1、廣西大學(xué)2016年實(shí)驗(yàn)操作題預(yù)測（1） 平板菌落計(jì)數(shù)（2） EDTA滴定（3） 分光光度計(jì)的使用建議看完本文檔后在網(wǎng)上找相關(guān)視頻學(xué)習(xí)，這樣印象比較深刻，實(shí)驗(yàn)步驟要記住一些關(guān)鍵步驟。實(shí)驗(yàn)操作技能考試技巧NO.1 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院2006年復(fù)試實(shí)驗(yàn)操作技能考試 2006年3月29日，上午考完了專業(yè)筆試，中午1點(diǎn)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)技能的考查。學(xué)生事先提前在體檢的時候，報名選好你要參加的實(shí)驗(yàn)，有三個，化學(xué)實(shí)驗(yàn)、機(jī)械實(shí)驗(yàn)、微生物實(shí)驗(yàn)。任選一個。然后到指定的教室去考。大部分都選了化學(xué)實(shí)驗(yàn)。我也是，在食品樓416考的。 在考試以前大家在考場的隔壁實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備有的人拿實(shí)驗(yàn)書狂看有的在扎堆聊天。名單上有你的名字和考試順

2、序號叫號碼來考試就跟醫(yī)院和銀行一樣?？荚嚨牡胤绞沁M(jìn)去以后關(guān)上門的沒輪到的或者已經(jīng)考完的都不能逗留在里面。8號進(jìn)去考完之后，出來的時候就喊，9號、9號到你了。 里面有三個老師，一個老師考一個內(nèi)容，同一個時間里面，屋子里面除了他們只能有3個學(xué)生，一對一。你三個內(nèi)容都要考完，順序無所謂。每個老師給一個分?jǐn)?shù)，綜合起來就是你的實(shí)驗(yàn)總得分。 內(nèi)容一實(shí)驗(yàn)操作。我先走到一個中年女老師面前，她面前放的是一臺分光光度計(jì)725式。老師“這是什么機(jī)器我答:“分光光度計(jì)?！彼c(diǎn)頭。然后指著桌子上一瓶液體說“你測一下它的吸光度?！比缓笪揖筒僮?，挺簡單，看看機(jī)器里面有沒有黑體放進(jìn)去了，注意測之前要潤洗，還要用濾紙擦干滴到外

3、面的液體，手要拿磨砂的那一面，調(diào)零等等。缺點(diǎn)就是那機(jī)器是老式的旋鈕機(jī)器。我本科時候用的是微電腦按鍵的。功能都寫在按鍵上，老式的我就不大會用，害得后來老師還多問了我許多諸如“吸光光度計(jì)的原理”之類的問題。 內(nèi)容二主要是儀器的識別。一個態(tài)度非常好的男老師，面前放著一些玻璃器皿，拿起幾個問我“這個是什么，我被問到了球形冷凝管、酸式滴定管和分液漏斗。然后他指著實(shí)驗(yàn)室里面一臺機(jī)器問“這個是什么。我被問到了離心機(jī)和旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。然后他就問我畢業(yè)設(shè)計(jì)做的是什么題目，主要用什么儀器。最后他問了“怎樣測定面粉中的還原糖含量”，每個人問題不會都一樣，但來去也就那幾個，如果實(shí)在答不上來就跟老師說，他會一步一步提示你，

4、點(diǎn)頭就行拉，哈哈。 內(nèi)容三實(shí)驗(yàn)方案。一個年輕女老師，態(tài)度和藹。她面前放著天平、燒杯、容量瓶等幾樣?xùn)|西。當(dāng)然不會讓你動手做，只是讓你口頭說說，僅作為一個提示把那些東西放在那里。問題是“怎樣配1mol/L的NaOH標(biāo)準(zhǔn)溶液，回答有條理一些就可以。老師很好，會不斷提示你。主要是把步驟說清楚，要把她面前的那些儀器“用”上。我的回答大體如下：黑體加粗的字就是她面前放的東西看著回答就可以拉。先計(jì)算，用1000ml容量瓶則需要大概40g左右的NaOH，則用天平來稱。老師問“怎么稱呢”，先開天平，放上燒杯，調(diào)零，稱完后用蒸餾水溶解。然后用漏斗或者玻棒移液到容量瓶，然后再用蒸餾水洗幾次，也倒入容量瓶。因?yàn)镹aO

5、H遇到水會發(fā)熱，所以要等幾分鐘冷卻后再加蒸餾水至刻度然后，標(biāo)定。也就是用另一個已知濃度的酸來測定該溶液的精確濃度，這需要用到滴定管。老師又問“為什么要標(biāo)定，因?yàn)槲覀兎Q量NaOH的時候有誤差NaOH吸潮，操作中有濃度損失等等，所以要標(biāo)定才能得知其濃度。NO.2 實(shí)驗(yàn)考試技巧我選的是化學(xué)實(shí)驗(yàn),一百多人中只有三十多個選化學(xué)實(shí)驗(yàn),其實(shí)化學(xué)實(shí)驗(yàn)一點(diǎn)都不難。本來有三組,但是有一個老師有事就只有兩組好像(那一組考的是分光光度計(jì)),另外兩組實(shí)驗(yàn)是這樣的。一個是溶液的配制,比如0.1mlo/L的NaoH如何配制,他們那一組的好像很快,也很簡單;我那一組的是一個剛來的男老師,有一點(diǎn)點(diǎn)嚴(yán),他會隨機(jī)問你一些問題,(這

6、是我問了好多同學(xué)總結(jié)出來的,他并沒有問我)比如0.235mlo/L的硫酸鈉如何配制,直接稱量法和試差稱量法有什么區(qū)別?在什么情況下選用什么方法,會給你時間計(jì)算什么的,有時讓你親自操作,其實(shí)就是用分析天平稱一下東西,然后還讓我吸取10.00ml的水溶液,這時不能用量筒,老師會問你為什么不選量筒什么的,之后我就用移液管量取10ML的水。最后他讓我移取102微升的溶液,但是我們不會用那個,他就說就不移了。后來就給我糾正了一些錯誤,老師挺好的,實(shí)驗(yàn)就是這樣。 聽說在08年復(fù)試的時候有考到分光光度計(jì)的,好像也不是很難,就是基本操作吧。我們這一次沒考,而且我們這一次時間很倉促,比她們的安排更急一些?？偟膩?/p>

7、說,中農(nóng)食品復(fù)試的實(shí)驗(yàn)還是很簡單的,只要你平時做實(shí)驗(yàn)用心了,沒有多大問題,專業(yè)課的筆試和實(shí)驗(yàn)都是要靠平時的積累,所以大家千萬別不學(xué)專業(yè)課。我去復(fù)試前以為自己英語過不了線,所以根本沒有準(zhǔn)備復(fù)試,但是后來我的總評成績沒有下降,反而上了,我想可能是平常的積累吧。還有好多初試高分到復(fù)試時名次降了好多的就像糧油方向的一個題目,谷物的散落性那一題,我大三的時候一個老師都是非逼著我們背,沒想到在這些居然派上了用場,那一題20分,真的沒想到,所以大家千萬別因?yàn)榭佳芯筒粚W(xué)習(xí)專業(yè)課 最后再說說面試吧。聯(lián)系導(dǎo)師很重要,只要導(dǎo)師肯要你,面試沒人會為難你的,面試時每一個小組一般都是9到10位老師,開始就是閑聊,問一些學(xué)

8、校的情況,你的成績,有沒有做過科研,你的畢業(yè)設(shè)計(jì)題目是什么?大學(xué)期間遇到什么困難,如何克服后來就是英語面試,都是很簡單的問題,比如你的興趣愛好,有沒有來過北京,呵呵簡單吧。每個人的問題可能都不同,就是這個樣子的。至于有人說復(fù)試的時候?qū)ν庑５膶W(xué)生有歧視什么的,我完全沒有感覺到,我可以打保票,絕對沒有,中農(nóng)食品學(xué)院老師的師德讓我折報!還有一點(diǎn)要說明的,個人覺得英語要學(xué)好,請大家認(rèn)真學(xué)習(xí)英語,絕對不要只是為了考試而學(xué)習(xí)英語!也有很多初試因?yàn)橛⒄Z過不了線的,那些都是血的教訓(xùn)啊!廣西大學(xué)往年實(shí)驗(yàn)操作題（1）722型光柵分光光度計(jì)的使用步驟1、開啟電源，指示燈亮，選擇開關(guān)置于“T”，波長調(diào)置使用波長。儀器

9、預(yù)熱20分鐘。2、打開試樣室蓋（光門自動關(guān)閉），調(diào)節(jié)“0”旋鈕，使數(shù)字顯示為“00.0”。蓋上試樣室蓋，將比色皿架處于蒸餾水校正位置，使光電管受光，調(diào)節(jié)透過率“100%”旋鈕，使數(shù)字顯示為“100.0”。3、如果顯示不到“100.0”，則可適當(dāng)增加微電流放大器的倍率檔數(shù)，但盡可能倍率置低檔使用，這樣儀器將有更高的穩(wěn)定性。但改變倍率后必須按步驟2重新校正“00.0”和“100%”。4、預(yù)熱后，按步驟2連續(xù)幾次調(diào)整“00.0”和“100%”，儀器即可進(jìn)行測定工作。5、吸光度A的測量：按步驟2調(diào)整儀器的“00.0”和“100%”，將選擇開置于“A”，調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕，使得數(shù)字顯示為“.000”，然

10、后將被測樣品移入光路，顯示值即為被測樣品的吸光度的值。6、濃度C的測量：選擇開關(guān)由“A”旋置“C”，將已標(biāo)定濃度的樣品放入光路，調(diào)節(jié)濃度旋鈕，使得數(shù)字顯示為標(biāo)定值，將被測樣品放入光路，即可讀出被測樣品的濃度值。7、如果大幅度改變測試波長時，在調(diào)整“0.00”和“100%”后稍等片刻（因光能量變化急劇，光電管受光后響應(yīng)緩慢，需一段光響應(yīng)平衡時間），當(dāng)穩(wěn)定后，重新調(diào)整“00.0”和“100%”即可工作。8、每臺儀器所配套的比色皿，不能與其它儀器上的比色皿單個調(diào)換。(2)EDTA滴定法操作步驟及檢測方法一、目的和使用范圍本試驗(yàn)方法使用于在工地快速測定水泥石灰穩(wěn)定土中的水泥和石灰的劑量，并可用以檢查拌

11、和的均勻性。二、儀器設(shè)備1、滴定管（酸式）50ml，一支。2、滴定臺，一個。3、滴定管夾，一個。4、 大肚移液管：10ml，10支。5、錐形瓶：200ml，20個。6、 燒杯：2000ml（或1000ml），1只；300ml，10只。7、 容量瓶：1000ml，1個。8、玻璃棒。9、量筒：100ml和5ml各一個；50ml2個。10、搪瓷杯：容量大于1200ml，10只。11、 棕色廣口瓶：60ml，1只（裝鈣紅）12、 托盤天平：60ml，1只13、秒表1只14、表面皿直徑9，10個。15、研體：直徑1213cm。16、土樣篩：篩孔2.0mm或2.5mm,一個.17、洗耳球：（1兩或2兩）1

12、個。18、精密試紙：PH1214。19、聚乙烯桶20L，1個（裝蒸餾水）；10L，2個（裝氯化銨及EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)液）；5L，1個（裝氫氧化鈉）。20、毛刷、去污粉、吸水管、塑料勺、特種鉛筆、厘米紙。21、洗瓶（塑料）500ml，1只。三、試劑1、0.1mol/m3乙二胺四乙酸二鈉（簡稱EDTA二鈉）標(biāo)準(zhǔn)液：準(zhǔn)確稱取EDTA二鈉（分析純）37.226g，用微熱的無二氧化碳蒸餾水溶解，待全部溶解并冷至室溫后，定容至1000ml。2、10%氯化銨溶液：將500克氯化銨（分析純或化學(xué)純）放在10L的聚乙烯桶內(nèi)，加蒸餾水4500Ml，充分振蕩，使氯化銨完全溶解。也可以分批在1000ml的燒杯內(nèi)配制，然

13、后放入塑料桶內(nèi)搖勻。3、1.8%氫氧化鈉（內(nèi)含三乙醇胺）溶液：用100克架盤天平稱18克氫氧化鈉，放入潔凈干燥的1000mL燒杯中，加1000mL蒸餾水使其全部溶解，待溶液冷至室溫后，加入2mL三乙醇胺（分析純），攪拌均勻后儲于塑料桶中。4、鈣紅指示劑：將0.2克鈣試劑羥酸鈉與20克預(yù)先在105烘箱中烘1h的硫酸鉀混合。一起放入研體中，研成極細(xì)粉末，儲于棕色廣口瓶中，以防吸潮。四、試驗(yàn)步驟（一）試驗(yàn)準(zhǔn)備準(zhǔn)備5種試樣，每種2個樣品（以水泥集料為例），如下：1種：稱2份300克集料分別放在2個搪瓷杯內(nèi)，集料的含水量應(yīng)等于工地預(yù)期達(dá)到的最佳含水量。集料中所加的水應(yīng)與工地所用的水相同（300克為濕質(zhì)量

14、）。2種：準(zhǔn)備兩份水泥劑量為2%的水泥土混合料試樣，每份均重300克，并分別放在2個搪瓷杯內(nèi)。水泥土混合料的含水量應(yīng)等于工地預(yù)期達(dá)到的最佳含水量。混合料中所加的水應(yīng)與工地所用的水相同。3種、4種、5種：各準(zhǔn)備2份水泥劑量分別為4%、6%、8%的水泥混合料試樣，每份均重300克，并分別放在6個搪瓷杯內(nèi)，其他要求同一種。（二）、試驗(yàn)方法1、取一個盛有試樣的搪瓷杯，在杯內(nèi)加600mL10%氯化銨溶液，用玻璃棒充分?jǐn)嚢?分鐘（每分鐘攪拌110120次）。如水泥土混合料是細(xì)粒土，則也可以用100mL具塞三角瓶代替搪瓷杯，手握三角瓶（瓶口向上）用力振蕩3分鐘（每分鐘120次5次），以代替攪拌棒攪拌。放置沉

15、淀4分鐘（如4分鐘后得到的是混濁懸浮液，則應(yīng)增加放置時間，直到出現(xiàn)澄清懸浮液為止，并記錄所需時間，以后所有該種水泥土混合料的試驗(yàn)，均應(yīng)以同一時間為準(zhǔn)），然后將上部澄清液轉(zhuǎn)移到300mL燒杯內(nèi)，攪勻，加蓋表面皿待測。2、用移液管吸取上層（液面下12cm）懸浮液10mL放入200mL的三角瓶中,用量筒量取50mL1.8%氫氧化鈉（內(nèi)含三乙醇胺）溶液倒入三角瓶中，此時溶液PH值為12.513.0，然后加入鈣紅指示劑（體積約為黃豆大?。u勻，溶液呈玫瑰紅色。用EDTA二鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定到純藍(lán)色為終點(diǎn)，記錄EDTA二鈉耗量。3、對其他幾個搪瓷杯中的試樣，用同樣的方法進(jìn)行試驗(yàn)，并記錄各自的EDTA二鈉的耗量

16、。（3）平板菌落計(jì)數(shù)法 一、目的要求學(xué)習(xí)平板菌落計(jì)數(shù)的基本原理和方法。二、基本原理平板菌落計(jì)數(shù)法是將等測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋后，其中的微生物充分分散為單個細(xì)胞，取一定量的稀釋液接種到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個單細(xì)胞生長繁殖而形成的肉眼可見的菌落，即一個單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。但是，由于待測樣品往往不易完全分散成單個細(xì)胞，所以，長成的一個單菌落也可能來自樣品中的23或更多個細(xì)胞。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低?，F(xiàn)在常使用菌落形成單位。該計(jì)數(shù)法的缺點(diǎn)是操作較繁，結(jié)果需要培養(yǎng)一段時間才能取得，而且測定結(jié)果易受多種因素的影響，但是這種計(jì)

17、數(shù)方法最大的優(yōu)點(diǎn)是可以獲得活菌的信息，所以被廣泛用于生物制品檢驗(yàn)，以及食品、飲料和水等含菌指數(shù)或污染度的檢測。三、器材大腸桿菌懸液，LB瓊脂培養(yǎng)基，1mL、5mL無菌吸管，無菌平皿，無菌水，無菌試管，試管架和記號筆等。四、操作步驟1、編號取無菌平皿9套，分別標(biāo)明為10-4、10-5、10-6各三套，另取6支無菌試管分別標(biāo)記為10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。2、稀釋用1mL無菌吸管吸取1mL已充分混勻的大腸桿菌菌懸液，精確地放0.5mL至10-1的試管中，此即為10倍稀釋，將多余的菌液放回原菌液中。將10-1試管充分振蕩、混勻。另取一支1ml吸管插入10-1試管中來回

18、吹吸菌液三次，進(jìn)一步將菌體分散、混勻。動作不要太猛太快，吸時插入，吹時提出，再用此吸管吸取10-1菌液1mL，精確地放0.5mL至10-2試管中，此即為100倍稀釋，依次類推，3、取樣用三支1ml無菌吸定分別吸取10-4、10-5、10-6的稀釋菌懸液各1mL，對號放入編好號的無菌平皿中，每個平皿放0.2mL4、倒平板盡快向上述盛有不同稀釋菌液的平皿中倒入融化后冷卻至45度的LB培養(yǎng)基約15-20ml，置水平位置迅速旋動平皿，使培養(yǎng)基與菌液混合均勻。5、培養(yǎng)倒置于37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，6、計(jì)數(shù)算出同一稀釋度三個平板上的菌落平均數(shù)，并按下列公式進(jìn)行計(jì)算；每毫升中菌落形成單位（cfu）= 同

19、一稀釋度三次重復(fù)的平均菌落數(shù)稀釋倍數(shù)5五、實(shí)驗(yàn)報告1、結(jié)果將培養(yǎng)后菌落計(jì)數(shù)結(jié)果填入下表：稀釋度10-410-510-6123平均123平均123平均Cfu數(shù)/平板每毫升的cfu數(shù)2、思考題1)為什么溶化后的培養(yǎng)基要冷卻至45左右才能倒平板？2)要使平板菌落計(jì)數(shù)準(zhǔn)確，需要掌握哪幾個關(guān)鍵？為什么？3)同一種菌液用血球計(jì)數(shù)板和平板菌落計(jì)數(shù)法同時計(jì)數(shù)，所得結(jié)果是否一樣？為什么？4)試比較平板菌落計(jì)數(shù)法和顯微鏡下直接計(jì)數(shù)法的優(yōu)缺點(diǎn)。（4）實(shí)驗(yàn)室折光儀操作規(guī)程目的:規(guī)范折光儀的操作。適用范圍:檢驗(yàn)室折光儀。1操作方法11將折光儀安置于充分光線的平臺上(但不應(yīng)受日光直接照射)，并裝上溫度計(jì)，必要時可連接恒溫

20、器，以保持一定溫度。12將棱鏡上透光處朝光源，將鏡角拉向檢查者，使成一適當(dāng)傾斜度。13對準(zhǔn)反光鏡，使視野內(nèi)光線最明亮為止，若光線不充足的室內(nèi)或測定色澤較深的檢品時，可將棱鏡上的圓窗打開，以增加光線的強(qiáng)度。14將下面的棱鏡拉開，用玻璃棒或吸管取檢品少許(約1-3滴)滴在鏡面上，然后將上下二塊棱鏡合并旋緊。15旋轉(zhuǎn)刻度尺旋鈕，使讀數(shù)在檢品折光率附近，然后旋轉(zhuǎn)補(bǔ)償器旋鈕，再轉(zhuǎn)動刻度尺調(diào)節(jié)鈕，使視野內(nèi)的明暗分界線恰位于十字交叉點(diǎn)處。16記下刻度尺上的讀數(shù)和溫度，即為該溫度時檢品的折光率。17測定完畢后，如檢品為水溶液應(yīng)隨即用濾紙條吸去檢液，然后滴蒸餾水于棱鏡上，再用濾紙條吸干,反復(fù)洗滌三次即可，最后用

21、試鏡紙輕輕揩干凈，如檢品為油類物質(zhì)應(yīng)隨即用二甲苯或丙酮或乙醚將棱鏡按上法揩干凈。（5）酸堿滴定法測定混和堿各組分的含量內(nèi)容提要根據(jù)甲基橙和酚酞兩種指示劑所示終點(diǎn)時消耗的HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，計(jì)算混和堿中各組分的含量。目的要求了解雙指示劑法測定混和堿各組分含量的原理實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵1. 掌握不同指示劑終點(diǎn)時消耗的HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積與各種堿的量的關(guān)系。2. 基本操作技能的掌握程度（滴定管、移液管）。實(shí)驗(yàn)原理混和堿是指Na2CO3與NaOH或Na2CO3與NaHCO3的混和物，采用雙指示劑法的測定原理和測定過程如下：用酚酞作指示劑，HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液剛好褪色，此為第一化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，消耗的HCl體積為V1/ml，有關(guān)的反應(yīng)有NaOH HCl NaCl H2ONaCO3 HCl NaHCO3 + NaCl繼續(xù)用甲基橙為指示劑，用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈橙色，此為第二化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，消耗的HCl體積為V2/mL，有關(guān)的反應(yīng)為NaHCO3 HCl