生物科學(xué)XX生物科技企業(yè)研發(fā)實(shí)習(xí)生實(shí)習(xí)報(bào)告一、摘要2023年7月1日至2023年8月31日，我在XX生物科技企業(yè)研發(fā)部門擔(dān)任實(shí)習(xí)生，崗位為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)助理。核心工作成果包括協(xié)助完成基因編輯實(shí)驗(yàn)，通過CRISPRCas9技術(shù)成功構(gòu)建3株突變體菌株，其中2株在酶活性檢測(cè)中表現(xiàn)出15%和22%的效率提升；參與建立高通量篩選流程，日均處理樣本量達(dá)120份，縮短實(shí)驗(yàn)周期30%。專業(yè)技能應(yīng)用方面，熟練掌握qPCR、WesternBlot等實(shí)驗(yàn)技術(shù)，通過優(yōu)化內(nèi)參基因選擇，使實(shí)驗(yàn)重復(fù)性CV值從12%降至5%。提煉出標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)操作SOP模板，涵蓋試劑配制、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析等環(huán)節(jié)，可復(fù)用于同類實(shí)驗(yàn)中。二、實(shí)習(xí)內(nèi)容及過程2023年7月1日到8月31日，我在XX生物科技企業(yè)研發(fā)部實(shí)習(xí)，崗位是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)助理。實(shí)習(xí)目的是把學(xué)校學(xué)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)用到實(shí)際項(xiàng)目中，了解生物制藥研發(fā)的完整流程。這家公司主要做基因治療藥物開發(fā)，團(tuán)隊(duì)負(fù)責(zé)新型酶的篩選和優(yōu)化。我參與的項(xiàng)目是利用CRISPRCas9篩選能提高某種酶活性的基因突變。實(shí)習(xí)中，我每天早上先檢查細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)，確認(rèn)無污染后開始實(shí)驗(yàn)。7月10日到20日，我跟著師兄學(xué)習(xí)構(gòu)建突變體文庫(kù)，用了3代BAC載體轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞，總共轉(zhuǎn)染了5個(gè)不同濃度的質(zhì)粒，每個(gè)濃度做3個(gè)重復(fù)。轉(zhuǎn)染后第3天開始觀察GFP熒光，挑取陽(yáng)性克隆。我負(fù)責(zé)的環(huán)節(jié)是測(cè)序驗(yàn)證和酶活性分析。7月25日拿到第一批測(cè)序數(shù)據(jù)，通過生物信息學(xué)工具比對(duì)，篩選出3株有潛在突變的菌株。8月1日到8月15日，我優(yōu)化了酶活性檢測(cè)方法，原來用試劑盒測(cè)，現(xiàn)在改用分光光度法，結(jié)果更穩(wěn)定。3株菌株的酶活性數(shù)據(jù)對(duì)比顯示，其中株號(hào)B02的酶活性比野生型高22%，株號(hào)A15高15%，這個(gè)結(jié)果在統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著。實(shí)驗(yàn)中遇到的最大挑戰(zhàn)是酶活性重復(fù)性差。8月5日做WesternBlot驗(yàn)證蛋白表達(dá)量時(shí)，發(fā)現(xiàn)同一個(gè)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，不同板之間的蛋白條帶差異很大。后來發(fā)現(xiàn)是細(xì)胞培養(yǎng)密度沒控制好，重新調(diào)到80%90%confluent接種，加上轉(zhuǎn)染后48小時(shí)收細(xì)胞，數(shù)據(jù)重做一遍，CV值從12%降到5%。我自學(xué)了ImageJ軟件做灰度分析，比手動(dòng)計(jì)數(shù)靠譜多了。這次實(shí)習(xí)讓我摸清了基因編輯到藥物篩選的基本流程，從細(xì)胞培養(yǎng)到蛋白質(zhì)純化，每一步的細(xì)節(jié)都不一樣。比如做酶活性實(shí)驗(yàn)，緩沖液pH值、溫度都要精確控制，否則結(jié)果偏差大。最讓我印象深刻的是導(dǎo)師說的“實(shí)驗(yàn)失敗是常態(tài)”，以前覺得失敗就是做錯(cuò)了，現(xiàn)在明白有時(shí)候失敗只是告訴你這個(gè)方向不行，得換個(gè)思路。公司的培訓(xùn)機(jī)制其實(shí)一般，很多實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)都是靠自己摸索，有時(shí)候師兄忙不過來只能自己試。我覺得他們可以搞個(gè)在線操作視頻庫(kù)，把關(guān)鍵步驟錄下來，新來的實(shí)習(xí)生也能快速上手。另外我的崗位偏重基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，跟臨床開發(fā)脫節(jié)，如果公司能多安排些跨部門交流就好了。這段經(jīng)歷讓我更清楚自己想做什么，以后想往酶工程方向發(fā)展，得多補(bǔ)分子模擬和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)方面的知識(shí)。三、總結(jié)與體會(huì)這8周實(shí)習(xí)像是在學(xué)校學(xué)習(xí)和未來工作之間搭了一座橋。7月剛進(jìn)去時(shí)，我對(duì)實(shí)際研發(fā)流程一知半解，連細(xì)胞培養(yǎng)基配都比劃不清，8月底離開時(shí)，獨(dú)立完成過表達(dá)蛋白純化和酶活性初步測(cè)定，這變化挺真實(shí)的。實(shí)習(xí)最大的收獲是認(rèn)識(shí)到細(xì)節(jié)決定成敗。7月18日做qPCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，發(fā)現(xiàn)重復(fù)孔Ct值偏差超1.5，反復(fù)檢查發(fā)現(xiàn)是反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)沒做好，重做后CV值從8.2%降到3.1%。這讓我明白，科研不是猜數(shù)據(jù)，每一步都要嚴(yán)謹(jǐn)。導(dǎo)師說的“數(shù)據(jù)會(huì)說話”現(xiàn)在懂了，以前看文獻(xiàn)只關(guān)注結(jié)論，現(xiàn)在會(huì)追溯方法學(xué)細(xì)節(jié)。這段經(jīng)歷直接影響了我的職業(yè)規(guī)劃。之前想畢業(yè)后隨便找個(gè)生物技術(shù)崗，現(xiàn)在明確想搞酶工程，所以下學(xué)期要補(bǔ)《酶學(xué)進(jìn)展》和《蛋白質(zhì)晶體學(xué)》兩門課，還打算考個(gè)PMP證書，了解項(xiàng)目管理。實(shí)習(xí)時(shí)看到同事用Python分析高通量測(cè)序數(shù)據(jù)，覺得挺酷，準(zhǔn)備自學(xué)R語言和Bioconductor包。行業(yè)里現(xiàn)在都喜歡用AI輔助藥物設(shè)計(jì)，8月參與的一個(gè)小項(xiàng)目就是用機(jī)器學(xué)習(xí)預(yù)測(cè)酶的底物結(jié)合能，雖然只是輔助實(shí)驗(yàn)，但感覺未來研發(fā)會(huì)越來越依賴計(jì)算工具。我實(shí)習(xí)用的那套酶活性篩選方法，現(xiàn)在看來流程有點(diǎn)老，新來的師兄用的是微流控芯片，通量高多了。這讓我意識(shí)到，不更新知識(shí)很快會(huì)被淘汰，以后得多關(guān)注領(lǐng)域前沿。最重要的是心態(tài)轉(zhuǎn)變。剛開始接任務(wù)時(shí)手忙腳亂，8月10日負(fù)責(zé)的細(xì)胞凍存突然大規(guī)模失敗，急得團(tuán)團(tuán)轉(zhuǎn)。后來靜下心分析發(fā)現(xiàn)是凍存液DMSO梯度配錯(cuò)了，重新制定方案補(bǔ)救過來?，F(xiàn)在明白，職場(chǎng)壓力是常態(tài)，關(guān)鍵是怎么扛。這種抗壓能力比學(xué)會(huì)多少實(shí)驗(yàn)技術(shù)更重要。離公司那天導(dǎo)師說我“像個(gè)能扛事的人了”，雖然有點(diǎn)不好意思，但確實(shí)成長(zhǎng)了?，F(xiàn)在回頭看，實(shí)習(xí)暴露了我在文獻(xiàn)檢索和問題解決上的短板。比如7月30日遇到菌株轉(zhuǎn)化效率低，花兩天查資料試了3種方法才解決，效率太低。下階段學(xué)習(xí)要學(xué)得更體系化，準(zhǔn)備買本《生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)原理與方法》啃啃。總之一句話，實(shí)習(xí)教會(huì)我的，比學(xué)校四年加起來還多。四、致謝感謝XX生物科技企業(yè)給我這次實(shí)習(xí)機(jī)會(huì)，讓我接觸到了真實(shí)的研發(fā)環(huán)境。特別感謝導(dǎo)師在實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)上的耐心，7月15日我做的第一個(gè)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)失敗時(shí)，您幫我分析了