生物樣本庫樣本凍存技術(shù)工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.細(xì)胞凍存的核心原則是______。2.常用凍存液中DMSO的濃度一般為______。3.樣本凍存前需記錄的關(guān)鍵信息包括樣本編號、采集時間和______。4.液氮罐操作中，禁止用______接觸液氮。5.組織樣本凍存前通常需要______成小塊。6.程序降溫盒的降溫速率一般控制在______℃/min。7.樣本長期保存的液氮溫度為______℃。8.凍存樣本解凍應(yīng)置于______℃水浴快速融化。9.凍存管常用材質(zhì)為______。10.樣本凍存記錄需包含______（操作人/復(fù)核人）信息。答案：1.慢凍快融；2.10%；3.凍存條件；4.裸露皮膚；5.切割；6.1；7.-196；8.37；9.聚丙烯（PP）；10.操作人二、單項選擇題（每題2分，共20分）1.以下不是常用凍存保護劑的是？A.DMSOB.甘油C.蔗糖D.生理鹽水2.細(xì)胞程序降溫的最終溫度是？A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.0℃3.液氮罐日常檢查不包括？A.液氮液位B.安全閥C.罐內(nèi)壓力D.凍存管數(shù)量4.組織凍存前預(yù)處理不包括？A.去壞死組織B.稱重C.固定D.切小塊5.解凍細(xì)胞的正確操作是？A.緩慢解凍B.37℃水浴搖晃C.室溫放置D.冰上解凍6.適合長期凍存的樣本是？A.新鮮血液B.甲醛固定組織C.液氮凍存組織D.室溫細(xì)胞7.凍存管標(biāo)識應(yīng)包含？A.僅編號B.編號+凍存日期C.編號+采集人D.僅日期8.程序降溫盒的作用是？A.快速降溫B.控制降溫速率C.保溫D.防液氮污染9.液氮罐液位低于______需補充？A.1/3B.1/2C.2/3D.1/410.細(xì)胞凍存后______小時內(nèi)轉(zhuǎn)液氮？A.24B.48C.72D.12答案：1.D；2.B；3.D；4.C；5.B；6.C；7.B；8.B；9.A；10.A三、多項選擇題（每題2分，共20分）1.凍存保護劑的作用包括？A.減少冰晶形成B.避免細(xì)胞脫水C.維持滲透壓D.殺滅微生物2.樣本凍存關(guān)鍵步驟有？A.預(yù)處理B.凍存液配制C.程序降溫D.液氮保存3.液氮罐安全注意事項？A.戴防凍手套B.防濺灑C.查安全閥D.放非凍存物品4.細(xì)胞凍存注意事項？A.對數(shù)生長期B.凍存液現(xiàn)配C.凍存管擰緊D.解凍后立即離心5.組織凍存預(yù)處理要求？A.快速處理B.防機械損傷C.去多余血液D.無需記錄6.凍存樣本管理要求？A.雙人雙鎖B.定期盤點C.出入庫記錄D.無需標(biāo)識7.屬于凍存設(shè)備的是？A.程序降溫盒B.液氮罐C.-80℃冰箱D.水浴鍋8.解凍樣本正確操作？A.37℃快速融化B.融化后冰上放置C.防凍存管破裂D.無需查狀態(tài)9.凍存記錄內(nèi)容？A.樣本類型B.凍存條件C.操作人D.解凍次數(shù)10.液氮危害包括？A.凍傷B.窒息C.爆炸D.腐蝕答案：1.ABC；2.ABCD；3.ABC；4.ABC；5.ABC；6.ABC；7.ABCD；8.AC；9.ABCD；10.AB四、判斷題（每題2分，共20分）1.細(xì)胞凍存時DMSO濃度越高越好。（×）2.液氮罐可敞口放置。（×）3.組織凍存前需固定。（×）4.解凍樣本應(yīng)緩慢進行。（×）5.程序降溫盒速率為1℃/min。（√）6.凍存管可重復(fù)使用。（×）7.凍存樣本24小時內(nèi)轉(zhuǎn)液氮。（√）8.液氮罐需定期查液位。（√）9.凍存保護劑防細(xì)胞凋亡。（×）10.解凍細(xì)胞應(yīng)立即接種。（√）五、簡答題（每題5分，共20分）1.簡述細(xì)胞凍存核心步驟及注意事項。答案：核心步驟：①對數(shù)生長期細(xì)胞離心收集；②配10%DMSO+90%完全培養(yǎng)基；③分裝凍存管（標(biāo)識清晰）；④程序降溫（1℃/min至-80℃）；⑤24小時內(nèi)轉(zhuǎn)液氮。注意事項：細(xì)胞狀態(tài)良好、凍存液現(xiàn)配、避免DMSO接觸皮膚、凍存管擰緊。2.液氮罐日常維護要點？答案：①每日查液位（<1/3補充）；②每周查安全閥/壓力表；③定期清罐內(nèi)雜物；④凍存架/盒分區(qū)標(biāo)識；⑤操作戴防凍手套/護目鏡；⑥禁放非凍存物品。3.組織凍存前預(yù)處理關(guān)鍵要求？答案：①采集后30分鐘內(nèi)快速處理；②去壞死組織/多余血液；③切1cm3以下小塊；④加凍存液（10%DMSO+FBS）；⑤雙標(biāo)識（編號、日期、部位）。4.凍存樣本解凍正確操作及注意事項？答案：操作：①37℃水浴搖晃1-2分鐘融化；②酒精擦管口；③加預(yù)冷培養(yǎng)基混勻；④1000rpm離心5分鐘棄上清。注意：防凍存管破裂、快速融化、解凍后30分鐘內(nèi)處理、避免DMSO長時間接觸細(xì)胞。六、討論題（每題5分，共10分）1.如何避免凍存樣本交叉污染？答案：①標(biāo)識：唯一編號+雙標(biāo)簽（內(nèi)外）；②操作：凍存管擰緊、換樣本換手套；③設(shè)備：液氮罐分區(qū)、凍存架/盒定期消毒；④記錄：出入庫雙人核對；⑤應(yīng)急：泄漏樣本隔離、清罐。2.凍存樣本質(zhì)量控制關(guān)鍵環(huán)節(jié)及方法？答案：環(huán)節(jié)：采集→預(yù)處理→凍存→保存→解