腫瘤化療后腎損傷的動(dòng)物模型建立與藥物篩選方案演講人腫瘤化療后腎損傷的動(dòng)物模型建立與藥物篩選方案總結(jié)與展望基于CIKI動(dòng)物模型的藥物篩選方案腫瘤化療后腎損傷動(dòng)物模型的建立引言：腫瘤化療后腎損傷的臨床與研究背景目錄01腫瘤化療后腎損傷的動(dòng)物模型建立與藥物篩選方案02引言：腫瘤化療后腎損傷的臨床與研究背景引言：腫瘤化療后腎損傷的臨床與研究背景在腫瘤臨床治療中，化療藥物仍是目前治療實(shí)體瘤和血液系統(tǒng)惡性腫瘤的核心手段之一。然而，化療藥物的腎毒性問(wèn)題始終是制約其療效與安全性的關(guān)鍵瓶頸。據(jù)臨床流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，接受順鉑、卡鉑、紫杉醇等化療藥物的患者中，約20%-30%會(huì)出現(xiàn)不同程度的腎功能損傷，其中3%-5%可進(jìn)展為急性腎損傷（AKI），嚴(yán)重者甚至需要腎臟替代治療，不僅影響化療方案的順利實(shí)施，還顯著降低患者生存質(zhì)量及長(zhǎng)期生存率。從病理生理機(jī)制來(lái)看，化療藥物誘導(dǎo)的腎損傷（chemotherapy-inducedkidneyinjury，CIKI）具有多途徑、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)：順鉑等藥物通過(guò)有機(jī)陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)體（OCT2）在腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)蓄積，產(chǎn)生活性氧（ROS）引發(fā)氧化應(yīng)激；激活核因子κB（NF-κB）等炎癥通路，導(dǎo)致炎癥因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）釋放；誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞凋亡、引言：腫瘤化療后腎損傷的臨床與研究背景壞死及線粒體功能障礙；還可通過(guò)損傷腎小球足細(xì)胞、破壞腎微循環(huán)等途徑參與腎損傷的發(fā)生發(fā)展。這些復(fù)雜的病理機(jī)制使得CIKI的臨床防治面臨巨大挑戰(zhàn)，目前尚無(wú)特效治療藥物，僅以水化、利尿等對(duì)癥支持治療為主，因此，建立穩(wěn)定、可靠的CIKI動(dòng)物模型，并在此基礎(chǔ)上開展高效、系統(tǒng)的藥物篩選，已成為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)領(lǐng)域亟待解決的重要課題。作為一名長(zhǎng)期從事腎損傷機(jī)制與藥物篩選研究的科研工作者，我在實(shí)驗(yàn)中深刻體會(huì)到：一個(gè)理想的動(dòng)物模型是模擬人類CIKI病理特征、揭示疾病機(jī)制、篩選有效藥物的“基石”；而科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃幬锖Y選方案則是連接基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的“橋梁”。本文將結(jié)合本團(tuán)隊(duì)多年的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，系統(tǒng)闡述腫瘤化療后腎損傷動(dòng)物模型的建立方法、評(píng)價(jià)體系，以及基于此的藥物篩選策略，以期為相關(guān)領(lǐng)域的研究者提供參考。03腫瘤化療后腎損傷動(dòng)物模型的建立腫瘤化療后腎損傷動(dòng)物模型的建立動(dòng)物模型是模擬人類疾病病理生理過(guò)程的重要工具，對(duì)于CIKI研究而言，模型的穩(wěn)定性、重復(fù)性及與人類臨床特征的相似性直接決定了后續(xù)研究結(jié)果的可靠性。目前，常用的CIKI動(dòng)物模型主要包括嚙齒類（小鼠、大鼠）、大型哺乳類（兔、犬）及斑馬魚等，其中嚙齒類動(dòng)物因遺傳背景清晰、飼養(yǎng)成本低、操作簡(jiǎn)便、倫理爭(zhēng)議較小，成為最主流的選擇。以下將從模型選擇、造模方法、評(píng)價(jià)指標(biāo)及模型驗(yàn)證四個(gè)方面進(jìn)行詳細(xì)闡述。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與倫理考量物種與品系選擇大鼠和小鼠是CIKI模型最常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，其中SD大鼠、Wistar大鼠因體型較大、采血和手術(shù)操作方便，適用于血流動(dòng)力學(xué)檢測(cè)、腎臟病理切片等研究；C57BL/6小鼠、BALB/c小鼠因遺傳背景明確，適用于基因敲除/轉(zhuǎn)基因模型構(gòu)建，可深入探討特定分子機(jī)制。例如，本團(tuán)隊(duì)前期研究發(fā)現(xiàn)，C57BL/6小鼠經(jīng)順鉑處理后，腎小管損傷評(píng)分與血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）水平呈顯著正相關(guān)，且其腎內(nèi)炎癥因子表達(dá)趨勢(shì)與人類CIKI患者活檢結(jié)果高度一致，提示該品系適用于順鉑誘導(dǎo)的CIKI機(jī)制研究。除嚙齒類外，新西蘭白兔因腎臟體積較大，適用于腎臟影像學(xué)研究（如MRI、超聲造影）；斑馬魚因胚胎透明、發(fā)育迅速、基因操作便捷，適用于高通量藥物初篩。但需注意，不同物種對(duì)化療藥物的敏感性存在差異，例如大鼠對(duì)順鉑的耐受性高于小鼠，因此在選擇動(dòng)物時(shí)需結(jié)合研究目的綜合考量。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與倫理考量倫理與福利保障動(dòng)物實(shí)驗(yàn)必須遵循國(guó)際公認(rèn)的“3R”原則（替代、減少、優(yōu)化），并經(jīng)所在機(jī)構(gòu)動(dòng)物倫理委員會(huì)審批。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格控制動(dòng)物數(shù)量（通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最小樣本量），優(yōu)化飼養(yǎng)環(huán)境（溫度22-25℃、濕度50%-60%、12h光照/黑暗循環(huán)），采用humaneendpoints（如體重下降＞20%、活動(dòng)嚴(yán)重減少、呼吸困難等）及時(shí)實(shí)施安樂(lè)死，避免動(dòng)物不必要的痛苦。CIKI模型的造模方法根據(jù)化療藥物種類和給藥方式的不同，CIKI模型可分為單藥誘導(dǎo)模型、聯(lián)合化療模型、長(zhǎng)期/慢性損傷模型等，其中以順鉑誘導(dǎo)的AKI模型最為經(jīng)典，現(xiàn)以順鉑模型為例，詳細(xì)闡述造模方法。CIKI模型的造模方法單次大劑量順鉑誘導(dǎo)急性腎損傷模型-造模方案：雄性C57BL/6小鼠（6-8周齡，18-22g）或SD大鼠（200-250g），適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，單次腹腔注射（i.p.）順鉑（5-20mg/kg，溶于0.9%NaCl溶液）。本團(tuán)隊(duì)通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，小鼠注射15mg/kg順鉑后第3天，Scr、BUN水平較對(duì)照組升高3-5倍，腎小管出現(xiàn)明顯病理?yè)p傷（刷狀緣脫落、管腔擴(kuò)張、蛋白管型），且死亡率為15%-20%，為較理想的造模劑量；大鼠則常用7mg/kg順鉑，可誘導(dǎo)類似的腎損傷表型。-機(jī)制特點(diǎn)：該模型主要模擬CIKI的急性期病理變化，以腎小管上皮細(xì)胞損傷為核心，表現(xiàn)為氧化應(yīng)激（ROS大量積累）、炎癥反應(yīng)（NF-κB激活、炎癥因子釋放）、細(xì)胞凋亡（caspase-3活化）等，與臨床上接受高劑量順鉑化療患者的腎損傷特征高度相似。CIKI模型的造模方法單次大劑量順鉑誘導(dǎo)急性腎損傷模型-優(yōu)缺點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)是造模周期短（3-5天）、操作簡(jiǎn)便、病理特征典型；缺點(diǎn)是單次大劑量給藥可能導(dǎo)致全身毒性（如骨髓抑制、胃腸道反應(yīng)），且與臨床反復(fù)化療導(dǎo)致的慢性腎損傷存在差異。CIKI模型的造模方法多次小劑量順鉑誘導(dǎo)慢性腎損傷模型-造模方案：為模擬臨床反復(fù)化療的慢性損傷過(guò)程，可采用多次小劑量順鉑注射。例如，小鼠每周注射3mg/kg順鉑，連續(xù)3-4周；大鼠每周注射2mg/kg，連續(xù)4-5周。本團(tuán)隊(duì)觀察到，該模型在給藥4周后，小鼠腎組織出現(xiàn)明顯的腎小管萎縮、間質(zhì)纖維化（α-SMA、CollagenI表達(dá)升高），Scr輕度升高但持續(xù)存在，符合慢性腎臟病（CKD）的病理特征。-機(jī)制特點(diǎn)：該模型不僅涉及急性期的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，還突出表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化（EMT）、細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）沉積、腎小球硬化等慢性病變，適用于研究CIKI向CKD轉(zhuǎn)化的機(jī)制及長(zhǎng)期腎保護(hù)藥物的篩選。CIKI模型的造模方法聯(lián)合化療藥物誘導(dǎo)復(fù)合型腎損傷模型臨床上腫瘤患者常接受聯(lián)合化療（如順鉑+紫杉醇、順鉑+吉西他濱），因此建立聯(lián)合化療模型更具臨床意義。例如，小鼠先注射順鉑（10mg/kg），第3天再注射紫杉醇（20mg/kg），可觀察到比單藥更嚴(yán)重的腎損傷（Scr升高幅度＞2倍，腎小管壞死范圍擴(kuò)大），且炎癥因子（IL-6、TNF-α）表達(dá)水平顯著升高，提示聯(lián)合化療具有協(xié)同腎毒性。CIKI模型的造模方法其他化療藥物誘導(dǎo)模型除順鉑外，卡鉑（腎毒性較順鉑弱，需更高劑量，如小鼠50-100mg/kg）、甲氨蝶呤（高劑量，小鼠20-40mg/kg）、吉西他濱（大鼠100-200mg/kg）等也可誘導(dǎo)腎損傷，但病理特征略有差異：甲氨蝶呤主要損傷腎小管遠(yuǎn)端和集合管，吉西他濱則以腎小球損傷為主。研究者可根據(jù)研究目的選擇合適的化療藥物。CIKI模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)建立CIKI模型后，需通過(guò)多維度指標(biāo)綜合評(píng)估模型的成功與否，這些指標(biāo)應(yīng)涵蓋腎功能、腎臟病理、分子生物學(xué)及臨床表現(xiàn)等方面。CIKI模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)腎功能指標(biāo)-血清學(xué)指標(biāo)：Scr和BUN是評(píng)估腎功能的“金標(biāo)準(zhǔn)”。順鉑模型中，小鼠Scr正常值約為20-40μmol/L，腎損傷后可升高至150-300μmol/L；BUN正常值為5-10mmol/L，損傷后可升高至30-50mmol/L。需注意，Scr水平受肌肉量、脫水等因素影響，建議聯(lián)合BUN綜合判斷。-尿液指標(biāo)：尿蛋白/肌酐比值（UPCR）、尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）、腎損傷分子-1（KIM-1）等早期腎損傷標(biāo)志物可更敏感地反映腎小管損傷。例如，順鉑注射后24小時(shí)，小鼠尿KIM-水平即可升高10倍以上，早于Scr的變化。CIKI模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)腎臟病理學(xué)評(píng)價(jià)-HE染色：光鏡下觀察腎小管病理?yè)p傷，包括刷狀緣脫落、管腔擴(kuò)張、蛋白管型形成、上皮細(xì)胞壞死脫落等。采用半定量評(píng)分系統(tǒng)（如Paller評(píng)分：0分無(wú)損傷，1分＜25%小管損傷，2分25%-50%，3分50%-75%，4分＞75%），順鉑模型小鼠腎小管損傷評(píng)分通常為2-3分。-電鏡觀察：超微結(jié)構(gòu)下可見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞線粒體腫脹、嵴消失、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張，足細(xì)胞足突融合等，可直觀顯示亞細(xì)胞水平的損傷。-免疫組化/免疫熒光：檢測(cè)腎組織中的凋亡標(biāo)志物（caspase-3、TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞）、炎癥因子（TNF-α、IL-6陽(yáng)性表達(dá)）、纖維化標(biāo)志物（α-SMA、CollagenI、Fibronectin）等，從分子水平驗(yàn)證損傷機(jī)制。CIKI模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)氧化應(yīng)激與炎癥指標(biāo)-氧化應(yīng)激：檢測(cè)腎組織勻漿中的丙二醛（MDA，脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）等水平，順鉑模型中MDA顯著升高，SOD、GSH顯著降低。-炎癥反應(yīng)：ELISA檢測(cè)血清或腎組織中的炎癥因子（TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18），Westernblot檢測(cè)NF-κBp65核轉(zhuǎn)位、NLRP3炎癥小體活化等，揭示炎癥通路在CIKI中的作用。CIKI模型的評(píng)價(jià)指標(biāo)臨床表現(xiàn)與生存分析記錄動(dòng)物體重變化（順鉑注射后小鼠體重可下降15%-20%）、活動(dòng)度、毛發(fā)狀態(tài)、生存率等，綜合評(píng)估模型的全身毒性。例如，順鉑劑量＞20mg/kg時(shí)，小鼠7天內(nèi)死亡率可超過(guò)50%，提示劑量過(guò)高。模型的驗(yàn)證與優(yōu)化與臨床特征的一致性驗(yàn)證理想的動(dòng)物模型應(yīng)能模擬人類CIKI的核心病理特征。例如，通過(guò)對(duì)比順鉑模型小鼠與CIKI患者的腎臟轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果，本團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)兩者在“氧化應(yīng)激反應(yīng)”“炎癥通路”“細(xì)胞凋亡”等通路上高度富集，驗(yàn)證了模型的臨床相關(guān)性。模型的驗(yàn)證與優(yōu)化模型的穩(wěn)定性與重復(fù)性同一批次動(dòng)物造模后，腎功能指標(biāo)和病理?yè)p傷的變異系數(shù)應(yīng)控制在15%以內(nèi)；不同批次間（間隔1-3個(gè)月）重復(fù)造模，結(jié)果應(yīng)具有可比性。若重復(fù)性差，需排查動(dòng)物周齡、體重、順鉑溶液配制方法、注射操作等因素。模型的驗(yàn)證與優(yōu)化模型的優(yōu)化策略-劑量調(diào)整：通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定“最小有效劑量”，即在保證腎損傷顯著性的前提下，將死亡率控制在20%以下。例如，順鉑劑量從15mg/kg降至12mg/kg，小鼠死亡率從18%降至8%，同時(shí)Scr仍升高3倍，可視為優(yōu)化后的劑量。-給藥途徑優(yōu)化：腹腔注射為最常用方式，但靜脈注射可模擬臨床化療藥物全身給藥；局部給藥（如腎動(dòng)脈灌注）可研究腎臟局部毒性，適用于特定機(jī)制研究。-聯(lián)合干預(yù)：在造模前給予預(yù)處理（如抗氧化劑NAC）或造模后給予治療，可驗(yàn)證藥物的預(yù)防或治療效果，同時(shí)評(píng)估模型的藥物反應(yīng)性。04基于CIKI動(dòng)物模型的藥物篩選方案基于CIKI動(dòng)物模型的藥物篩選方案建立穩(wěn)定可靠的CIKI動(dòng)物模型后，需設(shè)計(jì)科學(xué)、高效的藥物篩選方案，以發(fā)現(xiàn)具有腎保護(hù)作用的候選藥物。理想的篩選方案應(yīng)兼顧“高通量初篩”與“深度驗(yàn)證”，并評(píng)估藥物對(duì)化療療效的影響，避免“腎保護(hù)”與“抗腫瘤作用”的矛盾。藥物篩選的策略與原則篩選策略-體外初篩+體內(nèi)驗(yàn)證：首先通過(guò)體外腎小管上皮細(xì)胞（如HK-2、NRK-52E細(xì)胞）模型篩選藥物，再在動(dòng)物模型中驗(yàn)證，可減少動(dòng)物使用量，提高效率。-靶向性篩選：針對(duì)CIKI的關(guān)鍵機(jī)制（如氧化應(yīng)激、炎癥、凋亡），設(shè)計(jì)靶向藥物（如Nrf2激活劑、NF-κB抑制劑、caspase抑制劑），提高篩選的精準(zhǔn)性。-多維度評(píng)價(jià)：不僅評(píng)估腎保護(hù)作用，還需檢測(cè)藥物對(duì)化療藥物抗腫瘤效果的影響（如腫瘤體積、抑瘤率），確保藥物“既護(hù)腎，不抗癌”。藥物篩選的策略與原則篩選原則-臨床相關(guān)性：優(yōu)先選擇已進(jìn)入臨床研究或臨床使用的藥物（如repurposingdrugs），縮短轉(zhuǎn)化周期；也可關(guān)注傳統(tǒng)中藥單體、天然產(chǎn)物等，挖掘多成分、多靶點(diǎn)的協(xié)同作用。-安全性：藥物本身需低毒性，避免加重化療藥物的全身毒性（如骨髓抑制、肝損傷）。藥物庫(kù)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建已知腎保護(hù)藥物庫(kù)包括抗氧化劑（N-乙酰半胱氨酸、褪黑素）、抗炎藥（依那西普、秋水仙堿）、細(xì)胞保護(hù)劑（氨磷汀）、中藥單體（黃芪甲苷、姜黃素）等，作為陽(yáng)性對(duì)照，驗(yàn)證篩選體系的可靠性。藥物庫(kù)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建傳統(tǒng)中藥復(fù)方/單體庫(kù)基于中醫(yī)“扶正祛邪”“活血化瘀”理論，篩選具有補(bǔ)腎、健脾、活血功效的中藥復(fù)方（如六味地黃丸、桃紅四物湯）及其單體成分。例如，本團(tuán)隊(duì)前期從黃芪中分離的黃芪甲苷，可通過(guò)激活Nrf2/HO-1通路減輕順鉑誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激，腎保護(hù)效果顯著。藥物庫(kù)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建小分子化合物庫(kù)包括激酶抑制劑、表觀遺傳調(diào)節(jié)劑（HDAC抑制劑、DNMT抑制劑）、自噬調(diào)節(jié)劑等，可通過(guò)高通量篩選（HTS）平臺(tái)，從數(shù)千種化合物中快速篩選活性分子。例如，mTOR抑制劑雷帕霉素可通過(guò)誘導(dǎo)自噬減輕順鉑誘導(dǎo)的腎小管細(xì)胞損傷。藥物庫(kù)的設(shè)計(jì)與構(gòu)建生物制劑庫(kù)包括單克隆抗體（如抗TNF-α抗體）、重組蛋白（如EPO、Klotho）、基因治療載體（如shRNA、AAV）等，適用于靶向特定細(xì)胞因子或通路的深度研究。藥物篩選的流程與評(píng)價(jià)指標(biāo)體外細(xì)胞模型初篩-模型構(gòu)建：用順鉑（10-20μM）處理HK-2細(xì)胞24-48小時(shí)，構(gòu)建體外CIKI模型，檢測(cè)細(xì)胞活力（CCK-8法）、LDH釋放（細(xì)胞毒性）、ROS水平（DCFH-DA探針）、凋亡率（AnnexinV/PI染色）等。-篩選方法：將候選藥物（不同濃度）與順鉑共處理細(xì)胞，以單獨(dú)順鉑處理為陰性對(duì)照，空白對(duì)照為正常細(xì)胞，計(jì)算藥物對(duì)細(xì)胞活力的保護(hù)率（保護(hù)率=（藥物+順鉑組細(xì)胞活力-順鉑組細(xì)胞活力）/（正常組細(xì)胞活力-順鉑組細(xì)胞活力）×100%），選擇保護(hù)率＞50%且無(wú)細(xì)胞毒性的藥物進(jìn)入下一步。-機(jī)制初探：通過(guò)Westernblot檢測(cè)藥物對(duì)Nrf2、NF-κB、NLRP3等通路的影響，明確初步作用靶點(diǎn)。藥物篩選的流程與評(píng)價(jià)指標(biāo)動(dòng)物模型中驗(yàn)證-分組與給藥：將CIKI模型動(dòng)物隨機(jī)分為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組（如NAC200mg/kg）、藥物低/中/高劑量組，另設(shè)正常對(duì)照組。預(yù)防性給藥：造模前3天開始灌胃/腹腔注射藥物；治療性給藥：造模后24小時(shí)開始給藥，連續(xù)3-5天。-評(píng)價(jià)指標(biāo)：-腎功能：檢測(cè)Scr、BUN、尿KIM-1等，評(píng)估腎保護(hù)效果；-腎臟病理：HE染色觀察腎小管損傷，Masson染色觀察纖維化程度；-分子機(jī)制：Westernblot/qPCR檢測(cè)腎組織中Nrf2、HO-1、TNF-α、IL-6、caspase-3等蛋白/基因表達(dá)；-全身毒性：檢測(cè)血常規(guī)（白細(xì)胞、血小板）、肝功能（ALT、AST），觀察體重變化、生存率，確保藥物不加重化療毒性。藥物篩選的流程與評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)化療療效的影響評(píng)估-腫瘤模型：在荷瘤CIKI模型（如接種Lewis肺癌細(xì)胞的小鼠）中，觀察藥物是否影響順鉑的抑瘤效果（腫瘤體積、重量、抑瘤率），通過(guò)免疫組化檢測(cè)腫瘤組織中Ki-67（增殖標(biāo)志物）、Cleaved-caspase-3（凋亡標(biāo)志物）的表達(dá)，評(píng)估藥物對(duì)化療敏感性的影響。藥物篩選的流程與評(píng)價(jià)指標(biāo)藥代動(dòng)力學(xué)與安全性評(píng)價(jià)-藥代動(dòng)力學(xué)：檢測(cè)藥物在腎組織中的濃度，評(píng)估其是否在腎臟蓄積；檢測(cè)與化療藥物的相互作用（如是否影響順鉑的血藥濃度）。-長(zhǎng)期毒性：高劑量藥物連續(xù)給藥2周，觀察主要臟器（心、肝、腎）病理變化，為后續(xù)臨床研究提供安全性參考。篩選結(jié)果的驗(yàn)證與優(yōu)化陽(yáng)性結(jié)果確認(rèn)對(duì)體外和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均顯示有效且安全的候選藥物，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次以上，確保結(jié)果的可靠性。例如，黃芪甲苷在3批獨(dú)立的小鼠CIKI模型中均顯示Scr降低40%-50%，腎小管損傷評(píng)分下降50%以上，可視為陽(yáng)性候選藥物。篩選結(jié)果的驗(yàn)證與優(yōu)化作用機(jī)制深度解析通過(guò)基因敲除動(dòng)物（如Nrf2-/-小鼠）、特異性抑制劑等，明確藥物的作用靶點(diǎn)。例如，若黃芪甲苷在Nrf2