1、交叉配血試驗(yàn),交叉配血試驗(yàn),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?二、實(shí)驗(yàn)原理 三、實(shí)驗(yàn)步驟 四、方法學(xué)局限性 五、臨床意義 六、臨床新進(jìn)展,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握凝聚胺交叉配血試驗(yàn)的原理、方法、 結(jié)果判讀 熟悉交叉配血試驗(yàn)的臨床意義,實(shí)驗(yàn)原理,交叉配血試驗(yàn)分兩管： 主側(cè)：受血者血清+供血者紅細(xì)胞 次側(cè)：供血者血清+受血者紅細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)原理,紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，懸浮在電解質(zhì)溶液中，會(huì)吸引大量陽(yáng)離子，紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞，形成zeta電位。,實(shí)驗(yàn)原理,凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液（LIM）降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的電子云，如有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存在，則可促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清抗體的特異結(jié)合。,實(shí)

2、驗(yàn)原理,再加入凝聚胺溶液，溶解后產(chǎn)生很多正電荷，中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，紅細(xì)胞zeta電位降低，縮短紅細(xì)胞距離，無(wú)論是否有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存在，主、次側(cè)管均可產(chǎn)生非特異性聚集。,實(shí)驗(yàn)原理,最后加入懸浮液，具有中和凝聚胺陽(yáng)離子的作用，使正常紅細(xì)胞的非特異性凝集散開(kāi)，紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)血清抗體的特異性凝集仍然存在。,實(shí)驗(yàn)步驟,一、取出供血者血漿及紅細(xì)胞，并將冰凍血漿放入37溫箱解凍15分鐘。,實(shí)驗(yàn)步驟,二、受血者抗凝全血標(biāo)本離心備用,3000r/min，5min,實(shí)驗(yàn)步驟,三、將受血者血漿2滴加入主側(cè)管，紅細(xì)胞1滴加入次側(cè)管,實(shí)驗(yàn)步驟,四、剪下供血者血袋上的血辮，將供血者紅細(xì)胞1滴加入主

3、側(cè)管，血漿2滴加入次側(cè)管,實(shí)驗(yàn)步驟,五、在主次側(cè)各加入低離子溶液各0.65毫升，混合均勻。,實(shí)驗(yàn)步驟,六、在主、次側(cè)管分別加入2滴凝聚胺溶液，混勻后3400r/min離心10秒，棄去上清，觀察紅細(xì)胞的非特異凝集現(xiàn)象。,棄上清,實(shí)驗(yàn)步驟,七、最后各加入懸浮液2滴，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混勻并觀察結(jié)果。,實(shí)驗(yàn)步驟,八、如果在60秒內(nèi)，主、側(cè)管凝集均散開(kāi)，說(shuō)明是由凝聚胺溶液引起的非特異性凝集，配血相合。,實(shí)驗(yàn)步驟,九、如果凝集不散開(kāi)，則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不相合，如有疑問(wèn)，可進(jìn)一步鏡檢確認(rèn)。,實(shí)驗(yàn)步驟,十、同時(shí)對(duì)受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。,實(shí)驗(yàn)步驟,十一、對(duì)受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。,臨床意義,一、保證輸血安全 二、發(fā)現(xiàn)亞型和不規(guī)則抗體,方法學(xué)局限性,對(duì)罕見(jiàn)不規(guī)則抗體抗K敏感性低！,臨床新進(jìn)展,流式細(xì)胞術(shù) 基因分型技術(shù) 卡式微柱凝膠法,卡式微柱凝膠法,卡式微柱凝膠法,戴安娜全自動(dòng)配血系統(tǒng),卡式微柱凝膠法可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)檢測(cè),二 實(shí)驗(yàn)原理,血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原的類型。在ABO血型系統(tǒng)中，紅細(xì)胞膜上抗原分A和B兩種抗原，而血清抗體分抗A和抗B兩種抗體。血型鑒定是將受試者的紅細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清（含有抗B抗體）與標(biāo)準(zhǔn)B型血清（含有抗A抗體）中，觀察有無(wú)凝集現(xiàn)象，從而測(cè)知受試者紅