1、 阿司匹林含量測定方法綜述 一、阿司匹林原料藥的含量測定（1）酸堿滴定法1、直接滴定法2、水解后剩余滴定3、兩步滴定法 （2）儀器法4、反相高效液相色譜法5、薄層色譜法6、紫外分光光度法二、阿司匹林制劑的含量測定1、兩步滴定法光譜法：2、比色法3、雙波長紫外分光光度法4、雙波比值光譜法5、同步掃描熒光光譜6、萃取-火焰原子吸收光譜法7、紫外分光光度法8、分光光度法9、熒光光度法 10、差示分光光度法11、紫外褶合光譜法12、近紅外漫反射法色譜法：13、高效液相色譜法 14、反相高效液相色譜法 15、離子抑制-反相高效液相色譜法16、氣相色譜法 17、大口毛細(xì)管氣相色譜法18、膠束薄層色譜法 電

2、泳法：19、非水毛細(xì)管電泳法 20、反向高效毛細(xì)管電泳法其他法：21、動(dòng)力學(xué)光度法測定痕量乙酰水楊酸23、電極法 24、柱分配色譜-紫外分光光度法 25、阻尼最小二乘法 26、線性掃描伏安法測定阿司匹林 27、百分吸收系數(shù)法摘要：阿司匹林是水楊酸類解熱鎮(zhèn)痛藥物，臨床上主要用于治療感冒發(fā)燒、牙痛等慢性疼痛，現(xiàn)在的研究發(fā)現(xiàn)小劑量的阿司匹林也可用于預(yù)防惡性腫瘤，對多種疾病有治療作用。阿司匹林含量的測定方法很多，有容量分析法，紫外分光光度法，HPLC法，薄層色譜法，氣相色譜法等方法，現(xiàn)對其含量測定和鑒別方法作一綜述。關(guān)鍵詞：阿司匹林 含量測定阿司匹林是市場上常見的水楊酸類藥物，其化學(xué)式為：理化性質(zhì)：（

3、1） 本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩慢水解。（2） 本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶。（3） 結(jié)構(gòu)中具有羧基具有酸性。（4） 結(jié)構(gòu)中有酯鍵，在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時(shí)分解。（5） 苯環(huán)具有紫外吸收。中國藥典收載的品種有阿司匹林片、阿司匹林腸溶片、阿司匹林腸溶膠囊、阿司匹林泡騰片和阿司匹林栓，以及國家食品藥品地標(biāo)收載的小劑量的阿司匹林腸溶片，這些藥品成分相同，作用類似，市場應(yīng)用廣范。臨床上主要用于治療感冒發(fā)燒，牙痛、肌肉痛及神經(jīng)痛等慢性疼痛，急、慢性風(fēng)濕病及類風(fēng)濕病等，是風(fēng)濕、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎治療的常用藥物。本品主要的副作

4、用是引起幽門痙攣及刺激胃黏膜的胃腸道反應(yīng) 長期服用導(dǎo)致胃腸出血。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，各種儀器設(shè)備、新方法的應(yīng)用，形成了阿司匹林鑒別和含量測定方法的各異性。阿司匹林的含量測定一、原料藥：（1）酸堿滴定法1、直接滴定法16：原理：結(jié)構(gòu)中具有羧基，顯酸性，可用堿中和，利用中和反應(yīng)測定其含量。 方法：取本品0。4g，精密稱定，加中性乙醇20ml，溶解，加酚酞指示液3d，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）滴定。每1ml滴定液相當(dāng)于18.02mg 的C9H8O4。中國藥典(2010年版)二部采用此法。計(jì)算公式：NaOH滴定度T=0.1180.16(1/1)=18.02（mg/ml）F=M（實(shí)際）/M(規(guī)

5、定)含量（%）=（VTF）/W100%（V為滴定液體積（ml）； T為氫氧化鈉的滴定度 ，W為供試品稱樣量（g）； F為滴定液濃度校正因子（F=滴定液實(shí)際濃度/滴定液規(guī)定濃度） 優(yōu)點(diǎn)：簡便、快速。 缺點(diǎn)：1.酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）。2.酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸 ）。 適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測定。 2、水解后剩余滴定2：原理：利用阿司匹林酯結(jié)構(gòu)在堿性溶液中易于水解的特性，加入定量過量的氫氧化鈉滴定液，加熱使酯鍵水解后，再用硫酸滴定液回滴定剩余的氫氧化鈉滴定液。 方法：取本品1.5g，精密稱定加氫氧化鈉滴（0.5mol/l）50.0ml，混合，

6、緩緩煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩余的氫氧化鈉。計(jì)算公式：硫酸標(biāo)準(zhǔn)液與阿司匹林的摩爾比為11。硫酸的T=0.25（1/1）180.16=45.04(mg/ml)含量（%）=（V0-V）FT/W100%（V0為空白試驗(yàn)消耗硫酸滴定液的體積（ml）；V為樣品測定時(shí)消耗硫酸滴定液的體積（ml）；W為阿司匹林樣品的稱取量（g）；F為硫酸的濃度校正因數(shù)；T為硫酸溶液的滴定度） 優(yōu)點(diǎn)：消除了酯鍵水解的干擾 缺點(diǎn)：酸性雜質(zhì)干擾3、兩步滴定法16 3：原理：兩步滴定法系指測定過程分兩步進(jìn)行：第一步中和制劑中的酸性水解產(chǎn)物和酸性穩(wěn)定劑（同時(shí)中和阿司匹林的游離羧基），

7、以消除其干擾；第二步水解與滴定，即水解后剩余量滴定法。Chp2005曾收載兩步滴定法測定阿司匹林片和腸溶片的含量。中和：水解與滴定： 方法： A、中和：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取片粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.3g），置錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示劑顯中性）20ml，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/ml）至溶液顯粉紅色。此時(shí)中和了供試品中存在的游離酸，阿司匹林也同時(shí)成為鈉鹽。 B、水解與滴定：在中和后的供試品溶液中，精密加氫氧化鈉滴定液（0.1mol/ml）40ml，置水浴上加熱15分鐘并時(shí)時(shí)振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（0.05mo

8、l/ml）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。 計(jì)算公式：從上述反應(yīng)式可知：阿司匹林與硫酸的摩爾比為2：1硫酸的T=0.05（2/1）180.16=18.02（mg/ml）標(biāo)示量%=（V0-V）FTW(平均)/（W標(biāo)示量）100%（V0為空白試驗(yàn)消耗硫酸滴定液的體積（ml）；V為樣品測定時(shí)消耗硫酸滴定液的體積（ml）；F為硫酸滴定液的濃度校正因數(shù)；T為硫酸的滴定度（mg/ml）；W為供試品片粉的取樣量（g）；W（平均）為供試品的平均片重（g）；標(biāo)示量為片劑的規(guī)格（mg/片） 優(yōu)點(diǎn)：消除了酸性物質(zhì)的干擾4、反相高效液相色譜法（1）阿司匹林對照品溶液的制備：精密稱取阿司匹林對照品150mg，置50

9、ml量瓶中，加乙腈適量使溶解并稀釋至刻度；精密量取10ml，置25ml量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，制成含阿司匹林1200ug/ml的對照品溶液。（2）部分降解供試品溶液的制備：精密稱取阿司匹林樣品150mg，平鋪于50ml燒杯內(nèi)，然后置于恒溫恒濕箱（75、80%相對濕度）中加速其降解，一定時(shí)間后取出樣品，按（1）項(xiàng)下方法制成部分降解的供試品溶液。（3）含量測定：精密稱取不同批樣品150mg，置50ml量瓶中，加乙腈適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，取15ul注入液相色譜儀，記錄峰面積。另?。?）項(xiàng)下方法制成的對照品溶液（含阿司匹林1200ul/ml）15ul，同法測定，按外標(biāo)法計(jì)算阿

10、司匹林含量。優(yōu)選：直接滴定法，原料藥的純度較高，可用容量分析法直接測定其含量，不用重新提純和精制，本法所用儀器價(jià)廉易得，操作簡便、快速；方法耐用性高；測定結(jié)果準(zhǔn)確，相對誤差在0.2%以下。5、薄層色譜法6、紫外分光光度法二、制劑含量測定1、兩步滴定法 原理：因片劑中可能加入酒石酸或枸櫞酸作穩(wěn)定劑，也可能有水解酸性產(chǎn)物水楊酸，醋酸等，不能用直接滴定法，而是先中和共存的酸，再水解其目的物質(zhì)。A中和： B水解：C剩余滴定：2NaOH（過量）H2SO4 Na2SO42H2O反應(yīng)摩爾比為0.512、比色法21原理：利用阿司匹林在堿性條件下能定量水解成水楊酸的特性，采用比色法即水楊酸遇硫酸鐵銨指示液顯紫色

11、并在530nm1nm處測定其吸收度，求得水楊酸的量再折算成阿司匹林的量。高革、王?；蹖⑺酒チ咒\用0.1mol/L NaOH溶液定量水解后，用比色法測定了其中阿司匹林的含量。21【對照液的制備】精密稱取水楊酸適量置1000mL容量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1mL，再加水稀釋至刻度，搖勻，配成100g/mL的對照液?！竟┰嚻啡芤旱闹苽洹咳“⑺酒チ咒\約0.4g，精密稱定，加水20mL，再加0.1mol/L NaOH液25mL，煮沸并保溫30min，放冷后移至250mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻、濾過，棄去初液，精密量取續(xù)濾液10mL,置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得?！緲悠窚y定】取

12、本品約0.4g，精密稱定，加乙醚4mL，不斷攪拌。用乙醚潤濕濾紙，濾過，濾A樣=渣用乙醚洗滌3次，每次約2mL，濾渣及濾紙全部移至燒瓶中，加水20mL，再加0.1mol/L NaOH液25mL，煮沸并保溫30min，放冷后移至250mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液10mL置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。分別量取對照液及樣品液10mL，置25mL量瓶中，分別各加入0.01mol/L HCl溶液2.0mL，硫酸鐵銨指示劑2.0mL，再加水稀釋至刻度，搖勻。在530nm分別測定其吸收度。 【計(jì)算】樣品%100%D/WC對照A對照A樣、A對照分別為樣品和對

13、照品的吸收度，C對照為對照液的濃度，D為稀釋倍數(shù)，W為樣品取樣量?！居懻摗繕悠芬簼舛扰c光吸收值呈簡單的線性關(guān)系，測定結(jié)果相對偏差小，重現(xiàn)性好。樣品水解時(shí)加堿量及顯色時(shí)加酸量一定要足夠，否則結(jié)果偏低或偏高。原料中的游離水楊酸可用乙醚提出后再進(jìn)行測定。3、雙波長紫外分光光度法6池秀珍采用雙波長紫外分光光度法（測定波長為276nm和322nm），測定了阿司匹林腸溶片的含量，可消除水解產(chǎn)物水楊酸的干擾?！緲?biāo)準(zhǔn)曲線的繪制】精密稱取阿司匹林對照品適量，用乙醇溶解使成1000g/mL的溶液。精密吸取1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL，分置于25mL量瓶中，加乙醇至刻度，分別制成40、60、80、10

14、0和120g/mL的對照品溶液，以乙醇為空白，分別在276nm、322nm波長處測定吸收度，以濃度C對A進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：C=3.810-4+1.540310-1A，r=0.9999（n=5）【樣品測定】取阿司匹林腸溶片10片（小劑量20片），精密稱定，研細(xì)。精密稱取約相當(dāng)于阿司匹林50 mg于50mL量瓶中，加乙醇適量，振搖使溶解并定容，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液2mL于25mL量瓶中，加乙醇至刻度，以乙醇為空白，分別在276、322nm波長處測定吸收度，用回歸方程計(jì)算阿司匹林的含量?！居?jì)算】將樣品在276和322nm處的得的吸收度計(jì)算得的A，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得樣品中阿司匹林的濃度。

15、100%C實(shí)際測得的含量C標(biāo)示量=樣品%4、雙波比值光譜法22孫增先等應(yīng)用雙波長比值光譜法測定了復(fù)方乙酰水楊酸片中阿司匹林、非那西丁、咖啡因三種組分的含量，結(jié)果顯示阿司匹林（A）在520g/mL，非那西丁（P）在210g/mL，咖啡因（C）在g/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均回收率分別為100.3%，100.23%，99.96%。優(yōu)點(diǎn)：該方法適用于吸收光譜嚴(yán)重重疊，組分間互相干擾的復(fù)方制劑，測定波長少，計(jì)算簡單，對儀器的要求不高。5、同步掃描熒光光譜20原理：熒光光度計(jì)同步掃描時(shí), 得到兩組分互不干擾的熒光峰, 借此分別測定兩組分的含量。溶液的配制：對照液：精密稱取阿司匹林對照品適量，置10

16、0ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇定容，即得。供試品：精密稱取阿司匹林注射液適量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇定容，即得。測定方法：用對照品溶液測定熒光強(qiáng)度與濃度的線性關(guān)系后，再在每次測定前，用一定濃度的對照品溶液校正儀器的靈敏度；然后再相同的條件下，分別讀取對照品溶液及其試劑空白的熒光強(qiáng)度與供試品溶液及其空白的熒光強(qiáng)度計(jì)算公式：CX =（RXRXb）/（RrRrb）Cr（CX和 Cr為供試品溶液、對照品溶液的濃度，RX供試品溶液熒光強(qiáng)度，RXb供試品溶液試劑空白的熒光強(qiáng)度，Rr對照品溶液的熒光強(qiáng)度，Rrb為對照品溶液的試劑的

17、空白熒光強(qiáng)度）6、萃取-火焰原子吸收光譜法24朱鏗等以火焰法測定有機(jī)相中銅的原子吸收信號，間接求的阿司匹林的含量，建立了一種原子吸收光譜法間接測定阿司匹林的新方法，并用于實(shí)際樣品正痛片（錦州制藥廠生產(chǎn)）中阿司匹林的含量測定?！驹怼吭谝欢l件下，阿司匹林與新銅試劑-銅形成離子對，它可被甲基異丁基甲酮萃取，測定有機(jī)相中銅離子的濃度，間接求得阿司匹林的含量?！净鹧嬖游諟y定條件】光譜通帶0.5nm；波長324.8nm；燈電流2mA；燃燒器高度20mm；空氣流量8.0L/min；乙炔氣流量1.6L/min；積分時(shí)間2s?！救芤号渲啤堪⑺酒チ謽?biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取阿司匹林純品0.9008g，加入分析純（

18、95%）乙醇20mL溶解，于500mL容量瓶中以水定容，使其濃度為1.0010mol/L,使用時(shí)逐級稀釋。新銅試劑銅溶液：稱取分析純新銅試劑2.300g加入50mL分析純(95%)乙醇溶解；再加入分析純CuSO45H2O 1.250g，使其完全溶解，于500mL容量瓶中以水定容。新銅試劑-銅溶液濃度為0.01mol/L。硫脲溶液：稱取分析純（NH2）2CS 0.95g，溶解定容于500mL容量瓶中，使其濃度為0.025mol/L。緩沖溶液：由KH2PO4和K2HPO4配制?！痉椒ā吭?0.0mL磨口具塞刻度試管中，分別依次加入 1.0mL新銅試劑銅溶液，l.0mL (NH2)2CS溶液，5.0

19、mL緩沖溶液及1.0mL阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)溶液(或試樣溶液)。準(zhǔn)確加入 2.0mL甲基異丁基甲酮（MIBK），手搖1min，離心分離。測定有機(jī)相中銅的吸收信號（即響應(yīng)于阿司匹林的銅的吸光度），以未加阿司匹林溶液的MIBK提取溶液為空白。【計(jì)算】將阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)溶液按本法操作，用計(jì)算機(jī)計(jì)算得阿司匹林標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，得回歸方程：A=bC+a，將樣品的測的A值帶入方程，求得C。【討論】本方具有法線性范圍寬、重現(xiàn)性好、環(huán)境污染小、簡便、快速等特點(diǎn)，但對儀器和試劑有一定的要求 7、紫外分光光度法4 原理：結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)，具有紫外吸收的特性。精密稱取在105干燥至恒重的阿司匹林對照品32.08mg, 置25ml量瓶

20、中, 加0.1mol/LNaOH溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 作為貯備液。精密吸取上述儲備液1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml, 分別置100ml量瓶中, 用0.1mol/LNaOH稀釋至刻度, 搖勻, 照分光光度法, 在297nm處測定吸出度A,以A值對濃度C回歸, 得回歸方程為A=1.83910C+1.589610,r=0.9998(n=5)。結(jié)果表明：在19.2-44.9ug/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。適用于阿司匹林片、阿司匹林腸溶片等。8、分光光度法5原理：阿司匹林腸溶片的主要成分為乙酰水楊酸, 分子中酯基在堿性溶液中可與羥胺反應(yīng)生成羥肟酸; 后者在酸性條件下與三氯化鐵形成酒紅

21、色的羥肟酸鐵, 最大吸收波長為520nm,在一定濃度范圍內(nèi), 吸光度呈線性關(guān)系, 可測出阿司匹林藥片中乙酰水楊酸的含量。方法：a、標(biāo)準(zhǔn)溶液系列和樣品溶液的配制分別取0. 5g/L乙酰水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液0. 00ml( 空白溶液) , 0. 50ml, 1. 00ml, 1. 50ml, 2. 00ml和阿司匹林樣品溶液1. 00ml 置于25ml 容量瓶中, 分別加入7% 鹽酸羥胺乙醇液1. 00ml, 2 mol/L NaOH 1. 00ml, 放置3 分鐘, 再分別加入4 mol/L HCl和10%FeCl3 各1. 00ml, 加水至刻度, 搖勻。b、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：標(biāo)準(zhǔn)溶液系列和樣品溶液放

22、置10 分鐘后, 用空白溶液做對照, 在520nm 處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo), 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖, 繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線。9、熒光光度法7 原理：為將阿司匹林配置成一定量的稀溶液，然后A=ECL可以計(jì)算出，小劑量阿司匹林的含量。適用于小劑量阿司匹林片的含量測定。10、差示分光光度法8在波長297 nm 處, 阿司匹林以其在0. 1mol/l鹽酸溶液為參比液, 測得其在0.1mol/l氫氧化鈉溶液中的差示吸收值。結(jié)果:阿司匹林濃度在10. 29-30. 87 mol/l范圍內(nèi)A與溶液濃度呈良好線性關(guān)系( r= 0. 9998),平均回收率為99. 84% ( n = 6), RSD為0.

23、 51%。優(yōu)點(diǎn):該法簡便、快速、準(zhǔn)確。適用于阿司匹林腸溶片的含量測定。11、紫外褶合光譜法9原理：褶合曲線分析法是一種數(shù)學(xué)變換辦法，根據(jù)諧波分析原理，將光譜吸收曲線看作是多個(gè)數(shù)學(xué)分量加權(quán)而成，由于它提供的信息量大，可以顯示曲線的細(xì)微差異，以減少相似組分的數(shù)學(xué)相關(guān)性，所以在混合物定量方面具有明顯的優(yōu)點(diǎn)。小兒退熱靈的主要成分為阿司匹林和苯巴比妥，侯巍等 經(jīng)褶合光譜儀采集其245295 nm波長范圍吸收度信息，產(chǎn)生褶合光譜，冉利用計(jì)算機(jī)信息處理技術(shù)的褶合曲線分析法對阿司匹林和苯巴比妥進(jìn)行同時(shí)測定，獲得了滿意的結(jié)果。12、近紅外漫反射法14原理：近紅外漫反射法技術(shù)是隨計(jì)算機(jī)和化學(xué)計(jì)量學(xué)的發(fā)展而迅速發(fā)展

24、起來的一門新型光譜技術(shù)。近紅外譜區(qū)范圍一般為4 00010 000 cm，該譜區(qū)主要是含氫基團(tuán)的倍頻及合頻吸收。近紅外譜區(qū)譜峰重疊嚴(yán)重，定量分析需要一個(gè)待測成分已知的標(biāo)準(zhǔn)樣品集，根據(jù)標(biāo)樣中樣品的近紅外光譜，運(yùn)用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法建立光譜特征值與待測成分之間的數(shù)學(xué)關(guān)系。樣品可以不經(jīng)預(yù)處理，通過求解光譜矩陣來建立數(shù)學(xué)模型，進(jìn)行定量。喬梁等采用此法對精氨酸阿司匹林片劑進(jìn)行了含量測定。精氨酸阿司匹林主要含NH鍵，故選取 6 0007 000cm和4 5005 000 cm 這兩個(gè)主要是NH鍵振動(dòng)的頻率區(qū)間作為分析區(qū)間，取得了較好的效果。優(yōu)選：兩步滴定法，方法所用儀器少，操作簡單、快速，方法耐用性高，測定結(jié)

25、果準(zhǔn)確。13、高效液相色譜法15A、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)： 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動(dòng)相；檢測波長為276nm。理論板數(shù)按阿司匹林峰計(jì)算不低于3000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。B、測定法： 取本品20片，精密稱定，充分研細(xì)，精密稱取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林10mg），置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液強(qiáng)烈振搖使阿司匹林溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液10ul，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取阿司匹林對照品，精密稱定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振搖使溶解并定量稀釋制成每

26、1ml中約含0.1mg的溶液，同法測定。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。（中國藥典(2010年版)二部采用此法）。適用于阿司匹林片、阿司匹林膠囊等各種劑型。14、反相高效液相色譜法1（1）阿司匹林對照品溶液的制備：精密稱取阿司匹林對照品150mg，置50ml量瓶中，加乙腈適量使溶解并稀釋至刻度；精密量取10ml，置25ml量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，制成含阿司匹林1200ug/ml的對照品溶液。（2）部分降解供試品溶液的制備：精密稱取阿司匹林樣品150mg，平鋪于50ml燒杯內(nèi)，然后置于恒溫恒濕箱（75、80%相對濕度）中加速其降解，一定時(shí)間后取出樣品，按（1）項(xiàng)下方法制成部分降解的供試品溶液。（3

27、）含量測定：精密稱取不同批樣品150mg，置50ml量瓶中，加乙腈適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，取15ul注入液相色譜儀，記錄峰面積。另?。?）項(xiàng)下方法制成的對照品溶液（含阿司匹林1200ul/ml）15ul，同法測定，按外標(biāo)法計(jì)算阿司匹林含量。優(yōu)選：直接滴定法，原料藥的純度較高，可用容量分析法直接測定其含量，不用重新提純和精制，本法所用儀器價(jià)廉易得，操作簡便、快速；方法耐用性高；測定結(jié)果準(zhǔn)確，相對誤差在0.2%以下。15、離子抑制-反相高效液相色譜法典型芳酸類非甾體抗炎藥物制劑大多采用離子抑制-反相高效液相色譜法測定，用外標(biāo)法計(jì)算含量。以阿司匹林栓的含量測定為例，方法如下：色

28、譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-四氫呋喃-冰醋酸-水（20：5：5：70）為流動(dòng)相；檢測波長為276nm。理論板數(shù)按阿司匹林峰計(jì)算不低于3000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。測定方法：取本品5粒，精密稱定，置小燒杯中，在4050水浴上微溫熔融，在不斷攪拌下冷卻至室溫，精密稱取適量（約相當(dāng)于阿司匹林0.1g），置50ml量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻1小時(shí)，取出，迅速濾過，取續(xù)濾液作為供試品貯備液。精密量取供試品貯備液5ml，置100ml量瓶中，用1%冰醋酸的甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取1ul，注入液相色譜儀，記錄色

29、譜圖；另取阿司匹林對照品，精密稱定，加1%冰醋酸的甲醇溶液振搖使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含0.1mg的溶液，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。16、氣相色譜法10 原理：利用要分離的各組分在流動(dòng)相和固定相兩相間的分配差異，當(dāng)兩相作相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，這些組分在兩相間的分配反復(fù)進(jìn)行，可以分離出組分，從而進(jìn)行含量測定。色譜條件：色譜柱： 3SE一3O+3% Carbonwax20M，Chromosorb WAWDMCS6080目， 不銹鋼桂長2m ， 內(nèi)徑3 mm。氣體流速及溫度： 載氣： 氨氣流速30ml/min， 氫氣流速65mlmin ， 空氣流速425mlmin， 柱溫230，檢測器溫度

30、240，進(jìn)樣器溫度280， 1ul進(jìn)樣器。含量測定：準(zhǔn)確稱取阿斯匹林02g，于50ml燒杯中，加少量氮仿：乙醇(1：1)溶劑移至100ml容量瓶中。稀釋至射度，搖勻。以上述色譜條件進(jìn)樣3次，每次05gl 以烽面積法分別計(jì)算含量。適用于阿司匹林片、阿司匹林腸溶片等。17、大口毛細(xì)管氣相色譜法26【色譜條件】色譜柱：HP-1(5m053mm265m)石英毛細(xì)管柱；汽化室溫度：230；檢測器溫度：260；柱溫采取程序升溫：起始180( 1 min)載氣 (高純N2)流速：10mL/min，分流比1：10；空氣流速：350mL/min，氫氣流速：35mL/min，【標(biāo)準(zhǔn)溶液配制】取阿司匹林適量，加冰醋

31、酸2mL，然后用氯仿/乙醇（體積1：1，簡稱混合溶劑）配成濃度分別為40mg/L、20 mg/L、8 mg/L、5 mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液?！緝?nèi)標(biāo)物溶液配制】移取適量正十六烷置于50mL的容量瓶中，用混合溶劑定容至刻度，配成20mg/L內(nèi)標(biāo)溶液?！緲悠诽幚怼糠Q取一定量藥分（約相當(dāng)于阿司匹林226.8mg）置25mL容量瓶中，加2mL乙酸和適量混合溶劑溶解，超聲振蕩15min，并用混合溶劑定容至刻度。待藥物完全溶解后過濾，棄去10mL前濾液，取10mL中間濾液用混合溶劑稀釋至所需濃度。取1mL一定濃度中間濾液，加5mL內(nèi)標(biāo)溶液用混合溶劑定容至10mL，搖勻。【測定】精密吸取對照品溶液和供試品溶液各1L

32、，分別注入液相色譜中，記錄峰面積，計(jì)算供試品溶液的含量。 230(2 min)；18、膠束薄層色譜法25傳統(tǒng)的薄層色譜法采用有機(jī)溶劑作為展開劑，一般可以得到很好的分離效果，但是有機(jī)溶劑有毒、易燃、易揮發(fā)，尤其采用混合溶劑作為展開劑時(shí)，由于展開劑各組成揮發(fā)性的差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性差。膠束色譜因用含量高于臨界膠束濃度的表面活性劑作流動(dòng)相，可以克服上述缺點(diǎn)，并有較好的分離選擇性?！痉椒ā吭诰埘０繁∧ど希?% SDS：乙腈：PH8 NaAc-Na2HPO412H2O（3：1：1）為展開劑，測定波長273nm，單波長反射法鋸齒掃描。【標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制】精密稱取對照品阿司匹林約0.220g，置25mL量瓶

33、中，分別加入內(nèi)標(biāo)物間二苯酚約0.150g，用CHCl3-MeOH（1：1）溶解，并稀釋至刻度，搖勻?！緲悠啡芤旱呐渲啤烤芊Q取粉末適量，置50mL量瓶中，加入10mLCHCl3-MeOH（1：1）溶解，超聲10 min，靜置10min。將上清液濾紙25mL量瓶中（瓶中預(yù)先加入內(nèi)標(biāo)物間苯二酚約0.150g，精密稱定），用溶劑洗滌濾渣，并補(bǔ)充至刻度，搖勻。19、非水毛細(xì)管電泳法27毛細(xì)管電泳分離通常是在水溶液中完成，要求被分析物有一定的親水性。水溶液中溶解度很小的被分析物通常在毛細(xì)管壁上的吸附非常明顯。與水介質(zhì)系統(tǒng)分離相比，非水毛細(xì)管電泳法（NACE）具有更高的分離效率和分析靈敏度，能增加疏水性樣

34、品的溶解度，減少疏水性分析物對毛細(xì)管壁的吸附以及減少毛細(xì)管中的焦耳熱等優(yōu)點(diǎn)。而水楊酸類藥物均溶于水，它們易吸附在毛細(xì)管壁上，導(dǎo)致峰形嚴(yán)重拖尾，使柱效和分離度降低。NACE中有機(jī)溶劑的選擇，需要考慮揮發(fā)性引起的毒性和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的重現(xiàn)性以及介電常數(shù)、粘度等多種因素的綜合影響，其中溶劑揮發(fā)性是NACE中有機(jī)溶劑選擇的重要指標(biāo)之一。韋壽蓮、莫金垣建立了誰和非水毛細(xì)管電泳法-電導(dǎo)法分離檢測水楊酸類藥物?！緝x器與試劑】儀器：毛細(xì)管電導(dǎo)檢測系統(tǒng)為中山大學(xué)分析組自組裝，包括CZE30PN10MCNZ2型高壓電源(美國HighVoltageElectronicsCorp)，石英毛細(xì)管柱(55cm50m，河北永年光

35、導(dǎo)纖維廠)，DDS-11A型電導(dǎo)率儀(上海第二分析儀器廠，經(jīng)改裝)，毛細(xì)管電泳數(shù)據(jù)工作站(CES98中山大學(xué)化學(xué)系)，毛細(xì)管電泳儀裝置。pHS一3C精密酸度計(jì)(上海電光器件廠)。試劑：三羥甲基氨基甲烷(Tris，分析純，上海試劑三廠)；硼酸(H3BO3，分析純，廣州化學(xué)試劑廠)；水楊酸(sA)、乙酰水楊酸(ASA)(廣州藥品檢驗(yàn)所)，磺基水楊酸(SSA，分析純，上海試劑一廠)；阿斯匹林腸溶片(批號：010801；010101；010501；50mg片，桂林制藥廠)；其余試劑均為分析純，水為二次重蒸水。分別制備01molLTris和HBO貯備液，各取適量以水或乙醇為溶劑制備不同酸度不同濃度的運(yùn)行

36、緩沖液。SA，ASA和SSA均用運(yùn)行緩沖液配成500mg/L的貯備液，其他不同濃度的對照溶液用緩沖液稀釋得到?！緦?shí)驗(yàn)方法】毛細(xì)管使用前依次用0.1mo1/LNaOH溶液、蒸餾水和緩沖溶液各沖洗約5min。檢測電極用超聲波進(jìn)行沖洗，更換緩沖溶液或每進(jìn)樣2次后按上述步驟清洗毛細(xì)管和電極。用重力進(jìn)樣方式，進(jìn)樣高度差為20cm，時(shí)間為10s，操作電壓24kV。電導(dǎo)率儀的輸出信號經(jīng)數(shù)據(jù)工作站采集到微機(jī)中進(jìn)行實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)處理、圖形顯示和數(shù)據(jù)文件存儲。實(shí)驗(yàn)在恒溫(25)、恒濕(相對濕度65)條件下進(jìn)行。【條件選擇】（1）水介質(zhì)分離條件：選擇PH8.0的10mmol/L Tris-H3BO3為運(yùn)行緩沖液,以24k

37、V作為分離電壓，用虹吸進(jìn)樣（高度差20cm），進(jìn)樣時(shí)間10s。（2）非水介質(zhì)分離條件：選用乙醇作為有機(jī)溶劑，仍用分離電壓24kV，進(jìn)樣時(shí)間10S，運(yùn)行緩沖液為10mmol/L Tris-H3BO3。20、反向高效毛細(xì)管電泳法13原理：阿司匹林水解后帶電荷，能通過電泳計(jì)算其含量。方法：以十六烷基三甲基溴化銨為電滲流改向劑, 建立了適合乙酰水楊酸制劑優(yōu)化分離與定量分析的反向高效毛細(xì)管電泳法。電泳分離條件: 熔融石英毛細(xì)管40 cm50 Lm, uncoat ed( 河北永年) , 緩沖液組成為0. 05mol/ L 磷酸鹽溶液( pH 5. 0) , 含0. 5 m mol/ L 電滲流改向劑和5

38、. 0 mmol/ L B-環(huán)糊精, 運(yùn)行電壓11 kV( - ) ( + ) , 柱上檢測UV 210 nm, 0. 02 aufs。以磺基水楊酸為內(nèi)標(biāo), 測得乙酰水楊酸濃度在0. 050. 25 m g/ ml 范圍內(nèi)與樣品峰面積比的線性關(guān)系良好, 相關(guān)系數(shù)r= 0. 9994, 平均回收率為97. 22%, 日內(nèi)RSD 低于0. 96%, 日間RSD 低于2. 6%。21、動(dòng)力學(xué)光度法測定痕量乙酰水楊酸17原理：碘對Ce4+和As的氧化還原反應(yīng)有明顯的催化作用，乙酰水楊酸和碘容易發(fā)生取代反應(yīng)，使碘的濃度降低，導(dǎo)致碘的催化作用減弱，由此建立動(dòng)力學(xué)光度法測定痕量乙配水楊酸的新方法。優(yōu)選：直接

39、滴定法，操作簡單、快速，方法耐用性高，測定結(jié)果準(zhǔn)確。23、電極法11原理：以三芐基錫辛酸酯為活性物質(zhì), 制備具有良好的電位響應(yīng)性能和選擇性能的PVC 膜水楊酸根離子敏感電極，該電極應(yīng)用于阿司匹林制劑的含量測定。阿司匹林易水解得到水楊酸根離子, 且反應(yīng)定量。因此, 通過對水楊酸根離子的測定即可得出樣品中的阿司匹林含量。待測樣品的處理將適量阿司匹林片藥品( 10 片) 研制成粉狀，精密稱取11. 5 g ， 在0. 5 mol/ L NaOH 溶液25 ml 中加熱回流1 h 后過濾，定容至250 ml。吸取10ml 濾液，用稀硫酸調(diào)至pH 5. 5， 再用pH 5. 5的磷酸鹽緩沖液定容至100

40、 ml 作為待測液。測定方法：使用該電極通過標(biāo)準(zhǔn)溶液法和樣品加入法, 分別測定藥品經(jīng)前述處理后所得試樣中的水楊酸根離子濃度, 通過換算得出藥劑中阿司匹林的含量。優(yōu)點(diǎn)：與酸堿滴定相比，電極法測量除了具有更加簡單、快速的特點(diǎn)外，對待測樣品的要求較低，待測樣品的顏色、濁度等對測試結(jié)果均不會(huì)產(chǎn)生明顯的影響。該電極不僅適用于藥物含量測定，還可以用于血、尿中水楊酸根離子的含量測定，對研究阿司匹林在生物體內(nèi)的吸收、作用、代謝過程有較大的價(jià)值?？捎糜诎⑺酒チ制?、阿司匹林腸溶片、阿司匹林膠囊等各種劑型。24、柱分配色譜-紫外分光光度法12色譜柱的制備：于玻璃柱（20cm2.5cm）下端塞入少量玻璃棉，裝入硅藻土

41、3g和新制碳酸氫鈉液（112）2ml的混合填充劑。對照品溶液的制備：取阿司匹林對照品約50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加冰醋酸0.5mol，加三氯甲烷溶解并稀釋至刻度，混勻。精密量取5ml，置100ml量瓶中，用冰醋酸三氯甲烷溶液（1100）稀釋至刻度，混勻。制成每1ml中約含50ug的溶液。供試品溶液的制備：取本品20粒，精密稱定，研細(xì)，混勻；取細(xì)粉適量（約相當(dāng)于阿司匹林50mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加鹽酸甲醇溶液（150）1ml，加三氯甲烷稀釋至刻度，混勻。精密量取5ml，移至色譜柱填充劑上，用三氯甲烷5ml、25ml相繼洗滌，棄去洗液，用冰醋酸三氯甲烷溶液（150）10m

42、l洗滌后，再用冰醋酸三氯甲烷溶液（1100）85ml洗脫，收集洗脫液于100ml量瓶中，并用冰醋酸三氯甲烷溶液（1100）稀釋至刻度，混勻。測定法：用1cm吸收池，以三氯甲烷為空白，立即于最大吸收波長280nm處測定對照溶液和供試品溶液的吸光度，用下式計(jì)算所取得膠囊內(nèi)容物細(xì)粉中含阿司匹林（CHO）的量（mg）:阿司匹林（mg）=C （AA）式中，C為阿司匹林對照品溶液濃度（ug/ml）；A和A分別為供試品溶液和對照品溶液的吸光度。適用于阿司匹林片、阿司匹林腸溶片等。25、阻尼最小二乘法18原理：CPA矩陣阻尼最小二乘算法(DLS)，確定P系數(shù)矩陣對引入阻尼因子d,從而降低了其病態(tài)程度或?qū)φ`差的

43、敏感程度,將此法用于多組分復(fù)方藥物分析如復(fù)方阿司匹林片含量測定,操作簡便,平均回收率99.6%-101.1%（0.51%-0.4%）。適用于復(fù)方阿司匹林片中三組分（含阿司匹林）的含量測定。26、線性掃描伏安法測定阿司匹林19以玻碳電極為指示電極, 用線性掃描伏安法測定水楊酸, 從而間接測定阿司匹林。原理：在硫酸- 硫酸鉀底液中,阿司匹林的水解產(chǎn)物水楊酸在玻碳電極上產(chǎn)生一靈敏的氧化峰, 峰電位為1. 16 V; 在4. 010- 5mol/ L8. 010- 3mol/ L 濃度范圍內(nèi)水楊酸與峰電流呈良好線性關(guān)系, 最低檢測濃度為2. 010- 5 mol/ L。溶液的配制：0. 1 mol/

44、L NaOH 溶液: 稱取4g NaOH 于100 ml燒杯,用水溶解并轉(zhuǎn)移到1 000 ml容量瓶中, 用水定容。0.01mol/ L 水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液: 稱取0. 138 2 g分析純水楊酸, 用0. 1 mol/ L NaOH 溶液溶解并定容到100ml, 放置陰涼處保存。5 mol/ L硫酸溶液: 于720 ml水中徐徐加入280 ml濃硫酸, 同時(shí)用玻璃棒攪拌。0. 5 mol/ L 硫酸鉀溶液: 稱取8. 713 g 硫酸鉀于100 ml燒杯中, 用水溶解并轉(zhuǎn)移到100 ml容量瓶中, 用水定容。所用水均為去離子水.工作曲線制作：按選定實(shí)驗(yàn)條件對不同濃度水楊酸標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行線性掃描伏安

45、測定, 結(jié)果表明水楊酸在4. 010- 5mol/L8. 010- 3mol/ L 濃度范圍內(nèi)與峰電流呈良好線性關(guān)系, 最低檢測濃度為2. 010- 5mol/ L. 工作曲線回歸方程為I p= - 7. 336 2C- 4. 687 6, 相關(guān)系數(shù)R= 0. 9941.精密稱取10 片阿司匹林藥片, 均勻研細(xì), 再從中準(zhǔn)確稱取相當(dāng)于一片重量的樣品, 用0. 1 mol/ L NaOH溶液溶解, 放置10 min, 再用0. 1 mol/ L NaOH 溶液定容至50 ml。 從中移取1. 00 ml至25. 00 ml容量瓶, 加入5 mol/ L 硫酸2. 5 ml, 0. 5 mol/ L 硫酸鉀溶液2. 5 ml, 用去離子水稀釋至刻度, 搖勻, 按實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測定, 由工作曲線計(jì)算樣品中阿司匹林的含量C樣。計(jì)算公式：標(biāo)示量（%）=( C樣DW（平均）) /（W標(biāo)示量）100%（D為稀釋倍數(shù)；W（平均）為樣品的平均片重（g）；W為樣品片粉的取樣量（g）27、百分吸收系數(shù)法供試品：精密稱取阿司匹林注射液適量，置100ml量瓶，用乙醇定容。精密量取2ml置100ml量瓶，用乙醇定容，即得。含量測