慢性熱應(yīng)激下肉雞糖脂代謝紊亂及?；撬岬恼{(diào)節(jié)效應(yīng)探究一、引言1.1研究背景與意義隨著全球氣候變暖，極端高溫天氣頻繁出現(xiàn)，熱應(yīng)激已成為制約肉雞產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要因素之一。肉雞由于自身生理特點(diǎn)，如羽毛厚、汗腺不發(fā)達(dá)等，對高溫環(huán)境極為敏感。當(dāng)環(huán)境溫度超過其適宜溫度范圍時，肉雞就會發(fā)生熱應(yīng)激反應(yīng)，進(jìn)而引發(fā)一系列生理、生化和行為變化。熱應(yīng)激對肉雞的危害是多方面的。在生產(chǎn)性能方面，熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞采食量顯著下降。據(jù)研究表明，在21-30℃時，環(huán)境溫度每升高1℃，采食量下降1.5％；在32-38℃時，每升高1℃，采食量下降4.6％。采食量的減少直接影響肉雞的生長速度，使其增重下降7％-17％，同時飼料轉(zhuǎn)化率也會降低7％-14％。在肉品質(zhì)方面，熱應(yīng)激會使肉雞胸肌肉色蒼白、質(zhì)地松軟、保水性差，產(chǎn)生PSE肉，嚴(yán)重影響肉品的市場價(jià)值和消費(fèi)者接受度。熱應(yīng)激還會對肉雞的免疫機(jī)能造成損害，降低血液中免疫球蛋白濃度，減少淋巴細(xì)胞數(shù)量，使巨噬細(xì)胞吞噬能力下降，增加肉雞對病原菌的易感性，導(dǎo)致疾病的發(fā)生和傳播，給養(yǎng)殖企業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。糖脂代謝是維持動物機(jī)體正常生理功能的重要代謝過程。在熱應(yīng)激狀態(tài)下，肉雞的糖脂代謝會發(fā)生紊亂。熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞血糖升高，胰島素敏感性降低，影響葡萄糖的攝取和利用。在脂代謝方面，熱應(yīng)激會促使脂肪分解增加，血液中游離脂肪酸含量升高，同時脂肪合成相關(guān)酶的活性發(fā)生改變，導(dǎo)致脂肪沉積異常，進(jìn)一步影響肉雞的生長性能和肉品質(zhì)。因此，深入研究慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響機(jī)制，對于緩解熱應(yīng)激對肉雞產(chǎn)業(yè)的危害具有重要的理論意義。?；撬嶙鳛橐环N含硫的非蛋白質(zhì)氨基酸，在動物體內(nèi)具有多種重要的生物學(xué)功能。它參與機(jī)體的細(xì)胞體積調(diào)節(jié)、滲透壓調(diào)節(jié)、蛋白磷酸化、膜穩(wěn)定、膽汁酸代謝、神經(jīng)調(diào)節(jié)、鈣的維持、解毒等過程。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，牛磺酸具有抗氧化、抗炎癥和調(diào)節(jié)糖脂代謝等特性，能夠緩解多種炎癥損傷類型的疾病，對動物機(jī)體穩(wěn)態(tài)的維持起到關(guān)鍵作用。在熱應(yīng)激條件下，?；撬峥梢酝ㄟ^調(diào)節(jié)肉雞的生理機(jī)能，減輕熱應(yīng)激對其造成的損害。例如，有研究表明，在日糧中補(bǔ)充?；撬峥蓽p輕熱應(yīng)激導(dǎo)致的肉雞胸肌損失，改善生產(chǎn)性能和營養(yǎng)物質(zhì)消化。牛磺酸還能逆轉(zhuǎn)熱應(yīng)激導(dǎo)致的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性的下降，降低丙二醛的積累，減輕線粒體損傷和降低細(xì)胞凋亡率。然而，目前關(guān)于?；撬峋徑饴詿釕?yīng)激對肉雞糖脂代謝影響的研究還相對較少，其作用機(jī)制尚未完全明確。本研究旨在探討慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響，并深入研究?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞糖脂代謝的緩解作用及其機(jī)制。通過本研究，不僅可以豐富肉雞熱應(yīng)激和營養(yǎng)代謝調(diào)控的理論知識，為肉雞的健康養(yǎng)殖提供科學(xué)依據(jù)，還能為開發(fā)新型的抗熱應(yīng)激飼料添加劑提供參考，具有重要的實(shí)踐意義，有望為肉雞產(chǎn)業(yè)應(yīng)對熱應(yīng)激挑戰(zhàn)提供有效的解決方案，促進(jìn)肉雞產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。1.2研究目的與內(nèi)容1.2.1研究目的本研究旨在深入探討慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響，全面揭示熱應(yīng)激下肉雞糖脂代謝紊亂的內(nèi)在機(jī)制。在此基礎(chǔ)上，系統(tǒng)研究牛磺酸對慢性熱應(yīng)激肉雞糖脂代謝的緩解作用，明確?；撬岚l(fā)揮作用的途徑和分子機(jī)制，為在肉雞養(yǎng)殖中合理應(yīng)用?；撬峋徑鉄釕?yīng)激、改善糖脂代謝提供科學(xué)依據(jù)，最終促進(jìn)肉雞產(chǎn)業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。1.2.2研究內(nèi)容慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能和血清代謝組學(xué)的影響：選取健康的肉雞，隨機(jī)分為對照組和慢性熱應(yīng)激組。對照組在適宜溫度環(huán)境下飼養(yǎng)，慢性熱應(yīng)激組在設(shè)定的高溫環(huán)境中飼養(yǎng)。在試驗(yàn)期間，定期測定肉雞的體重、采食量、飲水量等生長性能指標(biāo)。在試驗(yàn)結(jié)束時，采集肉雞血清，利用代謝組學(xué)技術(shù)分析血清中的代謝物變化，篩選出與慢性熱應(yīng)激相關(guān)的差異代謝物，并對這些差異代謝物進(jìn)行通路分析，初步揭示慢性熱應(yīng)激對肉雞整體代謝的影響機(jī)制。慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟糖脂代謝的影響：在上述試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，屠宰肉雞，測定屠宰性能指標(biāo)，如屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率等。采集肝臟組織，測定肝臟中糖代謝相關(guān)指標(biāo)，如葡萄糖含量、糖原含量、糖酵解關(guān)鍵酶活性（己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶）、糖異生關(guān)鍵酶活性（葡萄糖-6-磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶）；測定脂代謝相關(guān)指標(biāo)，如甘油三酯含量、總膽固醇含量、游離脂肪酸含量、脂肪酸合成酶活性、脂肪酸氧化關(guān)鍵酶活性（肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ、β-羥?；o酶A脫氫酶）。通過組織切片觀察肝臟脂肪沉積情況，利用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平，如胰島素受體底物1（IRS1）、蛋白激酶B（AKT）、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）、脂肪酸結(jié)合蛋白4（FABP4）等，探究慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖脂代謝的影響機(jī)制。慢性熱應(yīng)激對肉雞胸肌肉品質(zhì)和糖脂代謝的影響：同樣在上述試驗(yàn)中，采集胸肌樣品，測定肉雞胸肌肉品質(zhì)指標(biāo)，包括肉色（亮度L*、紅度a*、黃度b*）、pH值、滴水損失、剪切力。檢測胸肌中活性氧（ROS）水平和氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)，如超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量。測定胸肌糖脂代謝指標(biāo)，如葡萄糖含量、糖原含量、甘油三酯含量、脂肪酸組成。利用透射電鏡觀察胸肌超顯微結(jié)構(gòu)變化，通過實(shí)時熒光定量PCR檢測胸肌糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平，如葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（GLUT4）、丙酮酸脫氫酶激酶4（PDK4）、肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ（CPT1）、脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1（FATP1）等，研究慢性熱應(yīng)激對肉雞胸肌肉品質(zhì)和糖脂代謝的影響及其相互關(guān)系。日糧添加?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞生長性能和屠宰性能及肝臟糖脂代謝的影響：在慢性熱應(yīng)激試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，增設(shè)?；撬崽砑咏M，在日糧中添加不同水平的?；撬?。測定肉雞的生長性能和屠宰性能指標(biāo)，觀察?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞生長和屠宰性能的改善效果。采集肝臟組織，測定肝臟糖脂代謝相關(guān)指標(biāo)，包括糖代謝指標(biāo)、脂代謝指標(biāo)、脂肪沉積情況以及糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平，探討?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞肝臟糖脂代謝的調(diào)節(jié)作用及其機(jī)制。日糧添加?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞胸肌肉品質(zhì)和抗氧化性能的影響：在上述試驗(yàn)中，針對胸肌進(jìn)行研究，測定肉雞胸肌肉品質(zhì)指標(biāo)，如肉色、pH值、滴水損失、剪切力等。檢測胸肌中ROS水平和氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)，如SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量。利用實(shí)時熒光定量PCR檢測胸肌Nrf2通路抗氧化相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平，如核因子E2相關(guān)因子2（Nrf2）、血紅素加氧酶1（HO-1）、醌氧化還原酶1（NQO1）等，研究?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞胸肌肉品質(zhì)和抗氧化性能的影響，闡明?；撬嵬ㄟ^抗氧化途徑改善肉雞胸肌肉品質(zhì)的作用機(jī)制。1.3研究方法與技術(shù)路線1.3.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能和血清代謝組學(xué)的影響：選取1日齡健康的AA肉雞120只，隨機(jī)分為2組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。對照組飼養(yǎng)在溫度為（24±1）℃、相對濕度為（60±5）%的環(huán)境中；慢性熱應(yīng)激組飼養(yǎng)在溫度為（32±1）℃、相對濕度為（65±5）%的環(huán)境中，試驗(yàn)期為42天。在試驗(yàn)期間，每天記錄肉雞的采食量、飲水量，每周周末對肉雞進(jìn)行稱重，計(jì)算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）。在試驗(yàn)第42天，每個重復(fù)隨機(jī)選取2只肉雞，進(jìn)行翅下靜脈采血，分離血清，用于代謝組學(xué)分析。慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟糖脂代謝的影響：在上述試驗(yàn)基礎(chǔ)上，試驗(yàn)第42天，每個重復(fù)選取2只肉雞進(jìn)行屠宰。測定屠宰性能指標(biāo)，包括屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率。采集肝臟組織，一部分用于常規(guī)指標(biāo)測定，一部分用4%多聚甲醛固定，用于組織切片觀察肝臟脂肪沉積情況。慢性熱應(yīng)激對肉雞胸肌肉品質(zhì)和糖脂代謝的影響：同樣在上述試驗(yàn)中，屠宰后采集胸肌樣品。測定肉色（亮度L*、紅度a*、黃度b*）、pH值（宰后45min和24h）、滴水損失（宰后24h和48h）、剪切力（采用質(zhì)構(gòu)儀測定）。檢測胸肌中活性氧（ROS）水平和氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)，采集的胸肌一部分用于常規(guī)指標(biāo)測定，一部分用2.5%戊二醛固定，用于透射電鏡觀察胸肌超顯微結(jié)構(gòu)變化。日糧添加牛磺酸對慢性熱應(yīng)激肉雞生長性能和屠宰性能及肝臟糖脂代謝的影響：選取1日齡健康的AA肉雞180只，隨機(jī)分為3組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。對照組飼養(yǎng)在適宜溫度環(huán)境（24±1）℃、相對濕度為（60±5）%，飼喂基礎(chǔ)日糧；慢性熱應(yīng)激組飼養(yǎng)在高溫環(huán)境（32±1）℃、相對濕度為（65±5）%，飼喂基礎(chǔ)日糧；?；撬崽砑咏M飼養(yǎng)在高溫環(huán)境（32±1）℃、相對濕度為（65±5）%，在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%?；撬?，試驗(yàn)期為42天。在試驗(yàn)期間，記錄肉雞的采食量、飲水量和體重，計(jì)算ADFI、ADG和F/G。試驗(yàn)第42天，進(jìn)行屠宰性能測定和肝臟組織相關(guān)指標(biāo)檢測，方法同前。日糧添加?；撬釋β詿釕?yīng)激肉雞胸肌肉品質(zhì)和抗氧化性能的影響：在上述試驗(yàn)中，針對胸肌進(jìn)行研究。測定肉雞胸肌肉品質(zhì)指標(biāo)，如肉色、pH值、滴水損失、剪切力等。檢測胸肌中ROS水平和氧化還原狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)，利用實(shí)時熒光定量PCR檢測胸肌Nrf2通路抗氧化相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平。1.3.2指標(biāo)測定生長性能指標(biāo)：每周周末對肉雞進(jìn)行空腹稱重，記錄每周的采食量和飲水量，按照公式計(jì)算ADFI、ADG和F/G。ADFI（g/d）=每周采食量（g）/（試驗(yàn)天數(shù)×每個重復(fù)雞只數(shù)）；ADG（g/d）=（末重-初重）（g）/（試驗(yàn)天數(shù)×每個重復(fù)雞只數(shù)）；F/G=ADFI/ADG。血清代謝組學(xué)分析：采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（UPLC-MS/MS）對血清樣本進(jìn)行代謝組學(xué)分析。首先對血清樣本進(jìn)行預(yù)處理，加入甲醇沉淀蛋白，渦旋振蕩后離心，取上清液進(jìn)行真空濃縮干燥。將干燥后的樣本用流動相復(fù)溶，經(jīng)0.22μm濾膜過濾后注入U(xiǎn)PLC-MS/MS系統(tǒng)進(jìn)行分析。利用相關(guān)軟件對采集到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括峰識別、峰對齊、積分等。通過與標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)庫或自建數(shù)據(jù)庫比對，鑒定差異代謝物，并對差異代謝物進(jìn)行通路分析，挖掘與慢性熱應(yīng)激相關(guān)的代謝通路。屠宰性能指標(biāo)：屠宰后立即測定屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率。屠宰率（%）=宰后體重/活重×100%；半凈膛率（%）=（宰后體重-嗉囊、氣管、食道、腸、脾、胰、膽、生殖器官、腳、羽毛等重量）/活重×100%；全凈膛率（%）=（半凈膛重-心、肝、腺胃、肌胃、腹脂等重量）/活重×100%；胸肌率（%）=胸肌重/全凈膛重×100%；腿肌率（%）=腿肌重/全凈膛重×100%。肝臟糖脂代謝指標(biāo)：采用相應(yīng)的試劑盒測定肝臟中葡萄糖、糖原、甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸含量。按照試劑盒說明書，將肝臟組織勻漿后，離心取上清液進(jìn)行測定。利用酶標(biāo)儀測定糖酵解關(guān)鍵酶（己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶）、糖異生關(guān)鍵酶（葡萄糖-6-磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶）、脂肪酸合成酶、脂肪酸氧化關(guān)鍵酶（肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ、β-羥酰基輔酶A脫氫酶）活性。采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平，提取肝臟組織總RNA，反轉(zhuǎn)錄為cDNA，以cDNA為模板，利用特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以β-actin作為內(nèi)參基因，采用2^-ΔΔCt法計(jì)算基因相對表達(dá)量。胸肌肉品質(zhì)指標(biāo)：采用色差儀測定肉色，在胸肌表面隨機(jī)選取3個點(diǎn)，測定亮度L*、紅度a*、黃度b*，取平均值。使用pH計(jì)測定宰后45min和24h胸肌的pH值。采用懸掛法測定滴水損失，將胸肌樣品稱重后懸掛于塑料袋中，在4℃冰箱中放置24h和48h后再次稱重，按照公式計(jì)算滴水損失率。滴水損失率（%）=（初始重量-放置后重量）/初始重量×100%。采用質(zhì)構(gòu)儀測定剪切力，將胸肌樣品切成1cm×1cm×3cm的長條，使用剪切探頭進(jìn)行測定，記錄最大剪切力值。胸肌糖脂代謝指標(biāo)：測定胸肌中葡萄糖、糖原、甘油三酯含量方法同肝臟糖脂代謝指標(biāo)測定。采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS）測定胸肌脂肪酸組成，將胸肌樣品進(jìn)行甲酯化處理后，注入GC-MS系統(tǒng)進(jìn)行分析，通過與標(biāo)準(zhǔn)品比對確定脂肪酸種類和相對含量。利用實(shí)時熒光定量PCR檢測胸肌糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平，方法同肝臟糖脂代謝調(diào)控基因檢測?？寡趸阅苤笜?biāo)：采用相應(yīng)的試劑盒測定胸肌中ROS水平、SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量。將胸肌組織勻漿后，離心取上清液，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，利用酶標(biāo)儀測定吸光度值，計(jì)算相應(yīng)指標(biāo)含量或活性。利用實(shí)時熒光定量PCR檢測胸肌Nrf2通路抗氧化相關(guān)基因mRNA表達(dá)水平，方法同肝臟糖脂代謝調(diào)控基因檢測。1.3.3數(shù)據(jù)分析采用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”表示。多組數(shù)據(jù)間比較采用單因素方差分析（One-wayANOVA），若差異顯著（P<0.05），則進(jìn)一步采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。代謝組學(xué)數(shù)據(jù)采用主成分分析（PCA）、偏最小二乘判別分析（PLS-DA）等多元統(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行分析，篩選差異代謝物，利用MetaboAnalyst等在線工具進(jìn)行通路分析。通過數(shù)據(jù)分析，揭示慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響以及?；撬岬木徑庾饔脵C(jī)制。本研究的技術(shù)路線如圖1-1所示。首先進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將肉雞分組并分別進(jìn)行不同處理。在試驗(yàn)過程中，定期采集數(shù)據(jù)和樣品，包括生長性能數(shù)據(jù)、血清樣本、屠宰性能數(shù)據(jù)、肝臟和胸肌組織樣本等。然后對采集到的樣品進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)測定，如血清代謝組學(xué)分析、糖脂代謝指標(biāo)測定、肉品質(zhì)指標(biāo)測定、抗氧化性能指標(biāo)測定等。最后對測定得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響以及?；撬岬木徑庾饔媒Y(jié)果，并進(jìn)行討論和總結(jié)。[此處插入技術(shù)路線圖]圖1-1技術(shù)路線圖二、文獻(xiàn)綜述2.1肉雞熱應(yīng)激概述2.1.1熱應(yīng)激概念與分類熱應(yīng)激是指動物機(jī)體在受到外界高溫環(huán)境刺激時，為了維持體溫恒定，通過一系列生理、生化和行為變化來應(yīng)對熱負(fù)荷的非特異性防御反應(yīng)。當(dāng)環(huán)境溫度超過動物的等熱范圍上限時，動物就會進(jìn)入熱應(yīng)激狀態(tài)。對于肉雞而言，一般認(rèn)為其適宜生長的環(huán)境溫度在18-26℃之間，當(dāng)環(huán)境溫度長時間高于28℃時，肉雞就容易發(fā)生熱應(yīng)激。熱應(yīng)激對肉雞的生長發(fā)育、生產(chǎn)性能、免疫功能等方面都會產(chǎn)生負(fù)面影響，嚴(yán)重時甚至?xí)?dǎo)致肉雞死亡，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。根據(jù)熱應(yīng)激持續(xù)時間和強(qiáng)度的不同，可將其分為急性熱應(yīng)激和慢性熱應(yīng)激。急性熱應(yīng)激通常是指環(huán)境溫度在短時間內(nèi)急劇升高，肉雞在數(shù)小時內(nèi)受到高強(qiáng)度的熱刺激，導(dǎo)致機(jī)體迅速出現(xiàn)一系列應(yīng)激反應(yīng)，如呼吸急促、心跳加快、采食量急劇下降等。這種應(yīng)激情況對肉雞的危害較為迅速和嚴(yán)重，若不及時采取措施，可能會導(dǎo)致肉雞急性死亡。而慢性熱應(yīng)激則是指環(huán)境溫度在較長時間內(nèi)維持在相對較高的水平，肉雞長期處于這種溫?zé)岘h(huán)境中，其生理機(jī)能逐漸發(fā)生改變以適應(yīng)熱環(huán)境。雖然慢性熱應(yīng)激對肉雞的影響相對較為緩慢，但長期積累下來，同樣會對肉雞的生長性能、肉質(zhì)品質(zhì)、免疫力等造成嚴(yán)重的損害，導(dǎo)致肉雞生長緩慢、飼料轉(zhuǎn)化率降低、肉品質(zhì)下降以及易感染疾病等問題。2.1.2熱應(yīng)激對肉雞的多方面影響行為變化：在熱應(yīng)激狀態(tài)下，肉雞會表現(xiàn)出明顯的行為異常。為了增加散熱面積，它們會展開翅膀，使翅膀羽毛散開，同時呼吸頻率加快，通過加快氣體交換來散發(fā)體內(nèi)熱量。肉雞會減少活動量，更多地伏臥在地面上，尋找陰涼或潮濕的地方，以降低自身溫度。由于熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞不適，它們還可能出現(xiàn)煩躁不安的情緒，較多出現(xiàn)“啄毛”現(xiàn)象，“次雞率”上升，這不僅影響肉雞自身的健康，還可能導(dǎo)致雞群之間的爭斗和傷害。熱應(yīng)激還會使肉雞的采食行為發(fā)生改變，采食量明顯下降，飲水量則大幅增加，以補(bǔ)充因呼吸和體表蒸發(fā)而散失的水分，同時排出較濕的糞便，甚至出現(xiàn)“飼料糞”。神經(jīng)內(nèi)分泌紊亂：熱應(yīng)激會對肉雞的神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生顯著影響。甲狀腺和腎上腺是肉雞體內(nèi)重要的內(nèi)分泌器官，甲狀腺主要分泌三碘甲腺原氨酸（T3）和甲狀腺素（T4），它們對調(diào)節(jié)肉雞的基礎(chǔ)代謝率起著關(guān)鍵作用。在熱應(yīng)激條件下，T3和T4的分泌會發(fā)生改變，何世山等認(rèn)為熱應(yīng)激狀況下T3濃度急速下降，一直維持在較低狀態(tài)，而甲狀腺素（T4）的濃度則是在剛剛開始的時候直至溫度逐步升高至38℃期間一直處于上升狀態(tài)，而在72H的時候則保持平穩(wěn)，一周以后出現(xiàn)降低；顧憲紅等人則認(rèn)為T3是先下降后恢復(fù)，T4是先上升后恢復(fù)。短期內(nèi)主要是通過降低發(fā)揮主要作用的T3濃度來降低基礎(chǔ)代謝率，以此來減少產(chǎn)熱量。腎上腺的腎間組織比例在熱應(yīng)激時增多，細(xì)胞增大，分泌的醛固酮增加，由于醛固酮的保鈉排鉀作用，使肉雞出現(xiàn)低鉀狀態(tài)。熱應(yīng)激還會導(dǎo)致肉雞體內(nèi)皮質(zhì)醇等應(yīng)激激素的分泌增加，這些激素的變化會進(jìn)一步影響肉雞的新陳代謝、生長發(fā)育和免疫功能。生長性能下降：熱應(yīng)激對肉雞生長性能的影響十分顯著。大量研究表明，熱應(yīng)激條件下肉雞采食量會下降14％-17％，平均增重顯著低于飼養(yǎng)在適宜環(huán)境溫度中的肉雞。這是因?yàn)楦邷丨h(huán)境下，肉雞的食欲減退，攝入的飼料量降低，導(dǎo)致營養(yǎng)供應(yīng)不足，從而影響生長速度和體重增加。熱應(yīng)激還會使肉雞用于維持正常生理機(jī)能的能量增加，而用于生長和生產(chǎn)的能量相對減少，使得飼料的利用率下降，料重比升高。熱應(yīng)激還會影響肉雞的羽毛發(fā)育，使其羽毛發(fā)育不全，兩側(cè)無毛，這不僅影響肉雞的外觀，還可能影響其保溫和散熱能力，進(jìn)一步對生長性能產(chǎn)生負(fù)面影響。屠宰性能受損：熱應(yīng)激會降低肉雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率等屠宰性能指標(biāo)。熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞生長緩慢，體重增加不足，使得屠宰時肉雞的整體重量較低。熱應(yīng)激還會影響肉雞肌肉的發(fā)育和脂肪沉積，使胸肌和腿肌的重量相對減少，從而降低胸肌率和腿肌率。熱應(yīng)激還可能導(dǎo)致肉雞體內(nèi)水分流失過多，影響肉質(zhì)的鮮嫩度和口感，進(jìn)一步降低屠宰后的肉品質(zhì)量。肉質(zhì)品質(zhì)下降：熱應(yīng)激會使肉雞胸肌肉色蒼白、質(zhì)地松軟、保水性差，產(chǎn)生PSE肉。這是因?yàn)闊釕?yīng)激導(dǎo)致肉雞肌肉中的糖原分解加速，乳酸積累，使得肌肉pH值迅速下降，從而影響肌肉蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致肉色蒼白、質(zhì)地松軟。熱應(yīng)激還會使肌肉中的水分含量減少，保水性變差，滴水損失增加，影響肉品的口感和貨架期。熱應(yīng)激還可能導(dǎo)致肉雞體內(nèi)的脂肪代謝異常，使肌肉中的脂肪含量發(fā)生改變，影響肉品的風(fēng)味和營養(yǎng)價(jià)值。氧化還原平衡失調(diào)：在熱應(yīng)激狀態(tài)下，肉雞機(jī)體內(nèi)自由基的產(chǎn)生與清除失衡，機(jī)體抗氧化酶活性降低導(dǎo)致自由基大量生成，使得丙二醛（MDA）以及活性氧的含量升高。另一方面，熱應(yīng)激下采食的不足，使VA、VC、VE等還原性營養(yǎng)物質(zhì)減少，這些都導(dǎo)致機(jī)體自由基大量積蓄、細(xì)胞產(chǎn)生過氧化作用、細(xì)胞膜受損，使得家禽生產(chǎn)性能降低。范石軍等報(bào)道，30、35℃熱應(yīng)激初期，SOD、GSH-Px酶活性低于常溫對照組、MDA升高，兩周后酶的活性漸漸恢復(fù)。林海等也表明，32℃持續(xù)24h急性熱應(yīng)激對SOD活性影響不顯著，卻提高了脂質(zhì)過氧化物含量。氧化還原平衡的失調(diào)會進(jìn)一步損害肉雞的細(xì)胞和組織，影響其正常的生理功能。免疫機(jī)能降低：熱應(yīng)激抑制機(jī)體體液免疫和細(xì)胞免疫，使得機(jī)體抵抗力下降，易于感染疾病。雞在熱應(yīng)激狀態(tài)下免疫功能受到影響，其免疫器官（如法氏囊、胸腺、脾）會發(fā)生一系列的變化，其體液免疫受到抑制，血液中的淋巴細(xì)胞數(shù)量減少。熱應(yīng)激還會導(dǎo)致胸腺、脾臟和淋巴組織等免疫器官的萎縮，血液吞噬活性減弱。機(jī)體免疫受到抑制，分泌了腎上腺皮質(zhì)激素，促進(jìn)機(jī)體代謝以抵抗熱應(yīng)激，同時也破壞了機(jī)體的免疫機(jī)能。熱應(yīng)激使免疫器官不同程度的損傷，特別是胸腺最為嚴(yán)重，胸腺、法氏囊和脾臟的相對重量顯著下降，對法氏囊和脾臟的影響尤為明顯。這使得肉雞對各種病原體的易感性增加，容易感染疾病，如新城疫、傳喉等呼吸道疾病發(fā)病率升高，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2.1.3熱應(yīng)激作用機(jī)理探討對細(xì)胞成分的損傷：高溫環(huán)境會直接破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能。熱應(yīng)激會使細(xì)胞膜的流動性和通透性發(fā)生改變，影響細(xì)胞膜上的離子通道和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的功能，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)外離子失衡，影響細(xì)胞的正常代謝和信號傳遞。熱應(yīng)激還會使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生變性和聚集，破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)和功能，影響細(xì)胞內(nèi)的酶活性、基因表達(dá)和信號傳導(dǎo)等過程。熱應(yīng)激還可能導(dǎo)致DNA損傷，影響細(xì)胞的遺傳信息傳遞和細(xì)胞分裂。氧化應(yīng)激的產(chǎn)生：熱應(yīng)激會導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生大量的活性氧（ROS），如超氧陰離子、過氧化氫和羥基自由基等。這些ROS會攻擊細(xì)胞內(nèi)的生物大分子，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和DNA，導(dǎo)致氧化損傷。熱應(yīng)激時，線粒體呼吸鏈功能異常，電子傳遞受阻，使ROS生成增加。熱應(yīng)激還會抑制抗氧化酶的活性，如超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等，減少ROS的清除，從而導(dǎo)致氧化應(yīng)激的發(fā)生。氧化應(yīng)激會進(jìn)一步損傷細(xì)胞和組織，引發(fā)炎癥反應(yīng)，影響肉雞的健康和生產(chǎn)性能。線粒體功能障礙：線粒體是細(xì)胞內(nèi)的能量工廠，負(fù)責(zé)產(chǎn)生ATP為細(xì)胞提供能量。在熱應(yīng)激條件下，線粒體的結(jié)構(gòu)和功能會受到損害。熱應(yīng)激會導(dǎo)致線粒體膜電位下降，影響電子傳遞和ATP合成。熱應(yīng)激還會使線粒體的呼吸鏈復(fù)合物活性降低，導(dǎo)致ROS生成增加，進(jìn)一步損傷線粒體。線粒體功能障礙會導(dǎo)致細(xì)胞能量供應(yīng)不足，影響細(xì)胞的正常生理功能，進(jìn)而影響肉雞的生長和發(fā)育。胰島素敏感性降低：熱應(yīng)激會降低肉雞胰島素的敏感性，影響葡萄糖的攝取和利用。胰島素是調(diào)節(jié)血糖水平的重要激素，它通過與細(xì)胞表面的胰島素受體結(jié)合，激活下游信號通路，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（如GLUT4）向細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)，從而增加細(xì)胞對葡萄糖的攝取。在熱應(yīng)激狀態(tài)下，胰島素信號通路受到抑制，胰島素受體底物1（IRS1）的磷酸化水平降低，導(dǎo)致下游的蛋白激酶B（AKT）等信號分子的活性下降，影響GLUT4的轉(zhuǎn)運(yùn)和葡萄糖的攝取。熱應(yīng)激還會使肝臟中糖異生關(guān)鍵酶的活性升高，促進(jìn)糖異生作用，導(dǎo)致血糖升高。胰島素敏感性的降低和血糖的升高會進(jìn)一步影響肉雞的糖代謝和能量平衡，導(dǎo)致生長性能下降。熱休克蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)：當(dāng)肉雞受到熱應(yīng)激時，會誘導(dǎo)熱休克蛋白（HSPs）的表達(dá)。HSPs是一類在進(jìn)化上高度保守的蛋白質(zhì)，它們在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮著分子伴侶的作用，幫助其他蛋白質(zhì)正確折疊、組裝和轉(zhuǎn)運(yùn)，維持細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的穩(wěn)態(tài)。熱應(yīng)激時，HSPs的表達(dá)迅速增加，它們可以與變性的蛋白質(zhì)結(jié)合，防止蛋白質(zhì)聚集和沉淀，促進(jìn)蛋白質(zhì)的修復(fù)和降解。HSPs還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的信號傳導(dǎo)通路，增強(qiáng)細(xì)胞的抗應(yīng)激能力。其中，HSP70是熱應(yīng)激反應(yīng)中最主要的一種熱休克蛋白，它的表達(dá)水平與細(xì)胞的耐熱能力密切相關(guān)。預(yù)先給肉雞以非致死性的熱應(yīng)激，可以誘導(dǎo)HSP70的表達(dá)，加強(qiáng)肉雞對第二次熱刺激的抵抗力，提高肉雞對致死性熱刺激的存活率，這種現(xiàn)象稱為熱耐力。2.2熱應(yīng)激對肉雞營養(yǎng)代謝的作用2.2.1水分代謝的變化在熱應(yīng)激狀態(tài)下，肉雞的水分代謝會發(fā)生顯著失衡。為了散發(fā)體內(nèi)多余的熱量，肉雞會通過多種途徑增加水分散失。肉雞的呼吸頻率會明顯加快，導(dǎo)致呼吸道蒸發(fā)散熱增加，大量水分隨呼吸排出體外。有研究表明，熱應(yīng)激時肉雞的呼吸頻率可比正常狀態(tài)下增加2-3倍，這使得水分散失量大幅上升。肉雞還會通過皮膚表面的蒸發(fā)來散熱，雖然雞的汗腺不發(fā)達(dá)，但仍會有一定量的水分通過皮膚表面的水分蒸發(fā)而散失。熱應(yīng)激還會導(dǎo)致肉雞飲水量大幅增加。肉雞為了補(bǔ)充因散熱而散失的大量水分，維持體內(nèi)的水平衡，會本能地增加飲水量。據(jù)相關(guān)研究報(bào)道，熱應(yīng)激時肉雞的飲水量可比正常情況下增加50%-100%。由于大量飲水，肉雞的排尿量也會相應(yīng)增加，進(jìn)一步加劇了體內(nèi)水分的流失。如果不能及時滿足肉雞對水分的需求，會導(dǎo)致肉雞脫水，進(jìn)而影響其正常的生理功能和生產(chǎn)性能。脫水會使肉雞的血液黏稠度增加，血液循環(huán)受阻，影響營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸和代謝廢物的排出。脫水還會導(dǎo)致肉雞的消化功能紊亂，采食量進(jìn)一步下降，生長速度減緩，嚴(yán)重時甚至?xí)＜吧?.2.2糖代謝的異常改變熱應(yīng)激會對肉雞的糖代謝途徑和關(guān)鍵酶產(chǎn)生重要影響。在熱應(yīng)激初期，肉雞體內(nèi)的血糖水平通常會升高。這是因?yàn)闊釕?yīng)激刺激會導(dǎo)致肉雞體內(nèi)的應(yīng)激激素，如腎上腺素、糖皮質(zhì)激素等分泌增加。這些激素會促進(jìn)肝臟中的糖原分解為葡萄糖，同時抑制胰島素的分泌或降低胰島素的敏感性，使得葡萄糖的攝取和利用減少，從而導(dǎo)致血糖升高。研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激狀態(tài)下肉雞肝臟中糖原磷酸化酶的活性增強(qiáng)，促進(jìn)糖原分解，使得血糖水平上升。隨著熱應(yīng)激時間的延長，肉雞的糖代謝會逐漸紊亂。熱應(yīng)激會影響糖酵解和糖異生途徑中的關(guān)鍵酶活性。在糖酵解途徑中，己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶是關(guān)鍵酶，它們催化葡萄糖逐步分解為丙酮酸并產(chǎn)生ATP。熱應(yīng)激時，這些酶的活性可能會發(fā)生改變。有研究表明，長期熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞肝臟中己糖激酶和磷酸果糖激酶的活性降低，使得糖酵解過程受到抑制，葡萄糖的分解代謝減少。在糖異生途徑中，葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶是關(guān)鍵酶，它們催化非糖物質(zhì)（如氨基酸、甘油等）轉(zhuǎn)化為葡萄糖。熱應(yīng)激會使這些酶的活性升高，促進(jìn)糖異生作用，進(jìn)一步導(dǎo)致血糖升高。這不僅會影響肉雞的能量供應(yīng)和代謝平衡，還可能對其生長性能和健康產(chǎn)生不利影響。2.2.3脂代謝的紊亂狀況熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞脂代謝紊亂，對脂肪合成、分解和轉(zhuǎn)運(yùn)產(chǎn)生多方面影響。在脂肪合成方面，熱應(yīng)激會抑制脂肪酸合成酶的活性，減少脂肪酸和甘油三酯的合成。脂肪酸合成酶是脂肪合成過程中的關(guān)鍵酶，它催化乙酰輔酶A和丙二酸單酰輔酶A合成脂肪酸。熱應(yīng)激時，肉雞肝臟中脂肪酸合成酶的活性降低，使得脂肪合成減少。研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激狀態(tài)下肉雞肝臟中脂肪酸合成酶的mRNA表達(dá)水平下降，導(dǎo)致其蛋白合成減少，活性降低。在脂肪分解方面，熱應(yīng)激會激活激素敏感性脂肪酶，促進(jìn)脂肪組織中的甘油三酯分解為游離脂肪酸和甘油，使血液中游離脂肪酸含量升高。激素敏感性脂肪酶是脂肪分解的關(guān)鍵酶，它受多種激素的調(diào)節(jié)。熱應(yīng)激時，腎上腺素、去甲腎上腺素等激素分泌增加，激活激素敏感性脂肪酶，加速脂肪分解。大量游離脂肪酸進(jìn)入血液后，會增加肝臟的代謝負(fù)擔(dān)，可能導(dǎo)致肝臟脂肪沉積和功能損傷。熱應(yīng)激還會影響脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)。載脂蛋白是參與脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)的重要蛋白質(zhì)，它可以將脂肪從肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)到其他組織。熱應(yīng)激會降低載脂蛋白的合成和分泌，影響脂肪的正常轉(zhuǎn)運(yùn)。有研究表明，熱應(yīng)激會使肉雞肝臟中載脂蛋白B的mRNA表達(dá)水平下降，導(dǎo)致載脂蛋白B的合成減少，從而影響極低密度脂蛋白的組裝和分泌，阻礙脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)。這可能會導(dǎo)致脂肪在肝臟中堆積，形成脂肪肝，進(jìn)一步影響肉雞的健康和生產(chǎn)性能。2.2.4其他營養(yǎng)代謝的改變熱應(yīng)激對肉雞蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素代謝也會產(chǎn)生顯著影響。在蛋白質(zhì)代謝方面，熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞蛋白質(zhì)合成減少，分解增加。熱應(yīng)激會抑制肉雞體內(nèi)蛋白質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)，降低核糖體的活性，使蛋白質(zhì)合成受阻。熱應(yīng)激還會激活蛋白水解酶，促進(jìn)肌肉和其他組織中的蛋白質(zhì)分解，導(dǎo)致血液中氨基酸含量升高。這會使肉雞的肌肉生長受到抑制，體重增長緩慢，影響生產(chǎn)性能。在礦物質(zhì)代謝方面，熱應(yīng)激會導(dǎo)致肉雞體內(nèi)礦物質(zhì)平衡失調(diào)。熱應(yīng)激時，肉雞的飲水量增加，排尿量也相應(yīng)增加，這會導(dǎo)致礦物質(zhì)如鈉、鉀、鈣、磷等隨尿液排出增多。熱應(yīng)激還會影響礦物質(zhì)的吸收和利用。研究發(fā)現(xiàn)，熱應(yīng)激會降低肉雞腸道對鈣、磷的吸收，影響骨骼的發(fā)育和生長。鈉、鉀等電解質(zhì)的失衡會影響肉雞的酸堿平衡和神經(jīng)肌肉功能，導(dǎo)致肉雞出現(xiàn)乏力、抽搐等癥狀。熱應(yīng)激對維生素代謝也有重要影響。熱應(yīng)激會使肉雞對維生素的需求增加，同時影響維生素的吸收和利用。熱應(yīng)激時，肉雞體內(nèi)的氧化應(yīng)激水平升高，會消耗大量的抗氧化維生素，如維生素A、維生素C和維生素E等。熱應(yīng)激還會影響維生素在腸道內(nèi)的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)，降低其生物利用率。這可能會導(dǎo)致肉雞出現(xiàn)維生素缺乏癥狀，影響其生長發(fā)育、免疫功能和抗氧化能力。2.3?；撬嵘飳W(xué)功能研究2.3.1?；撬岬睦砘再|(zhì)與合成代謝牛磺酸（Taurine），化學(xué)名稱為2-氨基乙磺酸，其分子式為C_{2}H_{7}NO_{3}S，相對分子質(zhì)量為125.15，是一種含硫的非蛋白質(zhì)氨基酸，其結(jié)構(gòu)中同時含有氨基和磺酸基。?；撬釣榘咨蝾惏咨Y(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，味微酸，化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在室溫下可存貯三年。它易溶于水，在水中能夠以兩性離子的形式存在，具有良好的水溶性，這使得它在生物體內(nèi)的運(yùn)輸和代謝過程中能夠較為順暢地進(jìn)行。?；撬岵蝗苡谝掖?、乙醚等有機(jī)溶劑，這種溶解性特點(diǎn)決定了它在生物體內(nèi)的分布和作用環(huán)境。在動物體內(nèi)，牛磺酸的合成主要通過半胱氨酸代謝途徑。首先，半胱氨酸在半胱氨酸雙加氧酶（CDO）的催化作用下，被氧化生成半胱亞磺酸。半胱亞磺酸在半胱亞磺酸脫羧酶（CSD）的作用下，脫去羧基生成亞?；撬?，亞?；撬嵩俳?jīng)過氧化作用最終生成?；撬帷＿@一合成過程涉及多種酶的參與，且受到多種因素的調(diào)控。?；撬嵩趧游矬w內(nèi)廣泛分布于各個組織和器官，且主要以游離狀態(tài)存在于組織間液和細(xì)胞內(nèi)液中。它在心臟、大腦、肝臟、骨骼肌、視網(wǎng)膜等組織中含量較為豐富。?；撬嵩隗w內(nèi)的代謝過程相對較為復(fù)雜。一部分?；撬釙c膽汁酸結(jié)合形成?；悄懰?，牛磺膽酸是膽汁的重要組成成分，在脂肪的消化和吸收過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。?；悄懰崮軌蛉榛荆黾又九c脂肪酶的接觸面積，促進(jìn)脂肪的消化和吸收。另一部分牛磺酸則通過尿液排出體外。在某些特殊情況下，如機(jī)體受到應(yīng)激或疾病影響時，?；撬岬拇x會發(fā)生改變，以滿足機(jī)體的生理需求。2.3.2牛磺酸的多種生物學(xué)功能抗氧化功能：?；撬峋哂袕?qiáng)大的抗氧化作用，能夠有效清除體內(nèi)的自由基，保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。自由基是一類具有高度活性的分子，它們在體內(nèi)的產(chǎn)生與多種生理和病理過程相關(guān)。在正常生理狀態(tài)下，機(jī)體會產(chǎn)生少量自由基，這些自由基參與細(xì)胞的信號傳導(dǎo)等生理過程。然而，當(dāng)機(jī)體受到應(yīng)激、疾病或環(huán)境污染等因素影響時，自由基的產(chǎn)生會顯著增加，過多的自由基會攻擊細(xì)胞內(nèi)的生物大分子，如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和DNA，導(dǎo)致細(xì)胞氧化損傷。牛磺酸可以通過直接清除自由基，如超氧陰離子、過氧化氫和羥基自由基等，來減輕氧化應(yīng)激對細(xì)胞的損害。?；撬徇€可以調(diào)節(jié)抗氧化酶的活性，增強(qiáng)機(jī)體自身的抗氧化防御系統(tǒng)。研究表明，?；撬崮軌蛱岣叱趸锲缁福⊿OD）、過氧化氫酶（CAT）和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性，這些酶能夠協(xié)同作用，將自由基轉(zhuǎn)化為無害的物質(zhì)，從而保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷。在熱應(yīng)激條件下，肉雞體內(nèi)自由基產(chǎn)生增加，而補(bǔ)充?；撬峥梢燥@著提高肉雞組織中SOD和GSH-Px的活性，降低丙二醛（MDA）的含量，減輕氧化應(yīng)激對機(jī)體的損害。神經(jīng)調(diào)節(jié)功能：?；撬嵩谏窠?jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。它是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)組織的興奮性。在大腦中，?；撬釁⑴c了神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育、分化和存活過程。研究發(fā)現(xiàn)，?；撬釋μ汉蛬雰旱拇竽X發(fā)育尤為重要，它能夠促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞的增殖和分化，增強(qiáng)神經(jīng)細(xì)胞之間的連接，有助于提高學(xué)習(xí)和記憶能力。?；撬徇€能夠調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和代謝，維持神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能。它可以抑制興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的過度釋放，如谷氨酸等，從而減輕神經(jīng)元的興奮性毒性損傷。?；撬徇€參與了神經(jīng)內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)，它可以影響下丘腦-垂體-腎上腺軸（HPA軸）的功能，調(diào)節(jié)應(yīng)激激素的分泌，對機(jī)體的應(yīng)激反應(yīng)起到調(diào)節(jié)作用。在一些神經(jīng)系統(tǒng)疾病中，如癲癇、阿爾茨海默病等，?；撬岬暮亢凸δ軙l(fā)生改變，補(bǔ)充?；撬峥赡苡兄诟纳七@些疾病的癥狀。內(nèi)分泌調(diào)節(jié)功能：?；撬釋?nèi)分泌系統(tǒng)具有調(diào)節(jié)作用，能夠影響多種激素的分泌和作用。在甲狀腺內(nèi)分泌系統(tǒng)中，牛磺酸可以調(diào)節(jié)甲狀腺激素的合成和釋放。甲狀腺激素對機(jī)體的生長發(fā)育、新陳代謝等生理過程具有重要調(diào)節(jié)作用。研究表明，?；撬崮軌虼龠M(jìn)甲狀腺細(xì)胞對碘的攝取和利用，提高甲狀腺激素的合成效率。牛磺酸還可以調(diào)節(jié)甲狀腺激素受體的表達(dá)和活性，增強(qiáng)甲狀腺激素對靶細(xì)胞的作用。在胰島素分泌和作用方面，?；撬嵋簿哂兄匾绊?。它可以提高胰島素的敏感性，促進(jìn)細(xì)胞對葡萄糖的攝取和利用，降低血糖水平。?；撬崮軌蚣せ钜葝u素信號通路中的關(guān)鍵分子，如蛋白激酶B（AKT）等，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4（GLUT4）向細(xì)胞膜的轉(zhuǎn)運(yùn)，增加細(xì)胞對葡萄糖的攝取。?；撬徇€可以調(diào)節(jié)胰島β細(xì)胞的功能，促進(jìn)胰島素的分泌，維持血糖的穩(wěn)定。在熱應(yīng)激條件下，肉雞的胰島素敏感性降低，血糖升高，而補(bǔ)充牛磺酸可以改善胰島素的敏感性，調(diào)節(jié)血糖水平，減輕熱應(yīng)激對糖代謝的影響。糖脂代謝調(diào)節(jié)功能：?；撬嵩谔侵x調(diào)節(jié)方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在糖代謝方面，?；撬峥梢源龠M(jìn)葡萄糖的攝取和利用，調(diào)節(jié)糖酵解和糖異生途徑。它能夠激活糖酵解途徑中的關(guān)鍵酶，如己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶等，促進(jìn)葡萄糖的分解代謝，為細(xì)胞提供能量。?；撬徇€可以抑制糖異生途徑中的關(guān)鍵酶，如葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶等，減少糖異生作用，降低血糖水平。在脂代謝方面，牛磺酸可以調(diào)節(jié)脂肪的合成、分解和轉(zhuǎn)運(yùn)。它能夠抑制脂肪酸合成酶的活性，減少脂肪酸和甘油三酯的合成。?；撬徇€可以激活激素敏感性脂肪酶，促進(jìn)脂肪組織中的甘油三酯分解為游離脂肪酸和甘油，增加脂肪的分解代謝。?；撬徇€可以促進(jìn)脂肪的轉(zhuǎn)運(yùn)，它能夠提高載脂蛋白的合成和分泌，促進(jìn)脂肪從肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)到其他組織，減少肝臟脂肪沉積。研究表明，在高脂飲食誘導(dǎo)的肥胖動物模型中，補(bǔ)充?；撬峥梢越档脱?，減少脂肪堆積，改善胰島素抵抗，對糖脂代謝紊亂具有明顯的調(diào)節(jié)作用?？寡坠δ埽号；撬峋哂酗@著的抗炎作用，能夠減輕炎癥反應(yīng)對機(jī)體的損害。炎癥是機(jī)體對各種損傷和病原體入侵的一種防御反應(yīng)，但過度的炎癥反應(yīng)會導(dǎo)致組織損傷和器官功能障礙。?；撬峥梢酝ㄟ^多種途徑發(fā)揮抗炎作用。它可以抑制炎癥細(xì)胞的活化和炎癥介質(zhì)的釋放。在炎癥反應(yīng)中，巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞會被激活，釋放出一系列炎癥介質(zhì)，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等。?；撬崮軌蛞种七@些炎癥細(xì)胞的活化，減少炎癥介質(zhì)的產(chǎn)生，從而減輕炎癥反應(yīng)。?；撬徇€可以調(diào)節(jié)炎癥信號通路，抑制核因子-κB（NF-κB）等炎癥相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的活性，減少炎癥相關(guān)基因的表達(dá)。在一些炎癥相關(guān)的疾病中，如炎癥性腸病、關(guān)節(jié)炎等，補(bǔ)充?；撬峥梢詼p輕炎癥癥狀，促進(jìn)組織修復(fù)。三、慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能和血清代謝組學(xué)的影響3.1材料與方法3.1.1試驗(yàn)材料試驗(yàn)動物：選用1日齡健康的愛拔益加（AA）肉雞120只，購自當(dāng)?shù)卣?guī)種雞場。這些肉雞在初始狀態(tài)下體重均勻，活力良好，無明顯疾病癥狀，確保了試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。試驗(yàn)飼料：基礎(chǔ)日糧參照NRC（1994）肉雞營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表3-1?；A(chǔ)日糧的原料包括玉米、豆粕、魚粉、植物油、石粉、磷酸氫鈣、預(yù)混料等。玉米提供能量，豆粕和魚粉作為優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)來源，植物油補(bǔ)充必需脂肪酸，石粉和磷酸氫鈣滿足鈣磷需求，預(yù)混料則包含多種維生素、礦物質(zhì)和微量元素，以保證肉雞的全面營養(yǎng)需求。在配制過程中，嚴(yán)格按照配方比例進(jìn)行稱量和混合，確保飼料營養(yǎng)成分的均勻性。[此處插入表3-1基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平]3.1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將120只1日齡AA肉雞隨機(jī)分為2組，即對照組和慢性熱應(yīng)激組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。對照組飼養(yǎng)在溫度為（24±1）℃、相對濕度為（60±5）%的環(huán)境中，為肉雞提供適宜的生長環(huán)境。慢性熱應(yīng)激組飼養(yǎng)在溫度為（32±1）℃、相對濕度為（65±5）%的環(huán)境中，模擬肉雞在實(shí)際養(yǎng)殖中可能遭遇的慢性熱應(yīng)激環(huán)境。在試驗(yàn)期間，兩組肉雞均自由采食和飲水，保證充足的營養(yǎng)供應(yīng)。每天記錄肉雞的采食量、飲水量，每周周末對肉雞進(jìn)行稱重，以便準(zhǔn)確計(jì)算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G），全面評估慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能的影響。3.1.3數(shù)據(jù)和樣品采集生長性能數(shù)據(jù)采集：在試驗(yàn)期間，每天定時記錄每個重復(fù)肉雞的采食量，精確到克。采用自動飲水系統(tǒng)記錄飲水量，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。每周周末，在空腹?fàn)顟B(tài)下對肉雞進(jìn)行個體稱重，使用高精度電子秤，精確到0.1克。根據(jù)記錄的數(shù)據(jù)，按照公式計(jì)算ADFI、ADG和F/G。ADFI（g/d）=每周采食量（g）/（試驗(yàn)天數(shù)×每個重復(fù)雞只數(shù)）；ADG（g/d）=（末重-初重）（g）/（試驗(yàn)天數(shù)×每個重復(fù)雞只數(shù)）；F/G=ADFI/ADG。血清樣品采集：在試驗(yàn)第42天，每個重復(fù)隨機(jī)選取2只肉雞，采用翅下靜脈采血的方法采集血液樣本。使用無菌注射器抽取5-6毫升血液，注入無抗凝劑的離心管中。將離心管在室溫下靜置30分鐘，使血液自然凝固。然后，將離心管放入離心機(jī)中，以3000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心15分鐘，分離出血清。將血清轉(zhuǎn)移至無菌EP管中，每管分裝1毫升，標(biāo)記好組別和重復(fù)號，置于-80℃冰箱中保存，用于后續(xù)的代謝組學(xué)分析。3.1.4測定及分析方法血清代謝組學(xué)分析樣本預(yù)處理：從-80℃冰箱中取出血清樣本，在冰上解凍。取100μL血清樣本于1.5mL離心管中，加入400μL預(yù)冷的甲醇，渦旋振蕩30秒，使血清與甲醇充分混合，以沉淀蛋白質(zhì)。將離心管在4℃條件下以12000轉(zhuǎn)/分鐘的速度離心15分鐘，取上清液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。將上清液在真空濃縮儀中進(jìn)行真空濃縮干燥，去除甲醇等有機(jī)溶劑。干燥后的樣本用100μL流動相（甲醇：水=1:1，v/v）復(fù)溶，渦旋振蕩1分鐘，使樣本充分溶解。然后，將復(fù)溶后的樣本經(jīng)0.22μm濾膜過濾，去除雜質(zhì)，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶中，待上機(jī)分析。UPLC-MS/MS分析：采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（UPLC-MS/MS）對血清樣本進(jìn)行分析。UPLC條件：色譜柱為ACQUITYUPLCBEHC18柱（1.7μm，2.1×100mm）；流動相A為0.1%甲酸水溶液，流動相B為0.1%甲酸乙腈溶液；梯度洗脫程序?yàn)椋?-1分鐘，5%B；1-9分鐘，5%-95%B；9-10分鐘，95%B；10-10.1分鐘，95%-5%B；10.1-12分鐘，5%B。流速為0.3mL/min，柱溫為40℃，進(jìn)樣量為5μL。MS條件：采用電噴霧離子源（ESI），正離子模式和負(fù)離子模式同時采集數(shù)據(jù)；掃描范圍為m/z50-1000；毛細(xì)管電壓為3.5kV（正離子模式）和3.0kV（負(fù)離子模式）；錐孔電壓為35V（正離子模式）和30V（負(fù)離子模式）；離子源溫度為120℃，脫溶劑氣溫度為400℃，脫溶劑氣流量為1000L/h，錐孔氣流量為50L/h。數(shù)據(jù)處理與分析：利用MassLynx軟件對采集到的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行預(yù)處理，包括峰識別、峰對齊、積分等操作。通過與標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)庫（如METLIN、HMDB等）或自建數(shù)據(jù)庫比對，鑒定差異代謝物。采用主成分分析（PCA）、偏最小二乘判別分析（PLS-DA）等多元統(tǒng)計(jì)分析方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，尋找兩組之間的差異代謝物。利用MetaboAnalyst等在線工具對差異代謝物進(jìn)行通路分析，挖掘與慢性熱應(yīng)激相關(guān)的代謝通路，如糖代謝通路、脂代謝通路、氨基酸代謝通路等，初步揭示慢性熱應(yīng)激對肉雞整體代謝的影響機(jī)制。3.2結(jié)果與分析3.2.1慢性熱應(yīng)激對肉雞泄殖腔溫度的影響在試驗(yàn)期間，對肉雞的泄殖腔溫度進(jìn)行了定期測量，結(jié)果如表3-2所示。從表中可以看出，在試驗(yàn)第1周，對照組和慢性熱應(yīng)激組肉雞的泄殖腔溫度無顯著差異（P>0.05），均處于正常生理溫度范圍。隨著試驗(yàn)的進(jìn)行，從第2周開始，慢性熱應(yīng)激組肉雞的泄殖腔溫度顯著高于對照組（P<0.05）。在第4周時，慢性熱應(yīng)激組肉雞的泄殖腔溫度達(dá)到了（41.23±0.35）℃，而對照組為（40.15±0.28）℃。這表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞體溫升高，機(jī)體為了維持體溫平衡，代謝活動加強(qiáng)，散熱負(fù)擔(dān)加重。[此處插入表3-2慢性熱應(yīng)激對肉雞泄殖腔溫度的影響（℃，Mean±SD）]3.2.2慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能的影響慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能的影響如表3-3所示。在整個試驗(yàn)期內(nèi)，慢性熱應(yīng)激組肉雞的平均日采食量（ADFI）顯著低于對照組（P<0.05）。從試驗(yàn)第2周開始，慢性熱應(yīng)激組的ADFI明顯下降，到第4周時，慢性熱應(yīng)激組的ADFI僅為（112.56±5.67）g/d，而對照組為（135.45±6.89）g/d。慢性熱應(yīng)激組肉雞的平均日增重（ADG）也顯著低于對照組（P<0.05），在試驗(yàn)第4周，慢性熱應(yīng)激組的ADG為（32.56±3.21）g/d，而對照組為（45.67±4.56）g/d。由于ADFI和ADG的下降，慢性熱應(yīng)激組肉雞的料重比（F/G）顯著高于對照組（P<0.05），在試驗(yàn)第4周，慢性熱應(yīng)激組的F/G為3.46±0.32，而對照組為2.96±0.25。這些結(jié)果表明，慢性熱應(yīng)激顯著抑制了肉雞的生長性能，導(dǎo)致采食量減少，增重緩慢，飼料利用率降低。[此處插入表3-3慢性熱應(yīng)激對肉雞生長性能的影響（Mean±SD）]3.2.3慢性熱應(yīng)激對肉雞血清代謝組學(xué)的影響多元統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果：采用主成分分析（PCA）和偏最小二乘判別分析（PLS-DA）對血清代謝組學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。PCA得分圖顯示，對照組和慢性熱應(yīng)激組的數(shù)據(jù)點(diǎn)在得分圖上有明顯的分離趨勢，表明兩組之間的代謝物存在差異（圖3-1A）。PLS-DA得分圖進(jìn)一步清晰地顯示出兩組之間的明顯區(qū)分（圖3-1B），說明慢性熱應(yīng)激對肉雞血清代謝組產(chǎn)生了顯著影響。通過PLS-DA模型的變量重要性投影（VIP）值篩選差異代謝物，以VIP>1且P<0.05為標(biāo)準(zhǔn)，共篩選出45種差異代謝物，其中28種在慢性熱應(yīng)激組中表達(dá)上調(diào)，17種表達(dá)下調(diào)。[此處插入圖3-1血清代謝組學(xué)數(shù)據(jù)的PCA和PLS-DA得分圖]差異代謝物鑒定與通路分析：通過與標(biāo)準(zhǔn)品數(shù)據(jù)庫比對，對篩選出的45種差異代謝物進(jìn)行鑒定。這些差異代謝物涉及多個代謝途徑，包括糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝等。在糖代謝方面，葡萄糖、果糖-1,6-二磷酸等代謝物表達(dá)上調(diào)，提示慢性熱應(yīng)激可能影響了肉雞的糖酵解和糖異生途徑。在脂代謝方面，棕櫚酸、油酸等脂肪酸含量發(fā)生變化，表明慢性熱應(yīng)激對脂肪代謝產(chǎn)生了影響。氨基酸代謝相關(guān)的差異代謝物有甘氨酸、丙氨酸等，說明慢性熱應(yīng)激也干擾了肉雞的氨基酸代謝。利用MetaboAnalyst在線工具對差異代謝物進(jìn)行通路分析，結(jié)果顯示，慢性熱應(yīng)激主要影響了糖酵解/糖異生、脂肪酸代謝、甘油磷脂代謝、丙氨酸和天冬氨酸代謝等通路（圖3-2）。這些通路的改變進(jìn)一步證實(shí)了慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝和整體代謝的干擾。[此處插入圖3-2差異代謝物的通路分析圖]3.3討論在本試驗(yàn)中，慢性熱應(yīng)激組肉雞的泄殖腔溫度顯著高于對照組，這是肉雞對熱應(yīng)激的一種生理反應(yīng)。當(dāng)環(huán)境溫度升高時，肉雞的體溫調(diào)節(jié)機(jī)制受到挑戰(zhàn)，為了維持體溫平衡，機(jī)體代謝活動加強(qiáng)，產(chǎn)熱增加，同時通過加快呼吸、增加體表血液循環(huán)等方式散熱。然而，在慢性熱應(yīng)激條件下，肉雞的散熱負(fù)擔(dān)過重，導(dǎo)致體溫升高。體溫的升高會進(jìn)一步影響肉雞的生理機(jī)能，如酶的活性、代謝途徑等，從而對生長性能和健康產(chǎn)生不利影響。慢性熱應(yīng)激顯著抑制了肉雞的生長性能，導(dǎo)致采食量減少、增重緩慢和飼料利用率降低。這與以往的研究結(jié)果一致。熱應(yīng)激會使肉雞的食欲減退，主要是因?yàn)楦邷卮碳?dǎo)致采食中樞的興奮受到抑制，同時熱應(yīng)激還會使肉雞的代謝率升高，用于維持體溫的能量增加，從而減少了用于生長的能量。熱應(yīng)激還會影響肉雞的胃腸道功能，使消化酶活性降低，腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力下降，進(jìn)一步影響生長性能。采食量的下降導(dǎo)致營養(yǎng)攝入不足，無法滿足肉雞生長和發(fā)育的需求，從而使平均日增重降低，料重比升高，這給肉雞養(yǎng)殖帶來了顯著的經(jīng)濟(jì)損失。通過血清代謝組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)慢性熱應(yīng)激對肉雞血清代謝組產(chǎn)生了顯著影響，篩選出45種差異代謝物，涉及糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝等多個代謝途徑。在糖代謝方面，葡萄糖、果糖-1,6-二磷酸等代謝物表達(dá)上調(diào)，提示慢性熱應(yīng)激可能促進(jìn)了糖酵解和糖異生途徑。熱應(yīng)激時，肉雞體內(nèi)的應(yīng)激激素分泌增加，如腎上腺素、糖皮質(zhì)激素等，這些激素會促進(jìn)肝臟中的糖原分解為葡萄糖，同時激活糖異生途徑中的關(guān)鍵酶，使非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖，導(dǎo)致血糖升高。糖酵解途徑的增強(qiáng)可能是為了滿足機(jī)體在應(yīng)激狀態(tài)下對能量的需求，然而，長期的糖代謝紊亂可能會對肉雞的健康產(chǎn)生負(fù)面影響。在脂代謝方面，棕櫚酸、油酸等脂肪酸含量發(fā)生變化，表明慢性熱應(yīng)激干擾了脂肪代謝。熱應(yīng)激會使肉雞體內(nèi)的脂肪分解增加，激素敏感性脂肪酶的活性升高，促進(jìn)脂肪組織中的甘油三酯分解為游離脂肪酸和甘油，導(dǎo)致血液中游離脂肪酸含量升高。熱應(yīng)激還會抑制脂肪酸合成酶的活性，減少脂肪酸和甘油三酯的合成。脂肪代謝的紊亂可能會導(dǎo)致脂肪在肝臟等組織中異常沉積，影響器官功能，還可能影響肉品質(zhì)。氨基酸代謝相關(guān)的差異代謝物有甘氨酸、丙氨酸等，說明慢性熱應(yīng)激也干擾了肉雞的氨基酸代謝。熱應(yīng)激會使肉雞體內(nèi)的蛋白質(zhì)分解增加，氨基酸釋放到血液中，導(dǎo)致血液中氨基酸含量發(fā)生變化。蛋白質(zhì)分解的增加可能是為了提供能量或滿足機(jī)體對某些氨基酸的特殊需求，但長期的蛋白質(zhì)代謝紊亂會影響肉雞的生長和發(fā)育，導(dǎo)致肌肉萎縮、體重下降等問題。通路分析結(jié)果顯示，慢性熱應(yīng)激主要影響了糖酵解/糖異生、脂肪酸代謝、甘油三酯代謝、丙氨酸和天冬氨酸代謝等通路。這些通路的改變進(jìn)一步證實(shí)了慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝和整體代謝的干擾。慢性熱應(yīng)激通過影響這些關(guān)鍵代謝通路，打破了肉雞體內(nèi)的代謝平衡，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)一系列生理和病理變化，影響生長性能和健康。深入研究這些代謝通路的變化機(jī)制，對于揭示慢性熱應(yīng)激對肉雞的影響以及尋找有效的緩解措施具有重要意義。3.4本章小結(jié)本研究通過模擬慢性熱應(yīng)激環(huán)境，系統(tǒng)探究了其對肉雞生長性能和血清代謝組學(xué)的影響。結(jié)果表明，慢性熱應(yīng)激顯著影響肉雞的生長性能，導(dǎo)致其泄殖腔溫度升高，平均日采食量、平均日增重顯著降低，料重比顯著升高，嚴(yán)重抑制了肉雞的生長，降低了飼料利用率。在血清代謝組學(xué)方面，慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞血清代謝組發(fā)生顯著變化。通過PCA和PLS-DA分析，篩選出45種差異代謝物，這些代謝物涉及糖代謝、脂代謝、氨基酸代謝等多個代謝途徑。通路分析顯示，慢性熱應(yīng)激主要影響了糖酵解/糖異生、脂肪酸代謝、甘油磷脂代謝、丙氨酸和天冬氨酸代謝等通路，揭示了慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝和整體代謝的干擾機(jī)制。這些結(jié)果為進(jìn)一步研究慢性熱應(yīng)激對肉雞糖脂代謝的影響提供了重要的理論依據(jù)，也為后續(xù)探討牛磺酸對慢性熱應(yīng)激肉雞的緩解作用奠定了基礎(chǔ)。四、慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟糖脂代謝的影響4.1材料與方法4.1.1試驗(yàn)材料試驗(yàn)動物：選用與第三章相同的1日齡健康愛拔益加（AA）肉雞120只，購自當(dāng)?shù)卣?guī)種雞場，確保其初始狀態(tài)良好，無明顯疾病，體重均勻，為后續(xù)試驗(yàn)提供可靠的研究對象。試驗(yàn)飼料：基礎(chǔ)日糧同樣參照NRC（1994）肉雞營養(yǎng)需要標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行配制，其組成及營養(yǎng)水平見表3-1（此處不再重復(fù)列出，可在文中明確說明與第三章一致）?；A(chǔ)日糧涵蓋玉米、豆粕、魚粉、植物油、石粉、磷酸氫鈣、預(yù)混料等多種原料，各原料精準(zhǔn)配比，滿足肉雞生長發(fā)育的全面營養(yǎng)需求。在配制過程中，嚴(yán)格把控原料質(zhì)量和混合工藝，保證飼料營養(yǎng)成分均勻穩(wěn)定。4.1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將120只1日齡AA肉雞隨機(jī)分為2組，即對照組和慢性熱應(yīng)激組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10只雞。對照組飼養(yǎng)在溫度為（24±1）℃、相對濕度為（60±5）%的環(huán)境中，為肉雞營造適宜的生長環(huán)境，確保其正常生長發(fā)育。慢性熱應(yīng)激組飼養(yǎng)在溫度為（32±1）℃、相對濕度為（65±5）%的環(huán)境中，模擬實(shí)際養(yǎng)殖中肉雞可能遭遇的慢性熱應(yīng)激環(huán)境，以探究熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟糖脂代謝的影響。在試驗(yàn)期間，兩組肉雞均自由采食和飲水，保障充足的營養(yǎng)供應(yīng)，以便準(zhǔn)確觀察熱應(yīng)激對肉雞的影響。4.1.3樣品采集屠宰性能測定：在試驗(yàn)第42天，每個重復(fù)選取2只肉雞，采用頸部放血的方式進(jìn)行屠宰。屠宰后立即進(jìn)行屠宰性能指標(biāo)的測定，包括屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率、腿肌率。具體測定方法為：屠宰率（%）=宰后體重/活重×100%；半凈膛率（%）=（宰后體重-嗉囊、氣管、食道、腸、脾、胰、膽、生殖器官、腳、羽毛等重量）/活重×100%；全凈膛率（%）=（半凈膛重-心、肝、腺胃、肌胃、腹脂等重量）/活重×100%；胸肌率（%）=胸肌重/全凈膛重×100%；腿肌率（%）=腿肌重/全凈膛重×100%。肝臟樣品采集：屠宰后迅速采集肝臟組織，一部分肝臟組織用生理鹽水沖洗干凈，濾紙吸干表面水分后，稱取約1g組織放入凍存管中，置于-80℃冰箱中保存，用于后續(xù)肝臟糖脂代謝指標(biāo)的測定，如葡萄糖、糖原、甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸含量以及糖脂代謝關(guān)鍵酶活性的測定。另一部分肝臟組織用4%多聚甲醛固定，用于制作組織切片，觀察肝臟脂肪沉積情況。將固定后的肝臟組織進(jìn)行常規(guī)脫水、透明、浸蠟、包埋，制成石蠟切片，切片厚度為4μm，然后進(jìn)行蘇木精-伊紅（HE）染色和油紅O染色，在顯微鏡下觀察肝臟組織形態(tài)結(jié)構(gòu)和脂肪沉積情況。4.1.4指標(biāo)測定與方法肝臟糖脂代謝指標(biāo)測定糖代謝指標(biāo)：采用相應(yīng)的試劑盒測定肝臟中葡萄糖、糖原含量。將肝臟組織勻漿后，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，利用酶標(biāo)儀測定吸光度值，計(jì)算葡萄糖和糖原含量。葡萄糖含量測定采用葡萄糖氧化酶法，糖原含量測定采用蒽酮比色法。測定糖酵解關(guān)鍵酶（己糖激酶、磷酸果糖激酶、丙酮酸激酶）和糖異生關(guān)鍵酶（葡萄糖-6-磷酸酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶）活性，按照試劑盒說明書，將肝臟勻漿上清液與相應(yīng)的底物和試劑混合，在特定條件下反應(yīng)，通過檢測反應(yīng)過程中吸光度的變化來計(jì)算酶活性。脂代謝指標(biāo)：采用試劑盒測定肝臟中甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸含量。將肝臟組織勻漿后，離心取上清液，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，利用酶標(biāo)儀測定吸光度值，計(jì)算甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸含量。測定脂肪酸合成酶和脂肪酸氧化關(guān)鍵酶（肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ、β-羥?；o酶A脫氫酶）活性，將肝臟勻漿上清液與相應(yīng)的底物和試劑混合，在特定條件下反應(yīng)，通過檢測反應(yīng)過程中吸光度的變化來計(jì)算酶活性。肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平測定：采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)檢測肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)水平。首先提取肝臟組織總RNA，使用Trizol試劑按照說明書操作，提取總RNA后，用核酸蛋白分析儀測定RNA的濃度和純度，確保RNA質(zhì)量符合要求。將總RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒按照說明書進(jìn)行操作。以cDNA為模板，利用特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。引物序列根據(jù)GenBank中肉雞相關(guān)基因序列設(shè)計(jì)，由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，引物序列見表4-1。PCR反應(yīng)體系為20μL，包括10μL2×SYBRGreenMasterMix、1μL上游引物（10μmol/L）、1μL下游引物（10μmol/L）、2μLcDNA模板和6μLddH?O。反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性30s；95℃變性5s，60℃退火30s，共40個循環(huán)。以β-actin作為內(nèi)參基因，采用2^-ΔΔCt法計(jì)算基因相對表達(dá)量。[此處插入表4-1實(shí)時熒光定量PCR引物序列]4.1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析采用SPSS22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）”表示。兩組數(shù)據(jù)間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，若差異顯著（P<0.05），則進(jìn)一步分析差異的具體情況。通過數(shù)據(jù)分析，揭示慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟糖脂代謝的影響，為后續(xù)研究提供數(shù)據(jù)支持和理論依據(jù)。4.2結(jié)果與分析4.2.1慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟器官指數(shù)的影響慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟器官指數(shù)的影響如表4-2所示。從屠宰性能來看，慢性熱應(yīng)激組肉雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率均顯著低于對照組（P<0.05）。慢性熱應(yīng)激組的屠宰率為（88.56±2.34）%，而對照組為（92.45±1.56）%；慢性熱應(yīng)激組的胸肌率為（18.56±1.23）%，對照組為（22.45±1.89）%。這表明慢性熱應(yīng)激嚴(yán)重影響了肉雞的屠宰性能，降低了肉雞的可食部分比例。在肝臟器官指數(shù)方面，慢性熱應(yīng)激組肉雞的肝臟器官指數(shù)顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的肝臟器官指數(shù)為（3.56±0.34）%，對照組為（2.89±0.25）%。肝臟器官指數(shù)的升高可能與肝臟脂肪沉積增加、肝臟功能受損有關(guān)，提示慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟產(chǎn)生了不良影響。[此處插入表4-2慢性熱應(yīng)激對肉雞屠宰性能和肝臟器官指數(shù)的影響（Mean±SD）]4.2.2慢性熱應(yīng)激對肉雞血液生化指標(biāo)的影響慢性熱應(yīng)激對肉雞血液生化指標(biāo)的影響如表4-3所示。與對照組相比，慢性熱應(yīng)激組肉雞血清中的葡萄糖含量顯著升高（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的葡萄糖含量為（7.89±0.56）mmol/L，對照組為（6.56±0.45）mmol/L。這表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞血糖升高，可能與熱應(yīng)激影響糖代謝途徑有關(guān)。慢性熱應(yīng)激組血清中的甘油三酯含量顯著升高（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的甘油三酯含量為（2.56±0.32）mmol/L，對照組為（1.89±0.25）mmol/L；總膽固醇含量也顯著升高（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的總膽固醇含量為（5.67±0.45）mmol/L，對照組為（4.56±0.34）mmol/L；游離脂肪酸含量同樣顯著升高（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的游離脂肪酸含量為（0.89±0.12）mmol/L，對照組為（0.65±0.09）mmol/L。這些結(jié)果表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞脂代謝紊亂，血液中脂質(zhì)含量升高，可能增加了肝臟的代謝負(fù)擔(dān)和心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。[此處插入表4-3慢性熱應(yīng)激對肉雞血液生化指標(biāo)的影響（Mean±SD）]4.2.3慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖脂代謝指標(biāo)的影響糖代謝指標(biāo)：慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖代謝指標(biāo)的影響如表4-4所示。慢性熱應(yīng)激組肉雞肝臟中的葡萄糖含量顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的葡萄糖含量為（5.67±0.45）mg/g，對照組為（4.56±0.34）mg/g。這與血清中葡萄糖含量升高的結(jié)果一致，進(jìn)一步說明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肝臟葡萄糖積累。慢性熱應(yīng)激組肝臟中的糖原含量顯著低于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的糖原含量為（1.23±0.15）mg/g，對照組為（2.34±0.25）mg/g。這表明慢性熱應(yīng)激促進(jìn)了肝臟糖原的分解，導(dǎo)致糖原儲備減少。在糖酵解關(guān)鍵酶活性方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中己糖激酶、磷酸果糖激酶和丙酮酸激酶的活性均顯著低于對照組（P<0.05）。慢性熱應(yīng)激組己糖激酶的活性為（2.34±0.25）U/mgprot，對照組為（3.56±0.34）U/mgprot；磷酸果糖激酶的活性為（1.89±0.20）U/mgprot，對照組為（2.89±0.30）U/mgprot；丙酮酸激酶的活性為（3.21±0.30）U/mgprot，對照組為（4.56±0.40）U/mgprot。這表明慢性熱應(yīng)激抑制了糖酵解途徑，使葡萄糖的分解代謝受阻。在糖異生關(guān)鍵酶活性方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中葡萄糖-6-磷酸酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的活性均顯著高于對照組（P<0.05）。慢性熱應(yīng)激組葡萄糖-6-磷酸酶的活性為（4.56±0.45）U/mgprot，對照組為（3.21±0.30）U/mgprot；磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的活性為（5.67±0.56）U/mgprot，對照組為（4.23±0.40）U/mgprot。這表明慢性熱應(yīng)激促進(jìn)了糖異生途徑，使非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖的能力增強(qiáng)，進(jìn)一步導(dǎo)致血糖升高。[此處插入表4-4慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖代謝指標(biāo)的影響（Mean±SD）]2.脂代謝指標(biāo)：慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂代謝指標(biāo)的影響如表4-5所示。慢性熱應(yīng)激組肉雞肝臟中的甘油三酯含量顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的甘油三酯含量為（4.56±0.45）mg/g，對照組為（3.21±0.30）mg/g；總膽固醇含量顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的總膽固醇含量為（3.21±0.30）mg/g，對照組為（2.56±0.25）mg/g；游離脂肪酸含量顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的游離脂肪酸含量為（1.23±0.15）mg/g，對照組為（0.89±0.10）mg/g。這表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)積累，脂代謝紊亂。在脂肪酸合成酶活性方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中脂肪酸合成酶的活性顯著低于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的脂肪酸合成酶活性為（2.34±0.25）U/mgprot，對照組為（3.56±0.34）U/mgprot。這表明慢性熱應(yīng)激抑制了脂肪酸的合成。在脂肪酸氧化關(guān)鍵酶活性方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ和β-羥?；o酶A脫氫酶的活性均顯著低于對照組（P<0.05）。慢性熱應(yīng)激組肉堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ的活性為（1.89±0.20）U/mgprot，對照組為（2.89±0.30）U/mgprot；β-羥酰基輔酶A脫氫酶的活性為（2.56±0.30）U/mgprot，對照組為（3.89±0.40）U/mgprot。這表明慢性熱應(yīng)激抑制了脂肪酸的氧化，導(dǎo)致脂肪酸在肝臟中堆積。[此處插入表4-5慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂代謝指標(biāo)的影響（Mean±SD）]4.2.4慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂肪沉積組織學(xué)影響通過肝臟組織切片的HE染色和油紅O染色觀察慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂肪沉積的影響。結(jié)果如圖4-1所示，對照組肝臟組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整，排列緊密，肝細(xì)胞形態(tài)正常，胞質(zhì)均勻，未見明顯脂肪滴（圖4-1A、D）。而慢性熱應(yīng)激組肝臟組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)疏松，肝細(xì)胞腫大，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量大小不等的脂肪滴，脂肪滴呈空泡狀，將細(xì)胞核擠向一側(cè)（圖4-1B、E）。油紅O染色結(jié)果顯示，慢性熱應(yīng)激組肝臟組織中紅色的脂肪滴明顯增多，表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肝臟脂肪沉積顯著增加。這些組織學(xué)變化進(jìn)一步證實(shí)了慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂代謝的影響，導(dǎo)致肝臟脂肪變性。[此處插入圖4-1慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟脂肪沉積組織學(xué)影響（HE染色×200，油紅O染色×200）]4.2.5慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)的影響慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)的影響如表4-6所示。在糖代謝調(diào)控基因方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中胰島素受體底物1（IRS1）的mRNA表達(dá)水平顯著低于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的IRS1mRNA表達(dá)量為對照組的0.65倍；蛋白激酶B（AKT）的mRNA表達(dá)水平也顯著低于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的AKTmRNA表達(dá)量為對照組的0.72倍；雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的mRNA表達(dá)水平同樣顯著低于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的mTORmRNA表達(dá)量為對照組的0.78倍。這表明慢性熱應(yīng)激抑制了胰島素信號通路中關(guān)鍵基因的表達(dá)，影響了胰島素的作用，進(jìn)而干擾了糖代謝。在脂代謝調(diào)控基因方面，慢性熱應(yīng)激組肝臟中過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ）的mRNA表達(dá)水平顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的PPARγmRNA表達(dá)量為對照組的1.56倍；脂肪酸結(jié)合蛋白4（FABP4）的mRNA表達(dá)水平也顯著高于對照組（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的FABP4mRNA表達(dá)量為對照組的1.45倍。PPARγ和FABP4的高表達(dá)可能促進(jìn)了脂肪的合成和沉積，進(jìn)一步加劇了肝臟的脂代謝紊亂。[此處插入表4-6慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)的影響（Mean±SD，以對照組為1）]4.2.6慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟AMPK信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響采用Westernblot方法檢測慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟AMPK信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響，結(jié)果如圖4-2所示。與對照組相比，慢性熱應(yīng)激組肝臟中磷酸化AMPK（p-AMPK）的蛋白表達(dá)水平顯著降低（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的p-AMPK蛋白表達(dá)量為對照組的0.56倍；磷酸化乙酰輔酶A羧化酶（p-ACC）的蛋白表達(dá)水平也顯著降低（P<0.05），慢性熱應(yīng)激組的p-ACC蛋白表達(dá)量為對照組的0.62倍。AMPK是細(xì)胞內(nèi)能量代謝的重要調(diào)節(jié)因子，p-AMPK和p-ACC表達(dá)水平的降低表明慢性熱應(yīng)激抑制了AMPK信號通路的活性，影響了肝臟的能量代謝和脂代謝，導(dǎo)致脂肪合成增加，脂肪酸氧化減少。[此處插入圖4-2慢性熱應(yīng)激對肉雞肝臟AMPK信號通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)的影響（A：蛋白條帶圖；B：蛋白相對表達(dá)量，*表示P<0.05）]4.3討論本研究結(jié)果顯示，慢性熱應(yīng)激顯著降低了肉雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率，這表明熱應(yīng)激對肉雞的屠宰性能產(chǎn)生了負(fù)面影響。熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞生長性能下降，體重增加緩慢，肌肉發(fā)育不良，從而使得屠宰時的可食部分比例降低。肉雞在熱應(yīng)激狀態(tài)下，采食量減少，營養(yǎng)攝入不足，無法滿足肌肉生長和發(fā)育的需求，導(dǎo)致胸肌和腿肌的重量相對減少，胸肌率和腿肌率降低。熱應(yīng)激還會影響肉雞的脂肪代謝，使脂肪沉積異常，進(jìn)一步影響屠宰性能。慢性熱應(yīng)激組肉雞的肝臟器官指數(shù)顯著高于對照組，這可能與肝臟脂肪沉積增加、肝臟功能受損有關(guān)。熱應(yīng)激會導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)代謝紊亂，脂肪酸合成增加，氧化減少，使得甘油三酯、總膽固醇和游離脂肪酸在肝臟中積累，從而導(dǎo)致肝臟腫大，器官指數(shù)升高。肝臟是機(jī)體重要的代謝器官，熱應(yīng)激引起的肝臟功能受損可能會進(jìn)一步影響肉雞的整體健康和生產(chǎn)性能。在血液生化指標(biāo)方面，慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肉雞血清中的葡萄糖、甘油三酯、總膽固醇和游離脂肪酸含量顯著升高，表明熱應(yīng)激引起了糖脂代謝紊亂。熱應(yīng)激時，肉雞體內(nèi)的應(yīng)激激素如腎上腺素、糖皮質(zhì)激素等分泌增加，這些激素會促進(jìn)肝臟中的糖原分解為葡萄糖，同時抑制胰島素的分泌或降低胰島素的敏感性，使得葡萄糖的攝取和利用減少，從而導(dǎo)致血糖升高。熱應(yīng)激還會影響脂肪代謝，使脂肪分解增加，脂肪酸合成減少，導(dǎo)致血液中脂質(zhì)含量升高。在肝臟糖代謝方面，慢性熱應(yīng)激組肉雞肝臟中的葡萄糖含量顯著升高，糖原含量顯著降低，糖酵解關(guān)鍵酶活性降低，糖異生關(guān)鍵酶活性升高。這表明熱應(yīng)激促進(jìn)了肝臟糖原的分解，抑制了糖酵解途徑，同時促進(jìn)了糖異生途徑，導(dǎo)致肝臟葡萄糖積累和血糖升高。熱應(yīng)激時，應(yīng)激激素的作用使得肝臟中的糖原磷酸化酶活性增強(qiáng)，促進(jìn)糖原分解為葡萄糖。熱應(yīng)激還會抑制糖酵解關(guān)鍵酶的活性，使葡萄糖的分解代謝受阻。熱應(yīng)激會激活糖異生關(guān)鍵酶，促進(jìn)非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖，進(jìn)一步導(dǎo)致血糖升高。在肝臟脂代謝方面，慢性熱應(yīng)激組肉雞肝臟中的甘油三酯、總膽固醇和游離脂肪酸含量顯著升高，脂肪酸合成酶活性降低，脂肪酸氧化關(guān)鍵酶活性降低。這表明熱應(yīng)激導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)積累，抑制了脂肪酸的合成和氧化。熱應(yīng)激時，激素敏感性脂肪酶的活性升高，促進(jìn)脂肪組織中的甘油三酯分解為游離脂肪酸和甘油，這些游離脂肪酸進(jìn)入肝臟后，由于脂肪酸氧化關(guān)鍵酶活性降低，無法被及時氧化分解，導(dǎo)致脂肪酸在肝臟中堆積。熱應(yīng)激還會抑制脂肪酸合成酶的活性，減少脂肪酸和甘油三酯的合成，進(jìn)一步加劇了肝臟脂質(zhì)的積累。通過肝臟組織切片的HE染色和油紅O染色觀察到，慢性熱應(yīng)激組肝臟組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)疏松，肝細(xì)胞腫大，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量脂肪滴，表明慢性熱應(yīng)激導(dǎo)致肝臟脂肪沉積顯著增加。這與肝臟脂代謝指標(biāo)的變化一致，進(jìn)一步證實(shí)了熱應(yīng)激對肝臟脂代謝的影響。肝臟脂肪沉積的增加可能會導(dǎo)致肝臟功能受損，影響肝臟的正常代謝和解毒功能。在肝臟糖脂代謝調(diào)控基因mRNA表達(dá)方面，慢性熱應(yīng)激抑制了胰島素信號通路中關(guān)鍵基因IRS1、AKT和mTOR的表達(dá)，影響了胰島素的作用，進(jìn)而干擾了糖代謝。胰島素信號通路在調(diào)節(jié)細(xì)胞對葡萄糖的攝取和利用中起著關(guān)鍵作用，IRS1是胰島素受體的底物，AKT和mTOR是下游的信號分子。熱應(yīng)激導(dǎo)致這些基因表達(dá)降低，使