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1、ABO半定型的必要性、ABO血型鑒定原理、ABO血型鑒定原理是根據(jù)紅細(xì)胞是否有A抗原或B抗原,將血型分為A型、B型、AB型、O型4種。利用紅細(xì)胞凝集實(shí)驗(yàn),通過(guò)羊水(血清實(shí)驗(yàn))斑(細(xì)胞實(shí)驗(yàn))定型,正確鑒定ABO血型。定型、半定型、定型是已知的抗A和抗B型血清,測(cè)定紅細(xì)胞是否有對(duì)應(yīng)的A抗原或B抗原,半定型是已知的A細(xì)胞和B細(xì)胞,測(cè)定血清是否有對(duì)應(yīng)的抗A或抗B。操作中注意點(diǎn),(1)嚴(yán)格檢查,標(biāo)記指示,(2)吸管等要混用渡邊杏。(3)先加血清,再加細(xì)胞,就渡邊杏了。(4)純正結(jié)果必須相符。(5)不要干(滑動(dòng)法),需要肉眼觀察時(shí),用顯微鏡觀察。(6)半定型為滑液法(7)試驗(yàn)管法,離心后,應(yīng)觀察上清液中是
2、否有溶血,然后搖晃官邸紅細(xì)胞進(jìn)行觀察。ABO血型半定型紅細(xì)胞試劑盒說(shuō)明,主要成分: A1型,B型,O型紅細(xì)胞有效期:兩個(gè)月樣品要求:被檢者血清或血漿檢測(cè)方法:1,試管法(1)被檢者血清(或血漿)一滴(50ul)ABO血型半定型檢測(cè)方法,2 .微量板法(1)在U型三個(gè)孔中,每一個(gè)都放入2530ul的受檢者血清或血漿(2),每一個(gè)都與血清等量的A1,B,O試劑紅細(xì)胞(3)混合(4)離心力,旋轉(zhuǎn)速度2000rpm20秒(震動(dòng)是凝聚陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞扣單獨(dú)半定型結(jié)果不能成為判斷血型的依據(jù)。結(jié)果閱讀注意事項(xiàng),1 .在半定型實(shí)驗(yàn)中,被檢者的血清或血漿與O型紅細(xì)胞試劑呈陽(yáng)性反應(yīng)時(shí),應(yīng)添加自我對(duì)照試驗(yàn)。如果自我對(duì)
3、比呈陽(yáng)性,則是由自身凝結(jié)激素引起的。如果自我對(duì)比是陰性,則表明被檢查者的血清或血漿可能存在ABO系統(tǒng)以外的其他系統(tǒng)的抗體干擾定型。結(jié)果閱讀注意事項(xiàng),2 .本產(chǎn)品紅細(xì)胞顏色深紫色或紅細(xì)胞凝聚,菌落或溶血嚴(yán)重時(shí)不能使用,盡量避免產(chǎn)品污染,變質(zhì)失效引起的黑色錯(cuò)誤。結(jié)果4():紅細(xì)胞聚集成大塊,認(rèn)為血清清澈透明,沒(méi)有玻璃細(xì)胞。3():紅細(xì)胞聚集成小塊,血清還很清晰。2():紅細(xì)胞分散成多個(gè)小塊,看自由細(xì)胞。1():肉眼可見(jiàn)顆粒形狀的小凝固,有很多玻璃細(xì)胞,上清液為紅色。():肉眼看不清。必須用顯微鏡觀察。鏡子下可見(jiàn)的幾個(gè)紅細(xì)胞聚集在一起,周圍有很多玻璃紅細(xì)胞。MF:可以看到混合形狀,即鏡下聚集了極少數(shù)
4、紅細(xì)胞,但極少數(shù)紅細(xì)胞仍然分散。():鏡子下沒(méi)有聚集,紅細(xì)胞分布均勻。,ABO血型鑒定的意義,1 .確保安全輸血和輸血治療效果2。新生兒溶血病診斷輔助3。器官移植應(yīng)用4。親子鑒定及其他(如法醫(yī)學(xué))、紅細(xì)胞ABO血型肯定和傅晶不匹配的原因分析、ABO肯定和傅晶不匹配的技術(shù)問(wèn)題1-1位陰性(1)樣本錯(cuò)誤、試管或幻燈片(2)實(shí)驗(yàn)中血清或抗體試劑(3)結(jié)果判讀法不標(biāo)準(zhǔn)化,忽略溶血現(xiàn)象ABO血型不合的技術(shù)問(wèn)題很好地解決了,ABO陽(yáng)性定型不符的理論問(wèn)題,(1)弱A或弱B亞型(2)白血病削弱A抗原或B抗原(3)何杰金病也抑制白血病抗原(4)B類抗原(5)抗B血清中含有某種低頻率抗原的抗體(7)胃癌,胰腺癌患
5、者紅細(xì)胞的血清或血漿中含有高濃度A或B血型物質(zhì),從而中和了抗體試劑(9),部分G菌感染可以吸附在紅細(xì)胞上,并與抗B凝集素反應(yīng),從而聚集,知識(shí)點(diǎn),B類抗原的存在(例如O型或A型抗原)多凝集紅細(xì)胞具有能在人和兔子的許多血清中凝集的特征。無(wú)論是否有相應(yīng)的同種抗體,都可以與大部分成人血清凝集。不凝聚在臍帶血中。通常不與自己的血清凝集。有條件的話,可以用外源凝集素鑒別。冷抗體是天然抗體,是在沒(méi)有可檢測(cè)的抗原刺激的情況下產(chǎn)生的抗體,以IgM為主,或通過(guò)不明顯的免疫刺激獲得。正常情況下,健康的人體含有少量的冷抗體,療效很低,通常在1:16以下。分子量大,熱弱,在425鹽水中與相應(yīng)紅細(xì)胞肉眼凝聚,溫度升高,活
6、性下降。支原體及病毒性肺炎、傳染性單核細(xì)胞增多癥、再生障礙性貧血、自身免疫性溶血性貧血、紅斑狼瘡等患者血清中有比較有效的價(jià)錢冷抗體,ABO正反反型容易產(chǎn)生電凝聚現(xiàn)象。一般生理鹽水沖洗紅細(xì)胞可以消除干擾,巰基乙醇或二硫代葡萄糖醇可以消滅,ABO正反定型不符合的理論問(wèn)題,2-2半定型不常見(jiàn)的原因(1)新生兒抗A,抗B檢出率為29 . 3 . 4%(;抗體水平減弱(3)白血病、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、使用免疫抑制劑的患者(4)先天性軍兵種球蛋白不足的患者(5)免疫缺陷患者(6)M蛋白抗-A、抗-B減弱或不足(7)嵌合(2)血漿增溶劑:右側(cè)線糖酐、聚乙烯醇(PVP)等可引起RBC碼串假凝集,解決方法
7、與上述相同,(3)臍帶血中沃頓膠含有點(diǎn)多糖物質(zhì),可引起自發(fā)碼串假凝集。臍帶血洗68次就可以了。(4)骨癌、胰腺癌、患者血漿中過(guò)剩的水溶性血型物質(zhì)(BGSS),中和試劑抗-A或抗-B,在更正型中出現(xiàn)假陰性或弱反應(yīng)。(。用生理鹽水洗可以解決牙齒問(wèn)題。ABO正反定型不符合的理論問(wèn)題,2-4的其他原因(1)牙齒聚集多,由于隱匿紅細(xì)胞抗原(如T抗原),在細(xì)菌性及病毒性感染中發(fā)現(xiàn)。(2)前代現(xiàn)象,患者的抗A或抗B水平不合適。(3)康冷凝集素:牙齒紅細(xì)胞總是直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)(DAT)陽(yáng)性。如果牙齒抗體與所有成人紅細(xì)胞凝集,則在半定型時(shí)與A型紅細(xì)胞凝結(jié)。用37生理鹽水洗患者紅細(xì)胞三次,如果血液中有姜冷凝集素,
8、可以進(jìn)行自我吸收實(shí)驗(yàn),從血清中去除自身抗體,然后用頻譜細(xì)胞確認(rèn)抗體特異性。(4)免疫性抗體:輸血工作中常見(jiàn)的原因,產(chǎn)生的抗體包裹紅細(xì)胞,直接抗球蛋白實(shí)驗(yàn)(DAT)牙齒陽(yáng)性,定型可能會(huì)發(fā)生混合形狀或弱凝集。(5)熱本身抗體:AIHA,藥物引起的甲基多巴,紅細(xì)胞包裹足夠的抗體,開(kāi)始自然聚集,其反應(yīng)強(qiáng)度遠(yuǎn)比室溫弱。(6)患者血清中除ABO同種凝集素外的其他同種抗體,半定型紅細(xì)胞中有A和B以外的抗原,患者血清中的其他抗體,可以凝集牙齒細(xì)胞。(7)除了抗-A、抗-B以外的抗體形成可以吸附在紅細(xì)胞上的抗原-抗體復(fù)合物。ABO肯定定型不匹配的解決方法,大部分ABO肯定定型不匹配的原因可以調(diào)查,所以首先要重復(fù)
9、所有實(shí)驗(yàn),確保紅細(xì)胞懸液不太濃或太淡。沒(méi)有紅細(xì)胞試劑及試管污染,標(biāo)本不混亂。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果和原來(lái)一樣,就要做如下整體實(shí)驗(yàn)。ABO陽(yáng)性陽(yáng)性不符合的解決方法;(1)紅細(xì)胞對(duì)抗體致敏(2)檢查的紅細(xì)胞的抗-A,抗-A1,抗-B,抗-AB,抗-AB;(3)檢查者血清的A1,A2,牙齒抗體通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒的血液循環(huán),紅細(xì)胞會(huì)凝聚,引起胎兒或新生兒的免疫性龍血癥。對(duì)孕婦沒(méi)有影響,但嚴(yán)重貧血、心力衰竭死亡,或大量膽紅素侵入腦細(xì)胞,引起核黃疸死亡,存活也可能影響神經(jīng)細(xì)胞和智力發(fā)育、運(yùn)動(dòng)功能等。moa血型不符,主要有ABO和Rh型兩種,MN系統(tǒng)等其他也能引起本病,但極為罕見(jiàn)。ABO血型不合很多,病情多,輕,容易被
10、忽略。Rh血型在我國(guó)很少見(jiàn),但病情嚴(yán)重,導(dǎo)致太史宮內(nèi)或新生兒核黃疸的情況很多。在ABO血型系統(tǒng)中,孕婦大部分是O型,父親和胎兒是A、B或AB型。胎兒的A,B抗原就是致敏源。Rh血型有6種抗原,分別為C,C,D,D,E,E,E,E,其中D具有很強(qiáng)的抗原性。溶血率最高,臨床用抗D血清檢查。如果母親或新生兒紅細(xì)胞與已知的抗D血清凝集,則為Rh陽(yáng)性,反之為陰性。Rh陰性孕婦有時(shí)對(duì)其他抗原敏感,能產(chǎn)生抗體(如抗E-抗C抗體等),發(fā)生母體血型不和。胎兒紅細(xì)胞不能正常通過(guò)胎盤。只有懷孕或分娩胎盤受損時(shí),絨毛血管內(nèi)的胎兒紅細(xì)胞才能進(jìn)入母體,根據(jù)進(jìn)入的數(shù)量和致敏次數(shù),抗體產(chǎn)生多少,最終影響胎兒溶血的輕重等。血型
11、抗體是一種免疫球蛋白,有IgG和IgM牙齒。IgG分子量小的(7Sr球蛋白)不完全抗體(膠體介質(zhì)抗體或阻塞性抗體),可以通過(guò)胎盤。IgM分子量較大的(19S球蛋白)是完全抗體(鹽水凝集抗體),不能通過(guò)胎盤。Rh,ABO血型抗體能通過(guò)胎盤發(fā)揮作用的有IgG,新生兒溶血臨床表現(xiàn),(1)紅細(xì)胞破壞增加,網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和肝臟,腎細(xì)胞含有鐵血黃素沉著。(b)骨髓及骨髓外造血組織可以看到在目的性增生、肝脾肥大、經(jīng)檢查在肝、脾、肺、胰、腎等組織內(nèi)分散在骨髓外造血組織中。(3)貧血會(huì)使心臟增大,血漿蛋白下降,全身蒼白,水腫,胸腹,心包等組織內(nèi)的胸水,同時(shí)會(huì)分散到骨髓外造血器官。(d)高膽紅素血癥會(huì)引起全身性黃疸和核黃疸。核黃疸多發(fā)生在基底核、海馬鉤、蒼白球、丘腦核、尾核、牙核等。神經(jīng)細(xì)胞變性,細(xì)胞質(zhì)黃染色,細(xì)胞核消失。輕度患者沒(méi)有特殊癥狀,溶血嚴(yán)重的人可能出現(xiàn)胎兒水腫、流產(chǎn)、早產(chǎn),甚至事態(tài)。產(chǎn)后主要出現(xiàn)貧血、水腫、肝脾瘤、黃疸和核黃疸。癥狀的輕重取決于抗體的數(shù)量、新生兒成熟度、針對(duì)性造血能力等。(3)新生兒龍血癥處理,1,1,1,12日,輕度患者注意黃疸發(fā)生時(shí)間,速度增加,程度等三個(gè)茄子重要時(shí)間。出生時(shí)貧血嚴(yán)重,臍帶血血紅蛋白12g需要考慮輸血。2,27日,重點(diǎn)針對(duì)和預(yù)防高膽紅素血癥引起的核黃疸,應(yīng)密切監(jiān)測(cè)血清間接膽紅素
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