實驗室生物安全培訓試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共30分）1.依據《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，我國將病原微生物分為四類，其中第二類病原微生物的危害程度為（）。A.低個體危害，低群體危害B.高個體危害，低群體危害C.高個體危害，高群體危害D.低個體危害，高群體危害2.以下不屬于BSL-2實驗室（二級生物安全實驗室）必須配備的基本設施是（）。A.生物安全柜B.自動閉門裝置C.高壓蒸汽滅菌器D.緊急沖淋裝置3.實驗人員在處理含有結核分枝桿菌的樣本時，應選擇的個人防護裝備（PPE）組合是（）。A.普通醫(yī)用口罩、實驗服、乳膠手套B.N95口罩、防滲實驗服、雙層手套C.一次性手術帽、護目鏡、布質工作服D.防化服、全面罩呼吸器、單層丁腈手套4.實驗室廢棄的培養(yǎng)皿（含活菌）應如何處理？（）A.直接投入黃色醫(yī)療廢物袋B.先高壓滅菌（121℃，30分鐘），再按感染性廢物處理C.用75%酒精浸泡2小時后丟棄D.密封后隨生活垃圾轉運5.關于生物安全柜的使用，以下操作錯誤的是（）。A.操作前開啟生物安全柜紫外線燈照射30分鐘B.操作時將雙臂快速伸入柜內，避免氣流紊亂C.柜內物品擺放遵循“清潔區(qū)→操作區(qū)→污染區(qū)”的順序D.操作結束后關閉風機前，用75%酒精擦拭臺面6.離心操作時，若發(fā)現(xiàn)離心機劇烈震動，應立即采取的措施是（）。A.繼續(xù)觀察，等待自動停止B.快速按下“急停”按鈕，待轉子完全靜止后檢查C.用手扶住離心機外殼穩(wěn)定震動D.關閉電源，2分鐘后重啟設備7.實驗室發(fā)生樣本（含HIV病毒）泄漏時，正確的處理流程是（）。A.立即用紙巾擦拭，再噴灑含氯消毒液（有效氯500mg/L）B.先疏散人員，報告實驗室負責人，穿戴PPE后用吸濕材料覆蓋，靜置10分鐘，再用含氯消毒液（有效氯2000mg/L）處理C.直接用自來水沖洗泄漏區(qū)域，避免擴散D.用75%酒精反復擦拭3次，確保消毒徹底8.實驗人員被污染的移液器吸頭刺傷手指后，應首先（）。A.立即擠壓傷口，從近心端向遠心端擠出污血B.用大量清水沖洗傷口，再用碘伏消毒C.報告實驗室主管，填寫暴露記錄表D.前往醫(yī)院注射疫苗9.以下哪種微生物樣本的運輸不符合生物安全要求？（）A.裝于防漏的初級容器，外層包裹吸水材料，置于帶鎖的運輸箱B.運輸高致病性病原微生物時，使用專用運輸車輛并配備雙人護送C.普通細菌培養(yǎng)物通過快遞郵寄，未標注生物危害標識D.樣本運輸前進行壓力測試，確認無泄漏10.BSL-2實驗室的準入要求是（）。A.所有人員可自由進出，無需培訓B.經生物安全培訓并考核合格，熟悉實驗室風險和操作規(guī)范C.僅需佩戴工作牌即可進入D.外來人員無需登記，由實驗人員陪同即可11.關于實驗室菌（毒）種管理，錯誤的做法是（）。A.建立唯一編號的電子和紙質檔案，記錄保存位置、數量、使用情況B.雙人雙鎖保管，領用需審批并登記C.過期或多余的菌（毒）種直接丟棄于普通垃圾桶D.銷毀時采用高壓滅菌或化學滅活，記錄銷毀過程12.進行動物實驗時，以下操作不符合生物安全要求的是（）。A.實驗動物在專用屏障系統(tǒng)中飼養(yǎng)B.解剖后的動物尸體裝入防漏袋，高壓滅菌后按醫(yī)療廢物處理C.操作感染動物時在生物安全柜外進行D.實驗結束后對動物飼養(yǎng)籠具進行徹底消毒13.實驗室冰箱管理中，正確的做法是（）。A.普通冰箱存放樣本和食品B.標注“生物危害”標識，分類存放不同種類樣本C.未密封的培養(yǎng)基直接放入冰箱D.超量存放物品，塞滿所有空間14.以下哪種情況不屬于實驗室生物安全事件？（）A.離心管破裂導致樣本泄漏B.實驗人員誤將含菌廢液倒入普通下水道C.實驗記錄丟失一頁D.小鼠逃逸出動物實驗室15.關于實驗室應急預案，錯誤的描述是（）。A.每年至少進行1次生物安全事件應急演練B.預案應包括泄漏處理、人員暴露、火災等場景C.應急物資（如消毒液、PPE、急救箱）需定期檢查更新D.發(fā)生事件后無需記錄，僅口頭報告上級即可二、判斷題（每題1分，共15分。正確填“√”，錯誤填“×”）1.實驗室可以在操作區(qū)飲食、飲水或存放食物。（）2.所有生物樣本均需視為具有潛在感染性，采取相應防護措施。（）3.生物安全柜的高效空氣過濾器（HEPA）無需定期檢測，損壞后更換即可。（）4.銳器（如針頭、玻片）使用后應直接放入耐刺的銳器盒，裝滿3/4時封口處理。（）5.實驗結束后，需用75%酒精或其他有效消毒液擦拭臺面和儀器表面。（）6.運輸感染性物質時，初級容器、次級包裝、外層包裝需符合“三重包裝系統(tǒng)”要求。（）7.實驗人員出現(xiàn)發(fā)熱等癥狀時，若未接觸病原微生物，可繼續(xù)工作。（）8.高壓蒸汽滅菌時，物品應松散放置，確保蒸汽穿透，滅菌后需待壓力歸零再開啟。（）9.基因工程實驗中，經改造的重組微生物可直接排放至環(huán)境中。（）10.實驗室生物安全負責人需定期檢查實驗室設施、設備和操作規(guī)范的執(zhí)行情況。（）11.處理完感染性材料后，應先脫手套，再摘口罩，最后洗手。（）12.動物實驗中，應遵循“3R原則”（替代、減少、優(yōu)化），降低動物使用量和痛苦。（）13.實驗室的生物安全標識只需在入口處張貼，操作區(qū)無需重復標注。（）14.凍干菌種復蘇時，需在生物安全柜內進行，避免氣溶膠擴散。（）15.發(fā)生生物安全事件后，應立即報告，并保護現(xiàn)場，配合調查。（）三、簡答題（每題8分，共40分）1.簡述BSL-2實驗室的基本生物安全要求（至少列出5項）。2.實驗人員被污染的銳器刺傷后，應采取哪些應急處置步驟？3.列舉實驗室感染性廢棄物的分類及對應的處理方法。4.生物安全柜的主要功能是什么？使用時需注意哪些關鍵事項？5.簡述實驗室菌（毒）種管理的核心要點（至少列出5項）。四、案例分析題（15分）某高校微生物實驗室開展沙門氏菌（BSL-2級病原微生物）實驗時，發(fā)生以下事件：實驗員小王在超凈工作臺（非生物安全柜）中進行菌液接種操作，未佩戴口罩；接種過程中，移液槍頭意外脫落，菌液濺到實驗服前襟；小王未及時處理，繼續(xù)操作至實驗結束，隨后將被污染的實驗服掛在實驗室更衣柜中，未進行消毒；實驗產生的廢棄培養(yǎng)皿直接投入黃色醫(yī)療廢物袋，未高壓滅菌。請分析該事件中存在的生物安全隱患，并提出改進措施。參考答案一、單項選擇題1.B2.D3.B4.B5.B6.B7.B8.A9.C10.B11.C12.C13.B14.C15.D二、判斷題1.×2.√3.×4.√5.√6.√7.×8.√9.×10.√11.×12.√13.×14.√15.√三、簡答題1.BSL-2實驗室的基本生物安全要求包括：（1）實驗室入口處設置生物危害標識和準入限制，非授權人員不得進入；（2）配備生物安全柜（至少Ⅱ級）用于操作感染性材料；（3）墻面、地面、臺面應耐腐、防滲，無死角，便于清潔消毒；（4）配備高壓蒸汽滅菌器用于感染性廢棄物處理；（5）實驗室應設自動閉門裝置，避免氣流逆向；（6）操作區(qū)與辦公區(qū)分離，設置獨立的更衣柜和洗消設施；（7）實驗人員需經過生物安全培訓并考核合格，操作時穿戴PPE（如N95口罩、防滲實驗服、手套等）。2.銳器刺傷后的應急處置步驟：（1）立即停止操作，在安全區(qū)域處理傷口；（2）從近心端向遠心端輕輕擠壓傷口，盡可能擠出污血，避免用力擠壓導致感染擴散；（3）用大量流動清水或生理鹽水沖洗傷口10分鐘以上；（4）用0.5%碘伏或75%酒精消毒傷口，并用無菌紗布覆蓋；（5）立即報告實驗室負責人或生物安全管理員，記錄暴露時間、地點、病原微生物種類等信息；（6）根據暴露風險（如病原微生物的致病性、傷口深度等），由專業(yè)人員評估是否需要預防性用藥（如抗生素、疫苗等）；（7）后續(xù)跟蹤觀察，記錄健康狀況，必要時進行醫(yī)學檢測。3.實驗室感染性廢棄物的分類及處理方法：（1）感染性廢液：如菌液、細胞培養(yǎng)液等，需用化學消毒劑（如含氯消毒液，有效氯≥2000mg/L）浸泡2小時以上，或高壓滅菌（121℃，30分鐘）后排放至實驗室專用廢水處理系統(tǒng)。（2）感染性固體廢棄物：包括培養(yǎng)皿、吸管、移液器吸頭、被污染的實驗服等，需先高壓滅菌（121℃，30分鐘）或化學滅活，再裝入黃色醫(yī)療廢物袋，由有資質的醫(yī)療廢物處理機構轉運處置。（3）銳器：如針頭、玻片、手術刀等，使用后立即放入耐刺、防漏的銳器盒，裝滿3/4時密封，高壓滅菌后按感染性廢物處理。（4）實驗動物尸體及組織：需裝入防漏袋，高壓滅菌后送專業(yè)機構焚燒處理，或使用化學方法（如2%戊二醛浸泡48小時）滅活后處理。4.生物安全柜的主要功能是通過定向氣流和HEPA過濾器，防止操作過程中產生的氣溶膠擴散到環(huán)境中，同時保護實驗樣本免受外界污染（Ⅱ級A2型及以上），實現(xiàn)“人員-環(huán)境-樣本”三重防護。使用時的關鍵注意事項：（1）操作前需開啟生物安全柜風機和紫外線燈照射30分鐘，關閉紫外線燈后待10分鐘再開始操作；（2）操作時手臂應緩慢伸入，避免快速移動擾亂氣流，柜內物品擺放應避免遮擋回風口；（3）禁止在生物安全柜內使用酒精燈等明火，以免破壞氣流平衡；（4）操作過程中，安全柜的前窗開口高度應保持在規(guī)定范圍內（通?！?0cm）；（5）操作結束后，用75%酒精擦拭臺面和物品表面，關閉前窗，繼續(xù)運行風機10分鐘后關閉；（6）定期（每6-12個月）對生物安全柜的風速、HEPA過濾器完整性進行檢測，確保功能正常。5.實驗室菌（毒）種管理的核心要點：（1）實行雙人雙鎖保管，菌（毒）種保存柜需有防盜措施；（2）建立詳細的登記檔案，包括菌（毒）種名稱、來源、編號、保存位置、數量、傳代次數、使用記錄等，電子檔案與紙質檔案同步更新；（3）領用菌（毒）種需填寫申請單，經實驗室負責人審批，雙人核對后發(fā)放；（4）使用過程中需在生物安全柜內操作，避免泄漏或氣溶膠擴散，使用后及時歸還；（5）過期或多余的菌（毒）種需經高壓滅菌或化學滅活處理，銷毀過程需雙人監(jiān)督并記錄；（6）定期（每半年）清點菌（毒）種庫存，確保賬物一致；（7）涉及高致病性病原微生物的菌（毒）種，需按《病原微生物實驗室生物安全管理條例》向相關部門備案。四、案例分析題存在的生物安全隱患及改進措施：隱患分析：（1）使用超凈工作臺替代生物安全柜：超凈工作臺僅能保護樣本，無法防護人員和環(huán)境，操作BSL-2級病原微生物時應使用Ⅱ級生物安全柜。（2）未佩戴口罩：操作感染性材料時，需佩戴N95口罩或更高防護級別的呼吸防護裝備，防止氣溶膠吸入。（3）菌液濺落后未及時處理：濺出的菌液可能形成氣溶膠或污染環(huán)境，需立即停止操作，穿戴PPE后用吸濕材料覆蓋，噴灑含氯消毒液（有效氯2000mg/L）作用30分鐘，再清理。（4）污染實驗服未消毒：被污染的實驗服應立即脫下，放入專用收集袋高壓滅菌后清洗，不可掛在更衣柜中。（5）廢棄培養(yǎng)皿未高壓滅菌：含活菌的培養(yǎng)皿需先高壓滅菌（121℃，30分鐘），再按感染性廢物處理，直接丟棄可能導致病原微生物擴散。改進措施：（1）更換實驗設備：操作BSL-2級病原微生物時，必須使用Ⅱ級生物安全柜，禁止用超凈工作臺替代。（2）規(guī)范個人防護：實驗人員需穿戴N95口罩、防滲實驗服、手套，必要時佩戴護目鏡，操作前檢查PPE完整性。（3）完善應急處理流程：發(fā)生樣本泄漏時，立即停止操作，報告