性傳染病病原體四、判斷題（每題2分，共20分）1.PCR反應(yīng)的變性溫度通常為95℃左右。（）2.RNA可直接作為PCR反應(yīng)的模板。（）3.潔凈區(qū)級(jí)別越高，空氣中微生物數(shù)量越少。（）4.核酸檢測試劑盒需取得醫(yī)療器械注冊證方可生產(chǎn)銷售。（）5.生物安全柜可有效防止感染性樣本的氣溶膠擴(kuò)散。（）6.引物設(shè)計(jì)時(shí)無需考慮與模板的特異性結(jié)合。（）7.磁珠法核酸提取依賴核酸與磁珠表面的特異性結(jié)合。（）8.試劑盒穩(wěn)定性試驗(yàn)包括加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)。（）9.技術(shù)員可根據(jù)經(jīng)驗(yàn)自行修改SOP。（）10.假陽性結(jié)果一定是樣本污染導(dǎo)致的。（）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述核酸檢測試劑盒生產(chǎn)中防止交叉污染的關(guān)鍵措施。2.核酸提取的磁珠法原理是什么？3.簡述PCR反應(yīng)的三個(gè)基本步驟及對(duì)應(yīng)的溫度條件。4.試劑盒成品檢驗(yàn)的主要項(xiàng)目有哪些？六、討論題（每題5分，共10分）1.分析核酸檢測試劑盒出現(xiàn)假陰性結(jié)果的常見原因及解決辦法。2.討論生物安全柜在試劑盒生產(chǎn)中的正確使用及維護(hù)要點(diǎn)。---答案部分一、填空題答案1.核苷酸2.引物3.延伸4.萬5.標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程6.反轉(zhuǎn)錄酶7.磁珠8.溫度9.GMP10.BSL-2二、單項(xiàng)選擇題答案1.B2.A3.B4.B5.C6.B7.B8.B9.B10.B三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCDE2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABCDE8.ABCD9.ABCD10.BC四、判斷題答案1.√2.×3.√4.√5.√6.×7.√8.√9.×10.×五、簡答題答案1.①物理分區(qū)：原料、配制、分裝區(qū)嚴(yán)格隔離；②專用設(shè)備：不同工序設(shè)備不共用；③人員更衣：不同區(qū)域人員穿專用潔凈服；④物料傳遞：經(jīng)傳遞窗滅菌后進(jìn)入潔凈區(qū)；⑤環(huán)境監(jiān)測：定期檢測微生物，及時(shí)消毒；⑥單人單批：試劑分裝時(shí)單人操作，避免批量交叉。2.磁珠表面修飾硅羥基等基團(tuán)，在高鹽條件下，核酸與磁珠特異性結(jié)合；通過磁場吸附磁珠，去除雜質(zhì)；用低鹽洗脫液將核酸從磁珠上分離，獲得純化核酸。3.①變性：94-95℃，雙鏈DNA解旋為單鏈；②退火：55-65℃，引物與單鏈模板結(jié)合；③延伸：72℃，Taq酶合成互補(bǔ)鏈。三步循環(huán)實(shí)現(xiàn)核酸指數(shù)擴(kuò)增。4.①外觀：包裝、內(nèi)容物無破損；②物理性能：試劑澄清度、分裝量；③質(zhì)量指標(biāo)：特異性、靈敏度、精密度；④穩(wěn)定性：加速/長期試驗(yàn)驗(yàn)證有效期；⑤無菌性：微生物檢測符合要求。六、討論題答案1.常見原因：①樣本問題：采集不足、RNA降解；②提取問題：核酸殘留抑制劑；③試劑問題：過期、酶活性下降；④操作問題：加樣錯(cuò)誤。解決辦法：①規(guī)范樣本采集（咽拭子深度、保存液正確）；②優(yōu)化提取流程（增加裂解時(shí)間）；③定期更換失效試劑；④嚴(yán)格