合成生物學(xué)菌種保藏工程師崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（共10題，每題1分）1.菌種保藏的核心是保持菌種的______和遺傳穩(wěn)定性。2.冷凍干燥保藏的關(guān)鍵步驟包括預(yù)凍、______和解析干燥。3.常用的低溫冷凍保護(hù)劑是______（30%濃度）。4.斜面保藏菌種的溫度一般為______℃。5.菌種衰退的主要原因之一是______（基因突變/環(huán)境適應(yīng)）。6.液氮保藏的溫度約為______℃。7.復(fù)蘇冷凍干燥菌種時(shí)，首先需加入______（無菌水/培養(yǎng)基）。8.液體石蠟保藏的原理是______（隔絕氧氣/提供營(yíng)養(yǎng)）。9.菌種保藏前必須進(jìn)行______鑒定。10.傳代保藏的缺點(diǎn)是易導(dǎo)致菌種______。二、單項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分）1.最適合長(zhǎng)期保藏菌種的方法是（）A.斜面保藏B.液氮保藏C.液體石蠟保藏D.傳代保藏2.下列不屬于菌種衰退預(yù)防措施的是（）A.減少傳代次數(shù)B.低溫保藏C.增加培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)D.添加保護(hù)劑3.復(fù)蘇菌種時(shí)正確的解凍方式是（）A.緩慢解凍B.快速解凍C.室溫自然解凍D.4℃解凍4.菌種純度檢測(cè)常用的方法是（）A.電泳B.平板劃線分離C.PCRD.比色法5.冷凍干燥保藏菌種的保藏期限一般為（）A.數(shù)月B.1-5年C.10-20年D.數(shù)年至數(shù)十年6.斜面保藏適用的菌種類型是（）A.產(chǎn)孢子菌種B.重組工程菌C.厭氧菌種D.極端嗜熱菌7.菌種保藏的核心目標(biāo)不包括（）A.保持活性B.維持遺傳特性C.提高生長(zhǎng)速率D.防止污染8.液體石蠟保藏時(shí)，石蠟需覆蓋斜面的（）A.1/2高度B.全部斜面C.液面以上1cmD.任意高度9.菌種編號(hào)應(yīng)包含的信息不包括（）A.菌種來源B.保藏日期C.實(shí)驗(yàn)者姓名D.保藏方法10.下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致菌種污染（）A.無菌操作不規(guī)范B.低溫保藏C.添加保護(hù)劑D.減少傳代三、多項(xiàng)選擇題（共10題，每題2分）1.菌種保藏的常用方法包括（）A.冷凍干燥保藏B.液氮保藏C.斜面保藏D.液體石蠟保藏2.菌種衰退的主要原因有（）A.基因突變B.傳代過多C.環(huán)境壓力D.營(yíng)養(yǎng)不足3.冷凍保護(hù)劑的作用包括（）A.抗凍保護(hù)B.維持細(xì)胞結(jié)構(gòu)C.抗氧化D.促進(jìn)生長(zhǎng)4.菌種純度檢測(cè)的方法有（）A.平板劃線B.鏡檢（形態(tài)觀察）C.生化鑒定D.PCR鑒定5.液氮保藏的注意事項(xiàng)包括（）A.戴防護(hù)手套/面罩B.緩慢升溫復(fù)蘇C.避免液氮接觸皮膚D.無需定期檢測(cè)6.菌種保藏的管理要求包括（）A.唯一編號(hào)B.詳細(xì)記錄C.定期活性檢測(cè)D.環(huán)境溫濕度控制7.斜面保藏的適用場(chǎng)景是（）A.短期保藏B.頻繁使用的菌種C.產(chǎn)孢子菌D.長(zhǎng)期保藏8.復(fù)蘇菌種后的驗(yàn)證內(nèi)容包括（）A.活性檢測(cè)（菌落計(jì)數(shù)）B.純度鑒定C.性能驗(yàn)證（如酶活）D.質(zhì)粒穩(wěn)定性（工程菌）9.液體石蠟保藏的操作要點(diǎn)是（）A.石蠟滅菌（121℃，30min）B.覆蓋斜面1cm以上C.密封試管D.室溫保藏10.合成生物學(xué)工程菌保藏需額外注意（）A.重組質(zhì)粒穩(wěn)定性B.標(biāo)記基因篩選C.避免抗生素壓力D.低溫保藏四、判斷題（共10題，每題2分）1.冷凍干燥保藏的菌種活性比液氮保藏高。（）2.傳代保藏會(huì)導(dǎo)致菌種遺傳特性改變。（）3.甘油是常用的冷凍保護(hù)劑，濃度一般為30%。（）4.斜面保藏的溫度為-20℃。（）5.菌種保藏?zé)o需定期檢測(cè)活性。（）6.液氮保藏的溫度是-196℃。（）7.液體石蠟保藏的原理是隔絕氧氣和水分。（）8.復(fù)蘇菌種時(shí)應(yīng)快速解凍，避免冰晶損傷細(xì)胞。（）9.菌種編號(hào)只需唯一，無需其他信息。（）10.產(chǎn)孢子菌種比營(yíng)養(yǎng)體菌種更易保藏。（）五、簡(jiǎn)答題（共4題，每題5分）1.簡(jiǎn)述冷凍干燥保藏菌種的基本步驟。2.菌種衰退的主要原因及預(yù)防措施是什么？3.液氮保藏菌種的注意事項(xiàng)有哪些？4.菌種純度檢測(cè)的常用方法及原理是什么？六、討論題（共2題，每題5分）1.如何平衡菌種保藏的長(zhǎng)期穩(wěn)定性與復(fù)蘇效率？2.合成生物學(xué)工程菌（含重組質(zhì)粒）的保藏策略與普通菌種有何差異？---答案部分一、填空題答案1.活性2.升華干燥3.甘油4.45.基因突變6.-1967.無菌水8.隔絕氧氣9.純度10.衰退二、單項(xiàng)選擇題答案1.B2.C3.B4.B5.D6.A7.C8.B9.D10.A三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABCD2.ABC3.ABC4.ABCD5.AC6.ABCD7.ABC8.ABCD9.ABC10.ABD四、判斷題答案1.×2.√3.√4.×5.×6.√7.√8.√9.×10.√五、簡(jiǎn)答題答案1.①制備含保護(hù)劑（甘油/脫脂奶）的菌懸液；②分裝安瓿管；③-40℃~-80℃預(yù)凍；④真空下升華干燥（冰直接變氣）；⑤解析干燥（去除殘留水分）；⑥密封安瓿；⑦檢測(cè)活性后保藏。2.原因：基因突變、傳代過多、環(huán)境壓力。預(yù)防：減少傳代、低溫/冷凍保藏、加保護(hù)劑、定期純度鑒定、用產(chǎn)孢子菌種保藏。3.①戴防凍裝備，避免液氮接觸皮膚；②菌懸液預(yù)凍后入液氮；③復(fù)蘇快速解凍（37℃水浴）；④定期補(bǔ)液氮；⑤用耐低溫凍存管，密封良好。4.①平板劃線：?jiǎn)尉湫螒B(tài)均一（純菌種菌落一致）；②鏡檢：細(xì)胞形態(tài)/排列一致；③生化鑒定：代謝特征（糖發(fā)酵）一致；④PCR：特異性基因條帶單一。六、討論題答案1.①選合適方法：長(zhǎng)期用液氮/冷凍干燥（穩(wěn)定性高），短期用斜面/液體石蠟（復(fù)蘇快）；②優(yōu)化保護(hù)劑：脫脂奶+甘油混合提升復(fù)蘇率；③復(fù)蘇條件：液氮菌快速解凍，冷凍干燥菌加無菌水復(fù)溶后接種；④定期檢測(cè)：每1-