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文檔簡介

1、維生素 B2 的含量測(cè)定 （熒光光度法）,OBJECTIVE,1 學(xué)習(xí)和掌握熒光光度分析法測(cè)定VB2的基本原理和方法。 2 學(xué)習(xí)熒光分光光度計(jì)的使用方法。,PRINCIPLE,熒光：物質(zhì)的分子經(jīng)紫外光照射后，發(fā)射出的較原來吸收 光的頻率低、波長長的光。不同的熒光物質(zhì)有各自 的特征激發(fā)光波長和熒光波長，利用物質(zhì)的熒光現(xiàn) 象進(jìn)行定性、定量分析的方法稱為熒光分析法。,F,C,C樣品,F=KC,F樣品,VB2的C（HAc）=0.1mol/L溶液在紫外光照射下，發(fā)出黃 綠色熒光，可直接進(jìn)行熒光測(cè)定。 pH=2.9, 激發(fā) 370nm，467nm 發(fā)射 527nm,VB2 ，核黃素,PROCEDURE,1

2、 維生素B2系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制,2 待測(cè)溶液的配制,取樣品溶液 5.00ml,0.1mol/L HAc,定容,25.0ml,搖勻,待測(cè)溶液,3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制,1）儀器預(yù)熱（激發(fā)光波長360nm，熒光波長510nm）。 2）以系列標(biāo)準(zhǔn)液6號(hào)液為標(biāo)準(zhǔn)，調(diào)節(jié)熒光強(qiáng)度F為90左右 。 3）固定熒光測(cè)定條件不變。分別測(cè)定下列標(biāo)準(zhǔn)液16號(hào)液（由稀倒?jié)猓┑臒晒鈴?qiáng)度F，并記錄。 4）以溶液組成量度C為橫坐標(biāo)，相對(duì)熒光強(qiáng)度F，為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。,F,C (g/ml),4 樣品測(cè)定,1）在相同的熒光測(cè)定條件下，測(cè)定樣品液的熒光強(qiáng)度F。 2）從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出對(duì)應(yīng)的組成量度，再乘以5，得試樣 中維生素B2的組成量度。,DATA,實(shí)驗(yàn)結(jié)果：CVB2 =,QUESTION &

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